全血細(xì)胞計數(shù)在新生兒疾病診斷中的應(yīng)用研究現(xiàn)狀

羅曉斐 張煉

新生兒疾病具有癥狀不典型、發(fā)展迅速等特點，如果缺乏快速、準(zhǔn)確的實驗室指標(biāo)協(xié)助早期診斷，將不能進(jìn)行及時有效的治療，這會導(dǎo)致較高的發(fā)病率和死亡率。快速、客觀的輔助診斷指標(biāo)對于新生兒疾病的診斷、病因的探究以及治療方案的制定尤為重要。全血細(xì)胞計數(shù)是一項篩選性試驗，是通過手工血細(xì)胞計數(shù)或血液分析儀檢測血細(xì)胞的數(shù)量和類型，是新生兒科常用的實驗室診斷指標(biāo)。自動化計數(shù)等新的應(yīng)用以及熒光流式細(xì)胞術(shù)檢測技術(shù)的發(fā)展，提高了檢測速度及精確度，節(jié)省了時間和人力[1]。文章就網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)、未成熟中性粒細(xì)胞及未成熟血小板在新生兒疾病診斷中的應(yīng)用的最新研究現(xiàn)狀綜述如下。

1 網(wǎng)織紅細(xì)胞

網(wǎng)織紅細(xì)胞是晚幼紅細(xì)胞脫核后的未成熟階段，在周圍血液中的數(shù)值可以反應(yīng)骨髓紅細(xì)胞的生成功能。網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)通過自動血液分析儀可以報告為網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比（percentage of reticulocytes，RET%）、網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值（absolute count of reticulocytes，RET#）、未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)（immature fraction of reticulocytes，IRF%）和網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量（hemoglobin content of reticulocytes，Ret-He）[2]。國 外 的 研 究 報 導(dǎo) 了 健 康足月新生兒生后24 h內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)的參考區(qū)間：RET#為（0.16～0.29）×1012/L；RET%為3.2%～6.0%；IRF%為35.7%～52.8%；Ret-He為31.7～38.4 pg[3]。國內(nèi)有研究報導(dǎo)了武漢地區(qū)健康足月新生兒0～3 d網(wǎng)織紅細(xì)胞參考區(qū)間：RET#為（0.124～0.400）×1012/L；RET%為2.06%～6.35%；Ret-He為27.49～37.3 pg[4]。還有研究報導(dǎo)了不同胎齡新生兒出生24 h內(nèi)Ret-He的參考區(qū)間：＜30周為（30.88±4.55）pg，30～33周為（32.19±3.16）pg，33～36周為（33.66±2.50）pg；出生2～3 d的Ret-He參考區(qū)間：＜30周為（25.32±3.31）pg，30～33周為（28.66±3.32）pg，33～36周為（30.49±3.13）pg；同時，該研究通過對比不同胎齡新生兒生后24 h內(nèi)及出生2～3 d的Re-He，發(fā)現(xiàn)不同胎齡新生兒生后24 h內(nèi)的Ret-He均高于出生2～3 d[5]。

網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)主要應(yīng)用于新生兒溶血病的診斷。當(dāng)新生兒出現(xiàn)黃疸時，病理性黃疸患兒的RET%、RET#和IRF均比正?；純焊?，并且RET%與血紅蛋白（hemoglobin，Hb）同時異常比單一總膽紅素（total bilirubin，TBil）異常更能有效預(yù)測患兒是否為ABO溶血[6]。近年，國內(nèi)多個研究均得出新生兒溶血患兒的RET%顯著升高的結(jié)論[7-11]。國內(nèi)的研究還表明IRF在新生兒溶血患兒中也會明顯升高[9，10，12]。在治療效果評價方面，國內(nèi)有學(xué)者報導(dǎo)了RET%明顯下降提示新生兒溶血病治療有效[13]。

網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)還用在其他疾病診斷方面，國內(nèi)外學(xué)者有以下觀點：新生兒貧血患兒RET%高于健康新生兒[14]；Ret-He可以直接反映骨髓中可用鐵的水平，表明實時Hb合成狀態(tài)，并且轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度和Ret-He之間有良好的相關(guān)性，所以，Re-He或可用于新生兒貧血的診斷[15-16]；當(dāng)發(fā)生新生兒窒息時，患兒的RET#和RET%會明顯高于正常值，并且RET#還與窒息程度有關(guān)，RET#越高，窒息程度越重[17]；當(dāng)發(fā)生新生兒缺氧缺血性腦病時，患兒的RET#和IRF會升高[18]。另外，在兒童中，有研究報導(dǎo)兒童急性病毒性感染時IRF下降，因此，IRF與白細(xì)胞相關(guān)計數(shù)聯(lián)用可協(xié)助鑒別兒童早期感染性疾病是病毒性感染還是細(xì)菌性感染[19]，但當(dāng)新生兒發(fā)生感染性疾病時，IRF是否有變化，尚無相關(guān)研究。

2 未成熟中性粒細(xì)胞

中性粒細(xì)胞自原始細(xì)胞，經(jīng)原始粒細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞、帶狀核粒細(xì)胞、多形核粒細(xì)胞等階段，其中早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞及晚幼粒細(xì)胞為未成熟中性粒細(xì)胞。未成熟中性粒細(xì)胞的計數(shù)方法也包括了人工計數(shù)及自動化計數(shù)。未成熟中細(xì)粒細(xì)胞與中性粒細(xì)胞（immature-to-total neutrophil，I/T）比值需要技術(shù)人員人工計數(shù)[20]，可能因技術(shù)人員的主觀差異而產(chǎn)生誤差，且需耗費較多人力。自動血液分析儀可將未成熟中性粒細(xì)胞（immature granulocyte，IG）報告為未成熟粒細(xì)胞百分比（immature granulocyte percent，IG%）以及未成熟粒細(xì)胞絕對值（absolute immature granulocyte count，IG#）。國外研究報導(dǎo)健康足月新生兒臍血的IG#參考值為（0.026 5～0.112 3）×103/μL[21]，生后24 hIG#及IG%的參考范圍分別為（0.080～1.700）×103/μL以及0.6%～6.1%[3]。國外另外有一研究[22]報導(dǎo)了日齡＜7 d及＞7 d新生兒IG#和IG%的參考范圍：日齡＜7 d IG#和IG%分別為（0.08～0.47）×103/μL和（0.90～3.10）%；日齡＞7 d IG#和IG%分別為（0.08～0.47）×103/μL和0.40%～2.33%。

新生兒敗血癥是新生兒期病原體侵入血液后引起的全身性炎癥反應(yīng)[23]，早期可無特異性臨床表現(xiàn)，容易被誤診和漏診，但該病起病急，進(jìn)展快，容易錯失最佳治療時機。在敗血癥診斷方面，國外有研究表明I/T比值可預(yù)測母親患有絨毛膜炎時新生兒是否會患敗血癥，但是該研究因樣本量小而具有局限性，尚需大樣本量的研究證實[24]。國外另一個研究表明，對于極低出生體質(zhì)量兒，將I/T比值與白細(xì)胞計數(shù)以及C反應(yīng)蛋白聯(lián)合進(jìn)行分析，具有較高的靈敏度，可用于預(yù)測是否會發(fā)生晚發(fā)型敗血癥[25]。I/T比值需人工計數(shù)，會因技術(shù)人員的主觀因素產(chǎn)生誤差，而IG#和IG%通過自動血液分析儀報告，可消除這一誤差。

在感染性疾病診斷方面，國內(nèi)有研究發(fā)現(xiàn)新生兒發(fā)生細(xì)菌感染時IG#、IG%會明顯升高[26]。國外的研究則報導(dǎo)血培養(yǎng)陽性新生兒的IG#比血培養(yǎng)陰性新生兒高，并且血培養(yǎng)陽性患兒中，革蘭染色陰性組患兒IG#比革蘭染色陽性組患兒高[27]。

除此之外，在非感染性疾病診斷方面，國外有學(xué)者發(fā)現(xiàn)IG#與新生兒先天性膈疝的疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，提出IG#或許可以作為先天性膈疝患兒體外肺膜氧合（extracorporeal membrane oxygenation，ECMO）支持的預(yù)測指標(biāo)[28]。然而，該研究樣本量小，尚需大規(guī)模研究證實。

3 未成熟血小板

血小板由巨核細(xì)胞系分化而來，經(jīng)過原巨核細(xì)胞系、幼巨核細(xì)胞、巨核細(xì)胞等階段，其中原巨核細(xì)胞、幼巨核細(xì)胞及巨核細(xì)胞為未成熟血小板。未成熟血小板通過自動分析儀可以報告為未成熟血小板絕對計數(shù)（immature platelet count，IPC）和未成熟血小板分?jǐn)?shù)（immature platelet fraction percent，IPF%）。國外的研究報導(dǎo)了健康足月新生兒生后24 h內(nèi)IPC和IPF%的參考范圍：IPC為（4.73～19.72）×103/μL，IPF%為1.7%～9.8%[3]。國外另有一研究報導(dǎo)了不同胎齡新生兒的IPF參考范圍：28～32周早產(chǎn)兒為3.95%～7.07%，32～34周早產(chǎn)兒為3.46%～4.82%，34周～不足37周早產(chǎn)兒為3.95%～7.07%，足月新生兒為3.29%～5.87%[29]。

國內(nèi)文獻(xiàn)[30]提出，IPF%能反映血小板的生成能力，可用于血小板減少性疾病病因的鑒別：原發(fā)免疫性血小板減少癥（primary immune thrombocytopenia，ITP）組的IPF%高于健康對照組、再生障礙性貧血（aplastic anemia，AA）組、化療組（chemotherapy，CT）及慢性肝?。╟hronic liver diseases，CLD）組，而AA組、CT組、CLD組及健康對照組之間的IPF%無差異。國外一研究證實了IPF%在免疫性血小板減少癥和其他血小板減少癥鑒別方面具有臨床價值：ITP患者的IPF%升高，當(dāng)ITP治愈后IPF%恢復(fù)正常[31]。ITP患者恢復(fù)時，IPC升高比成熟血小板計數(shù)的變化要早3 d[32]。與消耗性血小板減少癥新生兒包括免疫介導(dǎo)的血小板減少、感染后繼發(fā)的血小板減少、彌散性血管內(nèi)凝血以及壞死性小腸結(jié)腸炎等相比，低再生性血小板減少癥新生兒包括小于胎齡兒、出生窒息以及一些綜合征等的IPC和IPF%較低[33]。

在感染性疾病診斷及病情評估方面，IPF%及IPC也有臨床價值：國內(nèi)學(xué)者報道膿毒癥患者的IPF%顯著上升，并且IPF%與膿毒癥嚴(yán)重程度有關(guān)[34]；國外有文獻(xiàn)提出IPC或可作為膿毒癥嚴(yán)重程度的預(yù)測指標(biāo)之一[34-35]。但是新生兒膿毒癥患者IPF%、IPC如何改變尚未見報道。

4 小結(jié)

自動化計數(shù)以及熒光流式細(xì)胞術(shù)檢測技術(shù)的發(fā)展，提高了全血細(xì)胞計數(shù)的檢測速度及精確度，使全血細(xì)胞計數(shù)在新生兒科的應(yīng)用越來越廣泛。網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)可評估新生兒紅細(xì)胞生成及機體鐵水平，可應(yīng)用于新生兒溶血病的診斷及療效評價；未成熟中性粒細(xì)胞可更準(zhǔn)確協(xié)助診斷感染性疾病，也可用于先天性膈疝患兒ECMO支持的預(yù)測指標(biāo)；未成熟血小板可協(xié)助診斷血小板減少癥的潛在病因，可用于血小板減少性疾病病因的鑒別。一些自動血細(xì)胞計數(shù)新生兒參考值的豐富，極大促進(jìn)了其在新生兒領(lǐng)域的應(yīng)用。但是還有一些全血細(xì)胞計數(shù)的參數(shù)在新生兒科的應(yīng)用有待探究：（1）未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)協(xié)助判斷感染性疾病是病毒性感染還是細(xì)菌性感染；（2）未成熟中性粒細(xì)胞在感染性疾病的應(yīng)用；（3）未成熟血小板百分比在血小板減少癥病因識別、膿毒癥的診斷及判斷嚴(yán)重程度方面的應(yīng)用等。新生兒全血細(xì)胞計數(shù)研究的豐富，將為新生兒科的臨床工作提供很大的幫助。