張建軍

在整體中醫(yī)學(xué)科發(fā)展過(guò)程中，其中比較重要的應(yīng)用類學(xué)科是中藥鑒定部分，這一學(xué)科中的主要內(nèi)容涵蓋較廣，比較常見(jiàn)的是鑒定中藥類型以及質(zhì)量等，學(xué)科開(kāi)展的目標(biāo)是制定中藥質(zhì)量相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，尋找新型化的藥源[1]。這一學(xué)科的主要研究對(duì)象可以確定為中藥，其中包括中藥的不同類型，例如中成藥、中藥飲片以及中藥材。藥物質(zhì)量對(duì)中藥的現(xiàn)代化具有直接影響，在長(zhǎng)時(shí)間優(yōu)化和發(fā)展過(guò)程中，其逐漸成為中藥學(xué)專業(yè)必修的學(xué)科之一[2]。針對(duì)這一學(xué)科的了解和掌握，本研究對(duì)學(xué)科的產(chǎn)生和發(fā)展歷史進(jìn)行回顧，對(duì)方法學(xué)中具體的內(nèi)容進(jìn)行闡述，例如藥物來(lái)源或者是生物鑒定方式等。

1 學(xué)科的產(chǎn)生歷程分析

這一學(xué)科的最初形成基礎(chǔ)前提是本草學(xué)以及生物學(xué)，時(shí)間追溯到20世紀(jì)的30年代，中國(guó)引入國(guó)外比較盛行的生藥學(xué)內(nèi)容，相關(guān)研究人員根據(jù)理論基礎(chǔ)編制相關(guān)數(shù)據(jù)，隨即研究人員編制了《分子生藥學(xué)》[3]《藥用植物學(xué)與生藥學(xué)》[4]著作，這些理論著作對(duì)藥學(xué)理論的相關(guān)研究等進(jìn)行詳細(xì)的介紹。在新中國(guó)成立之后，出于社會(huì)發(fā)展需求，生藥學(xué)獲得比較廣泛的應(yīng)用，其發(fā)展現(xiàn)狀也比較可觀，在這一階段比較著名的現(xiàn)代生物學(xué)奠基人有樓之岑等，在學(xué)科建立過(guò)程中付出了十分重要的貢獻(xiàn)。發(fā)表了相應(yīng)的著作，為學(xué)科的建立奠定了重要基礎(chǔ)，同時(shí)這一階段也是學(xué)科發(fā)展的第一個(gè)高峰階段。

時(shí)間發(fā)展到20世紀(jì)的60年代，中藥材鑒定逐漸發(fā)展成為專業(yè)課程，在中醫(yī)藥院校中開(kāi)始使用《中藥鑒定學(xué)》[5]作為教材，其出現(xiàn)在中藥鑒定學(xué)科發(fā)展歷史中是里程碑的存在，其價(jià)值不僅僅局限于此，也是學(xué)科形成的典型標(biāo)志。在之后的發(fā)展中，其教材更新和改版，相關(guān)研究人員逐漸豐富教材內(nèi)容，促使學(xué)科實(shí)際建設(shè)內(nèi)容獲得十分重要的發(fā)展。在進(jìn)入到21世紀(jì)之后，相關(guān)研究人員認(rèn)為學(xué)科發(fā)展的主要任務(wù)需要確定為制定中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，因此其主要任務(wù)可以劃分為以下幾種：承接國(guó)家藥學(xué)優(yōu)秀歷史，規(guī)范中藥品種；構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)，完成中藥類型以及質(zhì)量的鑒定；研究新型化的藥源[6，7]。

中藥鑒定學(xué)科在長(zhǎng)時(shí)間發(fā)展過(guò)程中，注重先進(jìn)化儀器應(yīng)用，其中新型化的學(xué)科知識(shí)以及技術(shù)應(yīng)用其中，并且過(guò)程中也產(chǎn)生了新的學(xué)科內(nèi)容，比較常見(jiàn)的有中藥分子鑒定學(xué)、中藥資源學(xué)等，這一現(xiàn)狀促使學(xué)科的發(fā)展逐漸成為系統(tǒng)性的集成學(xué)科群體[8，9]?，F(xiàn)階段科學(xué)技術(shù)水平不斷提升，在這一背景下，中藥鑒定工作逐漸融入到計(jì)算機(jī)技術(shù)以及現(xiàn)代化生物技術(shù)中，對(duì)學(xué)科發(fā)展具有重要作用，同時(shí)這一現(xiàn)象也是學(xué)科進(jìn)入到新的發(fā)展階段的重要顯示[10，11]。

2 中藥鑒定學(xué)科方法學(xué)的發(fā)展歷程分析

在早期階段的學(xué)科內(nèi)容主要是中藥品種整理，分析其來(lái)源，在發(fā)展一段時(shí)間后，其進(jìn)入到鑒定藥物性狀階段，并且在這一階段中開(kāi)始使用現(xiàn)代化信息技術(shù)，在多樣化技術(shù)推動(dòng)過(guò)程中，鑒定方法也實(shí)現(xiàn)了迅速發(fā)展，鑒定方式發(fā)展多樣，主要有以下幾種，接下來(lái)進(jìn)行具體分析。

2.1 顯微鑒定方式分析顯微鑒定方式的應(yīng)用主要是利用顯微鏡設(shè)備，可以有效分析中藥物質(zhì)的組織結(jié)構(gòu)、其產(chǎn)生的具體粉末特點(diǎn)等?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》中利用顯微方式進(jìn)行鑒定的藥物種類超多上千種，并且在這一鑒定方式之后，各種藥材等中成藥方式獲得相應(yīng)豐富。在先進(jìn)技術(shù)支持下，將電子技術(shù)等應(yīng)用其中，中藥丸的分析比較全面，囊括中藥材以及飲片等，這促成顯微鑒定方式具有更加強(qiáng)大的數(shù)據(jù)支持[12]。在顯微鏡種類中，透射顯微鏡的使用可以觀察亞顯微以及細(xì)胞器結(jié)構(gòu)等，設(shè)備檢測(cè)精細(xì)到乳汁細(xì)胞中的生物堿囊泡等[13]。使用掃描電鏡的方式可以有效辨別附屬物以及精微紋飾等，大多數(shù)研究中會(huì)使用這一設(shè)備觀察種子表面的超微特征，對(duì)不同物種的使用進(jìn)行有效鑒別[14]。

在研究過(guò)程中使用掃描電鏡的方式對(duì)沙苑子的真?zhèn)芜M(jìn)行觀察，根據(jù)結(jié)果提示，其產(chǎn)生差異性較大的超微特征[15]。還有部分研究將這一設(shè)備應(yīng)用到天竺黃的特異性鑒定中，可以有效區(qū)分人工與天然的區(qū)別[16]。經(jīng)過(guò)相關(guān)研究結(jié)果可以證實(shí)，使用偏光或者是熒光的顯微鏡可以鑒別更多的信息，例如顯微結(jié)構(gòu)以及顯微特征中，通過(guò)研究過(guò)程分析處于偏光鏡狀態(tài)下的中藥材粉末特征相關(guān)特異性信息，結(jié)合這一結(jié)果可以有效分辨生藥粉中的中成藥成本，具有十分重要的現(xiàn)實(shí)價(jià)值[17-19]。研究過(guò)程中使用熒光顯微技術(shù)，其檢查的主要鑒別點(diǎn)可以設(shè)置為莖的橫切面情況等特征，根據(jù)結(jié)果也可以鑒別白花蛇舌草與同屬容易混合藥品之間的區(qū)別[20]。研究過(guò)程涉及普通光學(xué)顯微鏡以及熒光顯微鏡，可以觀察表面切面或者是非腺毛等，可以觀察其產(chǎn)生的差異性熒光特征，根據(jù)這一結(jié)果可以應(yīng)用于不同種類忍冬屬植物花蕾鑒別中[21]。在工作人員研究過(guò)程中使用質(zhì)譜儀設(shè)備分析植物組織，切片之后分析其化學(xué)成分，過(guò)程中可以使用組織化學(xué)定位的方式，完成直接分析，這一階段并不需要使用樣品實(shí)施化學(xué)處理[22]。測(cè)定板藍(lán)根的抗病毒活性過(guò)程中，使用化學(xué)特征譜法或者紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方式，最終結(jié)果提示斷面的木皮相較于板藍(lán)根具有低于1∶1的現(xiàn)象，質(zhì)量更高[23]。研究過(guò)程中，顯色香草醛-冰醋酸等混合試劑，在顯微鏡應(yīng)用之后可以觀察其成分的主要分布位置[24]。

2.2 理化鑒定方式分析這種方式的應(yīng)用過(guò)程主要是借助物理方式或者是化學(xué)方式，過(guò)程中實(shí)現(xiàn)定性或者定量分析藥物中特征成分以及有效成分等。在20世紀(jì)中期發(fā)展階段，中藥分析工作逐漸涉及色譜技術(shù)以及光譜技術(shù)，在鑒定過(guò)程中更具系統(tǒng)性和完善性。在理化方式鑒定過(guò)程中，使用最早的方式是薄層色譜方式，通常應(yīng)用在對(duì)照品以及對(duì)照提取物的鑒定過(guò)程中，這種方式是應(yīng)用較為廣泛的色譜技術(shù)，同時(shí)專屬性十分顯著[25]。在分析技術(shù)以及色譜分離技術(shù)實(shí)現(xiàn)大規(guī)模發(fā)展之后，在中藥鑒定過(guò)程中，高效液相色譜方式是十分重要的技術(shù)，同時(shí)興起的色譜技術(shù)也較多，將這些技術(shù)應(yīng)用到中藥成分以及數(shù)量分布分析中，十分精確和精細(xì)，在中藥鑒定以及質(zhì)量控制中屬于十分重要的方式[26]。研究過(guò)程中使用分離技術(shù)可以獲得比較重要的峰指紋圖譜，對(duì)中藥組分中的質(zhì)量進(jìn)行有效控制。現(xiàn)階段這一技術(shù)主要應(yīng)用在中藥注射劑中，以此完成質(zhì)量控制過(guò)程[27]?，F(xiàn)階段，多種成分質(zhì)量控制植物組分使用的方式較多，在分析過(guò)程中可以使用標(biāo)準(zhǔn)樣品，對(duì)不同指標(biāo)成分完成分析，具有較強(qiáng)的適用性，同時(shí)操作具有簡(jiǎn)易性，投入的成本較低，因此應(yīng)用范圍比較廣泛[28]。近些年，在中藥材等鑒定過(guò)程中，光譜技術(shù)的應(yīng)用實(shí)現(xiàn)了擴(kuò)展，其中紫外、近紅外等方式均實(shí)現(xiàn)有效應(yīng)用[29]。在研究過(guò)程中通過(guò)紅外光譜檢測(cè)技術(shù)，對(duì)照藥材數(shù)量十分可觀，熒光光譜的使用可以鑒別三七藥粉和偽造品[30]。在現(xiàn)代化技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中，其分析速度較快，樣品不需要進(jìn)行處理，不會(huì)損害樣品，因此屬于認(rèn)同比較廣泛的中藥鑒定技術(shù)。

2.3 生物鑒定方式分析鑒定中藥材過(guò)程中，針對(duì)其生物特征的檢測(cè)就是生物鑒定的過(guò)程，其中主要鑒定內(nèi)容有中藥中化學(xué)物質(zhì)生物效應(yīng)的檢測(cè)，同時(shí)部分檢測(cè)也需要鑒定其中的生命信息物質(zhì)。使用的方法主要有以下幾種。①生物效價(jià)測(cè)定方式。這一方式鑒定的主要物質(zhì)是缺乏明確活性物質(zhì)的中藥，在質(zhì)量評(píng)價(jià)過(guò)程中會(huì)使用到活性測(cè)量方式，使用的方式比較多樣，例如測(cè)定免疫作用或者是降壓物質(zhì)測(cè)定等，同時(shí)過(guò)程中也會(huì)囊括溶血以及凝聚檢查方式[31]。研究過(guò)程中使用薄層顯影技術(shù)可以對(duì)相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行有效鑒別，例如兩色金雞菊物質(zhì)，可以獲得比較顯著的顯色效果，檢測(cè)樣品的抗氧化程度。研究過(guò)程中需要遵循相關(guān)理論，將生物熱動(dòng)力進(jìn)行表達(dá)作為基礎(chǔ)，實(shí)現(xiàn)中藥質(zhì)量生物效價(jià)[32]。②免疫鑒定方式。在動(dòng)植物藥材中其特異蛋白存在差異性，免疫鑒定方式是通過(guò)這種差異性鑒別藥材中的真?zhèn)危饕笜?biāo)是參考樣品中的特異抗原生成的沉淀反應(yīng)，技術(shù)的應(yīng)用可以有效鑒別關(guān)系比較親近的動(dòng)物藥。研究中使用瓊脂糖凝膠電泳法對(duì)人體的血白蛋白以及免疫球蛋白制品的程度進(jìn)行鑒別，價(jià)值顯著[33]。③中藥分子鑒定方式。依據(jù)大分子特征進(jìn)行鑒定，在中藥樣品中存在一定特殊性，鑒定過(guò)程中，針對(duì)核酸分子的鑒定主要是將DNA分子作為主要鑒定成分，使用的技術(shù)也比較多樣。

在中藥鑒定學(xué)科中，方法確定主要是結(jié)合藥物來(lái)源、性狀等，伴隨生物技術(shù)不斷進(jìn)步，中藥使用過(guò)程中其安全性有效評(píng)價(jià)是目前重要發(fā)展需求，生物鑒定法由此形成。生物檢定技術(shù)并不能對(duì)以往使用的方式進(jìn)行代替，需要保證其他技術(shù)的持續(xù)性，保證臨床中藥使用安全性，促進(jìn)學(xué)科發(fā)展進(jìn)步。