豬偽狂犬病防治的研究進展

王久余

（遼寧省凌源市城郊動物衛(wèi)生監(jiān)督所 122500）

豬偽狂犬病首次在我國報道是1947 年，自那以后我國的多個省市均有此病的發(fā)生。豬偽狂犬病被世界動物衛(wèi)生組織列為B 類傳染病，該病毒能感染除短尾猿外的大多數(shù)哺乳動物，自然宿主為豬。2011 年后，豬偽狂犬病病毒變異毒株開始在中國流行，變異毒株相較于普通毒株，具有毒力增強、抗原變異的特點[1]，嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展，這也給豬偽狂犬病的綜合防控帶來一定的挑戰(zhàn)。

1 病原學

豬偽狂犬病毒是皰疹病毒科、甲型皰疹病毒亞科的成員之一，屬于豬皰疹病毒I 型，病毒粒子呈球形，直徑為150～180nm，其核衣殼直徑為105～110nm，形態(tài)由芯髓、衣殼、中間質(zhì)層和囊膜組成，囊膜表面有放射狀纖突，是線狀雙鏈DNA 病毒。目前已知的豬偽狂犬病毒僅有一個血清型，但不同毒株的毒力和生物學特性都有一定的差異。該病毒有泛噬性，可以在多個組織和細胞中進行增值，并且能造成細胞病變，在核內(nèi)生成嗜酸性包涵體。豬偽狂犬病毒對環(huán)境的抵抗能力較強，55℃下存活50min，80℃下存活3min，但100℃能瞬間殺滅本病毒，在干燥和陽光直射條件下能使病毒失活，常用的化學消毒劑如乙醚、氯仿等也可殺滅病毒。

近年來，對其各基因功能的研究已成為國內(nèi)外學者研究的熱點，尤其是一些病毒復制的非必須基因，常見的毒力基因，缺失這些基因的基礎(chǔ)上，自身病毒的毒力雖然顯著降低甚至消失，但仍然能刺激機體產(chǎn)生免疫力，這一發(fā)現(xiàn)為開展基因工程疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。以PRV 最主要的毒力基因TK 為例，與病毒的增殖不相關(guān)，但其缺失能引起病毒毒力大大降低，病毒在神經(jīng)組織中和的復制能力和外周神經(jīng)到腦的傳播能力都顯著降低。因此，缺失TK 基因的PRV 毒株，會被廣泛應用到PRV 基因缺失疫苗的研究中。

2 流行病學

豬偽狂犬病毒能造成多種動物的感染。如黃牛、水牛、羊、犬貓、兔子、鼠類等都可以通過自然感染本病，馬屬動物對本病有極強的抵抗力，對豬而言，任何生長階段、任何品種的豬均能感染本病毒。豬偽狂犬病主要的傳播途徑是消化道和呼吸道，也可通過交配和胎盤傳播，直接接觸和間接接觸均會發(fā)生感染，由于母豬的免疫球蛋白不能通過胎盤屏障進入胎兒體內(nèi)，所以當懷孕母豬感染豬偽狂犬病后胎兒的感染往往是致命的。

3 臨床癥狀

偽狂犬病毒的臨診主要取決于感染病毒的毒力、感染量和感染豬的年齡，尤其是新生仔豬感染最為嚴重。初生仔豬偽狂犬病例多數(shù)是胚胎期感染的，出生后第一天表現(xiàn)正常，第二天出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀、哺乳困難、抽搐、昏睡、拉稀，口角出現(xiàn)大量泡沫和唾液，聽到聲音興奮發(fā)出鳴叫聲，站立不穩(wěn)，肌肉震顫，進一步發(fā)展為四肢運動不協(xié)調(diào)，頭向后仰，四肢劃水，死亡率非常高，3～5d 內(nèi)是死亡的高峰期。初期以神經(jīng)癥狀為主，后期以麻痹為主，最常見的是間歇性抽搐，肌肉痙攣。70 日齡后育肥豬，發(fā)育稍微健全，抵抗病毒的能力加強，較仔豬發(fā)病較輕，初期感染的消化道癥狀比較明顯，被毛粗亂，沒有光澤，發(fā)育遲緩，采食和精神狀態(tài)無明顯異常，部分病例1個月左右便會自愈，若繼發(fā)其他疾病感染，如乙型腦炎，神經(jīng)癥狀明顯，四肢不協(xié)調(diào)，搖擺不定，站立不穩(wěn)且困難；若繼發(fā)豬瘟時，會表現(xiàn)胃腸潰瘍，肝臟和腎臟出血嚴重；繼發(fā)藍耳病，出現(xiàn)肺部“蝦肉樣”病變；繼發(fā)豬圓環(huán)病毒，膽囊和尾部病變明顯。成年豬常常呈隱性感染，體溫稍微有點高，精神不振，很少見神經(jīng)癥狀，容易恢復。妊娠期母豬受胎40d 以上會發(fā)生流產(chǎn)、死胎和木乃伊胎等，產(chǎn)下的仔豬身體瘦弱，一般在2～3d 后死亡，流產(chǎn)率為50%。一旦發(fā)生該病，還會造成種豬不育癥，出現(xiàn)睪丸腫大，萎縮，精液質(zhì)量下降，失去配種能力。母豬有時出現(xiàn)厭食和便秘，多呈一過性或亞臨床感染，屢配不孕，返情率較高，很少死亡。

4 病理變化

偽狂犬病毒感染主要見腎臟有拇指大、邊緣整齊的灰白色壞死灶，上呼吸道黏膜和扁桃體充血水腫，胃腸黏膜可看見卡他性炎癥出血。剖檢有臨床癥狀的仔豬會觀察到腦膜明顯充血和腦脊髓液量過多。組織學病變主要是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的彌散性非化膿性腦膜腦炎及神經(jīng)節(jié)炎，在腦神經(jīng)細胞內(nèi)、鼻咽黏膜、脾及淋巴結(jié)的淋巴細胞內(nèi)可見核內(nèi)嗜酸性包涵體和出血性炎癥[2]。

5 診斷技術(shù)

該病的臨床癥狀與豬細小病毒病、豬繁殖障礙與呼吸綜合征及豬布氏桿菌病等多個疾病的癥狀相類似，故診斷時應采用實驗室診斷法。實驗室診斷時可選擇病毒分離鑒定、血清學診斷或分子生物學診斷技術(shù)，病毒分離鑒定是在無菌條件下采集患病豬的腦組織、扁桃體、肝臟、腎臟、脾臟等組織接種于雞胚細胞、豬腎細胞等內(nèi)，經(jīng)培養(yǎng)后進行HE 染色，當核內(nèi)有酸性包涵體時可以判定為豬偽狂犬病感染，這種方法能根據(jù)蝕斑大小判斷毒株的毒力情況，且結(jié)果最為準確，但由于體外培養(yǎng)對環(huán)境和操作人員的要求較高，故不經(jīng)常在臨床中使用。血清學診斷的主要方法有血清中和試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、乳膠凝集試驗、間接免疫熒光試驗等。在以上方法中，血清中和試驗的特異性和敏感性最高，但操作的要求也最高，工作量大，同時也受技術(shù)條件的限制，實際應用比較少，相比之下酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的特異性和敏感性都能達到檢驗要求，且操作便捷，能多樣品同時檢驗，有效協(xié)助養(yǎng)殖場疫病監(jiān)測，在臨床實踐中應用最廣。血凝和徐寧抑制試驗雖能同時進行大量的樣品監(jiān)測，操作中受到人為因素和操作技術(shù)等原因的影響，其試驗結(jié)果往往不穩(wěn)定，會出現(xiàn)誤差。分子生物學診斷技術(shù)主要包括核酸探針技術(shù)、PCR 技術(shù)等。分子生物學的特異性和敏感性都要比血清學診斷強，可用于病原體的診斷，對動物的細菌、病毒、支原體和衣原體等均可通過PCR 方法進行檢測，敏感性強，檢測結(jié)果更為準確。高精準檢測出偽狂犬潛伏期和發(fā)病期的病毒，為快速降低豬場偽狂犬病毒發(fā)生風險具有重要意義。

6 綜合防控措施

（1）預防本病發(fā)生首先要消滅場區(qū)中的鼠類，還要嚴格控制犬、貓、鳥類和其他禽類進入場區(qū)，同時嚴格控制人員來往，禁止進入生產(chǎn)區(qū)，全進全出和分階段的飼養(yǎng)模式能在控制疾病上起至關(guān)重要的作用。做好場區(qū)周邊環(huán)境和舍內(nèi)環(huán)境的消毒工作，有條件的場區(qū)可以進行血清學監(jiān)測，做血清中和試驗，排查陽性病豬，隔離并無害化處理。每隔一段時間檢測一下，直至連續(xù)2 次全部轉(zhuǎn)為陰性結(jié)果，最終建立新的無病豬群。

（2）保持豬舍通風順暢，冬季保溫、夏季降溫的舒適的環(huán)境，做好清潔和消毒工作，及時清理糞便，避免產(chǎn)生有毒氣體。

（3）由于豬偽狂犬病沒有特效藥物可供使用，應本著預防為主的原則進行防控，其中最主要的方法是進行免疫接種，接種途徑主要包括肌肉注射、滴鼻等，在臨床上肌肉注射的方法更為常見，但滴鼻免疫能有效回避母源抗體干擾，減少潛伏感染。近年來，國內(nèi)外學者已經(jīng)研制出預防該病的多種疫苗，主要包括常規(guī)弱毒疫苗、滅活疫苗、基因缺失弱毒疫苗、基因缺失滅活疫苗及病毒載體重組基因疫苗等，重組疫苗目前仍處于實驗室研究階段，沒有應用于臨床實踐中。滅活疫苗主要是將強毒接種到敏感細胞，細胞出現(xiàn)變化后提取其中病毒，通過有效的方式殺死偽狂犬病毒，在利用佐劑做出針對性較強的疫苗，滅活疫苗安全性較高，不會因免疫接種而導致疫病的發(fā)生，但由于滅活疫苗不能把內(nèi)源性蛋白抗原提呈于免疫系統(tǒng)，所以細胞毒T 細胞反應較弱，免疫效果較難保證。弱毒疫苗則是將野毒株進行人工致弱后得到的疫苗，我國目前使用最為廣泛的疫苗就是中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所研制的PR 弱毒凍干疫苗，這是一種gI/gE 雙基因缺失疫苗，這一疫苗免疫原性較高，生產(chǎn)成本低，基因缺失疫苗避免了反毒現(xiàn)象的發(fā)生，安全性也有了保障?；蚬こ倘笔б呙缰饕抢没蚬こ碳夹g(shù)在病毒基因組中插入或缺失一段序列使病毒的一些基因不能表達，這樣既能使病毒毒力減弱，還能保持其免疫原性，從而達到誘導機體免疫應答，達到預防疾病的目的。除此之外，免疫刺激復合物是近些年來研制出的一種亞單位疫苗，能有效實現(xiàn)抗原遞呈作用，還能有效增強機體的免疫，在偽狂犬病種的防治具有非常好的應用前景。核酸疫苗、重組疫苗、亞單位疫苗等其他形式的疫苗也均在積極研發(fā)當中，隨著科技的不斷進步和分子生物學、基因工程學的不斷發(fā)展，基因工程疫苗必然會為根除豬偽狂犬病貢獻力量。

7 結(jié)論

豬偽狂犬病目前尚無特效藥，主要以預防為主，藥物為輔的原則[3]，綜合防控，建立嚴格的消毒、免疫、驅(qū)蟲和飼養(yǎng)管理制度，提高防控水平，確保豬群的健康狀況，做到早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早治療，現(xiàn)在已成功研制出多種弱毒疫苗，對該病的預防起到積極作用。陽性豬只不能作為種用，杜絕本病的發(fā)生和傳播，才能有效保障養(yǎng)殖者的經(jīng)濟效益，促使畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展。