馬俊秀，閆更軒，陳盛宇，吳皓瓊，張淑梅

（黑龍江省科學(xué)院微生物研究所，哈爾濱 150010）

蔬菜是人們生活中必備的食品，其產(chǎn)量與品質(zhì)對菜籃子工程影響較大。蔬菜生產(chǎn)過程中病害發(fā)生不可避免，其中，軟腐病是最常見的細(xì)菌病害。該病害寄主廣泛，可侵染白菜、番茄、馬鈴薯、甘藍(lán)、蔥類、黃瓜、蘿卜、芹菜等幾十種蔬菜；危害期長，一年四季在蔬菜生產(chǎn)和貯藏各個時期均可發(fā)生；危害大，居蔬菜細(xì)菌病害之首，造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失，制約了蔬菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

傳統(tǒng)化學(xué)藥劑的長期施用對土壤生態(tài)環(huán)境、農(nóng)產(chǎn)品安全及人畜健康的危害日益凸顯，生物防治具有綠色安全、無毒無害等優(yōu)點，符合農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展要求，是蔬菜軟腐病防治的重要方向和研究熱點，具有非常廣闊的應(yīng)用前景。本研究綜述了國內(nèi)外蔬菜軟腐病生物防治的最新研究進(jìn)展，為蔬菜軟腐病的生物防治新技術(shù)研發(fā)提供參考。

1 蔬菜軟腐病研究概況

1.1 病原菌

蔬菜軟腐病是一種遍布全球的流行性細(xì)菌病害，可引起蔬菜腐爛變質(zhì)。果膠桿菌屬（Pectobacte?riumspp.）、芽胞桿菌屬（Bacillusspp.）、黃桿菌屬（Flavobacteriumspp.）和假單胞菌屬（Pseudomonasspp.）是主要致病菌。迄今研究發(fā)現(xiàn)，果膠桿菌屬（以前是歐文氏桿菌屬Erwiniasspp.）是最主要的軟腐病原菌，也是人類首次發(fā)現(xiàn)的植物病原細(xì)菌［1］，主要包括胡蘿卜軟腐歐文氏菌胡蘿卜軟腐亞種（E.carotovora. subsp.carotovora，Ecc）、菊歐文氏菌（E.chrysanthemi，Ech）、胡蘿卜軟腐歐文氏菌黑莖亞種（E.carotovora.subsp.atroseptica，Eca）［2］。3 種病原菌的分布范圍以及寄主有所差別，其中Ecc寄主和分布范圍更廣，是國內(nèi)外研究較多的病原菌。近年來，將細(xì)菌性軟腐病病原菌Erwinia carotovora和Er?winia chrysanthemi歸到果膠桿菌屬（Pectobacteriumspp.）和迪基氏菌屬（Dickeyaspp.），并被歸入腸桿菌科［3］。果膠桿菌屬主要包括4 個種，分別為P.caroto?vorum（Pc）、P.wasabiae（Pw）、P.betavasularum（Pb）和P.atrosepticum（Pa）。Pc在種內(nèi)具有多樣性，被劃分 為P.carotovorumsubsp.carotovorum（Pcc）［4］、P.carotovorumsubsp.odoriferum（Pco）［5］和P.carotovo?rumsubsp.brasiliense（Pcb）［6］3 個亞種。研究發(fā)現(xiàn)，Pcc可以感染部分觀賞性花卉植物和數(shù)百種蔬菜，在許多地區(qū)的發(fā)病植物上均可發(fā)現(xiàn)，是軟腐病菌中分布最廣泛的病原菌［7］。

1.2 軟腐病菌致病機(jī)理

植物與病原菌互作過程中，病原菌會產(chǎn)生生物被膜、毒素物質(zhì)、細(xì)胞壁降解酶和抗生素等一系列致病因子。軟腐病菌可以產(chǎn)生果膠酶（多聚半乳糖醛酸酶和果膠酸鹽裂解酶）、纖維素酶以及蛋白酶［8］等多種細(xì)胞壁降解酶，是軟腐病菌發(fā)揮致病性的主要因子。其中，果膠酸鹽裂解酶在軟腐病致病過程中起重要作用，通過降解植物細(xì)胞壁，使植物組織瓦解、植株腐爛，另外2 種酶配合其他酶協(xié)同侵染，最終導(dǎo)致植株腐爛病變［9-11］。寄主與病原菌之間的互作分為親和與非親性互作2 種類型，非親和性互作中，病原菌不能大量繁殖，處于潛伏侵染狀態(tài)，植物不表現(xiàn)明顯癥狀；親和性互作中，病原菌大量繁殖，表現(xiàn)出明顯的軟腐病癥［12］。

1.3 軟腐病發(fā)生規(guī)律及侵染途徑

軟腐病常常發(fā)生在低洼、連作的地區(qū)。另外，土壤缺氧、連續(xù)陰雨、地表有水、高溫高濕等不利環(huán)境更容易使蔬菜感病。病菌通常存在于感病植株與病殘體、土壤、糞肥、昆蟲等環(huán)境中［13］，通過昆蟲、自然和人為傷害傳播。病菌可通過植株傷口或者自然條件下產(chǎn)生的裂口侵入植株中，也可以植株的幼苗或根苗為媒介侵入［14］。植株水分過多、長時間干旱或者深根損害會擴(kuò)大傷口，使植株更容易發(fā)病。

2 軟腐病生物防治策略

2.1 生防微生物

2.1.1 生防細(xì)菌 細(xì)菌是植物病害生物防治的研究主體，其防病機(jī)制主要包括競爭、抗生、誘導(dǎo)植物抗性等。1 種生防細(xì)菌可通過幾種生防機(jī)制協(xié)同發(fā)揮作用［15］，防治蔬菜軟腐病的生防細(xì)菌以芽孢桿菌為主。1993 年張春明等［16］從土壤中篩選到1 株對大白菜軟腐病菌有強(qiáng)烈抑制作用的細(xì)菌，對白菜軟腐病田間防效可達(dá)70%左右。2006 年賀小香［17］從409株植物內(nèi)生細(xì)菌中篩選出2 株芽孢桿菌B-401 和B-208，對大白菜軟腐病溫室防效均可達(dá)65%。同年，魯燕汶［18］從土樣中篩到1 株具有廣譜抑菌活性的多粘芽孢桿菌（Paenibacillu polymyxa），對白菜軟腐病菌具有強(qiáng)烈拮抗作用。近年來，利用芽孢桿菌防治蔬菜軟腐病的研究呈上升趨勢。谷會等［19］從采后辣椒中篩選到對辣椒軟腐病具有較強(qiáng)抑制作用的植物內(nèi)生芽孢桿菌pp-32，平板培養(yǎng)7 d 后抑制率達(dá)56.7%。楊瑞先等［20］、王超等［21］分別發(fā)現(xiàn)解淀粉芽孢桿菌對蘿卜和白菜軟腐病均具有高效抑制作用。Rashid 等［22］發(fā)現(xiàn)接種枯草芽孢桿菌48 h 對馬鈴薯軟腐病具有一定的抑制作用。李磊等［23］從芹菜根際土壤中獲得1 株解淀粉芽孢桿菌ZF75，對芹菜軟腐病防效達(dá)89.62%，且促生效果顯著，具有開發(fā)應(yīng)用潛力。孫旺旺等［24］從生菜根際土壤中篩選到1 株貝萊斯芽孢桿菌BPC6，對生菜軟腐病具有很好的防治效果。盧美歡等［25］在特殊生境溫泉中篩選到1 株土壤定殖力強(qiáng)、抑菌譜廣的埃吉類芽孢桿菌SWLW8，對白菜軟腐病菌Pcc的治療防效較高，具有良好生防潛力。除了芽孢桿菌外，乳酸菌和粘質(zhì)沙雷氏菌也可作為生防菌防治蔬菜軟腐病。Tsuda 等［26］發(fā)現(xiàn)乳酸菌（LAB）在田間條件下可以降低大白菜細(xì)菌性軟腐病的危害程度，該菌對洋蔥、馬鈴薯和番茄的軟腐病害也有抑制作用。馮迪南等［27］采用室內(nèi)平板試驗篩選到1 株粘質(zhì)沙雷氏菌，對馬鈴薯細(xì)菌性軟腐病菌Pcb具有良好拮抗作用。

研究發(fā)現(xiàn)，黏細(xì)菌（myxcobacteria）對于植物病原細(xì)菌和真菌具有很好的防治效果，是一種新型生防微生物資源菌［28，29］，未來對于黏細(xì)菌防治植物軟腐病方面研究有待進(jìn)一步開展。

2.1.2 生防放線菌 放線菌在土壤中廣泛存在，可以產(chǎn)生抗生素等多種豐富的次級代謝產(chǎn)物，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用最多的微生物類群。目前，對于植病生防放線菌的報道主要集中在對鏈霉菌屬（Strepto?mycespp.）和小單胞菌屬（Miccromonosporaspp.）。國內(nèi)在防治蔬菜軟腐病方面報道較多的是鏈霉菌，主要依靠其產(chǎn)生的抗生素類活性物質(zhì)發(fā)揮生防作用。李雅華等［30］從土壤中篩選到2 株放線菌菌株，對Ecc具有拮抗作用，發(fā)酵液和菌絲裂解液對Ecc抑菌圈直徑分別為19.2、21.3 mm。王鵬鳴［31］報道了淡紫灰鏈孢海南變種和灰色鏈霉菌（Streptomyces griseus）2種鏈霉菌，其產(chǎn)生的中生菌素和鏈霉素可以抑制白菜軟腐病原菌蛋白質(zhì)合成，使用3%中生菌素在白菜苗期和蓮座期噴施，對白菜軟腐病田間防效分別可達(dá)94.7%和84.0%；若使用72%濃度農(nóng)用鏈霉素，其田間防效在70%以上。

2.1.3 生防真菌 目前，用于植病生防的真菌主要包括木霉菌、粘帚霉、淡紫擬青霉、頭狀莖點霉以及毛殼菌等。木霉菌在防治蔬菜軟腐病方面發(fā)揮重要作用，能夠產(chǎn)生多種抑菌物質(zhì)，通過抗生、溶菌、誘導(dǎo)抗性、與病原菌競爭以及重寄生等方式發(fā)揮抑菌作用。Li 等［32］發(fā)現(xiàn)擬康寧木霉SMF2 能夠分泌1 種抗菌肽（康寧霉素），可有效防治由Pcc引起的大白菜軟腐病，提高大白菜體內(nèi)保護(hù)酶活性、促進(jìn)植株生長。魏蜜等［33］通過平板對峙法篩選到1 株拮抗真菌草莖點霉F217-1，對白菜軟腐病的平板抑菌效果顯著，離體葉片防效達(dá)75%。

2.2 群體感應(yīng)淬滅

群體感應(yīng)（Quorum sensing，QS）是微生物中普遍存在的一種細(xì)胞間交流機(jī)制，微生物通過感知其分泌的特殊信號分子濃度來調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達(dá)以適應(yīng)環(huán)境變化［34］。群體感應(yīng)系統(tǒng)最先在細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)，它可調(diào)控抗生素產(chǎn)生、生物膜形成、致病基因表達(dá)等群體行為。細(xì)菌的群體感應(yīng)信號分子主要包括N-?；呓z氨酸內(nèi)酯類化合物（AHLs）、烯酸類（DSF）、自誘導(dǎo)肽（AIPs）和呋喃硼酸二酯（AI-2）類。典型的群體感應(yīng)系統(tǒng)包括存在于革蘭氏陰性細(xì)菌中的AHL 系統(tǒng)、存在于革蘭氏陽性細(xì)菌中AIPs 系統(tǒng)以及革蘭氏陰陽性細(xì)菌中均有的AI-2 系統(tǒng)。

大量研究表明［35-37］，植物病原細(xì)菌的致病性受群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控，阻斷群體感應(yīng)即群體感應(yīng)淬滅作為防治植物細(xì)菌病害新策略，已成為國內(nèi)外研究熱點，尤其對AHL 介導(dǎo)系統(tǒng)的淬滅研究更加深入。主要的淬滅手段包括阻斷信號產(chǎn)生、阻斷信號與受體蛋白結(jié)合、降解信號分子。

蔬菜軟腐病菌的群體感應(yīng)系統(tǒng)以AHL 為主，近年來，國內(nèi)外針對AHL 信號因子的淬滅研究取得了一些新進(jìn)展，集中在利用能夠降解AHL 信號因子的生防菌株、AHL 降解酶與AHL 抑制防治蔬菜軟腐病等方面。對于AHL 降解酶，研究和應(yīng)用最廣泛的是AHL 內(nèi)酯酶，該酶由aiiA基因編碼，在芽孢桿菌、根癌農(nóng)桿菌、短小芽孢桿菌、節(jié)桿菌中廣泛存在，通過降解信號分子蛋白發(fā)揮生防作用，可用于防治蔬菜細(xì)菌性軟腐病。Dong 等［38，39］發(fā)現(xiàn)分離自芽孢桿菌的內(nèi)酯酶AiiA 可以有效抑制歐文氏桿菌引起的作物軟腐病，提出了利用群體淬滅酶是一種防控作物軟腐病的有效手段。邱健等［40］篩選到針對AHL 信號分子的AHL 內(nèi)酯酶SS10，該酶通過降解Ecc產(chǎn)生的細(xì)胞壁降解酶降低軟腐菌的危害。曾慧等［41］研究發(fā)現(xiàn)雙效菌素（ZWA）和AHL 內(nèi)酯酶具有協(xié)同增效作用，聯(lián)合使用可增強(qiáng)對馬鈴薯軟腐病的抗性。See-too 等［42］發(fā)現(xiàn)了一種新的AHL 內(nèi)酯酶AidP，該酶是一種來自南極動球細(xì)菌Planococcus versutusL10.15T中的適冷性酶，可以有效防治由Pc引起的白菜軟腐病。隨著對淬滅酶基因的深入研究，利用表達(dá)淬滅酶工程菌株以及轉(zhuǎn)淬滅酶基因植物是防控蔬菜細(xì)菌性軟腐病的一種新方法。張霞等［43］將aiiA基因轉(zhuǎn)入植物促生熒光假單胞菌P303 中，構(gòu)建重組熒光假單胞菌P303-ss10，該工程菌在離體試驗條件下可以有效抑制馬鈴薯和白菜軟腐病菌侵入，在一定程度上抑制軟腐病發(fā)生。Molina 等［44］和Qian等［45］分 別將aiiA基 因轉(zhuǎn) 入生 防 細(xì)菌Pseudomonas.fluorescensP3 和lysobacter enzymogenesOHll 中，發(fā)現(xiàn)2 種工程菌可以顯著降低由果膠桿菌引起的馬鈴薯和大白菜等軟腐病癥。Han 等［46］采用花粉管通道法將抗軟腐的aiiA基因轉(zhuǎn)入到大白菜中，獲得對軟腐病具有一定抗性的轉(zhuǎn)基因白菜；Vanjildorje 等［47］利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將來自芽孢桿菌GH02 的AHL 內(nèi)酯酶基因aii與馬鈴薯PinII 信號肽融合，構(gòu)建了融合基因pinIISP-aii，也獲得對軟腐病具有一定抗性的轉(zhuǎn)基因白菜。另外，AHL 抑制劑也是防控蔬菜軟腐病、實現(xiàn)蔬菜保鮮的有效防治措施之一。Charron等［48］研究發(fā)現(xiàn)西蘭花中的硫代葡萄糖苷降解產(chǎn)物可以抑制邊緣假單胞菌（Pseudomonas marginalis）引起的西蘭花細(xì)菌性軟腐病，不同品種西蘭花因總硫代葡萄糖苷含量不同其軟腐程度有所差異，在硫代葡萄糖苷含量為22.95 μg/g 及以上的西蘭花品種可有效抑制軟腐病在田間的發(fā)生。Zhang 等［49］利用己醛防治白菜細(xì)菌性軟腐病，己醛可以抑制白菜中胡蘿卜軟腐果膠桿菌和熒光假單胞菌2 種病原菌的AHL 信號分子的β-半乳糖苷酶以及胞外酶活性，從而抑制菌體生長。經(jīng)己醛處理后，白菜軟腐葉柄組織腐爛程度下降，且呈現(xiàn)濃度依賴性，在1/2 MIC 時對白菜腐爛抑制作用最強(qiáng)。Miguel 等［50］從鹽角草（Salicornia europaea）根際分離到可以降解AHL 的菌株P(guān)6（Pseudomonas segetisstrain P6），通過HPLC 和系統(tǒng)發(fā)育分析顯示該菌株可產(chǎn)生AHL 降解酶，在馬鈴薯和胡蘿卜上接種P6 菌株后，顯著降低了P.atro?septicum、D.solani和P.carotovorum引起的軟腐癥狀，并且對番茄還具有一定的促生作用。Fan 等［51］分離到1 株中間蒼白桿菌D-2（Ochrobactrum inter?mediumD-2），Zhang 等［52］分離到1 株新型不動桿菌菌株XN-10（Acinetobactersp.XN-10），2 株菌株均具有較好的AHL 降解活性，能有效降解各類AHL 信號分子，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析了AHL 的降解產(chǎn)物組成，確定菌株D-2 是通過水解方式降解AHL，菌株XN-10 是通過水解和去羥基化2 種方式降解AHL，對D-2 全基因組分析鑒定其內(nèi)酯酶為AidF。施用2 株AHL 降解菌發(fā)現(xiàn)均可以顯著降低軟腐病菌Pcc的致病性，在一定程度上抑制該病原菌在白菜、馬鈴薯和蘿卜上產(chǎn)生的組織浸漬，有效減輕軟腐病的發(fā)生。

大量研究表明，AHLs 信號在防控蔬菜軟腐病菌毒性方面具有良好的應(yīng)用前景，將是今后蔬菜軟腐病生物防治研究重點，同時也應(yīng)積極探索其他群體淬滅方式，以挖掘效果更佳的淬滅途徑。

2.3 噬菌體療法

噬菌體（Phage，bacteriophage）是一類專性感染細(xì)菌的病毒，作為植物細(xì)菌病害生物防治手段之一越來越受到重視。利用噬菌體防治馬鈴薯黑脛病、獼猴桃潰瘍病、梨果火疫病、番茄青枯病、白菜軟腐病等，已經(jīng)取得了一些成效。幾種噬菌體產(chǎn)品已經(jīng)在美國登記注冊，用于防治番茄細(xì)菌性潰瘍病、斑點病等。近年，利用噬菌體防治蔬菜細(xì)菌性軟腐病的研究處于快速發(fā)展階段。Lim 等［53］為了控制由Pcc引起的白菜、馬鈴薯和番茄等蔬菜細(xì)菌性軟腐病和莖腐病，分離篩選到一種噬菌體PP1，屬于有尾噬菌目（Caudovirales）中的短尾噬菌科（Podoviridae）家族，該噬菌體對Pcc具有高度特異性，對其宿主細(xì)菌具有快速而強(qiáng)大的裂解活性，可以顯著降低Pcc的致病性。Robert 等［54］從波蘭中部馬鈴薯樣品中成功分離到針對胡蘿卜軟腐果膠桿菌（Pcc）、馬鈴薯黑脛病菌（P.wasabiae）和植物腐敗菌（Dickeya solani）的噬菌體ΦPD10.3 和ΦPD23.1，生測結(jié)果表明，單一噬菌體對馬鈴薯塊莖軟腐程度降低80%，混合噬菌體使馬鈴薯塊莖軟腐程度降低95%。Adriaenssens［55］、Evelien 等［56］針對Pectobacterium carotovorum和Dick?eya solani2 種蔬菜軟腐病菌分離到vB_DsoM_LIME?stone1 和vB_ DsoM_LIMEstone2 2 個噬菌體，實驗室和田間試驗顯示可降低馬鈴薯塊莖的發(fā)病率和軟腐程度，并提高馬鈴薯產(chǎn)量。Elhafeez 等［57］從埃及馬鈴薯栽培田土樣中分離到2 株噬菌體vB_KsaM-C1和vB_KsaO-C2，可減輕馬鈴薯軟腐病癥狀。Muturi等［58］在馬鈴薯葉片上接種病原菌1 h 內(nèi)施用噬菌體，葉片軟腐病癥狀減輕90%。Voronina 等［59］利用噬菌體PP16 浸泡受感染的馬鈴薯種子塊莖，有效抑制軟腐病發(fā)生，植株萌發(fā)率顯著提高。

研究者對噬菌體特性及生防機(jī)理進(jìn)行了深入研究［60-62］，發(fā)現(xiàn)了針對Pcc的新噬菌體Jarilo［63］，未來將會發(fā)現(xiàn)更多新型高效的噬菌體應(yīng)用于防治蔬菜軟腐病中。

2.4 新型微生物蛋白農(nóng)藥

新型微生物蛋白農(nóng)藥屬于蛋白激發(fā)子類物質(zhì)，不直接作用于靶標(biāo)病原物，通過激發(fā)植物自身免疫，使植物抵抗病原菌侵染，提高植物免疫力，促進(jìn)植物生長。目前，研究較多的有超敏蛋白、隱地蛋白和激活蛋白。超敏蛋白是1992 年研究人員從植物病原細(xì)菌-解淀粉歐文氏菌中發(fā)現(xiàn)的，是目前最具代表性的蛋白農(nóng)藥，對作物的多種病害具有很好的防治效果。Qiu 等［64］和陳國參等［65］發(fā)現(xiàn)超敏蛋白制劑可以有效控制大白菜軟腐病，對大白菜軟腐病的防治效果高達(dá)90%。趙爍［66］發(fā)現(xiàn)噴施超敏蛋白提高了馬鈴薯對軟腐病的抗性。隱地蛋白和激活蛋白來源于植物病原真菌，對植物病毒病和真菌病防治效果顯著。微生物蛋白農(nóng)藥是植病生物防治的重要手段之一，今后，隨著對生防功能蛋白研究的深入，蛋白農(nóng)藥將會成為防治蔬菜軟腐病的重要手段。

2.5 小RNA 基因沉默

細(xì)菌小RNA（small RNA，sRNA）是細(xì)菌中的非編碼基因，作為轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子調(diào)節(jié)細(xì)菌毒力因子、生物膜形成、抗生素耐藥性等相關(guān)基因表達(dá)［67］。研究發(fā)現(xiàn)，許多細(xì)菌sRNA 參與調(diào)控細(xì)菌致病性，Zhang 等［68］報道了梨幼果接種sRNA（rhyhA 和rprA）缺失突變的軟腐歐文氏病菌后，梨幼果的腐爛程度狀明顯減輕。目前，已初步揭示了sRNA 在軟腐病菌致病過程中的作用機(jī)制，即病原菌中的內(nèi)源性非編碼小RNA 以RNA 沉默機(jī)制調(diào)控與植物免疫應(yīng)答相關(guān)基因的表達(dá)。Ecc是引起蔬菜軟腐病常見的病原菌，Sun 等［69］發(fā)明了一種高效克隆病原調(diào)控小RNA 的方法，構(gòu)建了小RNA cDNA 文庫，用于研究白菜內(nèi)源性小RNA 對Ecc感染的反應(yīng)。王純婷［70］研究了Hfq 蛋白和sRNA 在軟腐果膠桿菌PccS1 致病過程中的功能，發(fā)現(xiàn)sRNA（ArcZ）缺失突變后PccS1的致病能力顯著降低，篩選到ArcZ 靶標(biāo)基因，為后續(xù)利用sRNA 防治軟腐果膠桿菌引起的軟腐病奠定基礎(chǔ)。Dickeya dadantii是引起蔬菜軟腐病的另一種病原菌，其致病性與植物細(xì)胞壁降解酶（PCWDEs）、三型分泌系統(tǒng)（T3SS）和鞭毛運動等多種基因協(xié)同表達(dá)調(diào)控相關(guān)。Yuan 等［71］發(fā)現(xiàn)了一種用于控制由Dickeya dadantii引起的蔬菜軟腐病病原菌毒力的新型反饋信號通路，該信號通過連接環(huán)鳥苷二磷酸（cdi-GMP）和2 個機(jī)制不同的sRNA（ArcZ）和（RsmB）來控制該軟腐細(xì)菌的毒力，具體指以RNA 伴侶Hfq通過影響全局轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)系統(tǒng)RsmA/RsmB 的活性，以及通過2 種機(jī)制不同的ArcZ 和RsmB 的c-di-GMP 信號的活性來調(diào)控毒力決定因素。該報道對Dickeya dadantii毒力控制的多層復(fù)雜調(diào)控機(jī)制的新見解可促進(jìn)靶向其毒力抑制劑的發(fā)現(xiàn)，為防治該病原菌引起的蔬菜軟腐病提供一種新思路。近年來，高通量測序技術(shù)發(fā)展迅速，在蔬菜軟腐病菌中會有更多與致病性相關(guān)的小RNA 被發(fā)現(xiàn)，且隨著小RNA在致病過程中的基因沉默機(jī)制及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的深入研究，未來小RNA 基因沉默將成為蔬菜軟腐病菌的生物防控新選擇。

2.6 植物源活性物質(zhì)

近年，國內(nèi)在利用植物源活性物質(zhì)防治植物細(xì)菌病害方面開展了一些研究，但多數(shù)處于實驗室階段。周燚等［72］和劉霞等［73］發(fā)現(xiàn)，瓦松提取物和卷柏乙醇提取物可以明顯降低大白菜軟腐病害發(fā)生率。閔華等［74］在探討中草藥作為植物源農(nóng)藥防治植物病害的研究中發(fā)現(xiàn)，丁香提取物對白菜軟腐病菌的抑制作用達(dá)100%。賀理等［75］研究發(fā)現(xiàn)，洋蔥鱗葉和大蒜鱗莖的水提液對Ecc具有一定抑制作用，其中大蒜鱗莖水提液作用效果顯著。中國植物資源豐富，植物源活性物質(zhì)作為一種潛在的生防資源在防治細(xì)菌病害方面將發(fā)揮重要作用。

3 展望

細(xì)菌性軟腐病是制約蔬菜種植業(yè)發(fā)展的主要病害，隨著國家藥肥雙減政策的實施、生態(tài)環(huán)境與食品安全以及農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的要求，蔬菜軟腐病生物防治將發(fā)揮越來越重要的作用。本研究綜述了蔬菜軟腐病多種生物防治方法的研究現(xiàn)狀，體現(xiàn)出蔬菜軟腐病生物防治趨向多元化，每種方法各具優(yōu)勢，但也存在一定的局限性，很多方法尚處于實驗室起步階段，存在防效不穩(wěn)定、防治作用單一和商業(yè)化生產(chǎn)困難等不足之處。目前，生態(tài)環(huán)境的復(fù)雜性使單一的防控技術(shù)難以達(dá)到對軟腐病的長期穩(wěn)定控制，因此，將生物防治與物理、化學(xué)以及農(nóng)業(yè)防治措施相結(jié)合，對蔬菜細(xì)菌性軟腐病的防治可以產(chǎn)生協(xié)同增效作用?，F(xiàn)有的生物防治技術(shù)存在應(yīng)用作物和抗菌譜窄的局限性，鑒于蔬菜病害多發(fā)混發(fā)現(xiàn)狀，未來應(yīng)著重研發(fā)對多種蔬菜、多種病害起作用的廣譜、高效的防控方法。目前，隨著對軟腐病菌的致病機(jī)理由淺入深的認(rèn)知、分子生物學(xué)等技術(shù)的日益完善以及人們對轉(zhuǎn)基因等技術(shù)的科學(xué)認(rèn)識，效果更佳的生物防治技術(shù)將會不斷涌現(xiàn)，群體感應(yīng)淬滅、小RNA 基因沉默等新技術(shù)將會更加成熟。