吳學(xué)琴 陳慧青 張璐 尚國(guó)珍 吳雁 邊疆暉

(1 中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所，中國(guó)科學(xué)院高原生物適應(yīng)與進(jìn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西寧810001)(2 中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京100049)(3 青海省動(dòng)物生態(tài)基因組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西寧810001)(4 杭州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，杭州 310012)

高原鼠兔(Ochotona curzoniae) 隸屬于兔形目(Lagomorpha) 鼠兔科(Ochotonidae) 鼠兔屬，廣泛棲息于海拔3 200～ 5 200 m 植被低矮的高寒草甸地區(qū)，是青藏高原特有的非冬眠小型植食性哺乳動(dòng)物，也是高寒草甸生態(tài)系統(tǒng)的關(guān)鍵種(Smith and Foggin,1999;Wilson and Smith,2015;Smithet al.,2019)。近幾十年來，由于過度放牧引起草地退化，導(dǎo)致高原鼠兔種群數(shù)量暴發(fā)式增長(zhǎng)，最高時(shí)可達(dá)2 400 只/公頃(來德珍等，2006)。有關(guān)草地退化與高原鼠兔種群數(shù)量關(guān)系的研究表明，放牧降低了植被的高度和蓋度，為高原鼠兔提供了開闊的棲息環(huán)境，有利于其躲避天敵，降低被捕食的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而導(dǎo)致種群暴發(fā)(施銀柱，1983；邊疆暉等，1994)，但引起高原鼠兔種群暴發(fā)的生理機(jī)制，目前尚不清楚。

免疫力是影響植食性小哺乳動(dòng)物種群波動(dòng)的重要調(diào)節(jié)因子(Mihoket al.,1985;Sinclair and Lochmiller,2000；張志強(qiáng)和王德華，2005)，動(dòng)物免疫力降低可增加病原體的感染(Nordlinget al.,1998;Holt and Roy,2007;Cornellet al.,2008;Hawley and Altizer,2011;Duet al.,2016)，繼而降低種群數(shù)量(Yanget al.,2018;Shanget al.,2019)；反之，個(gè)體免疫力增強(qiáng)，種群死亡率降低，越冬存活率增加(Ksi??eket al.,2014)，則促進(jìn)種群增長(zhǎng)(Lochmiller,1996;Nelson,2004)。在器官水平上，肝臟和腎臟對(duì)氧化降解和排除植物次生化合物具有重要作用(Caldwell,1982;Lindroth and Batzli,1983;Foley,1992；李俊年等，2003a，2003b；何嵐等，2010)，對(duì)小哺乳動(dòng)物的生存至關(guān)重要(張志強(qiáng)等，2007)。在青藏高原地區(qū)，草地不同退化程度為高原鼠兔提供了不同的植物資源，而不同的食物資源對(duì)動(dòng)物免疫力及生長(zhǎng)發(fā)育有不同的效應(yīng)。例如高蛋白質(zhì)食物可增強(qiáng)個(gè)體免疫力(Lochmilleret al.,1993;Davis and Lochmiller,1995)；高次生化合物含量食物抑制個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育(段傳人等，2003；冶娜娜，2015)。

據(jù)此推測(cè)，高原鼠兔的種群數(shù)量隨草地退化而增加，可能是因?yàn)橥嘶莸卦鰪?qiáng)了高原鼠兔個(gè)體的免疫力，同時(shí)緩解了植物次生化合物對(duì)肝臟和腎臟的損傷。為了驗(yàn)證該假設(shè)，本研究在青海海北高寒草地生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家野外科學(xué)觀測(cè)研究站地區(qū)，分別調(diào)查了輕度、中度、重度3類退化草地中高原鼠兔洞口數(shù)量并測(cè)定了高原鼠兔血清總IgG含量、腸道寄生物感染狀況以及肝臟和腎臟指數(shù)。通過分析不同退化草地對(duì)高原鼠兔天然免疫力能力及肝臟和腎臟的效應(yīng)，可為揭示高原鼠兔種群暴發(fā)的生理機(jī)制提供部分理論依據(jù)。

1 研究方法

1.1 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)與設(shè)計(jì)

本實(shí)驗(yàn)于2021年7月在青海海北高寒草地生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家野外科學(xué)觀測(cè)研究站進(jìn)行。根據(jù)實(shí)地訪問調(diào)查的放牧強(qiáng)度(放牧家畜以藏系綿羊和牦牛為主)，確定并選擇了輕度(lightly degraded grassland,LD；每公頃4.14 個(gè)羊單位)、中度(moderately degraded grassland,MD；每公頃8.77 個(gè)羊單位)和重度退化草地(heavily degraded grassland,HD；每公頃14.44 個(gè)羊單位)各5 塊樣地，共計(jì)15 塊樣地，每塊樣地約4 hm2，不同程度退化草地各樣地間相距300 m以上，以避免樣地間的假重復(fù)。

首先，采用樣線法計(jì)數(shù)每塊樣地中半徑為50 m的圓面積樣方(3個(gè)重復(fù))內(nèi)高原鼠兔洞口數(shù)量，以此估算種群密度。隨后采用繩套法活捕各樣地中的高原鼠兔，采用毛細(xì)吸管經(jīng)眼眶靜脈竇采血100～200 μL 于0.5 mL 的離心管中，并將離心管保存在有冰袋的采樣盒中靜置30 min，帶回實(shí)驗(yàn)室后，4 000 r/min，4℃離心15 min，取上清液，-20℃冰箱保存，留測(cè)血清總免疫球蛋白G (Immunoglobin G,IgG) 含量。采血后立即將高原鼠兔脫臼處死，置于冰盒，帶回實(shí)驗(yàn)室稱其體重，并解剖成體高原鼠兔(雄性體重大于130 g，雌性體重大于120 g；周立等，1987)，剝離高原鼠兔的肝臟和腎臟，用干凈濾紙吸去器官上的血液后稱重(精確到0.001 g)，隨后收集結(jié)腸內(nèi)容物，用于測(cè)定腸道寄生物感染狀況。

1.2 血清總IgG含量測(cè)定

采用酶聯(lián)免疫法(Enzyme linked immune sorbentassay,ELISA) 測(cè)定成體高原鼠兔血清總IgG含量。酶聯(lián)免疫試劑盒購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司(貨號(hào)：ml027974)，具體測(cè)定方法如下：取96 孔酶標(biāo)包被板，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔和待測(cè)樣品孔。標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50 μL，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液45 μL，再加高原鼠兔血清5 μL，空白孔加樣品稀釋液50 μL。接著每孔加入酶標(biāo)試劑100 μL(空白孔除外) 后用封板膜封板置 于37℃溫育60 min。然后棄去液體，甩干，使用1 × 洗滌液洗滌5 次，每次靜置30 s 甩干。隨后每孔分別先后加入顯色劑A 和B 各50 μL，37℃避光顯色15 min。最后，每孔加入終止液50 μL，于450 nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光值。依據(jù)測(cè)定的吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算高原鼠兔血清總IgG 含量。

1.3 寄生物感染的測(cè)定

腸道寄生物的分類計(jì)數(shù)采用改良的麥克馬斯特法(Wetzel,1951)。用電子天平稱取0.200 g (精確到0.001 g)糞便樣品，置于研缽，加入2 mL 飽和NaCl 溶液研磨，依次通過40 目銅網(wǎng)篩和100 目尼龍網(wǎng)篩過濾后，將濾液用飽和NaCl 溶液定容至5 mL。采用飽和鹽水漂浮法，10 倍物鏡下統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)板網(wǎng)格內(nèi)各類寄生物卵囊數(shù)(聶緒恒等，2014)，并計(jì)算其感染率和感染強(qiáng)度(Bushet al.,1997)。感染率=樣地取樣個(gè)體感染數(shù)/樣地取樣的總個(gè)體數(shù)，感染強(qiáng)度為每克糞便中的卵囊數(shù)(Oocysts per gram,OPG)，OPG=(寄生物計(jì)數(shù)×5)/(0.15×2×糞便重)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用廣義線性混合模型(Generalized Linear Mixed Models,GLMMs)，以不同退化草地類型和性別作為固定因子，樣地作為隨機(jī)變量，檢驗(yàn)高原鼠兔洞口數(shù)量、腸道寄生物感染率和感染強(qiáng)度、血清總IgG 含量、肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)在各因子及各因子間交互效應(yīng)的顯著性。由于肝臟和腎臟的絕對(duì)重量與體重具有顯著相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)分別為肝臟：r=0.730，P＜0.01；腎臟：r=0.466，P ＜0.001)，所以將肝臟和腎臟的絕對(duì)重量換算為臟器指數(shù)(臟器濕重/體重×100%)以排除體重的效應(yīng)，并對(duì)數(shù)據(jù)經(jīng)Kolmogorov-Smirnov 和Levene 進(jìn)行正態(tài)性和方差齊性檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)肝臟和腎臟指數(shù)不符合正態(tài)分布，故分析前進(jìn)行反正弦轉(zhuǎn)換。由于腸道寄生物感染強(qiáng)度的范圍在0～253 111，所以分析前對(duì)其進(jìn)行l(wèi)n(OPG+1)轉(zhuǎn)換；采用Bonferroni進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)，顯著水平為P＜0.05。所有統(tǒng)計(jì)均在SPSS 21.0 軟件中進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 不同退化草地高原鼠兔洞口數(shù)量

不同退化草地中高原鼠兔的洞口數(shù)量差異顯著(F2,12=17.71,P＜0.001) (圖1)，重度退化草地顯著高于中度和輕度退化草地(P＜0.05)，且中度退化草地顯著高于輕度退化草地 (P＜0.05)(圖1)。

圖1 不同退化草地中高原鼠兔的洞口數(shù)量(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤).圖中不同小寫字母表示差異顯著(P ＜0.05)Fig.1 The number of burrow entrances of plateau pika in lightly(LD),moderaterly(MD)and heavily degraded grassland(HD)(mean±SE).The lowercase indicates significant difference(P ＜0.05)

2.2 不同退化草地高原鼠兔血清總IgG含量

草地退化顯著影響高原鼠兔血清總IgG 含量(F2,138=3.38,P=0.037)(圖2)。重度退化草地中高原鼠兔血清的總IgG 含量顯著高于輕度退化草地(P＜0.05)，而中度與輕度和重度退化草地之間均無顯著差異(P＞0.05) (圖2)。性別(F1,138=0.00,P=0.991) 及性別與草地退化的交互作用(F2,138=1.26,P=0.287) 對(duì)高原鼠兔的血清總IgG 水平無顯著影響。

圖2 不同退化草地中高原鼠兔血清總IgG 水平(平均值± 標(biāo)準(zhǔn)誤).輕度、中度和重度退化草地的雄性樣本量分別為17、25 和23，雌性樣本量分別為26、33 和20.圖中不同小寫字母表示差異顯著(P ＜0.05)Fig.2 Serum total IgG levels of plateau pika in LD,MD and HD(mean±SE). n=17,25 and 23 for males and n=26,33 and 20 for females in LD,MD and HD,respectively.The lowercase indicates significant difference(P ＜0.05).For abbreviations,see Fig.1

2.3 不同退化草地高原鼠兔腸道寄生物感染狀況

高原鼠兔在3類退化類型草地中的球蟲感染率均為100%，草地退化顯著影響高原鼠兔對(duì)絳蟲(F1,8=7.34,P=0.027) 和線蟲(F2,12=6.22,P=0.014)的感染率(圖3A、B、C)。在中度退化草地中，高原鼠兔未感染絳蟲，且對(duì)線蟲的感染率顯著低于輕度退化草地(P＜0.05)；在重度退化草地中，對(duì)絳蟲和線蟲的感染率均顯著低于輕度退化草地(P＜0.05)(圖3B、C)。性別顯著影響高原鼠兔對(duì)絳蟲的感染率(F1,8=5.41,P=0.049)，雄性的感染率顯著低于雌性(P＜0.05)，但是對(duì)線蟲的感染率無顯著影響(F1,12=4.06,P=0.067)。草地退化與性別的交互作用顯著影響高原鼠兔對(duì)絳蟲(F1,8=9.11,P=0.017)和線蟲(F2,12=5.48,P=0.020)的感染率，雌性高原鼠兔在重度退化草地中對(duì)二者的感染率顯著低于輕度退化草地(P＜0.05)；而雄性高原鼠兔在不同退化草地中對(duì)二者的感染率無顯著變化(P＞0.05)。

圖3 不同退化草地中高原鼠兔對(duì)球蟲、絳蟲和線蟲的感染率及感染強(qiáng)度(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤).輕度、中度和重度退化草地的雄性樣本量分別為12、11 和11，雌性樣本量分別為13、19 和10.圖中不同小寫字母表示差異顯著(P ＜0.05).由于所檢測(cè)的高原鼠兔均感染了球蟲，所以未對(duì)球蟲的感染率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.中度退化草地中高原鼠兔未感染絳蟲，所以統(tǒng)計(jì)分析時(shí)刪除了該組Fig.3 Prevalence and intensity of intestinal parasites infection of plateau pika in LD,MD and HD(mean±SE). n=12,11 and 11 for males and n=13,19 and 10 for females in LD,MD and HD,respectively.The lowercase indicates significant difference(P ＜0.05).Because all the plateau pikas were infected with coccidia,the coccidian prevalence was not analyzed.The plateau pikas in MD were not infected with cestode,so the group was excluded during the statistical analyses.For abbreviations,see Fig.1

草地退化顯著影響高原鼠兔對(duì)球蟲(F2,70=17.07,P＜0.001)、絳蟲(F2,42=5.09,P=0.029)和線蟲(F2,70=5.20,P=0.008) 感染強(qiáng)度(圖3D、E、F)。中度退化草地球蟲感染強(qiáng)度顯著低于輕度和重度退化草地(P＜0.001)，而輕度與重度退化草地之間無顯著差異(P＞0.05)(圖3D)；重度退化草地絳蟲感染強(qiáng)度顯著低于輕度退化草地(P＜0.05)(圖3E)；中度和重度退化草地線蟲感染強(qiáng)度均顯著低于輕度退化草地(P＜0.001)，但彼此間無顯著差異(P＞0.05)(圖3F)。性別對(duì)球蟲(F1,70=1.59,P=0.211)、絳蟲(F2,42=2.62,P=0.113) 和線蟲(F1,70=3.16,P=0.080)的感染強(qiáng)度均無顯著影響。草地退化與性別的交互作用對(duì)球蟲感染強(qiáng)度無顯著影響(F2,70=0.69,P=0.505)，但顯著影響絳蟲(F2,42=11.26,P=0.002) 和線蟲(F2,70=5.41,P=0.007) 的感染強(qiáng)度。雌性在重度退化草地中對(duì)二者的感染強(qiáng)度均顯著低于輕度退化草地(P＜0.01)，而雄性對(duì)二者的感染強(qiáng)度在不同退化草地中無顯著變化(P＞0.05)。

2.4 不同退化草地中高原鼠兔肝臟和腎臟指數(shù)

草地退化顯著影響肝臟(F2,176=17.53,P＜0.001；圖4A) 和腎臟(F2,176=5.18,P=0.007;圖4B)指數(shù)。重度退化草地中高原鼠兔的肝臟和腎臟指數(shù)均顯著低于輕度和中度退化草地(P＜0.05)，而二者在輕度與中度退化草地之間無顯著差異(P＞0.05) (圖4)。性別影響肝臟指數(shù)(F1,176=21.68,P＜0.001)，雄性個(gè)體肝臟指數(shù)顯著低于雌性(P＜0.05)。腎臟指數(shù)無性別差異(F1,176=1.59,P=0.209)；退化草地與性別的交互作用對(duì)肝臟(F2,176=2.04,P=0.133) 和腎臟(F2,176=0.61,P=0.543)指數(shù)無顯著影響。

圖4 不同退化草地中高原鼠兔的肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤).輕度、中度和重度退化草地的雄性樣本量分別為22、30和28，雄性樣本量分別為32、41 和29.圖中不同小寫字母表示差異顯著(P ＜0.05)Fig.4 The liver and kidney indices of plateau pika in LD,MD and HD (mean ± SE). n=22,30 and 28 for males and n=32,41 and 29 for females in LD,MD and HD,respectively.The lowercase indicates significant difference(P ＜0.05).For abbreviations,see Fig.1

3 討論

天然免疫功能是機(jī)體抵抗病原體或寄生物感染的第一道屏障，對(duì)動(dòng)物的生存至關(guān)重要(Franket al.,2000;Lochmiller and Deerenberg,2000;Ochsenbein and Zinkernagel,2000;Rickert,2005)。大量的研究中都以血清總IgG水平或白細(xì)胞數(shù)量衡量機(jī)體的天然免疫能力(Greiveset al.,2006;Xuet al.,2012;Forbeset al.,2014,2016)。盡管本研究中僅測(cè)定了血清總IgG水平，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果與寄生物感染率和感染強(qiáng)度的降低相互印證地說明，在高寒草甸生態(tài)系統(tǒng)中，草地退化增強(qiáng)了高原鼠兔的天然免疫功能。

在自然界中，食物和捕食是影響動(dòng)物免疫功能的重要因素(Nohret al.,1985;Lordet al.,1998；徐德立和王德華，2015;Shanget al.,2019)。大量研究表明，食物短缺可抑制動(dòng)物的免疫功能(Nohret al.,1985;Lordet al.,1998；徐德立和王德華，2015)，尤其是食物蛋白質(zhì)對(duì)動(dòng)物免疫功能具有重要影響。Davis 和Lochmiller (1995) 以及Lochmiller 等(1993)發(fā)現(xiàn)，即使中度限制蛋白質(zhì)攝入水平，也會(huì)顯著降低棉鼠(Sigmodon hispid) 的免疫功能。在本研究中，不同退化草地中高原鼠兔天然免疫力的變化，可能與其獲取的食物蛋白質(zhì)密切關(guān)聯(lián)。在青藏高原地區(qū)，Li 等(2019)通過放牧控制實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，高放牧強(qiáng)度可顯著增加豆科植物的相對(duì)生物量。雖然豆科植物對(duì)家畜而言是有毒牧草，但對(duì)高原鼠兔而言，則是富含蛋白質(zhì)的喜食食物(蔣志剛和夏武平，1985；樊乃昌和張道川，1996；劉偉等，2008)。我們的另一研究發(fā)現(xiàn)，在中度和重度退化草地中，高原鼠兔胃內(nèi)容物蛋白質(zhì)含量顯著高于輕度退化草地，且草地退化為高原鼠兔提供了豐富的高蛋白質(zhì)食物資源(未發(fā)表資料)。由此可見，重度退化草地通過提供豐富的高蛋白質(zhì)食物，使其免疫力維持在較高水平。另一方面，高原鼠兔免疫力變化還可能與捕食風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。高原鼠兔具有警戒、觀察和啄食式取食模式等反捕食行為特征(邊疆暉和樊乃昌，1997；邊疆暉等，1999)，而過度放牧通過降低植被高度和蓋度為高原鼠兔提供了開闊視野(施銀柱，1983；邊疆暉等，1994)；反之，未退化或輕度退化的郁閉生境可通過抑制高原鼠兔的反捕食行為而增大其捕食風(fēng)險(xiǎn)，捕食風(fēng)險(xiǎn)的增大可引起個(gè)體的捕食應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致免疫功能降低(Boonstraet al.,1998;Bianet al.,2005;Sheriffet al.,2010,2011;Shanget al.,2019)。因此，草地退化對(duì)高原鼠兔天然免疫力的增強(qiáng)效應(yīng)可能是退化草地中高蛋白質(zhì)食物資源與低捕食風(fēng)險(xiǎn)的耦合效應(yīng)所致。

血清總IgG 水平升高可說明動(dòng)物個(gè)體的身體狀況更加健康，抵抗寄生物感染的能力更強(qiáng)(Forbeset al.,2016)。球蟲是高原鼠兔的主要腸道寄生物(曹伊凡等，2011；邊疆暉等，2011)，高原鼠兔為其直接宿主。本研究發(fā)現(xiàn)，中度退化草地高原鼠兔球蟲感染強(qiáng)度顯著低于輕度退化草地，但在重度退化草地中，沒有發(fā)現(xiàn)顯著變化。球蟲感染強(qiáng)度不僅與免疫力相關(guān)，而且與種群密度正相關(guān)(聶緒恒等，2014)。例如球蟲感染與紅松鼠(Sciurus vulgaris) 種群密度呈顯著正相關(guān)(Bertolinoet al.,2003)。在本研究的重度退化草地中，高原鼠兔洞口密度為751 個(gè)/公頃，是輕度退化草地的5.3 倍，在這種高密度條件下，高原鼠兔球蟲感染強(qiáng)度通過糞便污染食物而加劇，加之高原鼠兔具食軟便習(xí)性(劉全生和王德華，2004)，從而導(dǎo)致重度退化草地中球蟲感染強(qiáng)度增加，而絳蟲和線蟲需中間宿主才能完成其生活史，從蟲卵到終宿主體內(nèi)發(fā)育成成蟲需較長(zhǎng)時(shí)間，因而，其感染與宿主天然免疫力有更直接的關(guān)聯(lián)性。

本研究發(fā)現(xiàn)，高原鼠兔肝臟和腎臟指數(shù)隨草地退化而顯著降低。在自然界中，引起動(dòng)物肝臟和腎臟重量變化的因素眾多，如光周期(張志強(qiáng)等，2007；郭子涵等，2022)、溫度(張志強(qiáng)等，2007)、食物質(zhì)量(Liu and Wang,2007;Zhanget al.,2012) 等。本研究在同一地區(qū)同一時(shí)期進(jìn)行，因此，高原鼠兔肝臟和腎臟指數(shù)的變化可能與食物質(zhì)量有密切關(guān)聯(lián)。對(duì)于植食性小哺乳動(dòng)物，在覓食過程中不可避免地?cái)z入或多或少的植物次生化合物。肝臟和腎臟作為機(jī)體重要的解毒器官，其重量變化能夠直接反映植物次生化合物的毒副作用。何嵐等(2010) 研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼喂高次生化合物含量(6%) 的食物時(shí)，可顯著增加?xùn)|方田鼠(Alexandromys fortis) 肝臟和腎臟指數(shù)，而高蛋白質(zhì)含量食物(20%) 可減弱次生化合物對(duì)肝腎指數(shù)的負(fù)效應(yīng)。在青藏高原地區(qū)，草地退化是通過長(zhǎng)期過度放牧，家畜頻繁地大量采食和踐踏草地而導(dǎo)致，而頻繁采食亦可導(dǎo)致植物的再生。相對(duì)于老的枝葉，再生的嫩枝葉富含較高的蛋白質(zhì)和較低的次生化合物(白玉龍等，1999；李富娟和玉永雄，2006；戴鑫等，2012)，這提示，相較于輕度退化草地，重度退化草地所提供的高蛋白質(zhì)、低次生化合物食物可減輕植物次生化合物對(duì)高原鼠兔肝臟和腎臟的損傷，繼而降低對(duì)高原鼠兔生長(zhǎng)發(fā)育的不利影響，表現(xiàn)為重度退化草地的高原鼠兔肝臟和腎臟指數(shù)顯著低于輕度退化草地。該結(jié)果也進(jìn)一步佐證了重度退化草地高原鼠兔的較高天然免疫力可能與食物質(zhì)量有關(guān)的推論。事實(shí)上，家畜選擇性地采食可改善小哺乳動(dòng)物食物質(zhì)量(高蛋白質(zhì)和低次生化合物) 的取食易化效應(yīng)(feeding facilitation)，在其他生態(tài)系統(tǒng)中已有大量的例證(Kruegeret al.,1986;Arsenault and Owen-Smith,2002;Cheng and Ritchie,2006)。

由此，驗(yàn)證了本文提出的草地退化可增強(qiáng)高原鼠兔的天然免疫功能，緩解植物次生化合物對(duì)高原鼠兔肝臟和腎臟損傷的假設(shè)。

在小哺乳動(dòng)物種群波動(dòng)中，免疫和寄生物是影響種群統(tǒng)計(jì)參數(shù)的重要因子(Boonstraet al.,1998；張志強(qiáng)和王德華，2005;Ksi??eket al.,2014;Shanget al.,2019)。我們前期研究表明，應(yīng)激—免疫—寄生物感染之間可形成惡性循環(huán)，導(dǎo)致種群死亡率增加，繼而導(dǎo)致種群衰減(Yanget al.,2018)，這從另一方面說明，重度退化草地可通過增強(qiáng)高原鼠兔天然免疫力，防止或削弱應(yīng)激—免疫—寄生物感染之間的惡性循環(huán)，繼而導(dǎo)致高原鼠兔種群數(shù)量的增加?；谏鲜鼋Y(jié)果與分析，本研究認(rèn)為，草地退化可通過提高高原鼠兔天然免疫力、降低次生化合物對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育的負(fù)效應(yīng)，繼而在高原鼠兔種群暴發(fā)中起促進(jìn)作用。