巨細(xì)胞病毒疫苗研究進(jìn)展

孫 鈺， 張魯平， 蔣銀華， 秦 剛

作者單位： 1. 南通大學(xué)附屬醫(yī)院感染科，江蘇南通 226001；*耳鼻咽喉科；

2. 南通市婦幼保健院臨床醫(yī)學(xué)研究中心。

1 巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus, CMV）感染現(xiàn)狀

CMV 感染是一個(gè)被忽視的重大公共衛(wèi)生問題,全球近80%人口存在CMV 感染，感染與地理位置、種族和經(jīng)濟(jì)狀況有關(guān)。在發(fā)達(dá)國(guó)家，CMV 感染率低于發(fā)展中國(guó)家，育齡期女性CMV 血清特異性抗體陽性率為41%～50%[1]，新生兒先天性CMV感染率為0.5%～1%[2]。在發(fā)展中國(guó)家，CMV 感染率較高，育齡期女性CMV 血清特異性抗體陽性率高達(dá)80%～100%，新生兒先天性CMV 感染率為0.6%～6.1%[3]。我國(guó)是CMV 感染的高發(fā)區(qū)，我國(guó)孕婦的CMV 血清特異性抗體陽性率為94%～98%，新生兒先天性CMV 感染率約0.7%[4-5]。CMV 感染也是導(dǎo)致異基因造血干細(xì)胞移植（HCT）和實(shí)體器官移植（SOT）患者發(fā)病率和死亡率高的重要原因之一，其中HCT 后CMV 活動(dòng)性感染總發(fā)生率為44.08%，病死率為16.18%，異基因HCT后CMV 感染病死率高于同基因HCT 移植與自體移植者（P＜0.01）[6]；在沒有進(jìn)行抗病毒預(yù)防的情況下，SOT 患者CMV 感染率為75%，具體發(fā)病率因移植器官的類型而異[7]。

CMV 是人類皰疹病毒中最大的一種，為雙鏈DNA 病毒。完整病毒顆粒直徑為200～300 nm，電鏡下由外向內(nèi)分別為含有多種糖蛋白的脂質(zhì)包膜、被膜、二十面體立體對(duì)稱衣殼和包含其基因組的內(nèi)部核蛋白核心。脂質(zhì)包膜含有糖蛋白，能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體，目前發(fā)現(xiàn)的CMV 包膜糖蛋白包括糖蛋白 B、糖蛋白H、糖蛋白L、糖蛋白O 等。CMV 被膜介于二十面體衣殼與包膜之間，是皰疹病毒所特有的結(jié)構(gòu)，其被膜蛋白包含豐富的磷酸化蛋白pp65，能誘導(dǎo)強(qiáng)烈的細(xì)胞免疫應(yīng)答，在病毒的裝配、基因調(diào)控和改變宿主細(xì)胞代謝等方面發(fā)揮作用。CMV 衣殼蛋白除了構(gòu)成病毒衣殼外，還有錨定病毒DNA 的作用。基因組是一個(gè)64 nm 的線性雙鏈DNA 分子，包含超過230 個(gè)蛋白質(zhì)的非重疊開放閱讀框；其中一種蛋白質(zhì)是DNA 聚合酶，它在病毒復(fù)制中起著不可或缺的作用，并且是目前所有批準(zhǔn)的抗病毒藥物的主要靶點(diǎn)[8]。CMV 感染會(huì)引起強(qiáng)烈的病毒特異性CD4+和CD8+T 細(xì)胞反應(yīng)。針對(duì)CMV 的不同抗原，機(jī)體能夠產(chǎn)生特異性抗體，其中IgG 表示既往感染，IgM 表示急性或近期感染。研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體抗CMV 產(chǎn)生的體液免疫應(yīng)答主要針對(duì)病毒包膜糖蛋白gB，而細(xì)胞免疫應(yīng)答主要針對(duì)被膜蛋白pp65[9]。

CMV 感染人體后主要通過體液傳播，包括唾液、尿液、精液、陰道分泌物和乳汁，感染后可累及全身多個(gè)系統(tǒng)及臟器，持續(xù)存在于被感染宿主體內(nèi)并在骨髓細(xì)胞中保持休眠狀態(tài)。當(dāng)宿主免疫力下降時(shí)，病毒發(fā)生再激活，被釋放到血液和其他體液中，從而出現(xiàn)感染后癥狀[10]。所以不僅是未感染過CMV 的人群需要接種疫苗，針對(duì)CMV 血清抗體陽性人群接種疫苗仍是十分必要的，可以增強(qiáng)機(jī)體免疫反應(yīng)，減輕病毒再激活后的臨床癥狀，減少CMV 感染后并發(fā)癥等。在個(gè)體成為血清抗體陽性之前的年齡進(jìn)行免疫接種疫苗可以最大限度地發(fā)揮作用。如果疫苗最終部署在血清陽性比例很高的年齡人群中，在血清學(xué)測(cè)試中可能有一些效用，以確定哪些人可能從疫苗中獲益最多，但如果接種血清陽性者沒有安全問題，也可以考慮在沒有血清學(xué)測(cè)試的情況下使用已知的僅對(duì)血清陰性者有益的疫苗。盡管在出現(xiàn)大量血清反應(yīng)陽性的年齡接種疫苗可能是安全的，但如果在許多青春期及育齡期女性出現(xiàn)血清反應(yīng)陽性之前的年齡就接種疫苗，可能會(huì)更有說服力[11]。

2 疫苗研究進(jìn)展

CMV 疫苗被美國(guó)醫(yī)學(xué)研究所和疫苗咨詢委員會(huì)認(rèn)為是21 世紀(jì)疫苗中的高度優(yōu)先報(bào)告事項(xiàng)[12]。雖然目前對(duì)CMV 疫苗的需求十分迫切，但至今尚無CMV 疫苗上市。第一代CMV 疫苗主要是減毒活疫苗，有免疫原性但臨床預(yù)防效果差[13]。第二代疫苗主要是亞單位疫苗，如gB 疫苗、gH/gL/UL128/UL130/UL131A 五聚體疫苗、pp65 肽疫苗。第三代疫苗為各種基因疫苗，如DNA 疫苗、病毒載體疫苗。當(dāng)前的CMV 疫苗已經(jīng)進(jìn)行了廣泛的臨床研究，在針對(duì)特殊人群的CMV 感染及相關(guān)疾病預(yù)防方面取得了令人鼓舞的成績(jī)。如果疫苗能有效預(yù)防感染或病毒脫落，最初接種CMV 疫苗的目標(biāo)人群包括青春期及育齡期女性[14]。

2.1 減毒活疫苗

Towne-Toledo 嵌合體疫苗Towne 株和未減毒的Toledo 株的基因組重組研制4 種獨(dú)立的嵌合候選疫苗。首次人體試驗(yàn)是一次Ⅰ期臨床試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明4 種嵌合CMV Towne-Toledo 候選疫苗對(duì)20 名CMV 血清陽性受試者均具有良好的安全性與耐受性，沒有與疫苗接種相關(guān)的嚴(yán)重不良事件。為辨別4 種不同疫苗在安全性或耐受性方面的差異,在之后進(jìn)行了一項(xiàng)針對(duì)CMV 血清陰性受試者的Ⅰ期臨床試驗(yàn)。36 名受試者均分為4 組，分別接受Towne-Toledo 嵌合體1～4 疫苗。試驗(yàn)結(jié)果表明，接種疫苗后發(fā)生抗體反應(yīng)，嵌合體1～4的血清抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性的人數(shù)占總?cè)藬?shù)的百分比不同，分別為11.11%、33.33%、0、77.78%，顯然嵌合體4 在誘導(dǎo)血清轉(zhuǎn)化方面最成功。在接種后12 周或發(fā)生血清轉(zhuǎn)化者的 52 周內(nèi)，所有受試者的尿液或唾液檢測(cè)CMV 均為陰性，即該疫苗在CMV 血清陰性受試者中具有良好的耐受性并且不會(huì)被排出體外。檢測(cè)到發(fā)生CD4+T 細(xì)胞反應(yīng)的概率為2.78%，僅在1 名接受嵌合體4 的受試者中檢測(cè)到。檢測(cè)到發(fā)生CD8+T 細(xì)胞反應(yīng)是在 11 個(gè)血清轉(zhuǎn)化者中，概率為72.72%。然而，在所有血清轉(zhuǎn)化的受試者中，與其他疫苗相比，發(fā)生血清學(xué)反應(yīng)的強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間并沒有明顯更強(qiáng)、更長(zhǎng)，即沒有證據(jù)表明該疫苗的免疫原性強(qiáng)于其他疫苗。需要注意的是該疫苗尚沒有在其他受試者中進(jìn)行試驗(yàn)，無法確定在其他受試者中的安全性和免疫原性，且仍需進(jìn)一步的試驗(yàn)確定該疫苗的最佳劑量[15]。

2.2 亞單位疫苗

2.2.1 gB 疫苗 現(xiàn)階段研究最為深入的疫苗是gB亞單位疫苗。gB/MF59 疫苗為重組CMV gB 蛋白和MF59 佐劑組成的疫苗，最初由美國(guó) Chiron 公司研發(fā)，之后授權(quán)給法國(guó)Sanofi Pasteur 公司。已在三種受試者分別為經(jīng)產(chǎn)婦、SOT 受者及青春期女性的Ⅱ期臨床試驗(yàn)中顯示出部分保護(hù)作用。其中在針對(duì)CMV 血清特異性抗體陰性的健康經(jīng)產(chǎn)婦和青春期女性的兩項(xiàng)Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，總有效率為43%～50%[16-17]。兩次試驗(yàn)的具體結(jié)果如下：受試者為經(jīng)產(chǎn)婦，隨機(jī)分配為疫苗組和安慰劑組。疫苗組的年感染率為3.30%，安慰劑組為6.60%，總體疫苗效力為50%[16]。受試者為青春期女性，試驗(yàn)結(jié)果表明，若按方案接種，疫苗有效率45%?？傮w而言，該疫苗安全且具有免疫原性[17]。另一項(xiàng)Ⅱ期臨床試驗(yàn)是針對(duì)等待腎或肝移植的成年人，140 名受試者按照CMV 血清陰性和血清陽性1:1隨機(jī)分配為疫苗組和安慰劑組。研究表明疫苗組gB 抗體滴度顯著增加。在移植后出現(xiàn)病毒血癥的患者中，gB 抗體滴度與病毒血癥的持續(xù)時(shí)間呈負(fù)相關(guān)（r=0.62，P=0.002 2）。在有血清陽性供者的血清陰性受者中，接種疫苗者的病毒血癥持續(xù)時(shí)間 （12%對(duì)57%，P=0.048 0）和更昔洛韋治療天數(shù)（13% 對(duì) 69%，P=0.028 7）減少。同時(shí)，試驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為該疫苗誘導(dǎo)的抗體可能結(jié)合CMV 陽性供者所捐獻(xiàn)器官中的病毒，防止移植后受者發(fā)生病毒血癥[18]。此外，為驗(yàn)證該疫苗對(duì)于CMV 血清特異性抗體陽性人群的有效性，對(duì)已感染CMV 的人群進(jìn)行了Ⅰ期臨床試驗(yàn)。研究表明，在慢性 CMV 感染的女性中接種gB/MF59 疫苗后，CMV 特異性抗體和CD4+T 細(xì)胞反應(yīng)均可增強(qiáng)[19]。評(píng)估疫苗策略的金標(biāo)準(zhǔn)傳統(tǒng)上認(rèn)為是誘導(dǎo)有效的中和抗體反應(yīng)，有數(shù)據(jù)顯示，血清陽性移植受者的血清具有中和抗體，但接種gB/MF59 后這些抗體并未明顯增強(qiáng)。最有可能的是，gB 疫苗的有效性并不完全依賴于經(jīng)典的中和生物活性，還應(yīng)歸因于部分非中和抗體[20]。

2.2.2 gH/gL/UL128/UL130/UL131A 五 聚 體 疫苗 V160 疫苗由是德國(guó)的Merck Sharp ＆ Dohme公司研發(fā)，該疫苗源自AD169 毒株，在疫苗制造過程中使用一種稱為Shield-1 的合成化學(xué)物質(zhì)作為培養(yǎng)基中的補(bǔ)充劑，能夠嚴(yán)格調(diào)控病毒生長(zhǎng)，使其在接種后無法在機(jī)體內(nèi)正常復(fù)制。并通過基因改造恢復(fù)病毒gH /gL/UL128/UL130/UL131A 五聚體復(fù)合物的表達(dá)，該復(fù)合物為病毒感染機(jī)體所必需的決定因素，也是機(jī)體感染后自然免疫產(chǎn)生中和抗體的主要靶點(diǎn)，應(yīng)答主要集中在IE1 和pp65上。在一項(xiàng)受試者為CMV 血清特異性抗體陽性及陰性人群的Ⅰ期臨床試驗(yàn)中。檢測(cè)疫苗組受試者的唾液或尿液，沒有發(fā)現(xiàn)病毒脫落，證實(shí)了V160存在復(fù)制缺陷。在血清特異性抗體陰性的受試者中，接種該疫苗后受試者抗上皮細(xì)胞感染的中和抗體效價(jià)明顯增加。接種疫苗后的第7 個(gè)月，所有疫苗接受者均出現(xiàn)中和抗體陽性，在第12 個(gè)月和第18 個(gè)月，大多數(shù)疫苗接受者中和抗體仍呈陽性。證明該疫苗對(duì)CMV 血清陰性與陽性人群的安全性和免疫原性均良好[21]。雖然V160 不能在體內(nèi)復(fù)制，但仍可以有效地啟動(dòng)已接種疫苗的受試者的免疫系統(tǒng)。此外，一項(xiàng)Ⅱb 期多中心研究自2018 年開始進(jìn)行（NCT03486834），目的是評(píng)估2 劑和3 劑V160 方案在16～35 歲健康血清陰性女性中的安全性、耐受性、有效性和免疫原性。該試驗(yàn)共有2 200 名參與者，參與者在第1 天、第2 個(gè)月和第6個(gè)月接受V160 疫苗（3 劑量方案）；第1 天和第6個(gè)月接受V160 疫苗，第2 個(gè)月接受安慰劑（2 劑量方案）；或在第1 天、第3 個(gè)月和第6 個(gè)月接受安慰劑（安慰劑對(duì)照組）。目前尚無研究結(jié)果公布。Towne-Toledo 疫苗和gB/MF59 疫苗在CMV 血清

陰性的婦女中，這兩種疫苗對(duì)CMV 感染療效溫和，因?yàn)槎既狈Σ《疚寰垠w復(fù)合物的表達(dá)，而病毒五聚體復(fù)合物是CMV 感染上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的趨向性決定因素，也是在自然感染期間觀察到的有效中和抗體的關(guān)鍵抗原。V160 是第一個(gè)設(shè)計(jì)用來表達(dá)五聚體復(fù)合物的候選疫苗，這項(xiàng)首次人類評(píng)估的結(jié)果證實(shí)了在臨床前評(píng)估中觀察到的五聚體復(fù)合物在誘導(dǎo)有效中和效價(jià)對(duì)抗人類上皮細(xì)胞病毒感染方面的重要性。雖然已經(jīng)證明五聚體特異性抗體在中和上皮細(xì)胞進(jìn)入方面比gB 抗體強(qiáng)，但關(guān)于五聚體疫苗的研究結(jié)果尚不足以說明五聚體疫苗強(qiáng)于gB 疫苗。

2.2.3 pp65 肽疫苗 CMV PepVax 疫苗由由美國(guó)希望之城醫(yī)療中心和美國(guó)國(guó)家癌癥研究所研制，由美國(guó)輝瑞公司提供佐劑，是由HLA A*0201 人群的限制性CTL 表位 pp65495-503 與破傷風(fēng)毒素T 細(xì)胞表位融合而成的肽疫苗，佐劑為Toll 樣受體 9 激動(dòng)劑PF03512676。pp65 被膜蛋白是CMV血清反應(yīng)陽性健康成年人中最常被免疫學(xué)識(shí)別的CMV 抗原之一。在一項(xiàng)Ⅰb 期臨床試驗(yàn)中，共有68 名HLA-A*0201 CMV 血清陽性或血清陰性的受試者，試驗(yàn)結(jié)果證明盡管添加 PF03512676 佐劑會(huì)增加不良反應(yīng)的反應(yīng)原性，但該肽疫苗在大多數(shù)受試者中是安全且耐受的。但是，研究報(bào)告顯示使用 PF03512676 佐劑時(shí)發(fā)生流感樣不良反應(yīng)的比例很高，這表明需要謹(jǐn)慎用于免疫活性供體產(chǎn)品的進(jìn)一步開發(fā)[22]。異基因HCT 受者極易受到機(jī)會(huì)性感染，其中CMV 仍然是HCT 受者的主要感染并發(fā)癥。在一項(xiàng)主要目的是研究該疫苗的安全性與免疫原性的Ⅰb 期臨床試驗(yàn)中，受試者為36 名CMV 血清陽性的HCT 受者，且為HLA-A* 0201限制性，按CMV 供體血清水平分層后隨機(jī)分配到疫苗組或?qū)φ战M。對(duì)照組在接受HCT 后的100 d內(nèi) pp65495-503 特異性CD8+T 細(xì)胞的水平增加為基 線 的1.4 倍（95%CI：0.6～3.3，P=0.27）， 而疫苗組增加為基線的3.5 倍（95%CI：1.6～7.9，P=0.0018），疫苗效應(yīng)疫苗組與對(duì)照組相比從基線到第100 天平均增加2 倍（95%CI：1.04～3.51，P=0.025）；移植后180 d 內(nèi)，疫苗組與對(duì)照組相比病毒再激活減少（1 例對(duì) 6 例，P=0.039），發(fā)生病毒血癥者接受抗病毒治療后痊愈的時(shí)間縮短（15 d對(duì) 263 d，P=0.03）。研究表明該疫苗安全性、耐受性與免疫原性均良好，可以減少CMV 再激活和抗病毒藥物的使用[23]。一項(xiàng)多中心Ⅱ期臨床試驗(yàn)自2015 年開始（NCT02396134），目的是評(píng)估優(yōu)化劑量的PepVax 疫苗對(duì)HCT 受者的保護(hù)功能，并研究該疫苗接種后在接受干細(xì)胞移植的患者中減少發(fā)生嚴(yán)重CMV 感染的效果，以評(píng)估該疫苗的保護(hù)效益。這項(xiàng)試驗(yàn)參與者為133 名CMV 血清陽性的HCT 接受者，隨機(jī)分配為兩組，在接受CMV 血清特異性抗體陽性的HCT 治療的同時(shí)，接受該疫苗或安慰劑治療，并在未來的一年中接受隨訪觀察，暫時(shí)無具體試驗(yàn)結(jié)果公布，這將進(jìn)一步確定該疫苗策略在HCT 環(huán)境中的作用和影響。當(dāng)前研究的數(shù)據(jù)表明，最近開發(fā)的CMVPepVax 疫苗迅速擴(kuò)增了具有記憶效應(yīng)表型的CMV 特異性T 細(xì)胞，這通常在未接種疫苗的HCT 患者發(fā)生病毒血癥的CMV 再激活后出現(xiàn)。這些特性使CMVPepVax 疫苗成為進(jìn)一步臨床評(píng)估的有希望的候選者。盡管如此，CMVPepVax 只能用于HLA A*0201 接受者（約占40%），這是該疫苗的一個(gè)重大限制[24]。

2.3 基因疫苗

2.3.1 DNA 疫苗 ASP0113 疫苗是由美國(guó)Vical公司開發(fā)，現(xiàn)由日本的Astellas 公司接管，是一種DNA 疫苗，由兩個(gè)編碼gB 和pp65 的質(zhì)粒構(gòu)成。已經(jīng)完成了Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗(yàn)，但是結(jié)果卻證明該疫苗缺乏療效，主要是由于DNA 疫苗本身就較難產(chǎn)生強(qiáng)的免疫原性。在Ⅰ期臨床試驗(yàn)中，試驗(yàn)過程沒有發(fā)生嚴(yán)重不良事件，表明該疫苗耐受性良好，但該疫苗與對(duì)照組相比沒有增強(qiáng)抗體反應(yīng)。Ⅱ期臨床試驗(yàn)的受試者為HCT 受者。與對(duì)照組相比，疫苗組可檢測(cè)到的 CMV 病毒血癥的發(fā)生率顯著降低（P=0.008），CMV 病毒血癥發(fā)作次數(shù)更少 （P=0.017），雖試驗(yàn)中出現(xiàn)不良反應(yīng)，但差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，所以該試驗(yàn)認(rèn)為疫苗的耐受性良好[25]。在另一項(xiàng)Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，目的是評(píng)估疫苗ASP0113 在CMV 血清特異性抗體陰性腎移植受者中接受來自CMV 血清特異性抗體陽性供體的器官的有效性和安全性。結(jié)果表明，疫苗組與對(duì)照組之間的差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒有顯著意義 （OR=0.79，95%CI：0.43～1.47，P=0.307）。疫苗組與對(duì)照組的移植受者之間對(duì)pp65 的平均T 細(xì)胞反應(yīng)和平均gB 抗體水平相似。且疫苗組和對(duì)照組受試者在第一次研究藥物注射后一年內(nèi)CMV 病毒血癥的發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果表明該疫苗在CMV 血清特異性抗體陰性的腎移植人群中無效但安全[26]。在一項(xiàng)目的是評(píng)估該疫苗在接受HCT 的CMV 血清特異性抗體陽性受體中的保護(hù)功效和安全性的Ⅲ期臨床試驗(yàn)中，514 名CMV 血清特異性抗體陽性HCT 接受者，隨機(jī)接受疫苗或安慰劑。疫苗組與對(duì)照組之間的gB 特異性抗體反應(yīng)總體上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.112）。該疫苗在降低總體死亡率和CMV 感染終末器官病變方面沒有效果，并且在同種異體HCT 受者移植后1 年期間，在降低CMV 病毒血癥方面似乎也沒有效果。此外，與對(duì)照組相比，ASP0113 并未引起有效的T 細(xì)胞或B 細(xì)胞反應(yīng)，與對(duì)照組安全性結(jié)果相似。由于缺乏療效，ASP0113 的開發(fā)已被終止[27]。盡管接種ASP0113 的受者CMV 病毒血癥的首發(fā)時(shí)間較長(zhǎng)，CMV 病毒血癥的發(fā)生率較低，但未能達(dá)到減少需要抗病毒治療的CMV 病毒血癥的主要終點(diǎn)。

2.3.2 病毒載體疫苗 希望之城三聯(lián)疫苗由美國(guó)希望之城醫(yī)療中心研發(fā)，是一種表達(dá)與保護(hù)性免疫相關(guān)的CMV 抗原的重組減毒痘病毒修飾的安卡拉痘苗 （MVA），該疫苗可表達(dá)來自CMV 的3 種免疫優(yōu)勢(shì)抗原（pp65、IE1、IE2），是一種高度減毒、非增殖性病毒載體疫苗。對(duì)該疫苗的首次臨床評(píng)估的Ⅰ期臨床試驗(yàn)證明該疫苗在健康成人中具有良好的耐受性和高度免疫原性[28]。一項(xiàng)Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，在高危異基因HCT 接受者中完成了對(duì)該疫苗安全性和療效的研究：將102 例需要接受HCT 治療的CMV 血清抗體陽性患者隨機(jī)分為疫苗組和對(duì)照組，在移植后的前100 d 內(nèi)，5 例三聯(lián)患者（9.8%）和10 例安慰劑患者（19.6%）發(fā)生CMV 再 激 活（HR=0.46，95%CI：0.16～1.4，P=0.075），證明接種該疫苗后發(fā)生CMV 事件的風(fēng)險(xiǎn)下降了一半。疫苗組的免疫應(yīng)答顯著增加，如CD137+CD4+和CD137+CD8+pp65 特異性T 細(xì)胞在接受HCT 后的第100 天以及1 年后顯著增強(qiáng)。在整個(gè)1 年的觀察期內(nèi)，抗病毒藥物的使用率，對(duì)照組為25.5%，而疫苗組為19.6%。盡管疫苗組接種前后3 級(jí)或4 級(jí)急性移植物抗宿主病發(fā)生率較高，但沒有超過預(yù)期。三聯(lián)療法耐受性對(duì)于血清特異性抗體陽性的HCT 接受者來說很好，在預(yù)防病毒血癥和改善CMV 特異性T 細(xì)胞重建方面明顯優(yōu)于對(duì)照組。這是第一個(gè)通用的 （非HLA 特異性）、基于病毒載體CMV 疫苗，可以安全地在免疫抑制患者中誘導(dǎo)強(qiáng)大而持久的CMV 特異性T 細(xì)胞反應(yīng)[29]。

HB-101 疫苗是由美國(guó)Hookipa Pharma 公司研發(fā)，載體為非復(fù)制型淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)膜腦膜炎病毒（LCMV），編碼必需糖蛋白的LCMV 基因被編碼gB 或pp65 蛋白的基因取代。表達(dá)gB 的rLCMV 載體編碼缺乏來自CMV 株 Merlin 的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的C 端截短形式的gB，而表達(dá)pp65 的rLCMV 載體編碼來自CMV 株AD169 的未修飾的pp65 蛋白。該疫苗是等量的pp65 和gB 表達(dá)載體的混合物。在一項(xiàng)Ⅰ期臨床試驗(yàn)中，共有54 名CMV 血清陰性受試者，目的是評(píng)估該疫苗在3 種不同劑量下對(duì)抗CMV 的安全性和免疫原性。該疫苗在所有劑量水平下均具有良好的耐受性，并且沒有報(bào)告嚴(yán)重不良事件。試驗(yàn)結(jié)果是低劑量時(shí)未誘導(dǎo)出LCMV 載體中和抗體。發(fā)現(xiàn)gB 結(jié)合和中和抗體均出現(xiàn)劑量依賴性反應(yīng)。高劑量組和中劑量組中的所有疫苗接種者 （100%）在第三次接種后都產(chǎn)生了gB 結(jié)合和中和抗體，在低劑量組中反應(yīng)率為93%。在3 次給藥后，分別在71%、93%和86%的低、中和高劑量接受者中檢測(cè)到對(duì)gB和/或pp65 特異性細(xì)胞因子CD8+T 細(xì)胞反應(yīng)。該研究表明HB-101 疫苗在高達(dá)100%的接受者中引發(fā)了CMV 特異性體液反應(yīng)，在高達(dá)93%的接受者中引發(fā)了功能性細(xì)胞反應(yīng)。伴隨這些CMV 特異性T 細(xì)胞反應(yīng)，HB-101 誘導(dǎo)了LCMV NP 特異性、分泌IFN-γ 的T 細(xì)胞，這些載體特異性T 細(xì)胞的存在并不能阻止HB-101 對(duì)CMV gB 或pp65 特異性T 細(xì)胞的加強(qiáng)。HB-101 疫苗是迄今為止測(cè)試過的最有效的CMV 疫苗。CMV 特異性和 LCMV 特異性T 細(xì)胞反應(yīng)是否以及在何種程度上可以競(jìng)爭(zhēng)仍有待研究。當(dāng)前研究中的受試者在研究開始時(shí)均為CMV 血清抗體陰性，未來的研究中將包括血清抗體陽性的受試者[30]。

3 小結(jié)與展望

綜上所述，目前已有多種CMV 疫苗進(jìn)入不同階段的臨床試驗(yàn)研究，甚至DNA 疫苗已經(jīng)進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)，但疫苗的有效性和安全性還有待進(jìn)一步研究，所以至今尚無CMV 疫苗進(jìn)入臨床使用。相信隨著人們對(duì)CMV 免疫學(xué)及保護(hù)機(jī)制的研究不斷深入和科研技術(shù)的不斷進(jìn)步，安全有效的CMV疫苗上市指日可待。