外源脫落酸對(duì)發(fā)芽玉米籽粒中類胡蘿卜素合成的影響

徐 昊，何偉偉，李大婧，包怡紅,*，羅 浩，王凡予，張鐘元

（1.東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，江蘇 南京 210014）

類胡蘿卜素是一類廣泛存在于高等植物中的烯萜類化合物，包括胡蘿卜素和葉黃素類。在植物的光合作用中，類胡蘿卜素能夠吸收過量的光能，保護(hù)光合作用的細(xì)胞器。在人體內(nèi)，類胡蘿卜素具有很強(qiáng)的抗氧化活性，能保護(hù)細(xì)胞膜和脂蛋白免受氧破壞，延緩細(xì)胞衰老和預(yù)防癌癥。但人和動(dòng)物不能在體內(nèi)合成類胡蘿卜素，只能從飲食中攝取。

玉米籽粒中營(yíng)養(yǎng)全面，含有碳水化合物、蛋白質(zhì)、類胡蘿卜素外，還含有膳食纖維、維生素和微量元素等營(yíng)養(yǎng)成分。玉米中類胡蘿卜素含量、總酚含量和總花青素含量在種子中較低，但在幼苗中很高。而玉米籽粒在萌發(fā)的過程中，類胡蘿卜素、氨基酸、維生素和鈣含量得到了顯著提高，并降低了制品黏度，改善口感形成特殊的風(fēng)味。因此，玉米籽粒通過萌發(fā)處理后可成為功能性食品。已有研究表明，脫落酸（abscisic acid，ABA）處理后可以提高番茄中β-胡蘿卜素等類胡蘿卜素含量，增強(qiáng)玉米中抗氧化酶活性，然而鮮有關(guān)于ABA調(diào)控發(fā)芽玉米富集類胡蘿卜素的研究。

ABA是一種以異戊二烯為基本結(jié)構(gòu)倍半萜類的植物生長(zhǎng)激素，也是類胡蘿卜素代謝途徑中的下游產(chǎn)物。ABA具有抑制生長(zhǎng)和促進(jìn)休眠等作用，除此之外ABA可以有效啟動(dòng)植物體內(nèi)抗逆基因表達(dá)，有效激活植物體內(nèi)抗逆免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)植物綜合抗性。有研究表明ABA可以通過維持細(xì)胞膜穩(wěn)定性等多個(gè)方面增加植物的抗氧化能力。鎢酸鈉（NaWoO）可以抑制內(nèi)源ABA合成并阻斷其信號(hào)傳遞，并抑制幼苗抗氧化能力。

因此，本實(shí)驗(yàn)以不同質(zhì)量濃度ABA浸泡處理玉米籽粒，研究ABA浸泡處理對(duì)發(fā)芽玉米籽粒生長(zhǎng)、抗氧化及類胡蘿卜素含量的影響，旨在為開發(fā)一種快速有效富含類胡蘿卜素的發(fā)芽玉米功能食品提供新途徑。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試玉米‘蘇玉29’，2020年產(chǎn)，購于江蘇瑞華農(nóng)業(yè)科技有限公司。

ABA、NaWoO上海阿拉丁有限公司；類胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品、2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS）、Trolox 美國(guó)Sigma公司；甲基叔丁基醚（methyl tert-butyl ether，MTBE）、甲醇（色譜純）美國(guó)Tedia公司；酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒 南京建成生物研究所；多糖多酚植物總RNA提取試劑盒 北京天根生化科技有限公司；PrimeScriptMaster Mix試劑盒 北京寶日醫(yī)生物技術(shù)有限公司；Powerup SYBR Green Master Mix試劑盒 美國(guó)Thermo Fisher公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

BS224S電子分析天平 北京賽多利斯科學(xué)儀器公司；LBI-150生化培養(yǎng)箱 上海龍躍儀器設(shè)備有限公司；FD-1A-50真空冷凍干燥機(jī) 北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；1260 Infinity II高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）儀 美國(guó)Agilent公司；Q3熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）儀 美國(guó)Thermo Fisher公司；A11分析研磨機(jī)德國(guó)IKA公司；5424R臺(tái)式高速離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司。

1.3 方法

1.3.1 發(fā)芽玉米籽粒的培養(yǎng)

玉米籽粒用蒸餾水清洗去除雜質(zhì)，置于0.5%次氯酸鈉溶液中浸泡25 min消毒處理，用蒸餾水清洗數(shù)次至pH值為中性。室溫25 ℃用ABA溶液（2.5、5、7.5 mg/L和10 mg/L）和8 g/L NaWoO溶液對(duì)玉米進(jìn)行24 h浸泡處理。將浸泡好的玉米用蒸餾水清洗后轉(zhuǎn)入墊有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，以蒸餾水作為培養(yǎng)液，在25 ℃避光條件下恒溫培養(yǎng)。發(fā)芽過程中每6 h噴灑一次蒸餾水，以保持玉米表面濕潤(rùn)，發(fā)芽72 h后，收獲發(fā)芽玉米，立即用液氮速凍后置于-80 ℃冰箱中保存待用。

1.3.2 理化指標(biāo)測(cè)定

發(fā)芽率根據(jù)國(guó)際種子試驗(yàn)協(xié)會(huì)的公式確定；芽長(zhǎng)用游標(biāo)卡尺測(cè)定。

可溶性蛋白質(zhì)含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測(cè)定；游離氨基酸含量采用茚三酮顯色法測(cè)定；脯氨酸含量采用酸性茚三酮顯色法測(cè)定。內(nèi)源激素ABA含量采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒測(cè)定。

1.3.3 VC和總酚含量的測(cè)定

VC測(cè)定：稱取2.5 g玉米粉末，加入少量4 ℃預(yù)冷的0.25%偏磷酸溶液浸提，冰浴條件下研磨后，用0.25%偏磷酸溶液定容至25 mL，4 ℃、10 000 r/min離心10 min，上清液經(jīng)0.45 μm水系膜過濾后待HPLC測(cè)定。

HPLC條件：色譜柱為ZORBAX 300SB-C（4.6 mm×250 mm，5 μm），柱溫25 ℃；流速0.8 mL/min；進(jìn)樣量20 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)240 nm；流動(dòng)相0.03 mol/L正磷酸溶液。

總酚測(cè)定：稱取4.0 g玉米粉末，用70%乙醇溶液定容至50 mL。取上述溶液1.0 mL，加入5 mL蒸餾水、1.0 mL福林試劑和3.0 mL 7.5% NaCO溶液。在765 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度?？偡雍恳詻]食子酸毫克當(dāng)量（mg/g）表示。

1.3.4 類胡蘿卜素的提取與測(cè)定

將收集冷藏保存的新鮮玉米籽粒真空冷凍干燥后，粉碎過40 目篩得到玉米粉。稱取3.0 g玉米粉置于磨口錐形瓶中，加入30 mL正己烷-乙醇-丙酮-甲苯（10∶6∶7∶7，V/V）混合萃取液，靜置3～4 h，加入2 mL 40% KOH-甲醇溶液，搖勻后置于暗處25 ℃皂化16 h，將皂化液轉(zhuǎn)入分液漏斗，加入30 mL正己烷，振蕩搖勻，再加入38 mL 10%硫酸鈉溶液，收集上層溶液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，氮?dú)獯蹈?，? mL甲醇溶解，過0.45 μm有機(jī)濾膜后，待HPLC分析。

HPLC條件：色譜柱為YMC-C色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），柱溫25 ℃；流速0.6 mL/min；進(jìn)樣量20 μL；檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)450 nm；流動(dòng)相：A為水-MTBE-甲醇（5∶25∶75，V/V）；B為水-MTBE-甲醇（5∶85∶10，V/V）。梯度洗脫：0～4.5 min，95%～80% A、5%～20% B；4.5～12.5 min，80%～50% A、20%～50% B；12.5～18 min，50%～25% A、50%～75% B；18～24 min，25%～5% A、75%～95% B；24～30 min，5% A、95% B。

1.3.5 基因表達(dá)量分析

按照多糖多酚植物總RNA提取試劑盒說明書操作步驟提取發(fā)芽玉米總RNA，按照PrimeScriptMaster Mix試劑盒合成cDNA。根據(jù)NCBI上公布的各個(gè)基因序列設(shè)計(jì)引物（表1），引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。按Powerup SYBR Green Master Mix試劑盒配制real-time PCR體系。以玉米中的肌動(dòng)蛋白基因（ACTIN）作為內(nèi)參基因，用2法計(jì)算各個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)量。

表1 real-time PCR所用引物序列Table 1 Primer sequences used for quantitative real-time PCR analysis

1.3.6 抗氧化酶活性的測(cè)定

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的活性通過其抑制50%硝基藍(lán)四唑的光還原能力確定。在25 ℃下反應(yīng)30 min后，在560 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。對(duì)照組同時(shí)進(jìn)行，不提取酶。比活力以每毫克蛋白質(zhì)的活性單位表示。蛋白含量參照Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定。

過氧化物酶（peroxidase，POD）活性采用愈創(chuàng)木酚氧化法測(cè)定。在470 nm波長(zhǎng)下每隔1 min記錄一次吸光度的變化。以每分鐘吸光度變化0.01表示1 個(gè)過氧化物酶活性單位（U），最終酶活性以U/mg表示。

1.3.7 抗氧化能力的測(cè)定

采用Müller等的方法評(píng)價(jià)其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基、ABTS陽離子自由基的活性，分別在517 nm和405 nm波長(zhǎng)處測(cè)定反應(yīng)溶液的吸光度。結(jié)果以Trolox當(dāng)量（mg/g和mmol/g）表示。鐵離子抗氧化能力（Ferric ion reducing antioxidant power，F(xiàn)RAP）在593 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，用硫酸亞鐵當(dāng)量表示。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米芽長(zhǎng)和發(fā)芽率的影響

圖1 ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米發(fā)芽率和芽長(zhǎng)的影響Fig. 1 Effect of ABA treatment on the germination rate and sprout length of germinated maize

如圖1所示，玉米籽粒的發(fā)芽率和芽長(zhǎng)隨著ABA質(zhì)量濃度的增加呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，當(dāng)ABA質(zhì)量濃度為2.5 mg/L時(shí)，發(fā)芽率和芽長(zhǎng)分別較對(duì)照組降低3.9%和4.8%。ABA質(zhì)量濃度增加則會(huì)抑制玉米籽粒的生長(zhǎng)。而NaWoO處理后發(fā)芽率和芽長(zhǎng)分別較對(duì)照組降低2.3%和3.8%。ABA有“休眠素”之稱，會(huì)促進(jìn)種子休眠和抑制幼苗生長(zhǎng)。Wang Zhiying等在研究中發(fā)現(xiàn)ABA會(huì)抑制甘藍(lán)芽的長(zhǎng)度。這可能是因?yàn)樘砑油庠碅BA后玉米籽粒中ABA激素含量增高，而種子內(nèi)ABA含量增加可能會(huì)導(dǎo)致種子生長(zhǎng)趨勢(shì)緩慢。

2.2 ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米可溶性蛋白、游離氨基酸、脯氨酸和內(nèi)源ABA含量的影響

圖2 ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米可溶性蛋白、游離氨基酸、脯氨酸和內(nèi)源ABA含量的影響Fig. 2 Effect of ABA treatment on the contents of soluble protein, free amino acids, proline and endogenous ABA in germinated maize

如圖2所示，隨ABA質(zhì)量濃度增加，發(fā)芽玉米籽粒中可溶性蛋白、游離氨基酸和脯氨酸的含量呈逐漸增加的趨勢(shì)，而NaWoO處理均低于對(duì)照組。在10 mg/L ABA處理組中，玉米籽粒中可溶性蛋白、游離氨基酸和脯氨酸含量分別較對(duì)照組提高9.9%、45.3%和47.0%。內(nèi)源ABA含量隨外源ABA添加呈大幅度升高的趨勢(shì)。在7.5 mg/L ABA處理下內(nèi)源ABA含量達(dá)到最高為47.16 ng/g，較對(duì)照組提高74.5%，當(dāng)ABA質(zhì)量濃度為10 mg/L時(shí)，內(nèi)源ABA含量較7.5 mg/L ABA處理組略有下降（P＞0.05），但NaWoO較對(duì)照組下降43.6%。這說明外源ABA可以正調(diào)節(jié)內(nèi)源ABA含量。脯氨酸是重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，可以起到膜穩(wěn)定劑的作用?？扇苄缘鞍卓商岣呒?xì)胞的保水能力，從而保證細(xì)胞膜的穩(wěn)定性。王相敏等研究發(fā)現(xiàn)外源ABA可以提高玉米幼苗中可溶性蛋白和脯氨酸的含量?？扇苄缘鞍住⒂坞x氨基酸和脯氨酸含量的增加可以改善玉米籽粒的生理狀態(tài)，維持幼苗的正常生長(zhǎng)。

2.3 ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米VC和總酚含量的影響

圖3 ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米中VC和總酚含量的影響Fig. 3 Effect of ABA treatment on the contents of vitamin C and total phenols in germinated maize

如圖3所示，隨著ABA質(zhì)量濃度的增加發(fā)芽玉米籽粒中VC和總酚的含量呈先增加后降低趨勢(shì)?？偡雍吭? mg/L ABA處理下達(dá)到3.83 mg/g，較對(duì)照組提高51.4%，張一冉等發(fā)現(xiàn)ABA可以促進(jìn)李果實(shí)中總酚含量的富集，其原因可能是ABA延緩果實(shí)多酚氧化酶的上升，并避免了多酚氧化酶和總酚的接觸。VC含量在7.5 mg/L ABA處理下達(dá)到最高，較對(duì)照組提高46.2%，可能是因?yàn)橥庠碅BA處理通過影響AsA合成相關(guān)基因的表達(dá)從而促進(jìn)VC含量的增加。而NaWoO處理后發(fā)芽玉米籽粒中總酚和VC含量較對(duì)照組有所降低，其原因可能是NaWoO間接抑制了ABA的合成，從而導(dǎo)致發(fā)芽玉米籽粒中VC和總酚含量有所降低。

2.4 ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米富集類胡蘿卜素含量的影響

表2 不同質(zhì)量濃度ABA處理下發(fā)芽玉米中類胡蘿卜素含量Table 2 Carotenoid contents in germinated maize treated with different concentrations of ABA μg/g

本研究在發(fā)芽玉米籽粒中檢測(cè)到6 種類胡蘿卜素，包括葉黃素、玉米黃質(zhì)、α-隱黃質(zhì)、β-隱黃質(zhì)、α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素。如表2所示，玉米籽粒中主要的類胡蘿卜素為葉黃素和玉米黃質(zhì)，其他物質(zhì)含量相對(duì)較低。經(jīng)過ABA處理后，發(fā)芽玉米籽粒6 種類胡蘿卜素含量隨ABA質(zhì)量濃度增加呈現(xiàn)先升高而后降低的趨勢(shì)。經(jīng)過5 mg/L ABA處理后，6 種類胡蘿卜素含量均達(dá)到最大值，葉黃素、玉米黃質(zhì)、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和β-隱黃質(zhì)含量較對(duì)照組分別提高27.6%、20.1%、52.4%、71.7%和12.5%。而NaWoO處理后，葉黃素、玉米黃質(zhì)、α-隱黃質(zhì)和α-胡蘿卜素分別較對(duì)照組下降了10.6%、7.2%、6.6%和19%，β-隱黃質(zhì)和β-胡蘿卜素較對(duì)照組差異不明顯。Barickman等發(fā)現(xiàn)外源ABA可以提高番茄中類胡蘿卜素含量，有效地保護(hù)葉黃素循環(huán)，并推測(cè)ABA可能通過增加PSY等關(guān)鍵酶的活性間接調(diào)控類胡蘿卜素途徑。

2.5 ABA處理對(duì)類胡蘿卜素合成酶基因表達(dá)量的影響

利用real-time PCR檢測(cè)ABA處理后類胡蘿卜素代謝相關(guān)基因表達(dá)的變化。如圖4所示，隨ABA質(zhì)量濃度的增加，基因表達(dá)呈先上升后下降的趨勢(shì)。在5 mg/L ABA處理下，PSY、PDS、ZDS、LCYB、LCYE、BCH1和CYP97C的轉(zhuǎn)錄表達(dá)量最高，分別是對(duì)照組的1.95、2.02、1.70、1.65、1.96、1.71 倍和2.37 倍；NCED的轉(zhuǎn)錄表達(dá)在7.5 mg/L ABA處理下達(dá)到最高為1.65 倍。而NaWoO處理后關(guān)鍵酶基因表達(dá)量下調(diào)，其中NCED基因表達(dá)量下降最多。

圖4 ABA處理對(duì)類胡蘿卜素關(guān)鍵合成酶基因表達(dá)量的影響Fig. 4 Effect of ABA treatment on the expression of key genes associated with carotenoid synthase

在類胡蘿卜素途徑中，PSY主要決定反應(yīng)速率和控制代謝通量。在擬南芥幼苗中，ABA可以正調(diào)控PSY基因表達(dá)從而導(dǎo)致類胡蘿卜素含量增加。Wu Qiong等發(fā)現(xiàn)ABA可以誘導(dǎo)番茄果實(shí)中PDS和ZDS基因表達(dá)上調(diào)，使類胡蘿卜素含量增加。而內(nèi)源ABA可以通過調(diào)節(jié)基因表達(dá)刺激類胡蘿卜素的合成。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)ABA可以誘導(dǎo)PSY、PDS和ZDS基因表達(dá)量上調(diào)，這可能是促進(jìn)類胡蘿卜素合成的原因。LCYB和LCYE可以催化番茄紅素產(chǎn)生α-胡蘿卜素或β-胡蘿卜素，BCH1可將β-胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為β-隱黃質(zhì)，BCH1和CYP97C可將α-胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為葉黃素。因此，α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和葉黃素含量的增加，可能與LCYB和LCYE基因表達(dá)上調(diào)有關(guān)；而β-隱黃質(zhì)和葉黃素含量增加，可能是BCH1和CYP97C基因的上調(diào)原因。高等植物中ABA生物合成的關(guān)鍵酶是NCED。NCED基因過量表達(dá)可以促進(jìn)ABA的合成。而NaWoO處理抑制類胡蘿卜素含量的富集，可能是NaWoO抑制了內(nèi)源ABA的合成。

2.6 ABA處理對(duì)抗氧化酶活性的影響

ABA處理后顯著提高了發(fā)芽玉米籽粒中抗氧化酶活性（圖5）。5 mg/L ABA處理后SOD（48.36 U/mg）和POD（24.55 U/mg）較對(duì)照組分別提高40.0%和38.6%?？寡趸赶到y(tǒng)中的SOD、POD等抗氧化酶協(xié)同清除植物體內(nèi)過量的活性氧，維持生理生化平衡。王相敏等發(fā)現(xiàn)添加外源ABA可以提高玉米在干旱環(huán)境中SOD和POD活性。這可能是因?yàn)锳BA可以幫助清除植物體內(nèi)的氧自由基，保護(hù)細(xì)胞盡量不受傷害，增強(qiáng)植物幼苗的抗氧化酶活性。而NaWoO抑制內(nèi)源ABA的合成，可能是NaWoO處理后抗氧化酶活性降低的原因。

圖5 不同質(zhì)量濃度ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米中抗氧化酶活性的影響Fig. 5 Effect of different concentrations of ABA treatment on the antioxidant enzyme activity in germinated maize

2.7 ABA處理對(duì)抗氧化能力的影響

圖6 不同質(zhì)量濃度ABA處理對(duì)發(fā)芽玉米中抗氧化能力的影響Fig. 6 Effect of different concentrations of ABA treatment on the antioxidant capacity of germinated maize

如圖6所示，隨著ABA質(zhì)量濃度的升高，發(fā)芽玉米籽粒中總抗氧化能力呈先升高而后降低的趨勢(shì)。5 mg/L ABA處理后DPPH自由基清除能力（27.42 mg/g）、ABTS陽離子自由基清除能力（1.66 mmol/g）和FRAP（0.48 mmol/g）較對(duì)照組分別提高21.2%、12.2%和45.5%。DPPH和ABTS是基于單電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)機(jī)制的抗氧化評(píng)價(jià)方法，能夠反映體外清除自由基的能力。FRAP是通過氧化還原能力反映物質(zhì)總抗氧化的活性。徐穎等在研究蘋果時(shí)發(fā)現(xiàn)，總酚與抗氧化之間存在顯著正相關(guān)性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與之相符合。

2.8 ABA處理下類胡蘿卜素含量與總酚、VC、抗氧化酶活性和抗氧化能力的相關(guān)性分析

圖7 ABA處理下類胡蘿卜素含量與總酚、VC、抗氧化酶活性和抗氧化能力的相關(guān)性分析Table 7 Correlation analysis between carotenoid content and total phenols, VC, antioxidant enzyme activity and antioxidant capacity in germinated maize with ABA treatment

如圖7所示，發(fā)芽玉米中抗氧化酶活性和抗氧化能力與總酚含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與VC含量相關(guān)性較弱。Maisuthisakul等認(rèn)為植物體內(nèi)的抗氧化活性主要由酚類物質(zhì)提供，酚類物質(zhì)與抗氧化活性直接相關(guān)。同時(shí)葉黃素、α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素與抗氧化酶活性、抗氧化能力和總酚呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），玉米黃質(zhì)和β-隱黃質(zhì)與抗氧化酶活性、抗氧化能力和總酚呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）。綜上，玉米籽粒中抗氧化能力和抗氧化酶活性的增強(qiáng)可能與總酚、葉黃素、α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素含量增加有關(guān)。

3 結(jié) 論

探究ABA對(duì)發(fā)芽玉米籽粒生長(zhǎng)和類胡蘿卜素含量的影響。結(jié)果表明，ABA會(huì)抑制發(fā)芽玉米籽粒的發(fā)芽率和芽長(zhǎng)。隨著ABA質(zhì)量濃度升高，發(fā)芽玉米籽粒中可溶性蛋白、游離氨基酸、脯氨酸和內(nèi)源激素ABA含量逐漸增加。ABA可以有效提高VC和總酚含量，但當(dāng)ABA質(zhì)量濃度過高時(shí)，則會(huì)出現(xiàn)降低的現(xiàn)象。5 mg/L ABA是發(fā)芽玉米籽粒富集類胡蘿卜素的最佳條件，這可能與ABA可以正調(diào)節(jié)合成類胡蘿卜素相關(guān)基因有關(guān)。而NaWoO抑制類胡蘿卜素含量的累積，這可能與NaWoO間接抑制內(nèi)源激素ABA合成有關(guān)。5 mg/L ABA處理后，SOD、POD抗氧化酶活性和DPPH、ABTS、FRAP抗氧化能力達(dá)到最大值，并發(fā)現(xiàn)總酚、葉黃素、α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素含量與抗氧化能力和抗氧化酶活性呈顯著相關(guān)性。因此，5 mg/L ABA處理發(fā)芽玉米籽?？勺鳛樘岣甙l(fā)芽玉米類胡蘿卜素含量的一種方法，并為開發(fā)功能性發(fā)芽玉米提供理論參考。