林玉蓉，于 宇，歐陽玲，張 玲，宋維芳△

中國人民解放軍陸軍第七十三集團軍醫(yī)院：1.皮膚病科；2.檢驗科，福建廈門 361000

超敏反應(yīng)即為變態(tài)反應(yīng)，是機體對某些抗原初次應(yīng)答致敏后，當(dāng)再次接觸相同抗原刺激時，所表現(xiàn)出的一種生理功能紊亂或組織細胞損傷為主的異常免疫應(yīng)答。引起超敏反應(yīng)的抗原物質(zhì)為變應(yīng)原，常見的變應(yīng)原有吸入性、食物性、接觸性化學(xué)物質(zhì)、接觸性化妝品等，能夠選擇性誘導(dǎo)機體產(chǎn)生特異性免疫球蛋白E(IgE)抗體，稱為Ⅰ型超敏反應(yīng)[1-2]。皮膚科常見的過敏性疾病有蕁麻疹、過敏性皮炎、濕疹等，主要由Ⅰ型超敏反應(yīng)引起[3-4]，變應(yīng)原主要為吸入性和食物性。本研究通過對廈門地區(qū)皮膚過敏性疾病進行血清特異性IgE的檢測，明確變應(yīng)原的種類，以期對廈門地區(qū)皮膚過敏性疾病的預(yù)防和診療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年1月至2020年12月在本院皮膚病科就診的2 967例皮膚過敏性疾病患者為研究對象，其中女1 587例，男1 380例，年齡0～91歲?；颊吲R床診斷主要包括蕁麻疹、濕疹、過敏性皮炎，所有皮膚過敏性疾病患者的臨床診斷均由皮膚科醫(yī)師確診，均符合相關(guān)疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。按照年齡將≥18歲的患者作為成年組(2 190例)，<18歲的患者作為未成年組(777例)；按廈門地區(qū)氣候特點劃分季節(jié)：3-4月為春雨季節(jié)，5-6月為梅雨季節(jié)，7-9月為夏季，10-11月為秋季，12月至次年2月為冬季。

1.2儀器與試劑 采用由德國Mediwiss Analytic GmbH敏篩定量過敏原檢測系統(tǒng)進行檢測，儀器包括免疫檢測儀(型號：C1)、孵育盒、混勻儀。試劑為過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒(免疫印跡法)，其中可檢測吸入性過敏原有9種，包括戶塵螨、屋塵、桑樹、貓毛皮屑、狗毛皮屑、蟑螂、霉菌組合(點青霉/分枝孢霉/煙曲霉/黑曲霉/交鏈霉)、草類組合(矮豚草/蒿草/葎草/藜草)、樹木組合(柏樹/榆樹/柳樹/櫟樹/樺樹/楓樹/胡桃樹/梧桐樹/楊樹花粉)，食物性過敏原有10種，包括莧、雞蛋白、牛奶、蝦、牛肉、貝、蟹、芒果、腰果、菠蘿。

1.3方法 免疫印跡法是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)。其試驗原理為將多種特異性過敏原提取物包被在特制的纖維膜條上，與待測標(biāo)本進行反應(yīng)[5]。隨機采集患者肘部靜脈血3～5 mL于含有分離膠的試管中，0～6歲嬰幼兒由兒科專業(yè)護士采集送檢，待自然析出血清后于當(dāng)天或者隔天完成檢測。操作前檢查儀器和試劑的性能在說明書安全范圍之內(nèi)，整個過程嚴格遵循操作說明書。第一步，用稀釋的洗脫液沖洗試劑條，用洗脫液填充試劑條，在反應(yīng)槽中搖動洗脫液10 s，輕輕地在吸紙上把洗脫液拍干；第二步，用移液器把250 μL血清注入反應(yīng)槽里，此過程血清需完全覆蓋試劑條，在混勻儀上孵育45 min；第三步，廢棄血清，注意廢棄血清的時候不要交叉污染試劑，用洗脫液沖洗反應(yīng)槽，在反應(yīng)槽中水平搖動洗脫液10 s，重復(fù)清洗步驟6～7次，空甩反應(yīng)槽消除剩余的洗脫液；輕輕地在吸紙上把洗脫液拍干；加入檢測抗體250 μL，檢測抗體需完全覆蓋試劑條，在混勻儀上孵育45 min；第四步，廢棄檢測抗體，沖洗反應(yīng)槽，拍干后加入結(jié)合物250 μL，在混勻儀上孵育20 min；第五步，廢棄結(jié)合物，沖洗反應(yīng)槽，在反應(yīng)槽中水平搖動洗脫液10 s，重復(fù)清洗步驟9～10次，加入底物250 μL，在混勻儀上孵育20 min；最后廢棄底物沖洗，用吹風(fēng)機直接吹干，試劑條干燥的結(jié)果是紫色背景消失變?yōu)榘咨８稍锖罅⒓从门涮总浖M行讀板評估。判斷標(biāo)準(zhǔn)：通過免疫檢測儀軟件評估條帶顏色深淺，試劑條上顏色的深淺與血清中特異性IgE抗體水平成正比。變應(yīng)原特異性IgE抗體水平分級、數(shù)字分級和IgE抗體水平(IU/mL)的換算關(guān)系見表1。把變應(yīng)原特異性IgE水平>0.35 IU/mL視為變應(yīng)原陽性[6]。

表1 變應(yīng)原特異性IgE抗體水平分級、數(shù)字分級和IgE抗體水平的換算關(guān)系

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS26.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計數(shù)資料以例數(shù)、率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.119種變應(yīng)原檢測結(jié)果 2 967例皮膚過敏性疾病患者中1 670例患者變應(yīng)原陽性，陽性率為56.29%，其中吸入性變應(yīng)原陽性1 115例(66.77%)，食物性變應(yīng)原陽性555例(33.23%)，吸入性變應(yīng)原的陽性占比高于食物性變應(yīng)原(χ2=375.569，P<0.001)。吸入性變應(yīng)原中占比排名前5位依次為戶塵螨(21.44%)、霉菌組合(9.64%)、樹木組合(7.31%)、蟑螂(6.29%)、屋塵(5.69%)；食物性變應(yīng)原占比排名前5位依次為牛奶(8.14%)、腰果(6.95%)、蟹(4.07%)、莧(3.35%)、蝦(3.05%)。見表2。

表2 19種變應(yīng)原陽性患者分布情況

續(xù)表2 19種變應(yīng)原陽性患者分布情況

2.2不同性別患者的變應(yīng)原陽性分布情況 男性患者變應(yīng)原陽性率為53.77%(742/1 380)，低于女性患者的58.48%(428/1 587)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.457，P=0.011)。

2.3變應(yīng)原在不同年齡患者中的陽性分布情況 成年組吸入性變應(yīng)原陽性率最高的是戶塵螨(13.79%)，其次是霉菌組合(6.30%)、樹木組合(5.11%)、蟑螂(4.11%)，而食物性變應(yīng)原陽性率最高的是腰果(4.93%)，其次是蟹(2.37%)和牛奶(2.28%)。未成年組中吸入性變應(yīng)原陽性率最高的是戶塵螨(7.21%)，其次是霉菌組合(2.96%)、屋塵(2.32%)和蟑螂(1.93%)，而食物性變應(yīng)原陽性率最高的是牛奶(11.07%)、其次是雞蛋白(2.70%)、蟹(2.06%)和蝦(1.54%)。成年組、未成年組以上排名靠前的變應(yīng)原中除屋塵、蟹、蝦外，其他差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 變應(yīng)原在不同年齡患者中的陽性分布比較[n(%)]

2.4變應(yīng)原在不同季節(jié)的陽性分布情況 變應(yīng)原在不同季節(jié)的總陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，夏季陽性率(83.16%)最高,其次是春雨季節(jié)(58.22%)、梅雨季節(jié)(46.77%)，其中戶塵螨、桑樹、蟑螂、霉菌組合、樹木類組合、牛奶、腰果的陽性率在不同季節(jié)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 變應(yīng)原在不同季節(jié)的陽性分布比較[n(%)]

續(xù)表4 變應(yīng)原在不同季節(jié)的陽性分布比較[n(%)]

2.5變應(yīng)原在不同類型皮膚過敏性疾病患者中的陽性分布情況 變應(yīng)原在不同類型皮膚過敏性疾病患者中的總陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，以蕁麻疹患者變應(yīng)原總陽性率(62.73%)最高。其中戶塵螨、霉菌組合在不同類型皮膚過敏性疾病中的陽性率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而其他變應(yīng)原在不同類型過敏性疾病患者中的陽性率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 變應(yīng)原在不同類型皮膚過敏性疾病患者中的陽性分布比較[n(%)]

3 討 論

隨著科技的進步，環(huán)境氣候的改變以及飲食結(jié)構(gòu)的進化，過敏的人群呈逐年上升趨勢，而在皮膚科就診患者中皮膚過敏者最常見、復(fù)發(fā)率最高，給人們的日常生活、工作以及身心健康帶來很大影響。據(jù)世界變態(tài)反應(yīng)組織白皮書報告，過敏已成為全球第六大疾病[7]。皮膚過敏性疾病往往病因復(fù)雜，且變應(yīng)原種類繁多，明確變應(yīng)原是避免皮膚過敏的最重要有效途徑，而目前常見檢測變應(yīng)原的方法有：皮膚點刺實驗、鼻黏膜激發(fā)試驗、食物激發(fā)試驗、體外診斷血清學(xué)檢驗,前3種方法屬于體內(nèi)實驗，因操作繁瑣且具有危險性和比較痛苦等缺點而不容易被患者所接受，體外診斷血清學(xué)檢驗變應(yīng)原安全可靠，具有高靈敏度和特異度[8]，且有相關(guān)實驗研究表明體外檢測血清變應(yīng)原特異性IgE抗體水平對過敏性疾病的治療和預(yù)防具有較大指導(dǎo)意義[9]。

本研究結(jié)果顯示，吸入性變應(yīng)原的陽性占比高于食物性變應(yīng)原(χ2=375.569，P<0.001)，說明該地區(qū)皮膚過敏性疾病的變應(yīng)原以吸入性變應(yīng)原為主，排名前5位依次為戶塵螨、霉菌組合、樹木組合、蟑螂、屋塵，以戶塵螨占比最高，這與國內(nèi)大部分的研究結(jié)果一致[10-11]，而屋塵在本次研究中僅排名第五，這與萬極碩等[12]報道屋塵排名第一的結(jié)果不一致，可能原因：北京地區(qū)受霧霾天氣影響較大，而廈門是全國有名的空氣優(yōu)良城市，隨著當(dāng)?shù)厝嗣裆钏降奶岣?，對居住環(huán)境要求也普遍提高，越來越注重生活衛(wèi)生條件，家里常備空氣凈化器、除螨儀等。樹木組合在本研究中排名第3，排名稍靠前，這與廈門是一座花園城市，綠色指數(shù)得分(94.8)排全國第一[13]，終年樹木常青，鮮花盛開有關(guān)。廈門地區(qū)居民休閑活動以戶外為主，如爬山、踏青、公園野餐等，增加了對樹木花粉過敏的概率。本研究結(jié)果顯示，在春、夏季節(jié)，樹木組合的陽性率明顯高于其他季節(jié)，因此春、夏季節(jié)到戶外游玩時，要特別做好防護措施，最好備長袖衣物，戴口罩外，要遠離花草密集的地方，盡量避免與花粉直接接觸；中午陽光強烈，花粉的釋放量最多，對花粉過敏者此時最好不要外出，在大風(fēng)天氣時也應(yīng)避免出游。

本研究結(jié)果顯示，未成年組和成年組總陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中未成年組主要對牛奶、戶塵螨、霉菌組合、雞蛋白、屋塵過敏，成年組主要對戶塵螨、霉菌組合、樹木組合、腰果、蟑螂過敏。其中牛奶為未成年患者最重要的食物變應(yīng)原在國內(nèi)外的研究中已成為共識[14-15]。而作為南方沿海城市，飲食結(jié)構(gòu)主要以海產(chǎn)品為主，蝦、蟹在未成年組和未成年組中均未進入前5，兩組的陽性率差異也無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，這與相關(guān)文獻報道不一致[16]。分析原因可能是近年來當(dāng)?shù)鼐用窬怙嬍车囊庾R逐漸提升，飲食趨向多樣化，而來皮膚科就診的過敏患者大部分都是有明顯癥狀，已經(jīng)影響到正常生活，所以飲食上都會有意識地避免海產(chǎn)品的攝入，干擾了研究結(jié)果。當(dāng)體內(nèi)抗原達不到可以檢測的水平，會造成假陰性結(jié)果，但即使某種食入性變應(yīng)原檢測結(jié)果是陰性，在生活中當(dāng)處于過敏狀態(tài)時也應(yīng)避免攝入容易引起過敏的食物。

本研究結(jié)果還顯示，在不同類型皮膚過敏性疾病中，蕁麻疹的變應(yīng)原總陽性率(62.73%)最高，其次是過敏性皮炎(54.70%)，最后是濕疹(48.20%)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。其中蕁麻疹患者主要對戶塵螨、牛奶、樹木組合、霉菌組合、腰果過敏，過敏性皮炎患者主要對戶塵螨、霉菌組合、牛奶、樹木組合、蟑螂過敏，濕疹患者主要對戶塵螨、霉菌組合、腰果、蟑螂、牛奶過敏，除了戶塵螨、霉菌組合差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)外，其他變應(yīng)原在不同類型皮膚過敏性疾病中差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。在本研究中，不同類型皮膚過敏性疾病霉菌組合的陽性率均較高，可能與當(dāng)?shù)氐臍夂虺Ｄ隃嘏睗?，容易滋長霉菌有關(guān)，這與相關(guān)報道一致[16-17]。同時腰果在本研究中排名也比較靠前，國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)腰果中含有多種變應(yīng)原，其中腰果中Ana o 3基因是腰果的主要變應(yīng)原，在美國，不管是兒童還是成人，腰果過敏已成為一個嚴峻的臨床問題，是食物過敏的主要因素之一，會引起嚴重的皮膚過敏[18-19]。腰果引起的過敏常見有蕁麻疹、過敏性皮炎、過敏性休克等，所以在皮膚科就診的過敏患者中腰果檢出率相對較高。腰果是世界四大干果之一，以美味、營養(yǎng)價值高廣受人們歡迎，同時相比花生、蠶豆，其致敏率更高。近年國內(nèi)經(jīng)濟水平快速提高，食用腰果人群增加，腰果的檢出率也隨之增加，過敏患者應(yīng)更加慎重食用腰果。

綜上所述，廈門地區(qū)皮膚過敏性疾病的主要變應(yīng)原為戶塵螨、霉菌組合、牛奶、樹木組合、腰果。特異性IgE抗體的陽性分布受性別、年齡、季節(jié)、地域、環(huán)境及皮膚過敏性疾病等因素影響而呈現(xiàn)一定的分布特點及規(guī)律，為該地區(qū)皮膚過敏性疾病的預(yù)防和治療提供參考依據(jù)。