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      蝦夷扇貝裙邊多肽提高鰱魚肌原纖維蛋白 結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性

      2022-10-19 08:03:40叢海花耿文豪朱嘉雯逯曉燕常珂欣趙前程
      肉類研究 2022年9期
      關(guān)鍵詞:裙邊扇貝羰基

      叢?;?,耿文豪,朱嘉雯,楊 天,逯曉燕,常珂欣,趙前程,3,*

      (1.蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院食品科技學(xué)院,江蘇 蘇州 215008;2.大連海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院, 遼寧省水產(chǎn)品加工及綜合利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,遼寧省水產(chǎn)品分析檢驗(yàn)及加工科技服務(wù)技術(shù)中心,遼寧 大連 116023;3.海洋食品精深加工關(guān)鍵技術(shù)省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心,遼寧 大連 116034)

      扇貝是扇貝屬雙殼類軟體動(dòng)物的代稱,其肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富,被列入八珍之一。扇貝種類豐富,適合大規(guī)模養(yǎng)殖,是我國(guó)重要的海洋經(jīng)濟(jì)產(chǎn)品之一。2021年我國(guó)扇貝產(chǎn)量高達(dá)17.4 萬t,其中扇貝加工廢棄物(包括內(nèi)臟)約占整個(gè)扇貝的30%,扇貝含有豐富的氨基酸、不飽和脂肪酸、微量元素等營(yíng)養(yǎng)成分。蝦夷扇貝屬軟體動(dòng)物門,屬大型冷水性雙殼貝類,是扇貝中個(gè)體最大的,為市面上較為常見的扇貝品種之一。我國(guó)的扇貝加工業(yè)發(fā)展迅速,產(chǎn)品種類不斷增加,但主要集中在貝柱為主的產(chǎn)品形式上,裙邊等副產(chǎn)物的綜合利用方面存在不足。目前,扇貝的加工利用由起初的扇貝柱、凍藏扇貝、扇貝罐頭逐漸轉(zhuǎn)移至扇貝副產(chǎn)物加工利用,如利用扇貝內(nèi)臟團(tuán)提取多糖、利用扇貝貝殼制備扇貝貝殼粉、利用扇貝裙邊提取多肽等精深加工范疇。近年來,蝦夷扇貝內(nèi)臟多糖、硫酸酯多糖等被證實(shí)與多種生物功能都有密切關(guān)系。

      但目前扇貝裙邊大多仍作為下腳料丟棄,造成了嚴(yán)重的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。裙邊是扇貝的外套膜,近年來的研究表明,扇貝裙邊富含活性多肽、氨基多糖、不飽和脂肪酸等多種生物活性物質(zhì)。多肽一般是指少于100 個(gè)氨基酸、通過肽鍵連接而成的化合物,其相對(duì)分子質(zhì)量低于10 000。多肽在自然界中廣泛存在,生物活性多肽具有免疫調(diào)節(jié)、激素調(diào)節(jié)、抗病毒、抗氧化、降血壓和降血脂等功能。

      目前研究報(bào)道,使用脂氧合酶催化的亞油酸、磷酸鹽-大豆分離蛋白、茶多酚等會(huì)對(duì)肌原纖維蛋白(myofibrillar protein,MP)的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生一定影響。除此之外,陳旭等的研究發(fā)現(xiàn),多肽對(duì)MP有良好的冷凍保護(hù)作用,尤其是多肽可以作為低溫保護(hù)劑的替代品,對(duì)魚糜的冷凍貯藏有良好的保護(hù)效果。一些植物蛋白飲料中也同樣添加多肽來維持其穩(wěn)定性。目前,蝦夷扇貝裙邊被大量廢棄,少量蝦夷扇貝裙邊被水解成蛋白,進(jìn)行生物活性研究。除此之外,還有少量蝦夷扇貝裙邊被用于糖胺聚糖、多糖的提取,并進(jìn)行生物活性研究。

      關(guān)于扇貝裙邊多肽對(duì)于MP結(jié)構(gòu)影響的研究鮮有報(bào)道。本研究以蝦夷扇貝裙邊多肽(mantle polypeptide,PMP)為研究對(duì)象,通過考察質(zhì)量濃度0、2、4 g/100 mL的PMP對(duì)鰱魚MP二、三級(jí)結(jié)構(gòu)變化的影響,為蝦夷扇貝裙邊的高值化利用提供新的思路和理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材料與試劑

      PMP 實(shí)驗(yàn)室制得;新鮮鰱魚 大連熟食品交易中心。

      溴化鉀(光譜純) 天津市大茂化學(xué)試劑廠;氯化鈉、乙酸乙酯 天津市富宇精細(xì)化工有限公司;-巰基乙醇 天津市福晨化學(xué)試劑廠;尿素、三(羥甲基)氨基甲烷 國(guó)藥基團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;鹽酸胍、三氯乙酸、5,5’-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(5,5’-dithio bis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB)、2,4-二硝基苯肼 上海麥克林生化科技有限公司;除溴化鉀外所有試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

      1.2 儀器與設(shè)備

      D S-1高速組織搗碎機(jī) 上海標(biāo)本模型廠; HR/T20MM立式高速冷凍離心機(jī) 湖南赫西儀器裝備有限公司;NEXUS670紅外光譜儀 美國(guó)PerkinElmer公司;Epoch2酶標(biāo)儀 美國(guó)伯騰儀器有限公司;F-2700熒光分光光度計(jì) 日本Hitachi公司;UV-9000雙光束紫外-可見分光光度計(jì) 上海元析儀器有限公司;BL-310電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;PHS1J-4F精密數(shù)顯pH計(jì) 山東晨拓科學(xué)儀器有限公司;SL-III數(shù)控層析冷柜、Scientz-30D真空冷凍干燥機(jī) 寧波新芝科技股份有限公司;HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋 國(guó)華電器有限公司。

      1.3 方法

      1.3.1 MP的提取

      根據(jù)儀淑敏等的提取方法,略作修改。將冷凍鰱魚糜于4 ℃層析柜中解凍過夜,取上述魚糜5 g,加入25 mL 10 mol/L Tris-HCl緩沖液(pH 7.2),4 000 r/min均質(zhì)2 min后,于4 ℃、5 000 r/min離心15 min,取沉淀加入100 mL 10 mol/L Tris-HCl緩沖液(含0.6 mol/L NaCl,pH 7.2),于4 000 r/min均質(zhì)30 s,4 ℃、4 500 r/min離心20 min后取上清,即為MP。用雙縮脲試劑測(cè)定蛋白質(zhì)量濃度。用10 mol/L Tris-HCl緩沖液(含0.6 mol/L NaCl,pH 7.2)將MP配制成1.0 mg/mL溶液。

      1.3.2 PMP的制備

      根據(jù)劉聰?shù)鹊姆椒?,將冷凍蝦夷扇貝裙邊經(jīng)解凍后清洗,進(jìn)行脫鹽處理后將扇貝裙邊組織搗碎,經(jīng)酶解后進(jìn)行超濾、滅酶后干燥。

      1.3.3 PMP粒徑測(cè)定

      將1.3.2節(jié)制備的PMP用pH 6.0、10 mmol/L磷酸鹽緩沖液(含0.6 mol/L NaCl)稀釋到5 mg/mL,用激光粒度儀對(duì)MP粒徑進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定參數(shù):物質(zhì)折射率1.520,介質(zhì)為水,介質(zhì)折射率1.333。

      1.3.4 PMP-MP復(fù)合物制備

      將質(zhì)量濃度0、2、4 g/100 mL的PMP添加到MP溶液中,放入層析柜中靜置過夜。

      1.3.5 PMP-MP復(fù)合物巰基含量測(cè)定

      1.3.5.1 總巰基含量測(cè)定

      根據(jù)朱東宏等的方法測(cè)定總巰基含量,略作修改。取不同質(zhì)量濃度PMP-MP復(fù)合物溶液0.5 mL,加入4.5 mL Tris-HCl緩沖液(含0.2 mol/L Tris、8 mol/L尿素、2 g/100 mL十二烷基硫酸鈉、10 mmol/L EDTA,pH 6.8),空白組加入等量去離子水?;旌暇鶆蚝笕』旌弦? mL,加入0.5 mL 10 mol/L DTNB溶液,置于40 ℃水浴鍋中加熱25 min。于412 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度??値€基含量按式(1)計(jì)算。

      式中:為樣品吸光度;為空白組吸光度;為稀釋倍數(shù);為蛋白質(zhì)量濃度/(mg/mL)。

      1.3.5.2 活性巰基含量測(cè)定

      根據(jù)Yildiz等的方法測(cè)定,略作修改。取不同質(zhì)量濃度PMP-MP復(fù)合物溶液0.5 mL,加入4.5 mL活性巰基緩沖液(含0.2 mol/L Tris-HCl、10 mmol/L EDTA,pH 6.8),空白組加入等量去離子水?;旌暇鶆蚝蠹尤?.5 mL 10 mol/L DTNB溶液,置于4 ℃冰箱中反應(yīng)1 h后,于412 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度?;钚詭€基含量按式(1)計(jì)算。

      1.3.6 PMP-MP復(fù)合物羰基含量測(cè)定

      根據(jù)Sawayama等的方法測(cè)定,略作修改。取0.25 mL不同質(zhì)量濃度PMP-MP復(fù)合物溶液于離心管中,加入0.5 mmol/L DNPH(溶于2 mol/L HCl)室溫避光反應(yīng)10 min,每10 min渦旋1 次,加入等體積的20%三氯乙酸,5 000 r/min、4 ℃離心10 min,沉淀加入1 mL乙醇-乙酸乙酯(1∶1,/)洗至無色,加入4 mL鹽酸胍 (6 mol/L,溶于20 mmol/L磷酸鹽緩沖液,pH 6.5),37 ℃沉淀20 min,10 000 r/min離心5 min,于370 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。羰基含量按式(2)計(jì)算。

      式中:為樣品吸光度;為稀釋倍數(shù);為摩爾吸光系數(shù)/(L/(mol·cm));為蛋白質(zhì)量濃度/(mg/mL)。

      1.3.7 PMP-MP復(fù)合物傅里葉變換紅外光譜(Fourier transform infrared spectroscopy,F(xiàn)TIR)測(cè)定

      根據(jù)Xu Yujuan等的方法,略作修改。取復(fù)合物溶液,冷凍10 h后,進(jìn)行冷凍干燥。取凍干后樣品2 mg,加入干燥的無水溴化鉀100 mg,充分混合后在約18 N壓力下加壓2 min,形成溴化鉀壓片。用紅外光譜儀進(jìn)行測(cè)定和分析,分辨率為4 cm,光譜觀察范圍為400~4 000 cm。

      PeakFit軟件用于酰胺Ⅰ譜帶的原始光譜曲線擬合。1600~1639cm被認(rèn)為是-折疊波段,1640~1650cm被認(rèn)為是無規(guī)卷曲波段,1651~1600cm被認(rèn)為是-螺旋波段,1 661~1 700 cm被認(rèn)為是-轉(zhuǎn)角波段。蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的相對(duì)含量根據(jù)積分面積計(jì)算。

      1.3.8 PMP-MP復(fù)合物紫外吸收光譜測(cè)定

      取復(fù)合物溶液,以10 mol/L Tris-HCl緩沖液(含0.6 mol/L NaCl,pH 7.2)作為對(duì)照。將溶液置于1 cm石英比色皿中,使用紫外-可見分光光度計(jì)在230~350 nm獲得紫外吸收光譜,使用OriginPro 2017軟件從紫外吸收光譜獲得二階導(dǎo)數(shù)光譜。

      1.3.9 PMP-MP復(fù)合物內(nèi)源熒光光譜測(cè)定

      取適量各組復(fù)合物溶液,加入光路長(zhǎng)度為1 cm的熒光比色皿中,采用熒光分光光度計(jì)在室溫(25 ℃)下進(jìn)行熒光光譜掃描,設(shè)置激發(fā)波長(zhǎng)為280 nm,掃描范圍300~450 nm,測(cè)定最大發(fā)射波長(zhǎng)下的熒光強(qiáng)度。

      1.4 數(shù)據(jù)處理

      采用SPSS軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)中所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析(<0.05),使用Excel和OriginPro 2017軟件制表繪圖。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 PMP粒徑分布

      粒徑是衡量脂質(zhì)體體系穩(wěn)定性、均勻性和生物利用度的重要物理參數(shù)。由圖1可知,在本研究工藝條件下制備的PMP粒徑分布范圍較寬,PMP粒徑呈現(xiàn)出先增大后減小的趨勢(shì),其中90%以上的PMP粒徑均小于200 μm。PMP粒徑大小是其能否被吸收的關(guān)鍵。PMP粒徑峰值處(70.03~77.83 μm),較小粒徑便于攜帶活性成分。

      圖1 PMP粒徑分布Fig. 1 Particle size distribution of PMP

      2.2 PMP對(duì)MP巰基的影響

      在蛋白質(zhì)各類基團(tuán)中反應(yīng)活性最強(qiáng)的是巰基基團(tuán),巰基含量可間接反映MP的氧化程度。蛋白質(zhì)側(cè)鏈上的巰基極易被氧化成二硫鍵,有時(shí)還會(huì)生成非二硫鍵的含硫化合物,引起蛋白質(zhì)間無序的交聯(lián)聚集,并導(dǎo)致總巰基含量降低。研究表明,茶多酚會(huì)對(duì)草魚MP結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響,低濃度的茶多酚抑制巰基含量的降低,高濃度茶多酚導(dǎo)致巰基含量的減少。由圖2可知,通過添加不同量PMP,會(huì)對(duì)MP巰基含量產(chǎn)生不同影響。當(dāng)PMP添加量2%時(shí),與空白組相比,總巰基和活性巰基含量顯著升高(<0.05),當(dāng)PMP添加量4%時(shí),與添加量2%相比總巰基與活性巰基含量降低,這與王鵬等的研究結(jié)果類似。當(dāng)PMP添加量2%時(shí),可能使MP結(jié)構(gòu)部分展開,從而使蛋白結(jié)構(gòu)中的二硫鍵變化形成巰基,使總巰基含量升高。而蛋白溶解度提高會(huì)使包埋于分子內(nèi)部的巰基暴露出來,進(jìn)而使得活性巰基含量逐漸增加。當(dāng)PMP添加量4%時(shí)巰基含量降低,可能是由于PMP的加入促進(jìn)了混合體系中MP分子二硫鍵的形成,導(dǎo)致巰基含量降低。

      圖2 不同添加量PMP對(duì)MP總巰基(A)和活性巰基含量(B)的影響Fig. 2 Effects of different concentrations of PMP on total sulfhydryl (A) and active sulfhydryl contents (B) of MP

      2.3 PMP對(duì)MP羰基的影響

      蛋白質(zhì)發(fā)生羰基化可作為蛋白質(zhì)氧化的一個(gè)重要指標(biāo),羰基主要由活性氧所致肽鏈的斷裂及活性氧攻擊氨基酸分子的氨基或亞氨基產(chǎn)生,羰基含量越高,蛋白質(zhì)氧化損傷程度越高,因此通過測(cè)定羰基含量來評(píng)估PMP對(duì)MP的抗氧化作用。由圖3可知,隨著PMP添加量的增加,羰基含量逐漸降低,當(dāng)添加量4%時(shí),羰基含量顯著降低(<0.05),這與Nikoo、賈娜等的研究結(jié)果一致,說明PMP的存在顯著抑制蛋白質(zhì)氧化引起的羰基形成。通常當(dāng)氨基酸側(cè)鏈含有—NH—或—NH時(shí)更易被氧化成羰基,可能是由于多肽中存在的—NH—或—NH較少。隨著PMP添加量升高,羰基含量降低,MP氧化穩(wěn)定性增加,反映了多肽的抗氧化性。

      圖3 不同添加量PMP對(duì)MP羰基含量的影響Fig. 3 Effect of different concentrations of PMP on the carbonyl content of MP

      2.4 PMP對(duì)MP二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響

      FTIR因其操作簡(jiǎn)單、掃描快速、波長(zhǎng)精確、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),多被用來分析蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)變化與C—H、N—H和C—O等的振動(dòng)方式有關(guān),這些振動(dòng)方式使紅外光譜在多個(gè)波段均有吸收。其中,酰胺Ⅰ帶(1 700~1 600 cm)是肌原纖維中最主要的譜帶,常被用來分析肌原纖維二級(jí)結(jié)構(gòu)的變化。 圖4A顯示了PMP修飾后的MP在4 000~500 cm范圍內(nèi)的FTIR譜圖。由圖4A可知,PMP修飾MP后吸收峰會(huì)發(fā)生變化,可以有效區(qū)分MP及修飾后的MP間的光譜差異。3 300 cm附近的寬峰屬于酰胺A帶,是由N—H的伸縮振動(dòng)導(dǎo)致的特征峰。酰胺Ⅰ帶(1 656 cm)主要是由 C=O伸縮振動(dòng)引起的,N—H彎曲振動(dòng)和C—N伸縮振動(dòng)引起酰胺帶。對(duì)比MP及PMP-MP復(fù)合物,1 404 cm處的吸收峰出現(xiàn)差異,可能是因?yàn)榘被釟埢鶄?cè)鏈基團(tuán)對(duì)抗氧化性有影響。PMP修飾后改變了MP的結(jié)構(gòu),反映了多肽的抗氧化性。由此可見,PMP的添加會(huì)對(duì)MP的FTIR產(chǎn)生一定影響。

      圖4 不同添加量PMP對(duì)MP FTIR譜圖(A)及二級(jí)結(jié)構(gòu)(B)的影響Fig. 4 Effect of different concentrations of PMP on FTIR spectrum (A) and secondary structure (B) of MP

      由圖4B可知,隨著PMP添加量增加,MP的-螺旋相對(duì)含量無顯著差異,但-折疊相對(duì)含量隨添加量增加而顯著降低(<0.05),轉(zhuǎn)角相對(duì)含量無顯著差異。近年來,亞麻籽膠、小麥麩膳食纖維都被證實(shí)可以對(duì)MP性質(zhì)產(chǎn)生一定的影響。-螺旋為位于多肽鏈內(nèi)部的緊密、不含空腔的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。-折疊和無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)的緊密程度和構(gòu)象穩(wěn)定性弱于-螺旋。氧化后MP的-螺旋相對(duì)含量下降,而無規(guī)卷曲相對(duì)含量提高。這表明氧化促進(jìn)了MP-螺旋結(jié)構(gòu)的去折疊,增加了-折疊、-轉(zhuǎn)角和無規(guī)卷曲的相對(duì)含量。添加PMP后,-螺旋相對(duì)含量先上升后下降,-折疊相對(duì)含量下降,-轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲相對(duì)含量逐漸上升,-螺旋構(gòu)象穩(wěn)定主要是通過碳基氧(C=O)和氨基氫(NH)之間形成的分子間氫鍵 實(shí)現(xiàn),PMP的存在可能會(huì)干擾這些氫鍵,從而影響蛋白質(zhì)的-螺旋并降低-螺旋的比例。

      2.5 PMP對(duì)MP紫外吸收光譜的影響

      紫外吸收光譜的產(chǎn)生是由于蛋白質(zhì)分子中含有能夠吸收紫外區(qū)某一波長(zhǎng)光的基團(tuán),是一種用于檢測(cè)和研究溶液中MP分子的一種光譜學(xué)方法。蛋白質(zhì)的紫外吸收光譜可以直接反映MP內(nèi)生色基團(tuán)(色氨酸殘基、酪氨酸殘基、苯丙氨酸殘基)的含量,被廣泛應(yīng)用于評(píng)價(jià)蛋白結(jié)構(gòu)變化,進(jìn)而可以檢測(cè)出溶液中蛋白質(zhì)分子的有序結(jié)構(gòu)是否被破壞。

      由圖5A可知,在約285 nm處觀察到紫外光譜中的清晰吸收峰,代表芳香族氨基酸殘基,包括色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。經(jīng)PMP修飾的MP紫外吸收強(qiáng)度先升高后降低,這與Liu Pingping等的研究結(jié)果一致,經(jīng)PMP修飾的MP紫外吸收強(qiáng)度相對(duì)于空白組均有所升高,這可能是由于添加PMP使掩藏在溶劑中的生色基團(tuán)暴露,即這些基團(tuán)由原來的非極性環(huán)境轉(zhuǎn)變到極性環(huán)境,從而使整體的紫外吸收強(qiáng)度升高。

      圖5 不同添加量PMP對(duì)MP紫外吸收光譜(A)及紫外二階導(dǎo)數(shù) 光譜(B)的影響Fig. 5 Effect of different concentrations of PMP on the ultraviolet absorption spectrum (A) and the second-derivative UV absorption spectrum (B) of MP

      二階導(dǎo)數(shù)紫外光譜法已被證明是分析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化的有效方法,主要是因?yàn)樗芎芎玫貐^(qū)分每個(gè)芳香族氨基酸的光譜帶??梢酝ㄟ^紫外二階導(dǎo)數(shù)光譜生成值(=/,、分別為第1、2次正吸收峰與負(fù)吸收峰的差值)來計(jì)算酪氨酸殘留物周圍的極性微環(huán)境。由圖5B可知,有2 個(gè)正吸收峰和2 個(gè)負(fù)吸收峰。

      首先從初始值1.938 2降低到1.725 3,PMP添加量增加后再上升至1.913 3。結(jié)果表明,當(dāng)PMP添加量較低時(shí),可能是由于PMP三級(jí)結(jié)構(gòu)并未展開,導(dǎo)致MP紫外二階導(dǎo)數(shù)降低。但隨著PMP添加量的增加,PMP三級(jí)結(jié)構(gòu)展開,這導(dǎo)致酪氨酸殘基向更強(qiáng)極性的區(qū)域移動(dòng)。在氧化過程中,隨著更多疏水性氨基酸殘基的暴露,疏水相互作用增強(qiáng),導(dǎo)致分子之間的聚集,然后在更疏水的環(huán)境中重新掩埋非極性芳香族氨基酸殘基。

      2.6 PMP對(duì)MP內(nèi)源熒光光譜的影響

      蛋白質(zhì)內(nèi)源性色氨酸熒光對(duì)于其周邊微環(huán)境的極性非常敏感,因此常用于監(jiān)測(cè)蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的 變化。研究表明,槲皮素和蘆丁、白藜蘆醇等的添加都會(huì)使MP的熒光強(qiáng)度降低。由圖6可知,未添加PMP的MP顯示出較強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,添加PMP誘導(dǎo)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)展開,使色氨酸暴露在極性環(huán)境中,導(dǎo)致MP熒光強(qiáng)度降低??赡苁怯捎赑MP和色氨酸殘基之間可能存在相互作用,導(dǎo)致熒光強(qiáng)度的降低。這與Huang Xiang、Zhong Yuanyuan等的研究結(jié)果一致。另一方面,隨著PMP添加量的增加,MP內(nèi)源色氨酸最大熒光強(qiáng)度逐漸減弱。這說明PMP對(duì)MP的作用增強(qiáng)了MP的去折疊,暴露更多色氨酸殘基,使熒光強(qiáng)度降低。

      圖6 不同添加量PMP對(duì)MP內(nèi)源熒光光譜的影響Fig. 6 Effect of different concentrations of PMP on the intrinsic fluorescence spectrum of MP

      3 結(jié) 論

      PMP的修飾對(duì)鰱魚MP的結(jié)構(gòu)有一定的影響。巰基、羰基測(cè)定結(jié)果表明,PMP存在一定的抗氧化性,PMP的修飾對(duì)鰱魚MP的結(jié)構(gòu)有一定影響。內(nèi)源熒光光譜和紫外吸收光譜結(jié)果表明,PMP修飾后改變了MP的二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu),反映了PMP的抗氧化性??傮w結(jié)果表明,PMP的修飾有利于維持MP結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。

      本研究討論了PMP對(duì)于MP結(jié)構(gòu)的影響。但PMP與MP之間的修飾作用仍需要進(jìn)一步研究,尤其是MP功能特性改善方面。本研究可為蝦夷扇貝加工副產(chǎn)物的高值化利用提供依據(jù),為多肽修飾蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、改善其功能特性的相關(guān)研究提供參考,同時(shí),可以考慮開發(fā)PMP作為淡水魚糜的天然抗氧化劑、低溫保護(hù)劑和凝膠質(zhì)構(gòu)增強(qiáng)劑。

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