牛至油對牦牛生長性能及血清指標(biāo)的影響

姜 輝，孫光明，張 強(qiáng)，張成福，朱 勇，曹涵文，鮮莉莉，陳曉英，馬金英，信金偉

（1.省部共建青稞和牦牛種質(zhì)資源與遺傳改良國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，拉薩 850000；2.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，拉薩 850009）

牛至（Origanum vulgareL.）是唇形科多年生半灌木或草本植物，其提取物牛至油（oregano oil）主要成分為香芹酚和百里香酚［1，2］。目前大量研究發(fā)現(xiàn)香芹酚和百里香酚通過改變細(xì)胞的通透性和去極化來行使抑菌作用［3-6］。另外，有發(fā)現(xiàn)表明牛至油與丁甲基羥化甲苯和α-生育酚的抗氧化活性相似［7］，且可以通過對調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白激酶家族和絲裂原活化蛋白激酶家族成員的表達(dá)，來抑制細(xì)胞內(nèi)外源毒素物質(zhì)的抗炎作用過程［8，9］。

在畜牧領(lǐng)域，牛至油作為重要的飼料添加劑已經(jīng)被廣泛認(rèn)可和應(yīng)用，迄今大量研究表明其具有提高 動物免疫力［10］、生產(chǎn)性能［11］、繁殖 率［12］、消 化率［13］、改善肉品質(zhì)［14，15］等眾多益處。牦牛作為中國青藏高原特有畜種，其對當(dāng)?shù)氐慕?jīng)濟(jì)價值和產(chǎn)業(yè)發(fā)展不言而喻。然而，關(guān)于日糧中添加牛至油對牦牛經(jīng)濟(jì)指標(biāo)和生理生化指標(biāo)的研究鮮見報(bào)道。為此，本研究以西藏查吾拉牦牛為研究對象，通過比較不同牛至油飼喂劑量牛群間生長性能指標(biāo)的差異和變化，進(jìn)一步明確牛至油對牦牛飼養(yǎng)的相關(guān)作用，同時通過血清學(xué)生化指標(biāo)差異進(jìn)一步解釋該添加劑對牦牛生化機(jī)制的影響，以期為牛至油在牦牛生產(chǎn)方面的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

試驗(yàn)在西藏聶榮縣嘎確牧民專業(yè)合作社開展，將18 頭年齡、體重、體況相近的查吾拉牦牛隨機(jī)分為3 組，每組6 頭牛，白天放牧，晚上添加不同劑量牛至油的精飼料補(bǔ)飼，其中對照組每頭牦牛每天補(bǔ)飼2 kg 精飼料（不添加牛至油），10 g/d 組在每頭牦牛每天補(bǔ)飼的精飼糧中添加10 g 牛至油，20 g/d 組在每頭牦牛每天補(bǔ)飼的精飼糧中添加20 g 牛至油。預(yù)試驗(yàn)期為10 d，后轉(zhuǎn)入90 d 的正式育肥期。

1.2 飼料配方及營養(yǎng)成分

因目前尚無牦牛的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，牦牛精料配比在注重蛋白質(zhì)與能量的平衡基礎(chǔ)上，參照美國NRC《肉牛營養(yǎng)需要》（2016 年版）及飼料原料組成設(shè)計(jì)育肥牦牛補(bǔ)飼精飼料成分組成和營養(yǎng)水平（表1）。

表1 補(bǔ)飼精飼料組成成分和營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 測定指標(biāo)

2020 年6 月15 日放牧前進(jìn)行第一次體重測定，記為初始體重，2020 年7 月15 日、8 月15 日及9 月15日放牧前稱取體重分別記為第1 月體重、第2 月體重和第3 月體重，根據(jù)所得的體重?cái)?shù)據(jù)計(jì)算得到每月的增重與增重比（增重/體重），以及總增重和平均日增重。

在第3 個月牦牛體重測定時，收集各組所有牛只靜脈全血5 mL，38 ℃溫水孵育20 min 分離血清。利用貝博科B-400 全自動生化分析儀（濟(jì)南，中國）檢測血清學(xué)40 項(xiàng)指標(biāo)（總蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷草/谷丙、谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、總膽汁酸、肌酸激酶、肌酸酶同工酶、乳酸脫氫酶、α-羥丁酸、C 反應(yīng)蛋白、淀粉酶、鉀、鈉、氯、鈣、二氧化碳、鎂、磷、尿素、肌酐、胱抑素C、β-2 微球蛋白、葡萄糖、尿酸、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白a、陰離子間隙、滲透壓、尿素氮/肌酐），各項(xiàng)檢測指標(biāo)所用試劑盒均購自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。

1.4 數(shù)據(jù)分析

運(yùn)用SPSS 19 軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各項(xiàng)檢測指標(biāo)以均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（SEM）表示，進(jìn)行ANOVA 方差分析，P<0.05 表示差異顯著，P<0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 牛至油對牦牛生長性能的影響

飼喂不同劑量牛至油牦牛的體重結(jié)果見表2。從表2 可以看出，第3 月增重10 g/d 組和20 g/d 組均顯著高于對照組（P＜0.05），其他組間比較均無顯著差異。另外，對10 g/d 組第1 月增重與第2 月增重進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)（表3），10 g/d 組在第2 月的增重與第1月增重差異顯著（P<0.05），第2 月增重比第1 月增重高25.30%；第3 月增重較第2 月增重顯著降低（P<0.05）。雖然其余各指標(biāo)沒有顯著差異，但根據(jù)均值結(jié)果可發(fā)現(xiàn)添加牛至油的試驗(yàn)組在整個試驗(yàn)期后總增重和平均日增重均較對照組有所增高，且總體規(guī)律為10 g/d 組＞20 g/d 組＞對照組。

表2 飼喂不同劑量牛至油的牦牛體重指標(biāo)檢測結(jié)果

表3 10 g/d 組增重和增重比

2.2 牛至油對牦牛血清生化指標(biāo)的影響

各處理牦牛血清生化指標(biāo)檢測結(jié)果見表4。從表4 可以看出，牛至油添加10 g/d 組牦牛的α-羥丁酸（HBDH）和乳酸脫氫酶（LDH）含量均極顯著低于對照組（P＜0.01），而尿素氮（BUN）含量顯著高于對照組（P＜0.05）。另外，20 g/d 組的α-羥丁酸（HBDH）、乳酸脫氫酶（LDH）、間接膽紅素（IBIL）、葡萄糖（GLU）含量顯著低于對照組（P＜0.05），堿性磷酸酶（ALP）含量顯著高于10 g/d 組（P＜0.05），而葡萄糖（GLU）含量極顯著低于10 g/d 組（P＜0.01）。

表4 牦牛生化指標(biāo)檢測結(jié)果

3 小結(jié)與討論

3.1 日糧中牛至油添加水平對牦牛生產(chǎn)性能的影響

牛至油作為一種植物提取物，在機(jī)體抗氧化、抗細(xì)菌真菌、抗發(fā)炎并預(yù)防新陳代謝疾病和改善上呼吸道疾病等方面發(fā)揮重要功效，同時可作為重要的飼料添加劑，可提高動物生產(chǎn)性能和調(diào)節(jié)機(jī)體生理代謝。牛至油能夠加速腸黏膜上皮組織細(xì)胞的更新，同時能夠抑制腸道內(nèi)有害菌的生長，對腸道菌群的平衡起到重要的維持作用，有利于動物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高動物的飼料轉(zhuǎn)化率［16］。張善芝［17］研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加牛至油有助于家養(yǎng)動物的生長性能提高和肉品質(zhì)改善，對免疫功能也具有積極作用。魯娜等［18］研究表明，隨著日糧添加牛至油，育肥牛胸圍顯著增加，飼料利用效率顯著提高，且夏季按精料的0.045%添加10%牛至油其育肥效果最好。本研究發(fā)現(xiàn)整個試驗(yàn)期結(jié)束后，10 g/d 組和20 g/d 組第3 月增重均顯著高對照組，兩個試驗(yàn)組的總增重和平均日增重均值均高于對照組，但差異不顯著，同時，10 g/d 組的總增重要高于20 g/d 組，可能是牛至油的添加量較高其特殊的氣味影響牦牛的食欲，使其增重效果低于10 g/d 組的日增重。本試驗(yàn)研究結(jié)果與牛至油在肉牛［17］、奶牛［19］和豬［20］生產(chǎn)中的研究結(jié)果相一致，表明適量添加牛至油可提高動物生產(chǎn)性能，但較高劑量水平則產(chǎn)生負(fù)面效應(yīng)，可能是與機(jī)體代謝相關(guān)，導(dǎo)致細(xì)胞氧化應(yīng)激加劇，影響動物的生長發(fā)育。

3.2 日糧中牛至油添加水平對牦牛血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)作為動物機(jī)體新陳代謝的直接衡量指標(biāo)，其各指標(biāo)的正常與否反映機(jī)體健康狀況，超出其合理范圍，則會引發(fā)各種代謝疾病。

IBIL 又稱非結(jié)合膽紅素，主要反映肝細(xì)胞的轉(zhuǎn)化功能和紅細(xì)胞的分解狀態(tài)。ALP 作為消化代謝關(guān)鍵酶，參與機(jī)體多種物質(zhì)代謝途徑，其活性高低可以反映動物機(jī)體的生長發(fā)育情況。LDH 則主要在機(jī)體糖酵解過程中發(fā)揮作用，催化乳酸和丙酸相互轉(zhuǎn)化，促進(jìn)機(jī)體能量代謝。HBDH 主要存在于心肌紅細(xì)胞、白細(xì)胞和腎臟，可以反映心肌、肌肉細(xì)胞以及紅細(xì)胞的損壞狀況。BUN 作為蛋白質(zhì)以外的另一種含氮化合物，主要是作為判斷腎臟功能的指標(biāo)。GLU 是動物活細(xì)胞的能量來源和新陳代謝的中間產(chǎn)物，可以反映動物機(jī)體的能量代謝水平。楊惠嵐等［21］研究發(fā)現(xiàn)，動物血清HBDH 和LDH 濃度降低，機(jī)體酮體合成減少，從而緩解了肝臟壓力，保證其正常代謝。還有研究發(fā)現(xiàn)，攝入日糧較高劑量水平牛至油時，IBIL 濃度降低，導(dǎo)致肝功能異常，原因可能是較高劑量牛至油導(dǎo)致腸道黏膜活性氧（ROS）含量增加，谷胱甘肽（GSH）基因的表達(dá)受阻，GSH 含量降低從而引起營養(yǎng)不良，導(dǎo)致肝功能障礙［22］。劉鳳云等［23］和雷蕾等［24］的研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)血清中ALP 含量高時，肝功能嚴(yán)重受損，而肝臟是動物機(jī)體內(nèi)重要的代謝器官，也是集體能量代謝和各類生理作用的活性物質(zhì)合成與加工場所。Li 等［25］和Liu 等［26］研究還發(fā)現(xiàn)，牛至油可以調(diào)節(jié)動物機(jī)體的脂質(zhì)代謝和葡萄糖代謝，有改善畜禽過度肥胖和腹脂率過高的作用，調(diào)節(jié)機(jī)體GLU 濃度，維持正常代謝。另外，低劑量的牛至油還能通過核因子E2 相關(guān)因子2（Nrf2）誘導(dǎo)細(xì)胞中超氧化物歧化酶和GSH 基因的表達(dá)，從而緩解過氧化氫誘導(dǎo)的小腸上皮細(xì)胞的氧化損傷［27］。本試驗(yàn)研究表明，當(dāng)日糧牛至油添加水平升高時，試驗(yàn)牛血清IBIL 濃度20 g/d 組顯著低于其他兩組，LDH和HBDH 濃度試驗(yàn)組極顯著低于對照組，BUN 濃度10 g/d 組顯著高于對照組，GLU 濃度10 g/d 組極顯著高于對照組和20 g/d 組，這與前人研究結(jié)果相似，表明合理水平牛至油可以維持肝功能正常，保證機(jī)體正常代謝，較高劑量則會導(dǎo)致肝功能障礙，引起相關(guān)代謝疾病。添加適宜劑量牛至油可以提供血清GLU 的充足來源，保證瘤胃微生物的需求，促進(jìn)動物生長。同時適宜濃度牛至油會促使血清BUN 濃度升高，表明適宜濃度牛至油會導(dǎo)致動物吸收的碳水化合物增多，瘤胃微生物大量繁殖，菌體蛋白合成量增加，對動物機(jī)體氮代謝有促進(jìn)作用。

趙曉彬等［28］臨床上發(fā)現(xiàn)，心肌梗死患者中心力衰竭程度與陰離子間隙（AG）存在聯(lián)系，而且心肌梗死患者比較不規(guī)律心絞痛患者的AG 明顯升高，且二氧化碳結(jié)合力明顯降低。本研究中發(fā)現(xiàn)雖然3 個處理的AG 含量無顯著性差異，但是20 g/d 組牛只的AG 均值明顯高于對照組與10 g/d 組，且10 g/d 組與對照組相近，這說明日糧中添加高劑量的牛至油可能對牦牛身體健康造成了一定的負(fù)面影響。

綜上所述，本研究顯示在牦牛補(bǔ)飼飼糧中添加不同劑量牛至油均能提高牦牛的生產(chǎn)性能，但低劑量的牛至油對體重增長的效果更加明顯。同時低劑量牛至油的添加會緩解肝臟壓力，提供血清GLU，同時會使血清BUN 濃度升高，促進(jìn)動物機(jī)體氮代謝。在本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加10 g/d 的牛至油對牦牛的生長性能和新陳代謝方面影響效果最佳。