張繼剛

遼寧省瓦房店市動物疫病防控中心，遼寧瓦房店 116300

1 發(fā)病情況

2021年12月，遼寧省瓦房店市某養(yǎng)雞場新購入雞苗1 000 只，第1 天精神狀態(tài)良好，飼養(yǎng)至7日齡時發(fā)現(xiàn)雞舍中部分雞開始精神沉郁，食欲廢絕，一部分雞伴有咳嗽，嚴重的出現(xiàn)呼吸困難，其中主要以腹瀉為主，死亡率極高。養(yǎng)殖戶使用土霉素進行治療，效果不佳，病情蔓延其他雞舍，難以控制，隨即向當?shù)仞B(yǎng)殖專家求助，專家立即趕往養(yǎng)殖場進行現(xiàn)場診斷。詢問養(yǎng)殖戶疫苗免疫接種情況，發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖戶未進行妥善的疫苗免疫接種，專家還發(fā)現(xiàn)雞舍的飼養(yǎng)密度過大、衛(wèi)生條件極差、糞便堆積、雞舍濕度大、通風不暢等情況。

2 流行病學

大腸桿菌病是自然界中廣泛存在的一種致病性細菌病，任何年齡和品種的雞均可感染該病，一年四季均可發(fā)生，主要以冬末春初較為常見，以雛雞最為易感，該病主要通過呼吸道、消化道以及可視黏膜等途徑進行感染，也可以經(jīng)卵和交配進行傳播，同時健康雞群接觸被污染的飼料、飲水、用具等均可造成感染。該病除與雞日齡大小相關(guān)外，還主要與飼養(yǎng)管理密切相關(guān)，寒冷潮濕季節(jié)容易高發(fā)，呈現(xiàn)地區(qū)流行。

3 臨床癥狀

專家現(xiàn)場觀察雞群發(fā)病情況，患病雞群精神萎靡，食欲不振，消瘦，部分雞呼吸困難，發(fā)出“咯咯”聲，雞冠發(fā)紫，有的站立不穩(wěn)，喜臥，雞肛門下方羽毛潮濕、污穢、粘連，黃白色或者黃綠色的粥樣糞便，消瘦，機體已經(jīng)嚴重脫水。用體溫計量肛門溫度，發(fā)現(xiàn)體溫較高，體表皮膚蒼白，失去彈性，羽毛凌亂，部分雞只不能正常排便，堵塞泄殖腔。

4 病理剖檢

抽取臨床癥狀較重的和病死的10 只雞進行剖檢，發(fā)現(xiàn)病變主要集中在呼吸道和胃腸道，病雞的氣管有明顯的出血現(xiàn)象，打開氣管后發(fā)現(xiàn)有泡沫狀黏液。部分患病雞脾表面附著大量白色壞死病灶，腺胃乳頭有出血點，病死雞十二指腸和小腸出血最為嚴重，呈現(xiàn)鮮紅色、猩紅色，腸黏膜嚴重脫落，腸道內(nèi)還有黃白色內(nèi)容物；個別雞只的病變臟器組織表面有白色纖維素性滲出物。養(yǎng)殖專家根據(jù)當?shù)亓餍星闆r、臨床癥狀、病理剖檢等，初步判定為大腸桿菌引起的雞腸炎型大腸桿菌病。

5 實驗室檢測

5.1 細菌培養(yǎng)

為進一步確定是大腸桿菌病引起的，采取病死雞的肝、脾、心包液和氣囊膜等處病料回到實驗室進行檢測，將病料處理后劃線在麥康凱瓊脂上，37 ℃培養(yǎng)24 h，結(jié)果在麥康凱瓊脂上形成紅色、圓形隆起、光滑濕潤、邊緣整齊、直徑1.5～2.5 mm 的小菌落；劃線接種于伊紅美藍瓊脂平板，37 ℃培養(yǎng)24 h，長出紫黑色、具有金屬光澤的小菌落；在三糖鐵培養(yǎng)基上不分解H2S、產(chǎn)酸產(chǎn)氣；在普通瓊脂斜面上的菌落是灰白色；在普通肉湯中呈現(xiàn)均勻渾濁，管底有灰白色沉淀并有糞臭味。

5.2 革蘭氏染色

革蘭氏染色法是細菌學中使用最廣泛的一種鑒別染色法，制備被檢病料抹片，首先固定涂片，用草酸銨結(jié)晶紫染1 min，用蒸餾水沖洗，加碘液覆蓋涂面染約1 min，水洗，用吸水紙吸去水分。加95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動進行脫色，20 s 后水洗，用吸水紙吸去水分。番紅染色液染1 min 后，蒸餾水沖洗，干燥，放置于顯微鏡下，先用低倍鏡觀察，找到目標后，在載玻片上滴加香柏油，用油鏡觀察，因大腸桿菌是革蘭氏陰性桿菌，通過革蘭氏染色法可染成紅色或粉紅色。結(jié)果可見視野中出現(xiàn)兩端鈍圓、紅色、短小桿菌。

5.3 生化試驗

挑取伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基上的紫黑色且?guī)в薪饘俟鉂傻膯蝹€菌落，進行生化試驗。分離菌株生化試驗中的吲哚試驗和甲基紅試驗結(jié)果均是“＋”、VP 試驗以及枸櫞酸鹽試驗結(jié)果為“－”，與典型的大腸桿菌生化特征一致，根據(jù)上述實驗室檢測方法判斷為大腸桿菌。

5.4 藥敏試驗

對分離菌進行常規(guī)紙片法藥物敏感試驗，選出高敏藥物，將細菌純培養(yǎng)物用無菌生理鹽水沖洗，稀釋適宜的菌懸液，用無菌棉簽蘸取稀釋液均勻涂抹在瓊脂平板表面，經(jīng)室溫干燥5 min 左右后，用無菌鑷子將抗菌藥物紙片取出放在平板上，37 ℃培養(yǎng)24 h 后觀察結(jié)果。結(jié)果顯示對新霉素、氧氟沙星、呋喃唑酮、慶大霉素高度敏感，對四環(huán)素耐藥。

6 治 療

大腸桿菌對許多抗生素敏感，如磺胺類以及呋喃類藥物，但長時間使用會產(chǎn)生抗藥性，針對由大腸桿菌感染引起的腸炎型大腸桿菌病應結(jié)合具體發(fā)病情況，進行對癥治療。本次治療選用呋喃唑酮0.02%～0.04%混料7～10 d；新霉素粉80 mg/kg，連續(xù)用3～5 d；對于癥狀較重的患病雞可肌注慶大霉素0.5 萬～l 萬單位/kg，或卡那霉素30～40 mg/kg，或鏈霉素100～200 mg/kg，1 次/d，連注3 d。采用上述抗生素治療1 周后，養(yǎng)殖場發(fā)病情況得到一定的改善，強化治療一段時間后，病情基本得到控制，雞群恢復原有的采食水平，但對于停止生長發(fā)育的雞要及時淘汰處理。有研究報道用中草藥防治大腸桿菌取得了明顯的效果，如用清瘟敗毒散、禽菌靈以及復方黃連口服液等藥物治療大腸桿菌腹瀉具有較好的效果。還有研究報道用白術(shù)、茯苓、桑皮、澤瀉、大腹皮、龍膽草、白芍、木瓜、姜皮、甘草等煎汁服用，將藥渣磨碎拌入飼料中飼喂，也得到一定的防治效果。

7 預防措施

7.1 消 毒

制定嚴格的消毒制度，進雛前，雞舍地面、墻壁、料槽和飲水器等用氫氧化鈉溶液噴灑消毒2～3次，尤其是檢查水源是否被大腸桿菌污染，若污染，及時更換。做好孵化車間的環(huán)境衛(wèi)生，防止經(jīng)種蛋傳播及初生雛的水平感染，避免疾病的發(fā)生。大腸桿菌常通過消化道、呼吸道及皮膚創(chuàng)傷等感染，被污染的飼料、飲水、墊草、空氣和食具等是主要的傳染媒介，必須嚴格進行消毒處理，糞便無害化處理，才能有效控制大腸桿菌病的發(fā)生，達到遏制致病菌感染的目的。

7.2 加強飼養(yǎng)管理

改善養(yǎng)殖密度、通風不良、衛(wèi)生條件情況，同時還要避免長途運輸和高溫造成的應激反應等，這些因素都能增加此病的發(fā)病率。由此，改善飼養(yǎng)管理條件以提升雛雞營養(yǎng)水平，增強雞群抗病能力，才能有效減少該病的感染概率。對進出的工作人員嚴格消毒，更換消毒衣服，認真打掃雞舍，定期對雞舍內(nèi)的飼養(yǎng)工具全方位消毒，患病雞進行隔離飼養(yǎng)，將病死雞或者沒有治療價值的淘汰雞及時無害化處理。禁止從感染過減蛋綜合癥的雞場引進種蛋或種雛，孵化場常有雞大腸桿菌病的發(fā)生，因此在早期要謹慎挑選。條件允許的雞場要結(jié)合實驗室檢測，定期檢測以剔除陽性病雞，才能留作種雞用，達到凈化雞群的目的。

保持穩(wěn)定的溫濕度，防止賊風，保證空氣流暢，保證雞舍環(huán)境衛(wèi)生干凈整潔，防止有害氣體滋生，同時也要控制飼養(yǎng)密度，避免過度擁擠，減少其應激的發(fā)生，及時清理糞便，保持所有用具無污染，舍內(nèi)外及用具要定期消毒。同時注意加強雞群營養(yǎng)，增強自身體質(zhì)，提高其抗病能力?？梢赃x擇全價配合飼料，保證雞群的營養(yǎng)需求，保證雞群體質(zhì)健康，提高抗病能力。在受到斷喙、接種、轉(zhuǎn)群、熱應激等刺激時，雞群抵抗力下降，此時可在飼料中添加維生素C、維生素E、微量元素及合適的抗生素，不僅能降低應激反應，還能增強自身的免疫力。同時要嚴禁飼喂發(fā)霉變質(zhì)的飼料，防止因食用而中毒。

7.3 預防性投藥

在飼養(yǎng)過程中雖沒有發(fā)病癥狀，有時受到外界應激就有可能繼發(fā)疾病，建議定期預防投藥。根據(jù)本場發(fā)病情況或飼養(yǎng)條件，可定期在飼料中加入恩諾沙星和慶大霉素等藥物，降低疾病的發(fā)生率。同時，要合理選擇藥物，不能長時間使用同一種抗生素，避免產(chǎn)生耐藥性。

7.4 定期進行免疫

國內(nèi)外使用滅活疫苗預防大腸桿菌病，但由于大腸桿菌血清型相對較多，最好是在當?shù)匕l(fā)病場中鑒定其血清型后再制備疫苗，會起到較好的預防效果。