馬 琴，馮 娟，田建文，劉 軍，李冬冬，張園園，劉敦華,,*，李江闊

（1.寧夏大學食品與葡萄酒學院，寧夏 銀川 750021；2.寧夏大學農(nóng)學院，寧夏 銀川 750021；3.寧夏回族自治區(qū)科技廳，寧夏 銀川 750001；4.國家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術研究中心（天津），天津市農(nóng)產(chǎn)品采后生理與貯藏保鮮重點實驗室，天津 300384）

火柿（L. Huoshi）是我國主栽柿品種之一，富含多種營養(yǎng)成分，具有降壓、抗脂質(zhì)過氧化、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等保健作用，深受消費者喜愛?；鹗翆俚湫秃粑S變型果實，產(chǎn)量大且收獲時節(jié)集中，在收獲后會發(fā)生明顯的軟化，在其軟化后更容易受到機械損傷并發(fā)生腐爛，這很大程度上限制了柿果的長途運輸及其貨架期，因此探究貯藏技術對火柿采后貯藏過程中軟化及貯藏品質(zhì)的影響尤為重要。

1-甲基環(huán)丙烯（1-methylcyclopropene，1-MCP）是一種乙烯受體抑制劑，可強烈競爭乙烯受體，與其發(fā)生不可逆結合，進而抑制乙烯釋放，達到減緩果蔬后熟衰老進程、延長貯藏保鮮期的目的。氣調(diào)貯藏（modified atmosphere packaging，MA）通過貯藏環(huán)境內(nèi)外氣體交換和產(chǎn)品自身呼吸作用，形成相對高CO、低O濃度的貯藏微環(huán)境，調(diào)控產(chǎn)品采后生理代謝，進而提高保鮮效果。由于1-MCP具有高效、無毒、低殘留的優(yōu)點，且在延緩果蔬后熟衰老、維持品質(zhì)和延長貯藏期方面呈現(xiàn)出顯著效果，因此在采后果蔬貯藏保鮮上具有重要的應用價值。已有研究表明1-MCP處理對桃、梨、蘋果等呼吸躍變型水果具有顯著的保鮮效果；相關研究表明不同濃度1-MCP處理均可保持柿果的感官品質(zhì)、色澤及VC含量，降低乙烯生成速率和丙二醛含量，并有效抑制柿果實軟化；1-MCP和其他處理聯(lián)合使用的效果更為顯著，如對比單一處理，1-MCP聯(lián)合聚氯乙烯保鮮膜處理能更有效抑制柿果硬度的下降、褐變程度的加劇、丙二醛含量的升高；聯(lián)合低溫（1 ℃）處理或氣調(diào)包裝可明顯減輕柿果冷害。

果萼是離體幼柿果實的乙烯生物合成起點和柿果采后蒸騰失水的主要部位，果實失水脅迫誘導萼片中脫落酸（abscisic acid，ABA）的積累并啟動離體幼果軟化生理生化程序，加速柿果軟化，因此柿采后果萼處理對貯藏效果也有一定影響。目前鮮見有關去萼片預處理后再采用1-MCP和MA單獨及聯(lián)合處理火柿在貯藏期內(nèi)軟化及品質(zhì)變化的研究報道。本實驗在冰溫（-0.5±0.3）℃條件下利用1-MCP和MA單獨及聯(lián)合處理保留萼片和去除萼片火柿，從柿果在貯藏過程中環(huán)境中氣體含量、生理指標和營養(yǎng)指標等變化的角度探討1-MCP、MA及協(xié)同處理（1-MCP+MA）對有、無萼片的火柿在貯藏過程中軟化的影響，為采后柿果的貯藏保鮮技術提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

火柿采摘自北京平谷；1-MCP 國家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術研究中心（天津）。所用試劑均為分析純級。

1.2 儀器與設備

Check point便攜式O/CO測定儀 丹麥Dansensor公司；TA.XT Plus質(zhì)構儀 英國SMS公司；TU-1810紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責任公司；2010氣相色譜儀 日本島津公司。

1.3 方法

1.3.1 火柿預處理和實驗分組

火柿于2019年10月采收，采后篩選果實質(zhì)量（（95±5）g）、顏色指數(shù)（12.5±0.5，顏色指數(shù)＝1 000×*/**）相近且無機械損傷的柿果作為實驗用果，并立即運往實驗室。篩選后的火柿先分為兩組，其中一組人工去除萼片，另一組不作處理。再將兩組火柿分別分為對照（CK）、MA、1-MCP、1-MCP+MA組，每組12 箱，每箱20 個火柿。在室溫下1-MCP、1-MCP+MA組用1-MCP（劑量為1.0 μL/L）處理24 h，對照組和MA組不作處理。將所有組放入精準溫控庫（（-0.5±0.3）℃）預冷24 h后，在MA組和1-MCP+MA組箱體上安裝氣調(diào)元件，所有箱蓋扣緊置于精準溫控庫冰溫（（-0.5±0.3）℃）貯藏60 d。每5 d測定保鮮箱內(nèi)CO、O體積分數(shù)，每15 d測定其他相應指標。

1.3.2 硬度測定

每組隨機抽取6 個柿果，使用質(zhì)構儀在赤道中部直接測定果皮硬度，而后在赤道中部去皮測定果肉硬度。質(zhì)構儀參數(shù)設置為探頭直徑5 mm、預壓速率1.00 mm/s、下壓速率5 mm/s、壓后上行速率1.00 mm/s、停留間隔5 s、樣品受壓變形60%、觸發(fā)力5 g。以每次測定最大力值為硬度，測定重復3 次，取平均值。

1.3.3 纖維素酶、多聚半乳糖醛酸酶和-半乳糖苷酶活力測定

纖維素酶（cellulase，CX）、多聚半乳糖醛酸酶（polygalactosidase，PG）的提取參照文獻[20]，采用DNS比色法進行測定，單位為mg/（h·g）。

-半乳糖苷酶（-galactosidase，-Gal）的提取和測定參照文獻[21]，單位為μmol/（30 min·g）。

1.3.4 O、CO體積分數(shù)的測定

每組使用Check point便攜式O/CO測定儀從箱體兩側扎入箱內(nèi)，測定其O、CO體積分數(shù)，測定后使用膠帶封閉針眼，測定重復3 次，取平均值。

1.3.5 呼吸強度和乙烯生成速率的測定

呼吸強度參照文獻[20]采用靜置法測定。乙烯生成速率參考Both等的方法并略作修改。每組隨機選擇5 個柿果裝入1 L的密封容器中，2.5 h后在容器頂部抽取20 mL氣體，采用氣相色譜儀測定乙烯體積分數(shù)。設置氣相色譜儀烘箱、進樣器和檢測器的溫度分別為110、50、150 ℃，氮氣、氫氣和壓縮空氣的流速分別為50、50、400 mL/min。乙烯生成速率單位為μL/（kg·h）。

1.3.6 VC、總酚、總黃酮水平的測定

VC含量測定：每組中隨機選擇6 個柿果取其果肉。將5.0 g果肉勻漿后與45 mL 0.4%（質(zhì)量分數(shù)）草酸溶液混合，過濾后將1 mL濾液和9 mL 2,6-二氯苯酚吲哚酚鈉鹽溶液進行混合，測定520 nm波長處的吸光度，重復測定3 次，取其平均值，代入標準曲線方程計算VC含量?？偡淤|(zhì)量分數(shù)采用福林-酚法進行測定，總黃酮質(zhì)量分數(shù)采用比色法測定。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

本實驗中每個指標測定均重復3 次，結果以平均值±標準差表示。采用Excel 2010軟件處理數(shù)據(jù)，采用SPSS 26.0軟件進行單因素方差分析，通過單因素方差分析中的Kruskal-Wallis 法及鄧肯多重比較檢驗組間差異顯著性，＜0.05表示差異顯著。采用Simca 14.1軟件對火柿于冰溫貯藏期間不同處理方式下的不同品質(zhì)指標數(shù)據(jù)進行主成分分析（principal component analysis，PCA），采用Origin 2020軟件作圖。

2 結果與分析

2.1 不同處理對火柿冰溫貯藏期間硬度的影響

如圖1A、B所示，在冰溫貯藏條件下，火柿果皮硬度隨貯藏時間的延長整體呈下降趨勢，且在貯藏期第15天后對照組硬度基本均小于其他處理組，下降幅度最大。至冰溫貯藏期結束，有萼片和無萼片柿果皮硬度均為1-MCP+MA＞1-MCP＞MA＞對照，其中除有萼片對照組硬度高于無萼片對照組以外，其他無萼片各處理組硬度均高于有萼片處理組。如圖1C、D所示，至冰溫貯藏期結束，有萼片火柿果肉硬度除1-MCP+MA對比初始硬度無明顯變化外，1-MCP、MA和對照組均有所下降，其果肉硬度為1-MCP+MA＞1-MCP＞MA＞對照（圖1C）；無萼片火柿果肉硬度1-MCP處理組對比初始硬度增高14.1%，1-MCP+MA處理組對比初始硬度無明顯變化，其果肉硬度為1-MCP＞1-MCP+MA＞MA＞對照（圖1D），且無萼片柿果實果肉硬度各處理組均顯著大于有萼片柿果實（＜0.05）。硬度是果實軟化的直觀表現(xiàn)，通過其可評估貯藏條件的適宜程度，綜上說明，去除萼片處理對比保留萼片可有效延緩火柿硬度的下降，1-MCP+MA聯(lián)合處理在維持柿果硬度方面效果更佳，進而有效保護柿果組織的完整性。

圖1 冰溫貯藏過程中有萼片和無萼片柿果實硬度的變化Fig. 1 Changes in the firmness of persimmon fruit with and without calyx lobes during freezing point storage

2.2 不同處理對火柿冰溫貯藏期間細胞壁降解相關酶活力的影響

如圖2A～D所示，火柿冰溫貯藏至第45天時，有、無萼片火柿對照組CX、PG活力均高于其他處理組，無萼片各處理組CX、PG活力略低于有萼片組，說明當貯藏45 d時，1-MCP、MA及1-MCP+MA處理均對火柿CX、PG活力起到抑制作用，且結合去萼片處理效果更佳。從貯藏期的第45天至結束，有萼片對照組CX、PG活力急劇下降，貯藏期結束時對比其他處理組最低；而無萼片對照組CX、PG活力緩慢下降，至貯藏期結束時仍高于其他處理組，說明1-MCP、MA及1-MCP+MA在貯藏中后期均能抑制CX、PG活力，且結合去萼處理對CX、PG活力的抑制作用優(yōu)于保留萼片處理，其中尤其以無萼片1-MCP處理組效果最佳。如圖2E、F所示，在冰溫貯藏過程中，至第60天時，1-MCP+MA處理組-Gal活力顯著大于其他各處理組（＜0.05），有萼片MA處理組-Gal活力低于對照組，有萼片處理對比去萼片處理抑制效果顯著，說明有萼片結合MA處理更能抑制-Gal活力。

圖2 冰溫貯藏過程中有萼片和無萼片柿果CX、PG和β-Gal活力的變化Fig. 2 Changes in CX, PG and β-Gal activities of persimmon fruit with and without calyx lobes during freezing point storage

2.3 不同處理對火柿冰溫貯藏期間箱內(nèi)氣體成分組成的影響

如圖3A、B所示，在冰溫條件下，隨著貯藏時間的延長，經(jīng)MA和1-MCP+MA處理的有、無萼片柿果在冰溫貯藏過程中環(huán)境內(nèi)CO體積分數(shù)均呈上升趨勢。貯藏結束時，有萼片MA處理組柿果貯藏環(huán)境內(nèi)CO體積分數(shù)為2.9%，有萼片1-MCP+MA處理組柿果貯藏環(huán)境內(nèi)CO體積分數(shù)為2.3%，整個貯藏期間上升速率為MA＞1-MCP+MA；無萼片MA處理組柿果貯藏環(huán)境內(nèi)CO體積分數(shù)為2.3%，無萼片1-MCP+MA處理組柿果貯藏環(huán)境內(nèi)CO體積分數(shù)為2.4%，整個貯藏期間的上升速率為1-MCP+MA＞MA；其他處理的柿果在冰溫貯藏過程中CO體積分數(shù)無明顯變化。對比有萼片處理結果，無萼片處理箱體內(nèi)的CO體積分數(shù)整體較低，表明萼片的保留增強了柿果的呼吸作用，且MA處理通過箱內(nèi)氣體交換能夠維持高CO、低O平衡，使MA結合保留萼片、冰溫貯藏處理對維持貯藏環(huán)境中一定CO水平效果顯著。

圖3 冰溫貯藏過程中有萼片和無萼片柿果箱內(nèi)CO2、O2體積分數(shù)變化Fig. 3 Changes in CO2 and O2 conconcentration in boxes containing persimmon fruit with and without calyx lobes during freezing point storage

貯藏環(huán)境中的O體積分數(shù)變化趨勢與CO體積分數(shù)相反，如圖3C、D所示，隨著貯藏時間的延長，有萼片火柿的O體積分數(shù)下降速率MA＞1-MCP+MA，至貯藏期結束，MA組O體積分數(shù)顯著低于其他處理組（＜0.05）；去萼片結合MA、1-MCP+MA處理組箱內(nèi)O體積分數(shù)下降速率無明顯差異；有、無萼片1-MCP和對照組均無明顯變化。由此可知，有萼片時，MA處理對于貯藏環(huán)境中O體積分數(shù)的降低最有效果。

2.4 不同處理對火柿冰溫貯藏期間呼吸強度和乙烯生成速率的影響

如圖4A、B所示，經(jīng)不同處理火柿的呼吸強度變化趨勢基本一致，均為前15 d下降，之后上升，至第30天時達到呼吸峰值后再下降，第45天后再次上升。有、無萼片柿果在貯藏第30天時均出現(xiàn)首次呼吸高峰，具有典型的躍變型果實呼吸特征，其中有、無萼片對照組呼吸強度峰值均最高，且有萼片對照組呼吸強度峰值高于無萼片對照組；處理組在首次呼吸高峰時的呼吸強度峰值均維持在較低水平，說明1-MCP、MA、1-MCP+MA在冰溫貯藏前期均可抑制火柿呼吸強度，且1-MCP和1-MCP+MA處理顯著低于對照（＜0.05），抑制呼吸作用效果顯著。至第60天時，有萼片和無萼片火柿呼吸強度均為MA＞1-MCP+MA＞對照＞1-MCP，且有萼片組1-MCP處理組呼吸強度為最低，說明有萼片組1-MCP處理在貯藏后期抑制柿果呼吸強度效果最好。

圖4 冰溫貯藏過程中有萼片和無萼片柿果呼吸強度和乙烯生成速率的變化Fig. 4 Changes in respiration intensity and ethylene production rate of persimmon fruit with and without calyx lobes during freezing point storage

乙烯生成速率與呼吸強度呈正相關，如圖4C、D所示，有、無萼片火柿在第15天時均達到乙烯釋放高峰，其中MA＞1-MCP+MA＞對照＞1-MCP。有萼片各處理組中除1-MCP+MA外，其他處理均出現(xiàn)不同強度的二次乙烯釋放高峰；而無萼片各處理組在貯藏30 d后不再出現(xiàn)乙烯釋放高峰。此外，在第15天火柿達到乙烯釋放高峰時，在有、無萼片的樣品中MA處理組均高于其他處理組，且無萼片MA處理樣品明顯高于有萼片MA處理樣品，推測是因為貯藏環(huán)境內(nèi)高CO體積分數(shù)使得乙烯生成速率短暫升高，萼片可進行呼吸作用，保留萼片結合MA處理使得箱內(nèi)CO體積分數(shù)較高，而高CO體積分數(shù)可抑制乙烯釋放，進而使無萼片MA處理組在達到乙烯釋放高峰時的峰值顯著高于其他處理組（＜0.05）。綜上說明1-MCP結合去萼片、冰溫貯藏可較好地抑制火柿的乙烯生成速率，降低貯藏環(huán)境內(nèi)乙烯生成速率，從而延緩火柿的成熟軟化進程。

2.5 不同處理對火柿冰溫貯藏期間VC、總酚、總黃酮水平的影響

如圖5A、B所示，在冰溫貯藏過程中，至第60天時，有萼片和無萼片處理柿果VC含量均為1-MCP+MA＞1-MCP＞MA＞對照，且1-MCP+MA、1-MCP處理組VC含量均顯著高于對照；但對比初始VC含量，有萼片柿果各處理組略有降低，而無萼片柿果各處理組均有所增加。說明1-MCP、MA、1-MCP+MA處理均可減少火柿VC的損失，其中1-MCP+MA、1-MCP處理效果最佳，結合去萼片處理，能促進火柿VC含量增加，阻止自由基的積累，延緩柿果衰老。如圖5C、D所示，在冰溫貯藏至第60天時，各處理組總酚質(zhì)量分數(shù)均有所降低，但處理組的總酚質(zhì)量分數(shù)均高于對照組，其中去萼片的1-MCP+MA處理組下降幅度最小，顯著高于對照組（＜0.05），說明該處理能在貯藏中后期有效阻止火柿總酚質(zhì)量分數(shù)的降低，控制果肉褐變的發(fā)生，保持火柿營養(yǎng)品質(zhì)。如圖5E、F所示，在冰溫貯藏過程中，至第60天時，柿果總黃酮質(zhì)量分數(shù)均有所下降，但各處理組的總黃酮質(zhì)量分數(shù)均顯著高于對照（＜0.05），其中有萼片柿果1-MCP+MA＞1-MCP＞MA＞對照，無萼片柿果1-MCP＞MA＞1-MCP+MA＞對照，說明1-MCP、MA、1-MCP+MA處理均可減少火柿總黃酮質(zhì)量分數(shù)的降低。綜上，至冰溫貯藏結束，有、無萼片對照組VC、總酚、總黃酮質(zhì)量分數(shù)總為最低，說明1-MCP、MA、1-MCP+MA處理在貯藏中后期均能降低火柿中VC、總酚、總黃酮質(zhì)量分數(shù)的損耗，尤其以1-MCP+MA效果最佳。

圖5 冰溫貯藏過程中有萼片和無萼片柿果VC、總酚和總黃酮水平的變化Fig. 5 Changes in contents of VC, total phenols and total flavonoids in persimmon fruit with and without calyx lobes during freezing point storage

2.6 不同條件處理火柿冰溫貯藏期間品質(zhì)指標的PCA結果

為綜合分析各指標與處理條件之間的關系，引入PCA-X可視化與量化不同指標、處理條件之間的相關性。如圖6A所示，共提取2 個主成分（principal component，PC）（特征值＞1），其中累計方差貢獻為0.589，能反映火柿貯藏期間品質(zhì)變化。為更加直觀表現(xiàn)不同指標在不同PC下的表現(xiàn)以及與不同處理方式之間的相關性繪制Biplot雙標圖，以火柿在冰溫貯藏期間不同處理方式下的不同品質(zhì)指標變化為分析對象，對其進行相關性分析，不同處理方式樣品的位置越接近，表示其具有更相近的貯藏品質(zhì)；不同指標與處理方式的位置越接近，表示其相關性越高。如圖6B所示，保留萼片處理與去萼片之間有較明顯的區(qū)域分布差異，其中尤其以去萼片結合1-MCP+MA、MA處理樣品的位置與有萼片各處理樣品的位置距離最遠，說明去萼片結合1-MCP+MA、MA處理對比對照所引起的貯藏品質(zhì)變化效果明顯。結合各指標在圖中的位置可知，去萼片處理與柿果VC含量、果肉硬度、O體積分數(shù)、CO體積分數(shù)、乙烯生成速率、總黃酮質(zhì)量分數(shù)及CX、PG活力的相關性更高，而保留萼片處理與柿果呼吸強度、果皮硬度、總酚質(zhì)量分數(shù)、-Gal活力的相關性更高。

圖6 不同條件處理火柿冰溫貯藏期間品質(zhì)指標的PCA-X載荷圖（A）及其Biplot雙標圖（B）Fig. 6 Principal component analysis-X loading plots of quality indicators in persimmon fruit under different treatment conditions during freezing point storage (A) and their corresponding biplot plots (B)

3 討 論

柿果實采后軟化是一個復雜有序的過程，包括營養(yǎng)成分含量的變化、細胞壁降解相關酶活力的上升、呼吸作用的增強、乙烯釋放的急劇增加等，這些因素相互影響。果萼是柿果實的氣體交換器官，同時也是環(huán)境脅迫的感知器官，比果實的其他部位對脅迫因素更加敏感。1-MCP和MA處理已經(jīng)成為延長果蔬保鮮期及提高貯藏品質(zhì)的有效措施，但去除萼片結合1-MCP或MA處理對火柿的軟化及貯藏品質(zhì)的影響尚不明確。在本研究中，綜合實驗結果發(fā)現(xiàn)，去除萼片結合1-MCP、1-MCP+MA處理火柿相對于保留萼片的火柿，延緩軟化和提高貯藏品質(zhì)效果更好。呼吸強度往往與貯藏環(huán)境內(nèi)O、CO體積分數(shù)、乙烯釋放量密切相關，是衡量果實生理代謝強弱的重要指標。乙烯是調(diào)控果實成熟、衰老的植物激素，通過與質(zhì)膜上的受體結合啟動下游信號傳導，引起一系列生理生化反應，如提高果實呼吸強度、促進果實內(nèi)容物質(zhì)分解或轉化、加劇果實軟化等。在本研究中，MA結合冰溫貯藏能維持火柿貯藏環(huán)境一定的CO體積分數(shù)，并降低O體積分數(shù)，建立平衡條件下的適宜氣體組成，抑制柿果呼吸作用，且有萼片處理效果優(yōu)于去萼片處理（圖3），可能是因為去除萼片阻斷了火柿通過萼片呼吸作用產(chǎn)生CO的途徑。相同貯藏時間下，有、無萼片的1-MCP+MA處理組貯藏環(huán)境中體積分數(shù)無明顯差異；相同貯藏時間有萼片1-MCP+MA組貯藏環(huán)境中CO體積分數(shù)明顯低于有萼片MA組，去萼片1- MCP+MA組貯藏環(huán)境中CO體積分數(shù)總體上低于去萼片MA組（圖3A、B），而1-MCP結合冰溫貯藏可顯著降低采后火柿的呼吸強度和乙烯生成速率（＜0.05）（圖4），說明1-MCP和去萼片處理同樣具有抑制柿果呼吸作用、降低乙烯生成速率的效果，主要是因為1-MCP在果實貯藏成熟過程中通過抑制乙烯受體的感知來阻礙其與受體的正常結合，并強烈競爭乙烯受體，通過金屬原子與乙烯受體緊密結合，使受體保持鈍化狀態(tài)，抑制乙烯釋放，且本實驗均在冰溫條件下進行，冰溫貯藏措施通過減緩柿果代謝活性，對乙烯釋放同樣起到了抑制作用。此外，本實驗發(fā)現(xiàn)有、無萼片火柿在第15天時均達到乙烯釋放高峰（圖4C、D），出現(xiàn)在首次呼吸強度高峰（貯藏30 d）之前，推測是因為貯藏環(huán)境中高CO體積分數(shù)使乙烯生成速率暫時升高。不同果實的呼吸強度高峰與乙烯釋放高峰出現(xiàn)時間的先后次序不同，在本實驗中，火柿的乙烯釋放高峰先于呼吸強度高峰，且通過對比發(fā)現(xiàn)，不同處理方式僅影響柿果呼吸強度與乙烯生成速率，并不影響呼吸強度高峰與乙烯釋放高峰的出現(xiàn)時間。有萼片各處理組中除1-MCP+MA外，其他處理均出現(xiàn)不同程度的二次乙烯釋放高峰（圖4C），而去萼片處理在30 d后不再出現(xiàn)乙烯釋放高峰（圖4D），可能是因為采后柿果中乙烯的生物合成最初發(fā)生在果萼中，而去萼片處理使柿果失去了萼片參與的呼吸作用，并且無法將萼片中產(chǎn)生的乙烯擴散到其他組織并產(chǎn)生二次乙烯釋放高峰。

果實呼吸強度和乙烯生成與VC、總酚、總黃酮的合成和降解密切相關。采后生理代謝受多種因素影響，且在貯藏期間個體差異較大，因此本實驗火柿中的VC、總酚、總黃酮水平變化有一定的波動性。但仍可看出1-MCP、MA、1-MCP+MA結合冰溫處理均有助于減少火柿在貯藏期間VC、總酚、總黃酮的損失，尤其在貯藏后期，1-MCP+MA處理總體上效果最為顯著（＜0.05），且去萼片處理效果整體上優(yōu)于保留萼片。

柿采后果實軟化是細胞壁結構、組分的改變以及內(nèi)部多糖降解的結果，其中細胞壁降解酶（CX、PG、果膠甲酯酶和-Gal）的作用是導致果實軟化的主要原因。一般細胞壁降解相關酶的活力越高，表明果實硬度越低，軟化程度越高，越不利于貯藏。在經(jīng)過1-MCP、MA、1-MCP+MA處理后，各處理組火柿硬度均高于對照組（圖1），這與在梨、蘋果、桃、櫻桃等果實得出的結論一致，其中尤其以1-MCP、1-MCP+MA結合去萼片處理效果顯著。此外，本實驗發(fā)現(xiàn)1-MCP處理組果肉硬度對比初始硬度明顯增高，出現(xiàn)非正常硬化，推測是否由于去除萼片而導致缺氧引起，其生理機制有待進一步研究。對比CX、PG和-Gal活力實驗結果（圖2），發(fā)現(xiàn)隨著CX、PG活力的降低，火柿果皮、果肉硬度下降幅度變小，CX、PG活力和柿果硬度呈負相關。此外，雖然至第60天時對照組CX、PG活力對比其他處理最低，但硬度依舊最低，柿果軟化最嚴重。本實驗證明1-MCP處理火柿可通過抑制CX、PG活力來維持柿子的硬度，且去萼片處理對抑制CX、PG活力效果優(yōu)于保留萼片，推測是由于去萼片處理降低火柿總體呼吸強度，抑制其內(nèi)部代謝。有研究報道采后柿果會因為自身呼吸作用而失水，發(fā)生水分脅迫，進而誘導萼片中基因的表達并誘導產(chǎn)生ABA，而ABA誘導乙烯生物合成酶基因和乙烯生物合成氧化酶基因表達，促進乙烯的產(chǎn)生并擴散至果肉組織中，作為次級信號激活乙烯自我催化，導致乙烯釋放激增，因此去萼片處理對CX、PG活力的抑制起到了協(xié)同作用。-Gal主要作用于水果軟化早期的細胞壁多糖，使細胞壁發(fā)生膨脹進而加速果實軟化。在本實驗貯藏結束時，MA處理組-Gal活力均低于其他處理組（圖2E、F），說明MA處理可抑制-Gal活力，而1-MCP處理對-Gal活力無明顯抑制作用，推測與本實驗1-MCP劑量不足以明顯影響-Gal活力有關，有待進一步研究。有萼片火柿中PG、-Gal活力整體上大于去萼片火柿，可能是因為去萼片處理影響細胞中多糖的合成，而PG參與降解細胞多糖中的多聚半乳糖醛酸，-Gal參與降解多聚醛酸，萼片的去除使PG、-Gal部分代謝通路受到影響，進而導致酶活力降低。

4 結 論

本實驗研究1-MCP、MA、1-MCP+MA處理對有、無萼片火柿采后冰溫貯藏期間軟化及相關生理指標的影響。結果發(fā)現(xiàn)，1-MCP、MA及1-MCP+MA均可不同程度降低火柿軟化速度，而去除萼片預處理有效延緩了火柿二次乙烯生成高峰的出現(xiàn)，且聯(lián)合1-MCP顯著延緩果肉硬度下降，抑制CX、PG活力，降低呼吸強度、乙烯生成速率以及總黃酮含量的下降，從而延緩了火柿軟化進程，提高了貯藏品質(zhì)。