楊東 陳青

血型抗原通常指人類紅細(xì)胞表面特異性抗原，是由目前已鑒定的血型基因位點(diǎn)遺傳多態(tài)性引起的遺傳特征，這些特異性抗原通常是具有重要功能的蛋白質(zhì)或糖蛋白[1-2]。血型研究在輸血安全、胎兒和新生兒溶血性疾病、器官移植等方面具有重要意義，同時(shí)由于部分血型系統(tǒng)的抗原陰性表達(dá)代表著相應(yīng)編碼基因的“自然敲除”，這有助于加深我們對該基因及其編碼蛋白功能的理解，也能促進(jìn)相關(guān)功能蛋白代償機(jī)制的研究[3]。

血型的正確鑒定是安全有效輸血的前提。自從1900年Karl Landsteiner發(fā)現(xiàn)ABO血型系統(tǒng)，1927年發(fā)現(xiàn)了MNS和P血型系統(tǒng)，1945年間接抗球蛋白技術(shù)應(yīng)用后，又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了更多的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，到2010年發(fā)現(xiàn)了30個(gè)紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。國際輸血協(xié)會(huì)紅細(xì)胞免疫遺傳和血型術(shù)語工作組（ISBT Working Party on Red Cell Immunogenetics and Blood Group Terminology）負(fù)責(zé)對紅細(xì)胞血型系統(tǒng)及相關(guān)抗原和等位基因命名，新的血型系統(tǒng)確定時(shí)需滿足以下5個(gè)條件：①抗原必須由人同種異體抗體定義；②該抗原必須具有遺傳特征；③編碼他的基因必須經(jīng)過鑒定和測序；④必須知道該基因的染色體位置；⑤該基因必須不同于編碼現(xiàn)有血型系統(tǒng)抗原的所有其他基因，不是緊密連鎖的同源基因。隨著下一代基因組測序（Next Generation Sequencing，NGS）技術(shù)的迅猛進(jìn)展，僅2020年，就正式命名了5個(gè)新的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。截至2021年6月，共確定了43個(gè)紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，378個(gè)抗原，其中345個(gè)抗原屬于43個(gè)紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，16個(gè)屬于700低頻率抗原，3個(gè)屬于901高頻率抗原，14個(gè)屬于集合系統(tǒng)抗原。本篇綜述主要圍繞2020年得到正式命名的CTL2 （ISBT 039）、PEL（ISBT 040）、MAM （ISBT 041）、EMM （ISBT 042）、ABCC1 （ISBT 043）這5個(gè)血型系統(tǒng)的研究進(jìn)展進(jìn)行論述。

1 CTL2 （ISBT 039） 血型系統(tǒng)研究進(jìn)展及其臨床意義

1.1 發(fā)現(xiàn)歷史：CTL2血型系統(tǒng)目前發(fā)現(xiàn)兩種抗原，分別是VER（ISBT 039.001） 抗原和RIF（ISBT 039.002） 抗原。RIF抗原陰性先證者最早發(fā)現(xiàn)于2007年，是一名出生在摩洛哥Rif海岸的比利時(shí)婦女，在第二次懷孕中查出她的血清與當(dāng)時(shí)所有測試的紅細(xì)胞均發(fā)生反應(yīng)，抗體效價(jià)檢測顯示高效價(jià)低親和力（high-titer，low-avidity，HTLA），隨后產(chǎn)下一名健康男嬰。VER抗原陰性先證者是一名出生在維羅納的意大利血統(tǒng)法國婦女，2010年因摔傷導(dǎo)致腦出血住院時(shí)發(fā)現(xiàn)她的血清與當(dāng)時(shí)所有測試的紅細(xì)胞均發(fā)生反應(yīng)，未發(fā)現(xiàn)該抗體的特異性抗原。血清學(xué)檢測顯示RIF抗原陰性個(gè)體的血清不與VER抗原陰性個(gè)體的紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，但VER抗原陰性個(gè)體的血清卻與RIF抗原陰性個(gè)體的紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，說明RIF抗體與VER抗體并不相同[4]。

1.2 遺傳學(xué)研究：VRIGNAUD等[4]對RIF抗原和VER抗原的遺傳學(xué)進(jìn)行了研究，對RIF抗原陰性個(gè)體進(jìn)行全外顯子測序（whole exome sequencing，WES），結(jié)果顯示RIF抗原陰性個(gè)體SLC44A2基因中第1 192位堿基C被A取代，第398位氨基酸的脯氨酸被替換為蘇氨酸（c.1192C＞A， p.Pro398Thr），變異染色體坐標(biāo)為19:10746156，RIF抗原陰性先證者SLC44A2（c.1192C＞A， p.Pro398Thr）為純合子變異，她的孩子及兄弟為SLC44A2（c.1192C＞A，p.Pro398Thr）雜合子變異，表型為RIF抗原陽性，因此RIF抗原陽性個(gè)體基因型為顯性等位基因純合子或雜合子，RIF抗原陰性個(gè)體基因型為隱性等位基因純合子。分別將野生型和c.1192C＞A變異型SLC44A2基因通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至鼠L-929細(xì)胞，通過RIF抗體血清對其進(jìn)行分析，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染了正常SLC44A2基因的細(xì)胞表達(dá)RIF抗原，而后者則無RIF抗原表達(dá)，證明SLC44A2（c.1192C＞A，p.Pro398Thr）變異是導(dǎo)致RIF抗原陰性表達(dá)的原因；經(jīng)全外顯子測序、引物步移法（primer walking）、拷貝數(shù)變異分析（copy number variation，CNV）、Sanger測序顯示VER抗原陰性個(gè)體雖未發(fā)生c.1192C＞A變異，但它前14個(gè)外顯子以及5' UTR區(qū)域出現(xiàn)純合缺失，這種變異導(dǎo)致SLC44A2基因表達(dá)完全缺失，VER抗原陰性先證者的姐姐為SLC44A2雜合缺失，表型為VER抗原陽性，因此VER抗原陽性個(gè)體基因型為顯性等位基因純合子或雜合子，VER抗原陰性個(gè)體基因型為隱性等位基因純合子。

1.3 臨床意義：SLC44A2基因位于染色體19p13.2，具有22個(gè)外顯子，共編碼706個(gè)氨基酸[5]，編碼產(chǎn)物為膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)樣蛋白2（choline transporter-like protein 2，CTL2）。SLC44A2基因多態(tài)性與多種疾病有關(guān)。

輸血相關(guān)急性肺損傷（transfusion-related acute lung injury，TRALI）是輸血期間或輸血后6小時(shí)內(nèi)發(fā)生的以低氧血癥和急性非心源性肺水腫為特點(diǎn)的臨床呼吸窘迫綜合征[6]。SLC44A2基因編碼的人類中性粒細(xì)胞抗原3（HNA-3a）被認(rèn)為是導(dǎo)致TRALI的重要抗體靶標(biāo)，在CTL2轉(zhuǎn)錄變體TV1（P2）和TV2（P1）中，TV1具有膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)活性，TV2無此活性，但二者與HNA-3a抗體結(jié)合的能力相同[7]。GREINACHER等[8]研究顯示HNA-3a抗體可通過Fab端與CTL2第一個(gè)外環(huán)特異性結(jié)合，誘導(dǎo)表達(dá)HNA-3a抗原的中性粒細(xì)胞主動(dòng)聚集而參與TRALI的發(fā)生，VRIGNAUD等研究表明VER抗體和RIF抗體均能特異性識別中性粒細(xì)胞上的CTL2蛋白（工作組內(nèi)部交流內(nèi)容，暫未發(fā)表），但其能否引起TRALI還需進(jìn)一步研究。

KOMMAREDDI等[9]在小鼠實(shí)驗(yàn)中證明了CTL2蛋白對維持毛細(xì)胞生存具有重要作用，SLC44A2基因純合、雜合敲除小鼠出現(xiàn)了不同程度的年齡相關(guān)高頻聽力丟失，并伴隨毛細(xì)胞和螺旋神經(jīng)細(xì)胞損傷，VER抗原陰性先證者及其姐姐（VER抗原陽性，SLC44A2雜合缺失）均出現(xiàn)了類似高頻范圍雙側(cè)感知性聽力障礙[4]。

CTL2功能目前尚未完全清楚，其中一項(xiàng)重要功能是轉(zhuǎn)運(yùn)膽堿，膽堿對線粒體呼吸功能具有重要作用，BENNETT等[10]提出CTL2可介導(dǎo)膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體內(nèi)，其在線粒體內(nèi)的代謝產(chǎn)物通過調(diào)節(jié)ATP及ROS釋放來促進(jìn)血小板活化，但目前并沒有關(guān)于VER抗原陰性個(gè)體血小板功能異常的相關(guān)報(bào)道，可能是某些機(jī)制彌補(bǔ)了VER抗原陰性個(gè)體缺陷的CTL2蛋白功能所致。

2 PEL（ISBT 040）血型系統(tǒng)研究進(jìn)展及臨床意義

2.1 發(fā)現(xiàn)歷史：1980年DANIELS最早描述了PEL抗原。PEL抗原陰性先證者是一名法裔加拿大婦女，在第二次懷孕期間經(jīng)抗體篩查被查出，無輸血史，嬰兒未發(fā)生新生兒溶血病，其父母、12個(gè)兄弟姐妹及兩個(gè)孩子的紅細(xì)胞均與該抗體發(fā)生反應(yīng)；接著又在名為Hugs的法裔加拿大婦女體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了PEL抗體，其三個(gè)兄弟姐妹的紅細(xì)胞與該抗體不發(fā)生反應(yīng)，但沒有一個(gè)相容同胞體內(nèi)有PEL抗體。由于當(dāng)時(shí)遺傳學(xué)證據(jù)并不清楚，國際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）將其暫時(shí)編號為901014[11]。

2.2 遺傳學(xué)研究：AZOUZI等[12]對三名PEL抗原陰性個(gè)體的紅細(xì)胞膜進(jìn)行全蛋白質(zhì)組學(xué)分析，結(jié)果顯示三者紅細(xì)胞膜上均無ABCC4/MRP4蛋白，通過拷貝數(shù)變異分析、Sanger測序、引物步移法確定了PEL抗原陰性個(gè)體中ABCC4基因出現(xiàn)67 528 bp的純合缺失，去除了最后10個(gè)外顯子和下游3'UTR區(qū)域的一部分，同時(shí)伴隨著18 bp的核苷酸插入。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示穩(wěn)定轉(zhuǎn)染ABCC4cDNA的HEK293細(xì)胞PEL抗原表達(dá)增加，通過CRISPR-Cas9技術(shù)敲除HEK293細(xì)胞的ABCC4基因完全消除了PEL抗原表達(dá)，證明ABCC4基因大量純合缺失是PEL抗原陰性表型的原因，由于PEL抗原血清學(xué)及遺傳學(xué)已經(jīng)清楚，國際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）將其正式命名為第40號PEL血型系統(tǒng)。

ABCC4基因位于染色體13q32.1，有32個(gè)外顯子，dbSNP數(shù)據(jù)庫中存有超過400多個(gè)ABCC4非同義單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）[13]，AZOUZI等[12]研究了rs11568658（p.G187W）、rs2274407（p.K304N）、rs3765534（p.E757K）三種SNP對紅細(xì)胞表面PEL抗原表達(dá)的影響，結(jié)果顯示三種SNP分別使紅細(xì)胞表面PEL抗原表達(dá)降低了16%、30%和33%，說明ABCC4基因雜合變異可能會(huì)影響PEL抗原表達(dá)。該基因編碼的多藥耐藥蛋白ABCC4/MRP4屬于ATP結(jié)合盒（ATP-binding cassette，ABC）轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成員，在血細(xì)胞、肝、腎、肺等多種組織中表達(dá)[13]，ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白有保守功能域和可變跨膜結(jié)構(gòu)域，用于結(jié)合和水解運(yùn)輸能源ATP并與底物結(jié)合[14]，該蛋白通過水解ATP產(chǎn)生能量將多種分子輸送至細(xì)胞外，具有轉(zhuǎn)運(yùn)信號分子和炎癥介質(zhì)的能力，與多種藥物耐藥性有關(guān)[15]。

2.3 臨床意義：目前尚無因PEL抗體引起的胎兒和新生兒溶血病例的報(bào)道，在不相容輸血情況下的臨床意義不明，但有研究顯示在輸注PEL抗原抗體不相容的血液時(shí)51Cr標(biāo)記的紅細(xì)胞生存率降低[11-12]，因此還需進(jìn)一步研究。

ABCC4蛋白在血小板致密顆粒中發(fā)揮作用，CHEEPALA等[16]研究顯示ABCC4蛋白在血小板主要表達(dá)于質(zhì)膜，在缺乏ABCC4情況下血小板致密顆粒的功能、體積、數(shù)量不受影響，但膠原蛋白誘導(dǎo)的血小板聚集出現(xiàn)損傷，ABCC4蛋白還可通過cAMP蛋白激酶A信號通路來調(diào)節(jié)血小板聚集[17]。PEL抗體是目前唯一可以檢測到細(xì)胞膜表面ABCC4蛋白的探針，AZOUZI等[12]發(fā)現(xiàn)PEL抗原陰性個(gè)體血小板計(jì)數(shù)正常，膠原蛋白誘導(dǎo)的血小板聚集功能也正常，可能是某些代償機(jī)制彌補(bǔ)了ABCC4蛋白相應(yīng)的功能，PEL抗原陰性個(gè)體紅細(xì)胞膜中ABCG2蛋白表達(dá)升高，支持這一假設(shè)，作者還發(fā)現(xiàn)PEL陰性個(gè)體血小板在低ADP濃度時(shí)聚集出現(xiàn)損傷，提示ABCC4在血小板聚集的潛在作用。血小板高反應(yīng)性往往與血栓、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)，TEMPERILLI等[18]報(bào)告了骨關(guān)節(jié)炎患者血小板ABCC4高表達(dá)與血小板高反應(yīng)性存在關(guān)聯(lián)，提示ABCC4可能在防治血栓、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病中發(fā)揮作用。

3 MAM （ISBT 041） 血型系統(tǒng)研究進(jìn)展及其臨床意義

3.1 發(fā)現(xiàn)歷史：MAM血型系統(tǒng)目前發(fā)現(xiàn)一種抗原，即MAM抗原，1993年ANDERSON等最早報(bào)告了MAM抗原陰性的先證者（M.A.M），該患者血清中含有未知抗體，與除她自己外所有測試的紅細(xì)胞均發(fā)生反應(yīng)，1997年MONTGOMERY等[19]報(bào)告了第二例血清中有MAM抗體的實(shí)例，該婦女血清與除她自己和M.A.M外所有測試的紅細(xì)胞均發(fā)生反應(yīng)，隨后又在該婦女的姐姐體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了MAM抗體。由于當(dāng)時(shí)沒有明確的遺傳學(xué)證據(jù)，這種抗原被以先證者的名字命名為MAM抗原，ISBT編號為901016。

3.2 遺傳學(xué)研究：對MAM抗原陰性個(gè)體的家系研究顯示缺乏MAM抗原的遺傳特征是常染色體隱性遺傳[19]，THORNTON等[20]對10名MAM抗原陰性個(gè)體進(jìn)行全外顯子及Sanger測序，結(jié)果顯示這10名MAM抗原陰性個(gè)體的EMP3基因均存在純合變異（包括全外顯子缺失、單外顯子缺失、堿基替換等），其中c.123C＞G（p.Tyr41Ter）變異最為常見，這些變異均使EMP3基因的表達(dá)發(fā)生實(shí)質(zhì)性改變或完全破壞，而對MAM抗原陰性個(gè)體的親屬（MAM抗原陽性）測序顯示EMP3基因?yàn)殡s合變異，與之前的家系研究結(jié)果一致。隨后通過CRISPR-Cas9基因敲除技術(shù)將人類永生化紅細(xì)胞系BEL-A2的EMP3基因敲除，結(jié)果顯示BEL-A2的MAM抗原表達(dá)完全缺失，證明EMP3為MAM抗原的編碼基因。由于MAM抗原的血清學(xué)及遺傳學(xué)已經(jīng)清楚，ISBT正式將其命名為第41號MAM血型系統(tǒng)。

EMP3基因位于19q13.3，具有6個(gè)外顯子，基因編碼區(qū)位于外顯子3-6，該基因編碼產(chǎn)物為上皮膜蛋白3（Epithelial membrane proteins 3，EMP3），是外周髓鞘蛋白22（Peripheral myelin protein 22-kDa，PMP22）超家族成員，是一個(gè)18 429 kDa的多通道膜蛋白，具有四個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和兩個(gè)N-連接糖基化位點(diǎn)，分子結(jié)構(gòu)具有蛋白質(zhì)激酶C磷酸化位點(diǎn)等特征[21-22]。EMP3基因功能目前尚未完全清楚，有研究顯示其在膽囊癌中下調(diào)激活了MAPK/ERK信號通路，從而促進(jìn)了腫瘤的進(jìn)展[23]，顯示出EMP3在腫瘤細(xì)胞增殖中具有一定的調(diào)控作用。

3.3 臨床意義：MONTGOMERY等[19]報(bào)道了第一例因MAM抗體引起嚴(yán)重的新生兒溶血?。╤emolytic disease of newborn，HDN）的案例，但是否會(huì)引起溶血性輸血反應(yīng)目前尚未報(bào)道，不過在輸注不相容同種異體紅細(xì)胞后MAM抗體可能會(huì)縮短紅細(xì)胞的生存時(shí)間，因此MAM抗體被認(rèn)為是具有臨床意義的抗體。

4 EMM（ISBT 042）血型系統(tǒng)研究進(jìn)展及其臨床意義

4.1 發(fā)現(xiàn)歷史：DANIELS等[24]最早報(bào)道了Emm抗原陰性先證者的案例，1973年，一名出生在馬達(dá)加斯加的法國裔男子在常規(guī)血液檢查時(shí)發(fā)現(xiàn)血清中存在針對高頻抗原的未知抗體，他的三個(gè)姐妹的紅細(xì)胞均與他的血清發(fā)生反應(yīng)，無輸血史，隨后又分別在一名美國婦女、一名巴基斯坦男子體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了同樣的抗體；1985年，在一對加拿大裔法國兄弟體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了同樣抗體，兩人均無輸血史，提示該抗原具有遺傳特征，由于缺少確切遺傳學(xué)證據(jù)，國際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）將其暫時(shí)編號為901008。

4.2 遺傳學(xué)研究：DUVAL等[25]對3名Emm抗原陰性個(gè)體基因組進(jìn)行全外顯子測序，結(jié)果顯示這三名Emm陰性個(gè)體PIGG基因均存在純合變異，三者變異位點(diǎn)分別為c.640C＞T（p.His214Tyr）、c.901+1delG和PIGG基因4kb的缺失導(dǎo)致外顯子6去除。用特異性抗-Emm抗體放散液對Emm抗原陰性個(gè)體紅細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，PIGG基因變異的紅細(xì)胞不存在Emm抗原；通過CRISPR-Cas9技術(shù)敲除K562細(xì)胞中的PIGG基因，結(jié)果顯示Emm抗原表達(dá)顯著降低，轉(zhuǎn)染PIGG（c.640C＞T; p.His214Tyr）的cDNA不會(huì)使Emm抗原表達(dá)增強(qiáng)，而轉(zhuǎn)染正常PIGGcDNA Emm抗原表達(dá)增強(qiáng)。LANE等[26]隨后報(bào)道了5位Emm抗原陰性個(gè)體PIGG基因分別出現(xiàn)了c.2624_2625delTA （p.Leu875*）、g.5982_11944del （p.Ala53Glyfs*2）、g.24216_30561del （p.Asp372Alafs*18）、c.361-51_383delinsGACTT （p.Ala121_Pro128delinsAspPhe）、c.1640G＞A （p.Trp547*）純合變異，以上研究證實(shí)了PIGG基因?yàn)镋mm抗原表達(dá)的遺傳基礎(chǔ)，國際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）將其正式命名為第42號Emm血型系統(tǒng)。

PIGG基因位于染色體4p16.3，具有18個(gè)外顯子。糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol，GPI）是一種可將150多種蛋白錨定在細(xì)胞表面的糖脂，形成的GPI錨定蛋白（GPI-AP）在細(xì)胞表面上具有重要作用，與GPI生物合成有關(guān)的基因稱為磷脂酰肌醇聚糖（phosphatidylinositol glycan，PIG）基因，與蛋白質(zhì)附著后GPI修飾有關(guān)的基因稱為PGAP（Post-GPI attachment to proteins）基因[27]，PIGG又稱為磷脂酰肌醇聚糖錨定生物合成G類，其編碼產(chǎn)物是可將乙醇胺磷酸酯（EtNP）與第二個(gè)甘露糖連接的酶，目前在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的生物學(xué)功能還未完全清楚[28]。

4.3 臨床意義：具有Emm抗體的個(gè)體在輸入不相容血液時(shí)會(huì)引起嚴(yán)重急性溶血性輸血反應(yīng)[26]，但目前尚無因Emm抗體導(dǎo)致新生兒溶血病的報(bào)道。2014年WAGNER等[29]報(bào)道了一名體內(nèi)含有Emm抗體的孕婦，該名婦女產(chǎn)下的男嬰未出現(xiàn)新生兒溶血性疾病，雖然該孕婦的抗體依賴性細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果低于10%，提示出現(xiàn)胎兒和新生兒溶血性疾病的可能性較低[30]，但作者認(rèn)為該抗體屬IgG抗體，具有導(dǎo)致胎兒和新生兒溶血性疾病的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)由于缺乏其他類似案例報(bào)道，作者建議有Emm抗體存在的婦女在妊娠中應(yīng)對胎兒加強(qiáng)監(jiān)測。Emm抗原陰性個(gè)體罕見，LANE等[26]根據(jù)相關(guān)等位基因頻率推測人群中每877 969人才有一例。由于成纖維細(xì)胞對GPI合成中的致病性變異尤其是與PIGG有關(guān)的變異較為敏感，作者提出其可能在未來篩查Emm抗原陰性個(gè)體中發(fā)揮作用。

MAKRYTHANASIS等[28]報(bào)道了5例因PIGG基因變異導(dǎo)致癲癇和重度肌張力低下的智力障礙病例，遺傳性GPI缺乏癥（IGD）的各種癥狀通常由GPI-APs表面水平降低或GPI結(jié)構(gòu)異常引起，但PIGG基因變異導(dǎo)致的癲癇和重度肌張力低下的智力障礙患者體內(nèi)GPI-APs表面水平和GPI結(jié)構(gòu)均正常。與其他PIG不同，PIGG不是GPI-AP生物合成所必需的，其編碼產(chǎn)物將乙醇胺磷酸酯與第二個(gè)甘露糖連接，但磷酸二酯酶PGAP5隨后將第二個(gè)甘露糖上的EtNP去除[31]，因此EtNP在成熟的GPI-APs不存在。PARSAMANESH等[32]報(bào)道了伊朗家庭中因PIGG編碼產(chǎn)物第658位氨基酸由精氨酸被替換為谷氨酰胺（p.Arg658Gln）導(dǎo)致智力障礙病例，但目前PIGG缺陷導(dǎo)致智力障礙的分子機(jī)制并不清楚，因此PIGG與智力障礙之間的關(guān)系還需進(jìn)一步研究。

5 ABCC1（ISBT 043）血型系統(tǒng)研究進(jìn)展及其臨床意義

5.1 發(fā)現(xiàn)歷史：2017年10月，在一名25歲混血（美國、非洲、歐洲）的巴西男性患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了一種針對高頻抗原的未知抗體，該患者9歲時(shí)被診斷為腎病，16歲時(shí)進(jìn)行了腎移植，有輸血史。該先證者的父母是第一代堂（表）兄妹，其妹妹紅細(xì)胞與其抗體不相容，而兩個(gè)弟弟的紅細(xì)胞與其抗體相容，提示該抗原缺失具有遺傳特征。

5.2 遺傳學(xué)研究：SUGIER等[33]對ABCC1抗原陰性先證者及其兩個(gè)弟弟（ABCC1抗原陰性）、妹妹（ABCC1抗原陽性）進(jìn)行全外顯子組測序，通過拷貝數(shù)變異分析、引物步移法、Sanger測序顯示ABCC1抗原陰性個(gè)體的ABCC1基因中存在包括5個(gè)外顯子（從內(nèi)含子21-26），總共212 496 bp的大片段純合缺失，而其妹妹為ABCC1該片段的雜合缺失，通過等位基因特異性PCR證實(shí)先證者父母ABCC1基因?yàn)殡s合缺失，說明ABCC1抗原陰性表型為常染色體隱性遺傳。Western blot分析顯示先證者紅細(xì)胞膜中缺失ABCC1蛋白，將ABCC1基因轉(zhuǎn)染至K562細(xì)胞中，用先證者抗體放散液對其進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，ABCC1蛋白是先證者抗體針對的特異性蛋白，證明該抗原表達(dá)的遺傳學(xué)基礎(chǔ)是ABCC1基因，由于遺傳學(xué)證據(jù)已經(jīng)清楚，國際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）將其正式命名為第43號ABCC1血型系統(tǒng)。

ABCC1基因位于16p13.11，具有34個(gè)外顯子，其編碼產(chǎn)物為多藥耐藥蛋白1（multidrug resistance-associated protein 1，MRP1），是ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成員，具有三個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和兩個(gè)核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域[34-36]，該蛋白可介導(dǎo)釋放外源性和內(nèi)源性有機(jī)陰離子，還可通過主動(dòng)外排減少細(xì)胞內(nèi)藥物積累，與多種藥物耐藥性相關(guān)[37]。

5.3 臨床意義：目前暫不清楚ABCC1抗體在輸入不相容血液時(shí)是否會(huì)引起溶血性輸血反應(yīng)，對其是否會(huì)導(dǎo)致新生兒溶血性疾病也暫不清楚。 FONSECA等[38]報(bào)道了ABCC1可以保護(hù)腎臟上皮細(xì)胞免受由腎髓質(zhì)中高鈉環(huán)境引起的應(yīng)激，ABCC1抗原陰性先證者患有腎病，其兩個(gè)弟弟雖然無明顯臨床表現(xiàn)但尿液中存在不同數(shù)量的草酸鈣晶體，因此ABCC1與腎臟疾病之間的關(guān)系還需進(jìn)一步研究。

6 展望 本文對ISBT最新命名的5個(gè)血型系統(tǒng)的遺傳學(xué)研究、臨床意義進(jìn)行了綜述，由于這些血型系統(tǒng)抗原陰性個(gè)體比較罕見，因此在未來我們可通過人群篩查來評估相應(yīng)抗原表達(dá)的頻率，評估該抗原與溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病以及相關(guān)疾病之間的關(guān)系，這不僅有助于臨床輸血醫(yī)學(xué)的發(fā)展，同時(shí)對于基因相關(guān)疾病研究也具有重要意義。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突