袁林祥
(湖南中醫(yī)藥大學藥學院,湖南長沙 410208)
黃精為百合科黃精屬多年生草本植物,歸脾、肺、腎經(jīng),具有健脾潤肺、益氣養(yǎng)陰之功效?!侗静萁?jīng)疏》 記載太陽之草名黃精,餌之可以長生,《本草綱目》記載常服黃精可延年益壽[1]?,F(xiàn)代研究表明,黃精含有黃酮、多糖、氨基酸、甾體皂苷、生物堿等有效成分[2-3],其功效包括調(diào)節(jié)血脂血糖[4-6]、抗衰老[7-9]、抗腫瘤[10]、調(diào)節(jié)免疫力[11]等多種生理功能,是一種具有多功能的藥食同源資源。
酵素是指利用乳酸菌、酵母菌等有益菌株對果蔬、藥食同源中藥等植物進行發(fā)酵,而含有一定活性物質(zhì)的產(chǎn)品[12-13]。經(jīng)過發(fā)酵后的產(chǎn)品可進一步增加其功效,降低副作用或產(chǎn)生其他活性物質(zhì)[14-15]。隨著經(jīng)濟的發(fā)展及健康意識的加強,人們的飲食觀念從“吃飽”“吃好”逐漸轉(zhuǎn)為“吃得營養(yǎng)”“吃得健康”。利用藥食同源植物資源,開發(fā)具有一定保健作用的新產(chǎn)品成為一種趨勢。
以黃精為主要原料,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)為指標,通過單因素試驗正交試驗優(yōu)化黃精酵素飲料的發(fā)酵工藝,旨在探尋黃精酵素飲料的最適發(fā)酵工藝,為黃精的綜合利用和開發(fā)提供新途徑。
黃精,市售;酵母,安琪酵母股份有限公司提供;鄰苯三酚、過二硫酸鉀、維C、乙二胺四乙酸二鈉(均為分析純),國藥集團化學試劑有限公司提供;蒸餾水為實驗室自制。
ATY124 型電子天平,日本島津儀器有限公司產(chǎn)品;HH-6S 型恒溫水浴鍋,鞏義中天儀器科技有限公司產(chǎn)品;UV1900 型雙光束紫外可見分光光度計,上海佑科儀器儀表有限公司產(chǎn)品;ST3100 型pH 計,奧豪斯儀器(常州)有限公司產(chǎn)品;PAC-101 型數(shù)顯糖度儀,杭州陸恒生物科技有限公司產(chǎn)品。
1.3.1 工藝流程
黃精→蒸制→浸泡→提取→過濾→接種發(fā)酵→檢測→成品。
1.3.2 黃精酵素產(chǎn)品品質(zhì)的確定方法
利用單因素試驗和正交試驗對發(fā)酵工藝進行研究,以發(fā)酵終點的SOD 酶活力為評價指標,確定產(chǎn)品品質(zhì)。采用鄰苯三酚自氧化法測定黃精酵素飲料樣品的SOD 酶活力[16-17]。
1.3.3 單因素試驗
將初始糖質(zhì)量分數(shù)(按Brix 值計)(14%,18%,22%,26%,30%)、料液比(1∶60,1∶70,1∶80,1∶90,1∶100)、發(fā)酵時間(16,24,32,40,48 h)、酵母質(zhì)量分數(shù)(1%,2%,3%,4%,5%)設(shè)置為單因素,研究以上幾個因素對黃精酵素發(fā)酵終點SOD 活力的影響,確定最佳的單因素水平。
1.3.4 正交試驗
依據(jù)上述所測得各單因素的試驗結(jié)果,選取糖質(zhì)量分數(shù)、料液比、發(fā)酵時間、酵母質(zhì)量分數(shù)4 個因素各3 水平,以黃精酵素發(fā)酵終點SOD 酶活力作為指標,進行正交試驗。
發(fā)酵工藝優(yōu)化正交因素與水平設(shè)計見表1。
表1 發(fā)酵工藝優(yōu)化正交因素與水平設(shè)計
2.1.1 糖質(zhì)量分數(shù)對SOD 值的影響
糖質(zhì)量分數(shù)對SOD 值的影響見圖1。
圖1 糖質(zhì)量分數(shù)對SOD 值的影響
由圖1 可知,黃精酵素飲料SOD 值隨糖質(zhì)量分數(shù)的增加先上升后下降。當糖質(zhì)量分數(shù)(Brix)26%時,達最高點,當糖質(zhì)量分數(shù)(Brix)>26%時,SOD 值有所下降。因此選取Brix 為22%,26%,30%此3 個初始糖度水平進行正交試驗。
2.1.2 黃精料液比對SOD 值的影響
黃精料液比對SOD 值的影響見圖2。
圖2 黃精料液比對SOD 值的影響
由圖2 可知,黃精酵素飲料SOD 值隨料液比的增加先上升后下降。當黃精料液比為1∶80 時,達最高點;當黃精料液比大于1∶80 時,SOD 值有所下降。因此,選取1∶70,1∶80,1∶90 此3 個初始料液比水平進行正交試驗。
2.1.3 發(fā)酵時間對SOD 值的影響
發(fā)酵時間對SOD 值的影響見圖3。
圖3 發(fā)酵時間對SOD 值的影響
由圖3 可知,黃精酵素飲料SOD 值隨發(fā)酵時間的增加先上升后下降。當發(fā)酵時間為24 h 時,達最高點;當黃精發(fā)酵時間大于24 h 時,SOD 值有所下降。因此選取16,24,32 h 此3 個初始發(fā)酵時間水平進行正交試驗。
2.1.4 酵母質(zhì)量分數(shù)對SOD 值的影響
酵母質(zhì)量分數(shù)對SOD 值的影響見圖4。
圖4 酵母質(zhì)量分數(shù)對SOD 值的影響
由圖4 可知,黃精酵素飲料SOD 值隨發(fā)酵質(zhì)量分數(shù)的增加先上升后下降。當發(fā)酵質(zhì)量分數(shù)為3%時,達最高點,當酵母質(zhì)量分數(shù)大于3%時,SOD 值有所下降。因此選取2%,3%,4%此3 個初始發(fā)酵質(zhì)量分數(shù)水平進行正交試驗。
根據(jù)單因素試驗結(jié)果,按正交試驗設(shè)計,選取初始糖質(zhì)量分數(shù)Brix(22%,26%,30%)、料液比(1∶70,1∶80,1∶90)、發(fā)酵時間(16,24,32 h)及酵母質(zhì)量分數(shù)(2%,3%,4%)進行試驗。
黃精飲料酵素發(fā)酵L9(34)正交試驗結(jié)果見表2。
表2 黃精飲料酵素發(fā)酵L9(34)正交試驗結(jié)果
由表2 可知,黃精酵素發(fā)酵的糖質(zhì)量分數(shù)(A)、料液比(B)、發(fā)酵時間(C)及酵母質(zhì)量分數(shù)(D)4 個因素的極差(R)表現(xiàn)為RC>RA>RD>RB,即影響黃精酵素發(fā)酵的主次影響因素依次為發(fā)酵時間、糖質(zhì)量分數(shù)、酵母質(zhì)量分數(shù)、料液比。得到最優(yōu)組合為A3B1C2D3,即黃精酵素的最佳發(fā)酵工藝為糖初始質(zhì)量分數(shù)(Brix)30%,料液比1∶70,發(fā)酵時間24 h,酵母質(zhì)量分數(shù)4%。
2.3.1 感官指標
所制備的黃精酵素組織形態(tài)均勻、澄清透明,色澤呈紫紅色,有黃精特有的香氣。
2.3.2 理化指標
最優(yōu)工藝產(chǎn)品的pH 值為4.89,可溶性固形物為12%。
2.3.3 微生物指標符合GB7 101—2015《食品安全國家標準飲料》。微生物指標及結(jié)果見表3。
表3 微生物指標及結(jié)果
以黃精為原料,SOD 酶活力為指標,通過單因素試驗研究了初始糖度、料液比、發(fā)酵時間、酵母質(zhì)量分數(shù)4 個因素對黃精酵素飲料的SOD 值的影響,單因素試驗及正交試驗優(yōu)化了黃精酵素飲料的發(fā)酵工藝。優(yōu)化后的黃精酵素飲料的發(fā)酵工藝為初始糖度(Brix)30%,料液比1∶70,發(fā)酵時間24 h,酵母質(zhì)量分數(shù)4%。發(fā)酵后的黃精酵素飲料色澤紅亮鮮艷、透明澄清,有黃精特有香氣。該研究為黃精酵素的進一步開發(fā)提供了參考,豐富了黃精產(chǎn)品的加工種類。