中空普魯士藍(lán)納米酶通過(guò)調(diào)控巨噬細(xì)胞極化治療牙周感染的研究

金 晗 達(dá)俊龍 李 瑩 張 斌

牙周炎、齲病、智齒冠周炎等引起的牙源性感染是口腔頜面部感染的主要來(lái)源。由于口腔內(nèi)的溫度、濕度適宜于細(xì)菌的生長(zhǎng)與繁殖，血液及淋巴循環(huán)豐富，并且存在較多潛在性筋膜間隙，因此當(dāng)機(jī)體抵抗力較低、局部處理不當(dāng)，或抗菌藥物使用不力或無(wú)效時(shí)，感染容易向周?chē)M織擴(kuò)散，導(dǎo)致蜂窩織炎、骨髓炎，嚴(yán)重者還可引起海綿竇血栓性靜脈炎、中毒性休克等危及生命的并發(fā)癥[1]?？股厥茄涝葱愿腥局饕妮o助治療方法，然而由于抗生素濫用造成的細(xì)菌耐藥問(wèn)題，常常導(dǎo)致療效不佳[2]，因此，探索新型高效的抗感染策略已成為目前亟需解決的臨床問(wèn)題。

巨噬細(xì)胞作為機(jī)體固有免疫主力軍在抵御病原體、對(duì)抗感染的過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[3]。巨噬細(xì)胞具有高度的異質(zhì)性，可使其在不同微環(huán)境下能夠被激活到具有特殊性質(zhì)的不同功能狀態(tài)。其中一種表型是經(jīng)典活化的巨噬細(xì)胞（M1型），其主要功能是在病原菌侵入早期誘發(fā)炎癥反應(yīng)，釋放大量的炎癥相關(guān)因子，殺滅病原微生物。然而過(guò)多的M1型巨噬細(xì)胞又會(huì)對(duì)機(jī)體造成損傷，從而加重炎癥反應(yīng)[4]。另一表型為替代活化巨噬細(xì)胞（M2型），通過(guò)產(chǎn)生抗炎因子促進(jìn)組織修復(fù)和傷口愈合[5]。越來(lái)越多的研究表明，活性氧（reactive oxygen specie，ROS）對(duì)M1型巨噬細(xì)胞形成至關(guān)重要[6]，因此，清除ROS，重塑具有M2表型極化的微環(huán)境，對(duì)減少炎癥和促進(jìn)組織修復(fù)具有重要意義。

普魯士藍(lán)（Prussian blue，PB）是一種歷史悠久的藍(lán)色染料，由于其同時(shí)存在二價(jià)鐵和三價(jià)鐵離子的特殊結(jié)構(gòu)，賦予了它優(yōu)異的光物理、電化學(xué)和磁性等性質(zhì)[7]。隨著納米醫(yī)學(xué)的發(fā)展，PB納米顆粒也被廣泛應(yīng)用于影像診斷、疾病治療和藥物/基因遞送等方面[8]。近年來(lái)，PB納米顆粒的多酶催化效應(yīng)（主要為過(guò)氧化物酶、過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶）也逐漸受到重視，其高效的ROS清除作用及穩(wěn)定的理化性質(zhì)，為炎癥治療提供了新的策略[9]。

本研究制備了中空普魯士藍(lán)（hollow mesoporous Prussian blue，HMPB）納米顆粒，并探討了其清除ROS的效果以及在炎癥環(huán)境下對(duì)巨噬細(xì)胞極化的影響；利用HMPB納米顆粒對(duì)大鼠牙周炎癥進(jìn)行治療，探討其對(duì)牙周感染的治療作用。

資料和方法

1.主要實(shí)驗(yàn)材料和儀器：K3[Fe（CN)6]、脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，來(lái)自E.coli）、2′，7’-二氯熒光素二乙酸酯（2’，7’-dichlorofluorescein diacetate，DCFH-DA）：阿拉丁試劑有限公司（中國(guó)上海）。聚乙烯基吡咯烷酮[poly（vinylpyrrolidone)，PVP，K30]：索萊寶生物科技有限公司（中國(guó)北京）。RAW264.7細(xì)胞系由吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院提供。Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基（dulbecco’s modified Eagle’s medium，DMEM）、青霉素/鏈霉素和胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）：賽默飛世爾科技有限公司。透射電子顯微鏡（HT7800）：日本Hitachi公司。傅里葉變換紅外光譜儀：美國(guó)Thermo Scientific公司。

2.水熱法制備HMPB納米顆粒及表征：首先，將9.0 g的PVP、396 mg的K3[Fe（CN）6]和120 mL的HCl（濃度為0.01 M）在磁力攪拌器上混合30 min，直到溶液澄清。將容器置于80℃的恒溫烤箱中反應(yīng)24 h后，利用蒸餾水和乙醇中進(jìn)行多次洗滌，最后離心收集PB納米顆粒。隨后，在磁攪拌下將200 mg的PVP和40 mg的PB加入到40 mL的HCl溶液（濃度為1.0 M）中。攪拌3 h后，將溶液轉(zhuǎn)移到不銹鋼高壓反應(yīng)釜中，140℃下加熱4 h。隨后以12000 rpm離心10 min，用蒸餾水洗滌三次，得到HMPB納米顆粒。使用透射電子顯微鏡（transmission electron microscop，TEM）觀察HMPB的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。傅里葉變換紅外光譜儀（fourier transform infrared，F(xiàn)TIR）對(duì)HMPB的性質(zhì)進(jìn)行研究。

3.類(lèi)過(guò)氧化物酶（peroxidase，POD）催化活性檢測(cè)：在2 mL的Hac-NaAc緩沖液（pH 4.0）中依次加入0.2 mL HMPB納米顆粒、0.16 mL 3，5，3′，5′-四甲基聯(lián)苯胺（TMB，10 mg/mL）和0.32 mL H2O2（30%），HMPB納米顆粒的終濃度為10 μg/mL，通過(guò)紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)在650 nm處測(cè)量10 min內(nèi)的吸光度值變化。

4.細(xì)胞分離與培養(yǎng)：本研究通過(guò)了哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院倫理委員會(huì)審查（KY2022-154），人牙齦成纖維細(xì)胞（human gingival fibroblasts，HGFs）提取自15～20歲正畸拔牙患者的牙齦組織。通過(guò)對(duì)細(xì)胞角蛋白和角蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。HGFs和RAW264.7細(xì)胞均在添加了10% FBS和1%青霉素/鏈霉素的DMEM中培養(yǎng)，37℃、5% CO2，在隨后的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的HGFs均在第4～6代的范圍內(nèi)。

5.細(xì)胞毒性檢測(cè)：將RAW264.7細(xì)胞以每孔6×103個(gè)細(xì)胞的密度接種到96孔板中培養(yǎng)12 h。更換含有不同濃度（0 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mL和80 μg/mL）的HMPB納米顆粒的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h。隨后，更換含10%CCK-8的培養(yǎng)基，再培養(yǎng)2 h后，用Bio-Rad酶標(biāo)儀在450 nm處檢測(cè)吸光度。

6.2′，7′-二氯熒光黃雙乙酸鹽（2’，7’-dichlorofluorescein diacetate，DCFH-DA）熒光探針檢測(cè)HMPB清除細(xì)胞內(nèi)ROS的作用：首先以每孔5×104個(gè)細(xì)胞的密度在12孔板中分別接種HGFs和RAW 264.7細(xì)胞，將這些細(xì)胞暴露于LPS（1 μg/mL）的刺激下，加入或不加入HMPB共同培養(yǎng)12小時(shí)。隨后用含10 μM DCFH-DA的無(wú)血清培養(yǎng)基替換原有細(xì)胞培養(yǎng)基，于37℃下培養(yǎng)30 min。PBS洗滌3次后，用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)ROS的變化。未經(jīng)任何處理的細(xì)胞為Control組，僅加入LPS的細(xì)胞為L(zhǎng)PS組，加入了LPS和HMPB的細(xì)胞為HMPB組。

7.HMPB納米顆粒對(duì)LPS誘導(dǎo)的HGFs和RAW 264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響：以每孔2×105個(gè)細(xì)胞的密度將HGFs和RAW 264.7細(xì)胞分別接種在6孔板中，分組同上。將這些細(xì)胞暴露于LPS（1 μg/mL）的刺激下，加入或不加入HMPB，共同孵育24 h后，用Trizol分離并提取細(xì)胞的總RNA。在Bio-Rad PCR儀中，利用PrimeScript RT試劑盒將1 μg提取的總RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。然后，使用SYBR Premix Ex Taq II試劑盒，采用實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）檢測(cè)促炎和抗炎因子腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細(xì)胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、精氨酸酶1（arginase-1，Arg-1）、轉(zhuǎn) 化 生 長(zhǎng) 因 子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、白細(xì)胞介素10（interleukin-10，IL-10）的mRNA表達(dá)。qPCR的引物序列列見(jiàn)表1。β肌動(dòng)蛋白（β-Actin）作為內(nèi)參，采用ΔΔCt法計(jì)算mRNA的相對(duì)表達(dá)。為了檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞中炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，收集細(xì)胞培養(yǎng)基并離心。通過(guò)小鼠酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒（中國(guó)泉州瑞信生物有限公司）測(cè)定促炎細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α的濃度。

表1 qPCR引物序列

8.免疫熒光染色（immunofluorescence，IF）檢測(cè)HGFs細(xì)胞中IL-1β的表達(dá)水平：所有組均用4%多聚甲醛固定，并在室溫下用0.5%的Triton X-100通透30 min，隨后用3%的BSA封閉。PBS沖洗后，加入一抗兔抗人IL-1β抗體（1:150，中國(guó)沈陽(yáng)萬(wàn)萊比奧）后在4℃下孵育過(guò)夜。PBS沖洗后，加入二抗Alexa Fluor 488共軛的山羊抗兔IgG（Sangon Biotech，中國(guó)上海）抗體孵育2 h。PBS沖洗后，用DAPI復(fù)染細(xì)胞核5 min。PBS沖洗后，熒光顯微鏡下觀察染色結(jié)果。

9.HMPB納米顆粒治療小鼠牙周炎癥的體內(nèi)研究：本研究通過(guò)了哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院倫理委員會(huì)審查（SYDW2022-079），使用ICR小鼠（25±5 g）構(gòu)建了牙周炎癥模型。麻醉后，在下頜切牙處齦下注射20 μl的LPS（濃度為1 mg/mL），連續(xù)3天每日注射一次。HMPB組在第四天時(shí)在炎癥部位注射20 μg的HMPB進(jìn)行治療，連續(xù)4天每日注射一次。第八天時(shí)處死小鼠，取下頜骨并用4%多聚甲醛固定24 h，隨后在15%的EDTA溶液中脫鈣2周。最后，對(duì)所有樣本進(jìn)行石蠟中包埋、切片，并以進(jìn)行蘇木精&伊紅染色（hematoxylin and eosin，HE）和免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）分析。

10.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，通過(guò)單因素方差分析（ANOVA）進(jìn)行多組間比較，所有結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1.HMPB納米顆粒的理化性質(zhì)、類(lèi)酶活性及細(xì)胞毒性表征：TEM圖像（圖1A）顯示HMBP納米顆粒呈立方體形貌，內(nèi)部可觀察到中空介孔結(jié)構(gòu)。對(duì)圖片中的納米顆粒的尺寸進(jìn)行測(cè)量，結(jié)果顯示HMBP的平均直徑約為139 nm。FTIR結(jié)果（圖1B）顯示，位于2060 cm-1處的吸收峰歸屬于Fe2+-CN-Fe3+中C≡N鍵的伸縮振動(dòng)。1628 cm-1的吸收峰為PVP中酰胺基團(tuán)的C=O伸縮振動(dòng)峰，表明PVP包被在納米粒子表面。隨后，筆者以TMB為顯色底物，對(duì)HMPB納米顆粒進(jìn)行了POD活性的測(cè)定。如圖1C所示，對(duì)照組在650 nm處的吸光度在10分鐘內(nèi)幾乎沒(méi)有變化，而HMPB納米顆粒顯示出較強(qiáng)的類(lèi)POD催化活性。CCK-8檢測(cè)（圖1D）表明HMPB納米顆粒的濃度低于40 μg/mL時(shí)具有促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞增殖的作用，當(dāng)濃度為80 μg/mL時(shí)顯示出一定的細(xì)胞毒性。

圖1 HMPB的理化性質(zhì)表征

2.HMPB對(duì)HGFs和RAW264.7細(xì)胞活性氧的清除作用：以LPS作為ROS誘導(dǎo)劑，分別刺激RAW264.7細(xì)胞和HGF細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)量的ROS，隨后使用DCFH-DA熒光探針檢測(cè)HMPB納米顆粒清除ROS的能力。如圖2所示，LPS處理后，熒光探針與ROS反應(yīng)生成DCF，顯示出很強(qiáng)的熒光信號(hào)，然而，在HMPB組中觀察到明顯的熒光淬滅，表明HMPB納米顆粒能夠清除細(xì)胞內(nèi)ROS，對(duì)細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷具有保護(hù)作用。

圖2 HMPB對(duì)HGFs和RAW264.7細(xì)胞活性氧的清除作用

3.HMPB納米顆粒對(duì)炎癥反應(yīng)和巨噬細(xì)胞極化的調(diào)節(jié)作用：筆者用LPS刺激RAW264.7細(xì)胞以模擬炎癥狀態(tài)，并通過(guò)qPCR和ELISA檢測(cè)巨噬細(xì)胞表型。qPCR結(jié)果表明加入LPS后M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物TNF-α、IL-1β和iNOS以及M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物TGF-β、IL-10和Arg-1的mRNA表達(dá)水平均顯著上調(diào)（圖3A-C）。然而，與LPS組相比，HMPB組M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物的mRNA表達(dá)水平顯著降低，而M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物的mRNA轉(zhuǎn)錄水平均顯著升高（圖3D-F）。進(jìn)一步，筆者通過(guò)ELISA檢測(cè)了RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)液中炎癥因子的表達(dá)水平（圖3G，H）。與Control組相比，LPS組中TNF-α和IL-1β的表達(dá)顯著增加，而加入HMPB納米顆?？娠@著抑制LPS誘導(dǎo)的炎癥因子表達(dá)。

圖3 HMPB對(duì)巨噬細(xì)胞炎性因子和生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響

4.通過(guò)qPCR和IF研究HMPB納米顆粒對(duì)HGFs細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響：qPCR結(jié)果（圖4A,B）顯示加入HMPB可顯著降低HGFs中TNF-α和IL-1β基因的表達(dá)水平。IL-1β的IF結(jié)果也顯示（圖4C），HMPB組的IL-1β蛋白表達(dá)水明顯低于LPS組，與對(duì)照組接近。

圖4 HMPB納米顆粒對(duì)HGFs細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響

5.HMPB納米顆粒的體內(nèi)抗炎作用：HE染色（圖5）可觀察到LPS炎癥模型組牙周組織區(qū)病理改變顯著，牙周組織中炎性細(xì)胞大量浸潤(rùn)，結(jié)締組織結(jié)構(gòu)紊亂，表明處于廣泛的炎癥狀態(tài)，然而，HMPB納米顆粒治療后，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少。IHC染色（圖5）顯示與HE染色相似的結(jié)果，與Control組相比，LPS誘導(dǎo)的炎癥組中TNF-α和IL-1β的免疫組化染色顯示較強(qiáng)的陽(yáng)性標(biāo)記。而在HMPB組，小鼠牙周組織中促炎因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)受到抑制，且達(dá)到與對(duì)照組相近的水平。

圖5 HMPB對(duì)小鼠牙周炎癥的治療效果和局部炎癥因子的調(diào)控作用

討 論

納米酶是一種具有類(lèi)酶特性的納米材料，其催化活性源自于材料本身的特殊納米結(jié)構(gòu)，與天然酶相比，具有穩(wěn)定性高、成本低、能夠長(zhǎng)期儲(chǔ)存和大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)[2]。目前已有多種納米顆?；谄浼{米酶的性質(zhì)用于炎癥相關(guān)疾病的治療，如金屬氧化物 和 硫 化 物 納 米 酶（Fe3O4、CeO2、ZnO、Mn3O4、MoS等）、碳基納米酶（碳納米管、碳量子點(diǎn)等）、金屬基納米酶（單金屬的Au、Ag、Pt及雙金屬或多金屬的納米晶體等）[10～12]，然而，這些納米酶的催化活性、生物安全性等問(wèn)題限制它們進(jìn)一步的應(yīng)用[13]。

普魯士藍(lán)具有良好的生物相容性，不溶性普魯士藍(lán)已被FDA批準(zhǔn)上市用于銫-137和鉈輻射污染的治療[8]。本研究中筆者利用水熱條件下的可控酸蝕制備了中空的普魯士藍(lán)納米顆粒，CCK-8的結(jié)果顯示其具有優(yōu)異的生物相容性，在發(fā)揮良好類(lèi)酶活性的應(yīng)用濃度范圍內(nèi)對(duì)RAW264.7細(xì)胞不具有毒性。近年來(lái)對(duì)PB納米顆粒的多酶活性、高催化速率、優(yōu)異的ROS清除能力等性質(zhì)進(jìn)行了充分研究，并在炎癥性疾病治療及應(yīng)用中受到廣泛關(guān)注[9]。ZHANG等[14]系統(tǒng)的研究了PB納米顆粒的POD、過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶的多酶活性及清除多種ROS的有效性，并證明PB不會(huì)通過(guò)芬頓反應(yīng)利用過(guò)氧化氫與亞鐵離子反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，而具有抑制羥自由基生成的類(lèi)POD催化活性。在本研究中筆者首先驗(yàn)證了HMPB納米顆粒的類(lèi)POD的催化活性，采用TMB作為底物，在酸性條件下（pH＝3.6）和H2O2存在的情況下，HMPB能夠催化H2O2迅速氧化TMB生成藍(lán)色產(chǎn)物，并得到類(lèi)POD的催化曲線。隨后，筆者進(jìn)一步在RAW264.7細(xì)胞系和HGFs細(xì)胞中對(duì)HMPB納米顆粒清除細(xì)胞內(nèi)ROS的作用進(jìn)行了驗(yàn)證。DCFH-DA熒光探針可與ROS反應(yīng)生產(chǎn)具有綠色熒光的DCF，熒光強(qiáng)度越強(qiáng)，表明ROS越多。細(xì)胞在經(jīng)過(guò)LPS誘導(dǎo)后，加入DCFH-DA熒光探針可以觀察到綠色熒光明顯增強(qiáng)，表明ROS水平升高，而HMPB組綠色熒光明顯減少，表明HMPB具有很強(qiáng)的清除ROS的作用。

感染性疾病的進(jìn)展與體內(nèi)ROS調(diào)節(jié)的失衡與過(guò)量具有密切的關(guān)系[15]，在炎癥急性期，巨噬細(xì)胞首先表現(xiàn)出經(jīng)典的M1活化表型，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)并釋放促炎介質(zhì)，如細(xì)胞因子、趨化因子、ROS和NO，從而誘導(dǎo)各種抗菌機(jī)制的活化，以殺死病原體和消除炎癥。然而，必須控制這些反應(yīng)，以防止炎癥對(duì)宿主的損傷，此時(shí)需要M2型巨噬細(xì)胞激活并占據(jù)主導(dǎo)，產(chǎn)生抗炎細(xì)胞因子和趨化因子，減輕炎性反應(yīng)，促進(jìn)和加速傷口愈合過(guò)程和組織修復(fù)[4，16]。而這種M1和M2極化狀態(tài)之間的來(lái)回切換與ROS的調(diào)節(jié)密切相關(guān)。許多研究表明在不同環(huán)境下，ROS通過(guò)多種信號(hào)分子及其通路調(diào)控巨噬細(xì)胞的極化，并可能發(fā)揮雙重的調(diào)節(jié)作用[17～19]。高濃度的ROS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M1型極化，促進(jìn)炎性細(xì)胞因子的釋放，發(fā)揮促炎作用；而低濃度的ROS可以調(diào)控巨噬細(xì)胞M2極化，抑制炎性反應(yīng)，因此，以ROS為靶點(diǎn)，清除過(guò)量ROS對(duì)于感染性疾病的治療有重要的意義。ZHAO等[20]構(gòu)建PVP修飾的PB納米顆粒，體外實(shí)驗(yàn)證明其具有較好的清除多種ROS的能力，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過(guò)靜脈注射PB納米顆粒進(jìn)入小鼠體內(nèi)能夠減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)從而治療炎癥性腸病。ZHANG等[14]利用小鼠尾靜脈注射LPS構(gòu)建急性肝炎模型，而PB納米顆粒預(yù)處理的小鼠尾靜脈注射LPS后，與對(duì)照組相比肝臟炎癥反應(yīng)明顯減輕。在本研究中，筆者從細(xì)胞水平上驗(yàn)證了HMPB在炎癥狀態(tài)下清除ROS，誘導(dǎo)M1型巨噬細(xì)胞向M2型轉(zhuǎn)變的作用，又通過(guò)建立牙周炎癥動(dòng)物模型觀察其對(duì)感染的治療作用。體外研究中，LPS的加入可以顯著誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生及M1型巨噬細(xì)胞相關(guān)促炎因子TNF-α、IL-1β和iNOS的釋放；HMPB納米顆粒能夠明顯減少細(xì)胞內(nèi)ROS的含量，并誘導(dǎo)M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物TGF-β、IL-10和Arg-1的表達(dá)。體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)注射LPS后，局部組織紅腫，鏡下觀察到大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，結(jié)締組織破壞明顯。經(jīng)過(guò)HMPB納米顆粒治療，能夠減輕局部炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，并抑制炎癥因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)。此外，筆者制備的HMPB具有中空介孔結(jié)構(gòu)，可裝載小分子藥物或基因，協(xié)同增強(qiáng)其在抗感染治療中的效果，進(jìn)一步拓展HMPB納米顆粒在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域更廣泛的應(yīng)用。

綜上所述，筆者制備的HMPB納米酶具有清除ROS的作用，能夠誘導(dǎo)炎癥狀態(tài)下的巨噬細(xì)胞由M1型主導(dǎo)向M2型主導(dǎo)轉(zhuǎn)變，并能顯著減輕牙周的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)組織的修復(fù)，為牙周感染的治療提供了一個(gè)新的方向與策略。