曹建文 , 佘德勇 , 夏倫斌 , 左瑞華 , 何佳玉
(皖西學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院 , 安徽 六安 237012)
犬傳染性性病腫瘤(Canine transmissible venereal tumor,CTVT)是迄今為止唯一已知的4種可傳播腫瘤之一,也被稱為犬傳染性性病淋巴肉瘤、可移植性肉瘤、性病肉芽腫及犬傳染性交媾性腫瘤等,此腫瘤發(fā)生在性成熟的犬科動物中,并在交配過程中進行相互傳播[1]。它主要侵害外部生殖器,但也可影響鼻、耳、口、眼睛、大腦及淋巴結(jié)等內(nèi)部器官。犬傳染性性病腫瘤多發(fā)生于有交配行為的成年犬及免疫缺陷犬,流浪犬只易發(fā),潛伏期約為2~6個月。該腫瘤細(xì)胞含有57~59條染色體,與正常犬的78條染色體有明顯差異[2]。
犬傳染性性病腫瘤發(fā)病初期腫瘤細(xì)胞較小,很難察覺,隨著腫瘤細(xì)胞的不斷增殖擴散,導(dǎo)致生殖系統(tǒng)被破壞,患犬表現(xiàn)出臨床癥狀。臨床檢查主要表現(xiàn)為腫瘤呈花椰菜狀,結(jié)節(jié)狀,乳頭狀,大小不一,質(zhì)脆,腫瘤表面潰瘍和發(fā)炎,易出血和感染,無包膜[3]。本文通過對救助的1只流浪犬進行臨床檢查、細(xì)胞學(xué)染色及病理學(xué)檢查,最終診斷為犬傳染性性病腫瘤,影像學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移,通過6周化療后痊愈出院,3個月后回訪,恢復(fù)良好。
1只雌性流浪犬,年齡不詳,免疫和驅(qū)蟲不詳,體重4.4 kg,體溫38.9 ℃,精神、食欲正常,外陰部可見結(jié)節(jié)狀或菜花狀腫物,呈淡粉紅色,形狀不規(guī)則,大小為6 cm×7 cm,質(zhì)地脆弱,易出血(見封三彩版圖1)。
2.1 血液學(xué)檢查及影像學(xué)檢查 血液學(xué)檢查結(jié)果顯示白細(xì)胞升高,紅細(xì)胞輕微下降;影像學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移,提示患犬機體存在炎癥反應(yīng)和貧血。
2.2 細(xì)胞學(xué)檢查 采用一次性無菌注射器進行負(fù)壓穿刺腫瘤組織,抽吸細(xì)胞液,涂片后使用德國納博科臨Diff-Quik染色鏡檢,可見均質(zhì)的圓形或卵圓形離散型腫瘤細(xì)胞,胞漿呈淡藍(lán)色,核仁突出位于細(xì)胞一側(cè),有異型細(xì)胞出現(xiàn)(見封三彩版圖2),細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的圓形空泡(見封三彩版圖3),可見有絲分裂相。
2.3 病理組織學(xué)檢查 病理組織學(xué)檢查可見被破壞的鱗狀上皮細(xì)胞,有大量彌漫性的異型腫瘤細(xì)胞增生,瘤細(xì)胞排列緊密多為橢圓形或圓形(見封三彩版圖4),染色質(zhì)分布不均,核仁明顯,血管豐富且擴張充血,胞漿內(nèi)有大小不一的空泡出現(xiàn),有出血和炎性細(xì)胞浸潤,可見核分裂(見封三彩版圖5)。
根據(jù)發(fā)病情況、臨床檢查及實驗室檢查等診斷方法,最終診斷為犬傳染性性病腫瘤。
由于腫瘤組織面積較大,手術(shù)徹底切除難度較大,經(jīng)與救助人進行協(xié)商后,救助人同意采用化療,長春新堿0.025 mg/(kg·bw)靜脈滴注,皮下注射用重組犬α干擾素50萬單位/(kg·bw),1次/周。
每次化療前進行血液學(xué)檢測未發(fā)現(xiàn)異常,經(jīng)過6次化療后,腫瘤組織全部萎縮消退(見封底彩版圖6),停藥觀察3個月未出現(xiàn)復(fù)發(fā)。
犬傳染性性病腫瘤是一種常見的犬傳染性性病腫瘤,主要通過水平傳播。犬傳染性性病腫瘤分布于世界各地,在熱帶地區(qū)較常見,特別是美國南部、愛爾蘭、中美洲和南美洲及東南歐等地,該病的發(fā)病率較高[4]。流浪犬具有很高的攜帶率,該病沒有品種易感性,通常發(fā)生在2~8歲的犬只,年齡較大的犬只較少發(fā)生該病,雌性比雄性更易感,主要傳播途徑為犬和犬進行交配,通過交配行為或其他舔舐行為將有活性的腫瘤細(xì)胞接種到破損的黏膜上,造成犬只發(fā)病[5]。
犬傳染性性病腫瘤臨床表現(xiàn)為腫瘤呈花椰菜狀,有花序梗,結(jié)節(jié)狀,乳頭狀或多葉,從1個小結(jié)節(jié)到1個大腫塊不等,呈粉紅色或淡粉紅色肉樣,堅固,但易碎,無包膜,與正常組織無明顯界限[1,6]。表面經(jīng)常潰瘍和發(fā)炎,可能出血和感染,腫瘤多發(fā)生于外生殖器,創(chuàng)緣出現(xiàn)在包皮或陰道深處,發(fā)病初期很難發(fā)現(xiàn),在雄性犬只,腫瘤病變多位于球腺部或陰莖球基部,陰莖頭的干部或頂端發(fā)病較少,主要表現(xiàn)為陰莖有血性分泌物滴出;雌性犬只腫瘤多位于陰道前庭和陰道交界處,較少發(fā)生于陰道或外陰唇;發(fā)病早期,腫瘤迅速生長,呈透亮的血色,常伴有出血性液體滲出,隨著腫瘤的發(fā)展,病變部位突出和外生殖器變形,腫瘤病灶繼發(fā)細(xì)菌感染,患畜表現(xiàn)為排尿困難、會陰區(qū)潰瘍、厭食和拒絕交配等行為[2]。
目前在獸醫(yī)臨床上,常用于犬傳染性性病腫瘤的診斷方法有細(xì)胞抽吸涂片、病理組織學(xué)切片、免疫組化、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)等。細(xì)胞抽吸涂片可見腫瘤細(xì)胞呈圓形或橢圓形,核仁突出,可見有絲分裂相,胞漿為淡藍(lán)色,核偏離在細(xì)胞一側(cè),細(xì)胞漿內(nèi)有大小不一的圓形空泡;病理組織切片可見腫瘤細(xì)胞排列緊密,多為圓形或卵圓形,鱗狀上皮細(xì)胞被破壞,有異性細(xì)胞出現(xiàn),細(xì)胞質(zhì)豐富,細(xì)胞漿內(nèi)有大小不一的圓形空泡,可見有絲分裂;免疫組化可見波形蛋白(Vimentin)、溶酶體(Lysomes)和α-抗胰蛋白酶(AAT)抗體表達為陽性,細(xì)胞角蛋白(CK)抗體表達為陰性[7];細(xì)胞遺傳學(xué)在犬傳染性性病腫瘤的確診中具有決定性的優(yōu)勢,因為正常細(xì)胞和癌細(xì)胞之間存在著非常顯著的核型差異。因為犬的正常染色體數(shù)目是78,犬傳染性性病腫瘤細(xì)胞的染色體數(shù)目為59(57~64),這與其他類型腫瘤的染色體數(shù)目有顯著差異[2,6]。本病例通過細(xì)胞抽吸和病理組織學(xué)檢查方法進行確診。
目前在獸醫(yī)臨床中常用的治療方案有外科手術(shù)療法、化療和聯(lián)合化療以及免疫療法等方法,外科手術(shù)常用于局限性腫瘤或腫瘤組織較小的病畜,但術(shù)后復(fù)發(fā)率約為30%~75%,由于手術(shù)不能徹底鏟除腫瘤組織,常需配合化療來達到最佳治愈效果;化療常使用長春新堿,通常按0.5~0.75 mg/m2或 0.025 mg/(kg·bw)的劑量進行靜脈滴注或推注,每周使用1次,連續(xù)使用3~6周,長春新堿副作用較小,在化療期間患畜可能出現(xiàn)短暫性白細(xì)胞減少;對于長春新堿耐受犬只,可使用阿霉素或多柔比星進行化療,每3周靜脈滴注1次,連續(xù)使用2~3次,即可達到治愈效果[8];聯(lián)合化療常采用長春新堿和犬重組α干擾素,可縮短治療周期;免疫療法也被報道為治療犬傳染性性病腫瘤的一種方法,此方法是用恢復(fù)期的血清和全血轉(zhuǎn)移被動免疫,或用腫瘤勻漿作為自體疫苗和細(xì)菌毒素進行主動免疫,而現(xiàn)代的方法是用白介素和病毒制劑刺激主動細(xì)胞免疫[9]。