林潤(rùn)昌 , 吳 凱 , 廖治鋒 , 蔡順萍 , 徐 亮 , 施遠(yuǎn)國(guó) , 李 繁 , 黃潤(rùn)良 , 藍(lán)榮彬 , 邱廣斌 , 姜桂娥 , 黃平華，譚理琦

(1.深圳市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣東 深圳 518000；2. 深圳聯(lián)合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 深圳 518000 ；3. 新瑞鵬寵物醫(yī)療集團(tuán)有限公司，廣東 深圳 518000；4. 深圳市瑞派寵物醫(yī)院管理股份有限公司，廣東 深圳 518000)

自2019年12月以來(lái),新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)肺炎引發(fā)的人際傳播，全球累計(jì)確診病例已超過(guò)5.4億例,死亡病人630多萬(wàn)，波及220多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，病毒大流行已嚴(yán)重危害了人類(lèi)生命健康安全。疫情流行期間，一些國(guó)家和地區(qū)相繼報(bào)道了不同動(dòng)物(包括貓、狗、水貂、水獺、獅子、老虎、白尾鹿、倉(cāng)鼠等)感染SARS-CoV-2的個(gè)案[1]，引發(fā)了人們對(duì)寵物傳染SARS-CoV-2的擔(dān)憂，因此，開(kāi)展集中隔離人員密接寵物的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)十分必要。

2022年3月中旬，深圳市福田區(qū)上沙塘晏村突發(fā)新冠肺炎疫情，急需對(duì)1萬(wàn)多戶(hù)居民進(jìn)行異地集中隔離，同時(shí)需要對(duì)150萬(wàn)平方米區(qū)域的公共場(chǎng)地及排水系統(tǒng)進(jìn)行清理消殺，并且需要對(duì)264只密接寵物進(jìn)行集中隔離托管。為解決隔離人員的后顧之憂，防范密接寵物傳播疫情風(fēng)險(xiǎn)，福田區(qū)在塘晏村率先使用集裝箱設(shè)立簡(jiǎn)易的寵物臨時(shí)安置點(diǎn)，集中接收隔離人員密接寵物。為應(yīng)對(duì)深圳市可能出現(xiàn)的新一輪新冠疫情，深圳市成立了涉疫寵物風(fēng)險(xiǎn)管控工作專(zhuān)班，并在光明區(qū)快速建立全國(guó)第一家寵物集中托管中心，承擔(dān)全市各區(qū)收集和托管密接寵物任務(wù)。本試驗(yàn)對(duì)集中隔離人員密接寵物進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)，聯(lián)合了深圳市瑞派寵物醫(yī)院管理股份有限公司、新瑞鵬寵物醫(yī)療集團(tuán)有限公司以及具備新冠病毒核酸檢測(cè)資質(zhì)的深圳聯(lián)合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室對(duì)塘晏村寵物臨時(shí)安置點(diǎn)和寵物集中托管中心2個(gè)托管點(diǎn)的318只寵物及其環(huán)境進(jìn)行樣品采集和監(jiān)測(cè)。由于國(guó)家尚未制定針對(duì)寵物的SARS-CoV-2采樣與核酸檢測(cè)方法，參考2003年SARS期間動(dòng)物防控經(jīng)驗(yàn)，寵物的SARS-CoV-2采樣和核酸檢測(cè)均參照人的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第八版)》附件10新冠病毒樣本采集和檢測(cè)技術(shù)指南進(jìn)行[2]。

1 監(jiān)測(cè)對(duì)象與方法

1.1 監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 新型冠狀病毒核酸。

1.2 監(jiān)測(cè)對(duì)象 主要對(duì)2個(gè)寵物托管點(diǎn)的318只寵物進(jìn)行監(jiān)測(cè)。其中，塘晏村寵物臨時(shí)安置點(diǎn)托管的264只寵物，包括貓196只，犬59只，鴨1只，兔1只，倉(cāng)鼠7只；寵物集中托管中心的54只寵物，包括貓28只，犬26只。

1.3 監(jiān)測(cè)時(shí)間 對(duì)塘晏村臨時(shí)安置點(diǎn)的寵物監(jiān)測(cè)從2022年3月18日—2022年4月6日，歷時(shí)19 d；對(duì)集中托管中心的寵物監(jiān)測(cè)從2022年3月26日—2022年6月15日，歷時(shí)82 d。2個(gè)時(shí)間段共持續(xù)監(jiān)測(cè)90 d。

1.4 主要儀器與試劑 核酸提取儀器：全自動(dòng)核酸工作站NFAST 96L(深圳聯(lián)合醫(yī)學(xué)科技有限公司)；核酸檢測(cè)設(shè)備：實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀：MA-6000型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(蘇州雅睿生物技術(shù)股份有限公司)；核酸提取試劑：核酸提取試劑(深圳聯(lián)合醫(yī)學(xué)科技有限公司)；核酸檢測(cè)試劑：新型冠狀病毒2019-nCoV核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)(廣州達(dá)安基因股份有限公司)。

1.5 人員防護(hù) 采樣人員的防護(hù)按照《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第八版)》附件12《重點(diǎn)場(chǎng)所、重點(diǎn)機(jī)構(gòu)、重點(diǎn)人群和特定人群新冠肺炎疫情防控指南》執(zhí)行[2]。

1.6 采樣方法

1.6.1 鼻拭子 對(duì)新冠陽(yáng)性患者的寵物每天進(jìn)行鼻拭子采樣檢測(cè)，連續(xù)7 d檢測(cè)結(jié)果為陰性的，第9天、第14天和離場(chǎng)前1天進(jìn)行鼻拭子采樣檢測(cè)(單拭子采樣)；對(duì)集中隔離人員(新冠陰性)的寵物在第1天和第3天進(jìn)行鼻拭子采樣檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為陰性的，第7天、第14天和離場(chǎng)前1天進(jìn)行鼻拭子采樣檢測(cè)(單拭子采樣)。將拭子以垂直鼻子(面部)方向貼壁轉(zhuǎn)動(dòng)進(jìn)入鼻孔內(nèi)，至鼻腭處，使拭子在鼻內(nèi)停留15～30 s，然后邊擦拭邊旋轉(zhuǎn)緩慢取出，最后拭子頭置入采集管中。

1.6.2 環(huán)境拭子 對(duì)寵物籠舍、飲水器、食槽、墊料等表面每3天進(jìn)行1次采樣檢測(cè)，每個(gè)場(chǎng)所采1～3份樣品(混采)。用病毒采樣管中的病毒保存液充分浸潤(rùn)采樣棉簽后，在需要采集的樣品表面至少涂抹10 cm×10 cm的面積，不足者采集全部面積。對(duì)樣品表面進(jìn)行多點(diǎn)分布式采樣。擦拭過(guò)的拭子放入含有3 mL采樣液的采樣管中，棄去尾部。將采集的樣品置于感染性樣品運(yùn)輸箱，冷鏈運(yùn)輸送深圳聯(lián)合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。為避免消毒對(duì)核酸檢測(cè)結(jié)果的影響，所有采樣均在消毒前進(jìn)行。

1.7 檢測(cè)方法及陽(yáng)性結(jié)果處理 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，按照《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第八版)》中附件10《新冠病毒樣本采集和檢測(cè)技術(shù)指南》[2]和選用試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)要求開(kāi)展檢測(cè)工作和試驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制及判定。如環(huán)境或?qū)櫸餀z測(cè)出核酸陽(yáng)性，則對(duì)該區(qū)場(chǎng)所進(jìn)行封閉管理，區(qū)內(nèi)所有寵物實(shí)施鼻拭子及環(huán)境拭子1天1檢，直到連續(xù)7 d核酸檢測(cè)為陰性。

2 監(jiān)測(cè)結(jié)果

2.1 托管寵物SARS-CoV-2監(jiān)測(cè) 對(duì)集中托管的寵物采集鼻拭子，共1 032份樣品。所有樣品檢測(cè)均為陰性，見(jiàn)表1。

表1 托管寵物樣品SARS-CoV-2監(jiān)測(cè)結(jié)果

2.2 托管寵物環(huán)境SARS-CoV-2監(jiān)測(cè) 對(duì)寵物居住環(huán)境及其生活用具采集環(huán)境拭子，共771份樣品，所有樣品檢測(cè)均為陰性，見(jiàn)表2。

表2 托管寵物環(huán)境樣品SARS-CoV-2監(jiān)測(cè)結(jié)果

3 討論

為了建立集中隔離人員密接寵物風(fēng)險(xiǎn)管控長(zhǎng)效機(jī)制，深圳市建立一家面向全市、場(chǎng)所固定、布局合理、設(shè)施完善、管理規(guī)范、風(fēng)險(xiǎn)可控的寵物集中托管中心，在全國(guó)率先探索出密接寵物集中托管的 “深圳做法”，涉疫寵物集中托管無(wú)一例死亡，無(wú)一例發(fā)病，無(wú)一例投訴，有效地解決了集中隔離人員寵物托管難題，防范了疫情傳播風(fēng)險(xiǎn)。

疫情期間，深圳市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心嚴(yán)格參照新冠肺炎疫情防控技術(shù)要領(lǐng)劃分“三區(qū)三級(jí)兩通道”，制定了寵物接送、區(qū)域轉(zhuǎn)移、消毒、無(wú)害化處置、人員管理等全流程配套指引，結(jié)合2003年SARS期間動(dòng)物防控經(jīng)驗(yàn)，初步建立了寵物采樣技術(shù)、檢測(cè)技術(shù)，采集了福田區(qū)塘晏村寵物臨時(shí)安置點(diǎn)和寵物集中托管中心的318只寵物的鼻拭子1 032份，環(huán)境拭子771份，均未檢出SARS-CoV-2，即便是寵物主確診感染了SARS-CoV-2，也沒(méi)有監(jiān)測(cè)到陽(yáng)性寵物。

對(duì)于不同動(dòng)物感染SARS-CoV-2的個(gè)案[1]，專(zhuān)業(yè)人士指出，動(dòng)物受感染主要與新冠確診者的撫摸或喂養(yǎng)，與動(dòng)物嗅聞丟棄的口罩，舔食受SARS-CoV-2污染的草地、水、空氣和食物等有關(guān)[3]。世界衛(wèi)生組織(WHO)指出，人類(lèi)之間互相傳染仍然是SARS-CoV-2蔓延的主要途徑，作為與人類(lèi)關(guān)系密切的寵物是否具有傳播SARS-CoV-2的可能性，學(xué)術(shù)界還需要收集更多的證據(jù)。因此，對(duì)寵物持續(xù)開(kāi)展SARS-CoV-2監(jiān)測(cè)工作仍有必要。

目前，全球新冠肺炎疫情仍處于高位，SARS-CoV-2仍在不斷變異，疫情的最終走向還存在很大不確定性，疫情防控工作依然不能放松。犬、貓等寵物是人類(lèi)的伴侶動(dòng)物，與寵物主關(guān)系密切。為此建議：(1)妥善處置密接寵物。對(duì)于隔離人員的密接寵物可采取體表和環(huán)境消毒以及適當(dāng)?shù)母綦x措施；不宜對(duì)密接寵物貿(mào)然采取撲殺措施，否則容易引發(fā)輿情，不利新冠肺炎疫情防控工作開(kāi)展。(2)探索和完善檢測(cè)方法。完善寵物SARS-CoV-2的檢測(cè)方法，提高檢測(cè)敏感性和特異性，深入探究寵物是否會(huì)感染SARS-CoV-2，為進(jìn)一步加強(qiáng)新冠疫情防控工作提供科學(xué)依據(jù)。(3)強(qiáng)化生物安全培訓(xùn)，提高人員防護(hù)意識(shí)。做好個(gè)人防護(hù)是預(yù)防疫情傳播的主要手段，動(dòng)物從業(yè)人員(寵物養(yǎng)殖人員、執(zhí)業(yè)獸醫(yī)等)要積極參加生物安全培訓(xùn)，提高安全防護(hù)意識(shí)，要加強(qiáng)自我健康監(jiān)測(cè)，定期接受SARS-CoV-2檢測(cè)。