王千窈，陳一丹，陳耀欽，葉高涵，姜 斌

(溫州科技職業(yè)學(xué)院，浙江 溫州 325000)

犬戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)引起的肝臟急性病毒性疾病，該病是一種重要的人畜共患病[1]。戊型肝炎作為重要的人畜共患病，犬在該病的傳播過(guò)程中具有重要的作用，但人們對(duì)這種疾病的情況沒(méi)有足夠重視。根據(jù)研究表明，犬戊型肝炎在我國(guó)多個(gè)地區(qū)均有流行，并且有逐漸蔓延的趨勢(shì)，對(duì)動(dòng)物和人類健康造成嚴(yán)重威脅[2-4]。

1 流行病學(xué)

目前，對(duì)于廣泛造成人類和哺乳動(dòng)物感染的HEV，屬于戊型肝炎病毒科正戊型肝炎病毒屬A種的一種單股正鏈RNA病毒[5]。HEV只有一種血清型，但基于HEV核苷酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析可以將其分為8種基因型，其中基因1型和2型僅見于人類患者，主要流行于亞州，非洲和拉丁美洲；基因3、4型在全球范圍內(nèi)廣泛流行，屬于人畜共患病病毒；基因5、6型僅在野豬中發(fā)現(xiàn)；基因7、8型分別在單峰駱駝和雙峰駱駝中發(fā)現(xiàn)[6]。早期我國(guó)境內(nèi)主要的HEV流行型為基因1型，現(xiàn)轉(zhuǎn)變?yōu)槿双F共患病的基因4型[7-8]，并且研究證實(shí)動(dòng)物與人群中流行的基因4型病毒具有較高的同源性[7]。

HEV作為一種可經(jīng)消化道感染的病毒，糞-口傳播是其主要的傳播途徑[9]。病毒進(jìn)入消化道后，在肝臟中大量增值并隨膽汁進(jìn)入腸道，最后隨糞便排出體外[10]。易感動(dòng)物因接觸糞便污染的食物和水源等而感染，形成循環(huán)傳播的形式。據(jù)報(bào)道，戊型肝炎在衛(wèi)生和經(jīng)濟(jì)較差的發(fā)展中國(guó)家呈廣泛散發(fā)、并時(shí)有爆發(fā)模式；在發(fā)達(dá)國(guó)家中呈散發(fā)模式，主要為動(dòng)物源性感染為主[11-13]。英國(guó)犬HEV抗體血清流行率為0.8%[14]，荷蘭為18.52%[1]，韓國(guó)為28.2%[15]，中國(guó)不同地區(qū)為12%～48.15%[3,16-18]。研究發(fā)現(xiàn)，HEV在犬身上的感染較為普遍，特別是對(duì)于流浪犬和管理較差的家養(yǎng)犬，病毒感染率更高，調(diào)查數(shù)據(jù)表明犬 HEV的發(fā)生和管理有著密切的關(guān)系[19]。因此與感染犬只密切接觸的人員更加具有被感染的風(fēng)險(xiǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，與普通人群相比，經(jīng)常接觸犬的獸醫(yī)和養(yǎng)犬場(chǎng)工作人員抗HEV抗體陽(yáng)性率明顯更高[2,20]。

2 臨床癥狀

感染HEV的不同動(dòng)物出現(xiàn)的潛伏期、臨床癥狀和疾病發(fā)展過(guò)程不盡相同。犬只感染HEV通常是一種急性、自限性疾病。通常感染犬表現(xiàn)為非特異性癥狀或亞臨床感染狀態(tài)，癥狀不明顯。出現(xiàn)臨床癥狀的動(dòng)物可見消瘦、精神不振、食欲降低或不食，黃疸等；可能伴有肝臟腫大，肝區(qū)觸診疼痛，腹圍增大且有波動(dòng)感的腹水癥狀，嚴(yán)重患犬出現(xiàn)消化道出血等并發(fā)癥。

人感染戊型肝炎潛伏期平均為40 d(10-60 d)。兒童多為亞臨床狀態(tài)，癥狀不明顯。成人感染的臨床癥狀為：發(fā)病急，多伴有發(fā)熱、乏力、嘔吐、惡心、上腹疼痛，常見膽汁淤積，并伴發(fā)黃疸，多數(shù)見肝腫大。感染孕婦病情嚴(yán)重，易發(fā)展為肝功能衰竭，尤其妊娠晚期病死率高，可見流產(chǎn)和死胎[21]。

3 診斷方法

犬感染HEV后，病毒進(jìn)入肝臟后大量增殖，在免疫系統(tǒng)和HEV的共同作用下?lián)p傷肝細(xì)胞，從而導(dǎo)致代謝和消化系統(tǒng)的障礙而引起相關(guān)的肝臟病理和血液生化檢查的變化。盡管犬體內(nèi)的病毒復(fù)制機(jī)制尚不清楚，但是有研究證明犬肝細(xì)胞可以支持基因3型HEV完成整個(gè)感染周期[19]。

由于犬感染HEV后通常表現(xiàn)為亞臨床癥狀，血清生化檢查和肝臟病理變化也不具有特異性。因此使用實(shí)驗(yàn)室病原診斷方法對(duì)于該病的診斷具有重要的意義。實(shí)驗(yàn)室病原診斷方法中的ELISA 方法和 RT-PCR方法，具有操作方便、檢測(cè)速度快且準(zhǔn)確率較高的優(yōu)點(diǎn)[22]。因此成為常用的犬戊型肝炎的病原診斷方法。

3.1血液生化檢查 HEV進(jìn)入肝臟細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞裂解或破損，此時(shí)肝細(xì)胞生化酶大量進(jìn)入血液，血液生化檢測(cè)可見谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 兩項(xiàng)指標(biāo)高于正常值。同時(shí)，大量的肝細(xì)胞破損導(dǎo)致膽紅素代謝障礙可見直接膽紅素(DBil)和間接膽紅素(IBil)升高；膽汁代謝障礙可使堿性磷酸酶(ALP)升高。伴有嚴(yán)重并發(fā)癥的患犬肝功能嚴(yán)重受損，可見白蛋白(ALB)顯著降低，引發(fā)血液膠體滲透壓下降并伴發(fā)漏出性腹水。

3.2病理變化 犬感染HEV后，病毒對(duì)肝細(xì)胞造成明顯的損傷并出現(xiàn)明顯的纖維化趨勢(shì)。光鏡檢查發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞發(fā)生病毒性肝炎的常見病理變化，包括單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肝細(xì)胞氣球樣病變、肝細(xì)胞變性，匯管區(qū)膽管增生、纖維結(jié)締組織增生[23]。長(zhǎng)期大量的纖維組織增生導(dǎo)致肝硬化的發(fā)生。電鏡檢查可見，肝細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器發(fā)生異常變化，包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，線粒體破壞，糖原減少，偶見HEV病毒顆粒存在于胞漿基質(zhì)中[24]。

3.3酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是目前用于檢測(cè)血清中HEV抗體最常用的方法。ELISA檢測(cè)方法有兩種，分別為適用于檢測(cè)抗原的夾心ELISA法和適用于檢測(cè)IgG或IgM抗體的間接ELISA方法[22]。兩種方法中，間接ELISA檢測(cè)方法使用更為廣泛。在人類HEV感染的病例中，檢測(cè)血清中的IgM，IgG抗體為診斷急性戊型肝炎的重要指標(biāo)。第二代間接ELISA檢測(cè)方法使用ORF2和ORF3的表達(dá)產(chǎn)物作為抗原，用于急性戊型肝炎的檢測(cè)。使用商品化的人戊型肝炎抗體檢測(cè)試劑盒能使檢測(cè)變的更加方便和快速。目前國(guó)內(nèi)外有多種商品化的間接ELISA試劑盒用于戊型肝炎的抗體檢測(cè)，但專用于檢測(cè)動(dòng)物血清中抗體的較少。研究表面，使用ORF2的表達(dá)產(chǎn)物作為抗原的商品化試劑盒，可以用于犬和豬戊型肝炎抗體的檢測(cè)[17,25]。

3.4RT-PCR RT-PCR法也是目前檢測(cè)HEV的一種常用方法。該方法可以用于檢測(cè)血清和糞便樣本中的HEV RNA，具有靈敏度高，特異性強(qiáng)、操作方便、快速等優(yōu)點(diǎn)。目前，采用簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增的方法，可以建立基因1-4型HEV的檢測(cè)。該方法在檢測(cè)HEV感染的同時(shí)還可以對(duì)HEV基因進(jìn)行分型，更加有利于流行病學(xué)的研究。同時(shí)，對(duì)于國(guó)內(nèi)主要流行的基因1型和基因4型HEV，采用特殊的簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增的方法，可以有效的提高檢測(cè)的靈敏性[26]。

4 防治措施

由于犬戊型肝炎是一種重要的人畜共患病，因此對(duì)于該病的防治不僅是要保證動(dòng)物健康，而且具有重大的公共衛(wèi)生學(xué)意義。犬戊型肝炎的防治工作，應(yīng)當(dāng)從傳染病流行病學(xué)的幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)來(lái)進(jìn)行，包括控制好傳染源，切斷傳播途徑和加強(qiáng)免疫。

4.1控制好傳染源 家養(yǎng)寵物犬與人類的密切接觸，可能作為一種人感染HEV的潛在傳染源[27]。寵物犬感染HEV后多數(shù)沒(méi)有臨床表現(xiàn)，容易被忽視，因此更加具有潛在傳播HEV的危險(xiǎn)。寵物主人應(yīng)加強(qiáng)寵物的犬戊型肝炎的監(jiān)測(cè)，對(duì)患病動(dòng)物采取消毒、隔離和治療手段，可以有效的防治犬戊型肝炎的傳播。

研究表明，流浪犬HEV感染率明顯高于家養(yǎng)的寵物犬[28]。因此，建議政府應(yīng)加強(qiáng)對(duì)流浪犬的監(jiān)管，以減少犬戊型肝炎病毒的傳播。養(yǎng)犬家庭加強(qiáng)寵物犬的飼養(yǎng)管理，減少與流浪動(dòng)物的接觸。同時(shí)獸醫(yī)監(jiān)管部門應(yīng)監(jiān)測(cè)當(dāng)?shù)厝煨透窝椎陌l(fā)病情況，并以病原學(xué)檢測(cè)為主，以便做好分析和預(yù)警。

4.2切斷傳播途徑 HEV主要通過(guò)糞-口途徑進(jìn)入消化道感染動(dòng)物，排泄物是造成糞-口途徑感染的主要傳染源。因此，對(duì)于寵物犬的科學(xué)規(guī)范管理能有效的切斷病毒的傳播。寵物主人需要做到訓(xùn)練寵物犬不隨意排便，并能及時(shí)清理排泄物不對(duì)環(huán)境造成污染；為寵物飼喂合格的商品化犬糧，不飼喂生食或不合格動(dòng)物內(nèi)臟可以有效的減少感染。寵物主人和動(dòng)物密切接觸人員要有良好的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣并盡量不食用生食。

對(duì)于存在有流浪犬感染HEV散發(fā)的區(qū)域，發(fā)現(xiàn)感染的動(dòng)物以后，應(yīng)當(dāng)及時(shí)采取措施。對(duì)感染動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品等進(jìn)行隔離、消毒或無(wú)害化處理。同時(shí)做好環(huán)境、水源等方面的消毒工作，避免因此造成HEV的廣泛性傳播。

4.3加強(qiáng)免疫 盡管目前還沒(méi)有研制出動(dòng)物HEV的成熟的疫苗制品，但是廈門大學(xué)研制的HEV239疫苗已經(jīng)于2012年在國(guó)內(nèi)上市[11]，可以有效的預(yù)防人戊型肝炎的發(fā)生。作為一種重要的人畜共患性疾病，動(dòng)物HEV疫苗的研制對(duì)于戊型肝炎的防控有重大意義。加快動(dòng)物HEV的研制和生產(chǎn)，盡早實(shí)現(xiàn)疫苗的廣泛接種，能切實(shí)有效地降低戊型肝炎造成的疾病負(fù)擔(dān)和公共衛(wèi)生安全風(fēng)險(xiǎn)[29-30]。

5 結(jié)論

戊型肝炎作為一種重要的人畜共患性疾病，多項(xiàng)研究表明可以在犬體內(nèi)檢測(cè)到HEV抗體存在，提示犬可能是人類感染HEV的動(dòng)物傳染源[15,31-33]。我國(guó)是一個(gè)戊型肝炎高發(fā)國(guó)家，在全國(guó)各省、市、自治區(qū)均有戊型肝炎病例發(fā)現(xiàn)[7,20,34]。隨著我國(guó)寵物經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，寵物犬通常被認(rèn)為是家庭中的一員并且與人類密切接觸，增加了戊型肝炎的傳播風(fēng)險(xiǎn)。所以犬戊型肝炎的流行和防控效果會(huì)對(duì)公共衛(wèi)生安全造成顯著的影響。對(duì)于犬戊型肝炎必須采取綜合防控的措施，建立完善的流浪犬管理體系，持續(xù)監(jiān)測(cè)寵物和與動(dòng)物密切接觸人員的HEV感染情況，以了解與戊型肝炎病毒傳播有關(guān)的公共衛(wèi)生問(wèn)題。人和動(dòng)物應(yīng)保持良好的衛(wèi)生習(xí)慣，獸醫(yī)和與動(dòng)物密切接觸的工作人員應(yīng)做好自身防護(hù)工作，做好免疫預(yù)防。另外，應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)于犬戊型肝炎的流行病學(xué)和防控措施的研究，從而更好地防控該病，減少人畜傳播的可能，消除公共衛(wèi)生安全風(fēng)險(xiǎn)。