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      動物用凍干活疫苗及其制備工藝

      2022-11-16 00:48:10金京勛顧超男
      吉林畜牧獸醫(yī) 2022年1期
      關(guān)鍵詞:保護劑冷凍干燥凍干

      金京勛,羅 琦,顧超男

      中崇信諾生物制藥泰州有限公司 ,江蘇泰州 225300

      疫苗是指由各種致病微生物制成的用于預(yù)防接種的生物制品,包括活疫苗和滅活疫苗?;钜呙缡峭ㄟ^人工減毒病原體或從自然界篩選無毒或微毒的病原體菌株而制備的活的微生物制劑,也稱為減毒活疫苗。將活疫苗接種于動物體內(nèi),不致病但病原體可在生物體中復(fù)制從而引發(fā)免疫反應(yīng),以實現(xiàn)長期或終生保護。與滅活疫苗相比,活疫苗具有更強的免疫力和更長的作用時間。

      在動物疫苗中,滅活疫苗占有相當(dāng)大的比例。隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展,動物疫苗的數(shù)量和種類不斷增加。目前滅活疫苗的保存形式主要為油苗,與活疫苗相比,其具有運輸方便,存儲要求低,但也有免疫效果差、抗體保護時間短且難以應(yīng)對新流行株等缺點。

      將活疫苗加入凍干保護劑中進行凍干處理,得到凍干活疫苗。目前常用的凍干保護劑主要有牛奶、蔗糖、明膠等,且凍干保護劑組成簡單,保護功能差,導(dǎo)致凍干活疫苗保存期短,穩(wěn)定性差。本文主要對動物凍干活疫苗進行分析研究,改進制備儲藏工藝,提高凍干活疫苗的穩(wěn)定性以及實用性。

      1 凍干活疫苗

      1.1 凍干疫苗概念

      凍干活疫苗在是不破壞原有免疫原性的基礎(chǔ)上,通過病原微生物的傳代或遺傳修飾使病原微生物非致病性,病原微生物失去致病性,將培養(yǎng)液放入凍干機中,通過低溫提高凍干機真空度的方法,將培養(yǎng)液中的水升華分離,制成保持原有微生物免疫原性的干粉,即凍干活疫苗。

      1.2 凍干技術(shù)

      冷凍干燥也稱為冷凍真空干燥或冷凍干燥。冷凍干燥過程的意義在于減少水分,降低病原生物化學(xué)活性并保持病原免疫原性。微生物通過生物化學(xué)反應(yīng)進行代謝;衰變率則取決于該反應(yīng)物的有效濃度、活性和溫度;對于這個反映來說,水起著重要的決定作用,因為它能夠使得生物蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生一系列變化,生物體的流動性也是由于水的存在。因此為了能夠保存好微生物,就必須去除水分。這樣才能夠保留好其本身的功能結(jié)構(gòu),而且能夠降低自身的流動性。對于生物的相關(guān)制品來說,它冷凍真空干燥的過程是水分轉(zhuǎn)移以及狀態(tài)發(fā)生變化的過程,水的三種狀態(tài)達到平衡,是需要一定條件的。也就是說,需要首先將含水的物質(zhì)先冷凍成為固態(tài),然后在真空下將固態(tài)冰升華成水蒸氣,其中水蒸氣在冷凝器的表面上形成霜;冷凍干燥后,霜融化成水并被排出。

      1.3 我國凍干疫苗制備領(lǐng)域的不足

      國內(nèi)凍干活疫苗生產(chǎn)企業(yè)由于要考慮到成本因素,所以在選擇凍干保護劑的時候,還是會選擇價格比較低的保護劑。因此,雖然保護方面有所變化,但改善的程度是有限的。對于現(xiàn)階段市場上的試劑來說,不同品牌以及不同批次的還是有一定的差距。所以說,制備保護劑的時候,就要先確定試劑制造商是否合格,這個過程對于產(chǎn)品的質(zhì)量來說,是非常至關(guān)重要的,在實驗過程中,需要建立高規(guī)格的原料質(zhì)量標準。

      此外,我國凍干活疫苗生產(chǎn)中凍干保護劑還存在一些不足,比如說配方簡單、保護劑的效果差異比較大等問題。對于國內(nèi)的生物制品來說,解決這些問題還是比較重要的。疫苗研制人員往往把凍干技術(shù)認定為一個機械的范疇,生產(chǎn)合格的半成品會被運送到分裝車間去完成工作。但是,通過實踐了解到,每個過程和環(huán)節(jié)都是非常重要的。只有疫苗研發(fā)制備人員對產(chǎn)品生產(chǎn)中的各個環(huán)節(jié)高度參與,并且必須將上下游有機地結(jié)合起來,與凍干操作人員密切溝通,否則很難生產(chǎn)出穩(wěn)定的高質(zhì)量產(chǎn)品[1]。

      2 凍干活疫苗制備工藝

      保護劑制備指南:其中疫苗塊的崩解溫度由賦形劑的相對濃度決定;抗原收獲或凍干前應(yīng)加入保護劑;它應(yīng)該含有能夠中和羧基的活性物質(zhì);電解液的成分應(yīng)該最少;國外學(xué)者研究了產(chǎn)品在凍干過程中的損傷及蛋白質(zhì)保護機理,以提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性和經(jīng)濟性,研究方向主要集中在凍干保護劑的選擇和耐熱保護劑的配方上。國內(nèi)部分單位也先后開展了豬瘟細胞活疫苗、新城疫活疫苗、馬立克氏病活疫苗、傳染性法氏囊病活疫苗、傳染性支氣管活疫苗、雞痘活疫苗等耐熱凍干保護劑的研究,并取得了階段性成果[2]。雞法氏囊病毒弱毒株B87制備凍干疫苗,在2~8 ℃條件下儲存12個月或24個月,效價基本保持不變。新城疫疫苗經(jīng)改良凍干保護劑儲存37個月后,雞只經(jīng)病毒免疫,保護率仍為91% ~100%。

      3 小結(jié)

      凍干保護劑對于國外來說,其相關(guān)技術(shù)是核心機密。因此,國內(nèi)企業(yè)要想達到國際的先進水平,就必須要和國外企業(yè)緊密合作,只有這樣,才能夠生產(chǎn)出價格合理、成本低廉的凍干活疫苗。同時要增加凍干活疫苗技術(shù)的理論研究,提高產(chǎn)品預(yù)測能力,增加產(chǎn)品批次間的穩(wěn)定性,為制備更好的動物用凍干活疫苗提供理論依據(jù)。

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