朱閆陳，陳奕業(yè)，田漢晨，吳龍飛，黃依琳，孫寶麗

(華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，廣東 廣州 510642)

隨著集約化養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)飼料的缺乏已經(jīng)成為限制我國養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展的因素之一。構(gòu)樹()屬于?？茦?gòu)樹屬落葉喬木，具有蛋白質(zhì)含量高，營養(yǎng)豐富，適應(yīng)力強、生長快和年產(chǎn)量高等諸多優(yōu)點，近年來得到了學(xué)術(shù)界與媒體的廣泛關(guān)注。構(gòu)樹中粗蛋白含量高達20%～30%，必需氨基酸含量優(yōu)于常見木本植物，各氨基酸組分與含量分配較合理。屠焰等測定了雜交構(gòu)樹葉的常規(guī)營養(yǎng)成分、微量元素、氨基酸等，研究表明雜交構(gòu)樹中鈣元素、鐵元素、錳元素以及鋅元素均高于苜蓿草粉和豆粕等常規(guī)日糧，而日糧中的礦物質(zhì)元素具有影響動物的生產(chǎn)性能，調(diào)節(jié)機體代謝和參與體內(nèi)的酶促反應(yīng)等重要生理功能。構(gòu)樹中含有豐富的具有抗氧化功能的物質(zhì)，如黃酮類物質(zhì)、木脂素化合物和酚類物質(zhì)等。此外構(gòu)樹中所含有的黃酮類物質(zhì)和生物堿對腫瘤細胞具有抑制作用。構(gòu)樹中含有的多種抑菌成分可以有效抑制細菌與真菌的活性，且對人體毒性小，可用于抗菌藥的開發(fā)利用。研究發(fā)現(xiàn)，構(gòu)樹葉中含有木質(zhì)素、單寧等多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，會影響畜禽對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。但是通過青貯處理后能大幅降低其中單寧含量，改善飼料的適口性，提高飼料的營養(yǎng)價值。

實際生產(chǎn)中，已經(jīng)有在日糧中添加經(jīng)過不同工藝處理的構(gòu)樹飼料的行為。但是現(xiàn)階段關(guān)于構(gòu)樹飼料的安全性和適宜的添加比例等方面的研究仍比較欠缺。本試驗以昆明(KM)小鼠為試驗動物，研究日糧中添加不同比例構(gòu)樹葉粉對小鼠生長性能、臟器指數(shù)以及血清生化指標的影響，旨在為構(gòu)樹作為新型飼料原料用于畜禽生產(chǎn)實踐中的安全性提供理論和實踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用構(gòu)樹新鮮樹葉采摘自華南農(nóng)業(yè)大學(xué)構(gòu)樹種植基地，去除主桿和發(fā)黃葉片，保留葉片前段20～30 cm處嫩枝和樹葉，于40 ℃烘箱內(nèi)烘干并粉碎。于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物實驗中心購買24只體重(18～20 g)一致的健康4周齡KM公鼠作為試驗動物。

1.2 試驗動物分組與管理

將24只遺傳背景相同的健康KM公鼠隨機分為4個組，每組6只。在小鼠的基礎(chǔ)日糧中分別添加0%(對照組：T0)、15%(T15)、25%(T25)、35%(T35)的構(gòu)樹葉粉日糧營養(yǎng)成分見表1。試驗預(yù)飼期7 d，正式試驗期28 d，提供自由采食與飲水。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (DM basis) %

1.3 樣品采集與指標測定

1.3.1 生長性能指標 預(yù)飼期結(jié)束后，分別在正式試驗期的第1，7，14，21，28天的09: 00對小鼠進行稱重，記錄數(shù)據(jù)并計算平均日增重。

1.3.2 臟器指數(shù) 試驗結(jié)束后，采用頸椎脫臼法處死小鼠，取下心臟、肝臟、腎臟、脾臟，肺臟并用PBS緩沖液將各器官沖洗干凈并用吸水紙擦干，稱量各臟器重量，按照下列公式計算臟器指數(shù)：

1.3.3 血清生化指標 正式試驗結(jié)束后，將KM小鼠禁食12 h，采集小鼠一側(cè)眼球的血液。分離血清樣品于微量離心管(EP管)后，于-20 ℃冷凍保存。采用全自動生化分析儀測定KM小鼠血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素(Urea)、總膽固醇(TC)、球蛋白(GLB)、總?cè)饧谞钕僭彼?T3)、總甲狀腺激素(T4)、白球比(A/G)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)用Excel軟件進行初步整理，使用SAS 9.4軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，用Tukey方法進行多重比較，<0.05 表示差異顯著，<0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同比例構(gòu)樹葉粉對KM小鼠生長性能的影響

由表2可知，T15組和T25組小鼠平均日增重與T0組差異不顯著(>0.05)，T35組的KM小鼠平均日增重顯著低于T0組(<0.05)。

表2 日糧中添加不同比例構(gòu)樹葉粉對KM小鼠生長性能的影響Table 2 Effects of different proportion of BPL powder on growth performance of KM mice

2.2 不同比例構(gòu)樹葉粉對KM小鼠臟器指數(shù)的影響

由表3可知，T15組小鼠的肝臟、脾臟指數(shù)顯著高于T0組(<0.05)；T25組小鼠的肺臟指數(shù)顯著低于對照組T0(<0.05)；T35組小鼠的肝臟指數(shù)極顯著低于其余三組(<0.01)，心臟指數(shù)顯著低于T0組與T25 組(<0.05)。

表3 日糧中添加不同比例構(gòu)樹葉粉對KM小鼠臟器指數(shù)的影響Table 3 Effects of different proportion of BPL powder on organ index of KM mice

2.3 不同比例構(gòu)樹葉粉對KM小鼠血清生化指標的影響

由表4可知，與對照組T0相比，試驗組小鼠LDH含量均有提高，T15組以及T35組KM小鼠的LDH含量達到極顯著水平(<0.01)，T25組達到顯著水平(<0.05)；試驗組TC含量均低于T0組，其中T25組和T35組達到顯著水平(<0.05)；T25組的KM小鼠ALT顯著低于T0組(<0.05)；相比與T0組，T35組小鼠TP、ALB和Urea含量均顯著提高(<0.05)。

表4 日糧中添加不同比例構(gòu)樹葉粉對KM小鼠血清生化指標的影響Table 4 Effects of different proportion of BPL powder on serum biochemical indexes of KM mice

3 討 論

3.1 構(gòu)樹葉粉對KM小鼠生長性能的影響

本試驗中T35組小鼠的平均日增重顯著低于T0組(<0.05)，T15組與T25組與T0組差異不顯著?？赡苁怯捎跇?gòu)樹的粗纖維含量較高，在日糧中添加較多構(gòu)樹葉粉會影響日糧的適口性，同時導(dǎo)致日糧能量水平較低，無法滿足小鼠的能量需求，造成小鼠增重減慢，這與吳健平等和何國英研究結(jié)果一致。同時未經(jīng)過處理的構(gòu)樹葉粉中含有較多的抗?fàn)I養(yǎng)因子，會阻礙小鼠對日糧中其他營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，不利于小鼠生長。綜上所述，建議在小鼠日糧中構(gòu)樹的添加量不超過25%。

3.2 構(gòu)樹葉粉對KM小鼠臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)指的是器官的重量占體重的百分比，可以在一定程度上反映器官的發(fā)育和健康情況。臟器指數(shù)在正常范圍內(nèi)的提高表示體內(nèi)器官功能增強，對機體有益。本試驗結(jié)果顯示構(gòu)樹葉粉對KM小鼠的臟器有不同程度的影響。脾臟是機體重要的免疫器官，對小鼠的免疫系統(tǒng)具有重要影響，肝臟功能眾多，是機體代謝的重要場所。T15組KM小鼠的脾臟、肝臟指數(shù)顯著高于T0組(<0.05)，說明日糧中添加15%的構(gòu)樹葉粉可以促進小鼠的脾臟和肝臟的發(fā)育，增強小鼠的免疫功能，促進機體代謝活動。與T0組相比，T25組的肺臟指數(shù)與T35組小鼠心臟指數(shù)顯著降低(<0.05)，T35組小鼠肝臟指數(shù)極顯著降低(<0.01)，可能是由于添加過量的構(gòu)樹葉粉導(dǎo)致日糧的適口性降低，小鼠采食量減少，同時營養(yǎng)水平下降，小鼠攝取營養(yǎng)不足影響各臟器的發(fā)育，也有可能是與構(gòu)樹葉中的抗?fàn)I養(yǎng)因子有關(guān)。綜上所述，在日糧中添加 15%左右的構(gòu)樹葉粉可以促進小鼠肝臟、脾臟的發(fā)育，且對小鼠其他臟器無不良影響，有利于小鼠的機體健康。

3.3 構(gòu)樹葉粉對KM小鼠血清生化指標的影響

血液生化檢查是臨床診斷中的重要手段，其指標可以反映機體組織器官的機能是否正常。LDH存在于機體所有組織細胞內(nèi)，其中肝臟含量最高，可作為評價肝功能受損的主要指標之一。本試驗中，T15組和T35組的LDH含量極顯著高于T0組(<0.01)， T25 組顯著高于T0組(<0.05)?？赡苁怯捎谔砑訕?gòu)樹葉粉含量過高，影響小鼠對養(yǎng)分的吸收利用，影響肝臟的功能，也可能是構(gòu)樹中某種物質(zhì)導(dǎo)致小鼠肝功能受損。血清TP含量反應(yīng)肝臟合成蛋白質(zhì)的能力，血清TP和ALB含量的升高時，機體蛋白質(zhì)代謝旺盛。Urea是體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物，血清中Urea含量可用來評價腎小球過濾功能。T35組TP、ALB和Urea含量均顯著高于T0組(<0.05)，說明日糧中添加構(gòu)樹葉粉可以增強機體蛋白質(zhì)代謝活動，但是過量會使腎臟功能受損。試驗組小鼠TC含量極顯著低于對照組T0組(<0.01)，說明日糧中添加構(gòu)樹葉粉有利于降低膽固醇含量，降低患心血管疾病的風(fēng)險。T3和T4都是動物體生長所必需的激素，能夠促進機體的生長與代謝活動，本試驗中，T15組T4含量顯著大于T25組和T35組(<0.05)，對機體健康更有利。機體特異性免疫應(yīng)答水平提升會使A/G值下降。本試驗中，T15組A/G值顯著低于T35組(<0.05)，說明構(gòu)樹葉粉含量過高會損害機體免疫功能。綜上所述，建議在小鼠日糧中添加的構(gòu)樹葉粉含量不超過25%，可以降低血清膽固醇含量，且對機體臟器以及其它功能影響較小。

4 結(jié) 論

日糧中添加構(gòu)樹葉粉含量不超過25%時能促進小鼠脾臟、肝臟的發(fā)育，降低小鼠總膽固醇含量，且對小鼠的生長性能及其他臟器和功能影響較小，大于35%時會導(dǎo)致小鼠生長受阻，部分臟器功能受損。在本試驗條件下建議KM小鼠日糧中構(gòu)樹葉粉添加量不高于25%。