鐘林江，張 佳，劉曉鳳，楊俊莉，鄧 妍，劉 濤

(1.成都大學(xué) 四川抗菌素工業(yè)研究所，四川 成都 610106；2.四川科倫藥業(yè)股份公司，四川 成都 610106；3.民辦四川天一學(xué)院，四川 綿竹 618200；4.成都大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院，四川 成都 610106)

丹參莖葉為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的莖和葉，約占丹參植株鮮質(zhì)量的66%，在丹參采收期常被丟棄，造成丹參資源的浪費(fèi)[1]，隨著丹參用量的不斷增加，丹參莖葉的浪費(fèi)量也不斷加大。丹參分布廣泛，丹參產(chǎn)量大的地區(qū)主要有河南、山東、四川、山西、陜西、江蘇和安徽等省份，不同地區(qū)丹參質(zhì)量差異較大[2]；在歷年的丹參抽查檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，由于加工方法的不同，丹參質(zhì)量也有較大差異，丹參莖葉與丹參同株，在產(chǎn)地加工過(guò)程中最大限度地減少丹參莖葉主要有效成分分解與流失的研究具有重要意義[3-4]。

丹參莖葉中所含成分主要為丹酚酸類(lèi)水溶性化合物，現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)表明，丹參莖葉具有活血化瘀、抗氧化等功效[5-8]。丹參莖葉藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)未載入現(xiàn)行版《中國(guó)藥典(一部)》(2020版)中，所以質(zhì)量控制水平不高。本研究以新采收鮮丹參莖葉為研究對(duì)象，通過(guò)簡(jiǎn)單的前處理，設(shè)計(jì)鮮丹參莖葉不同加工方法，優(yōu)選加工方式，減少藥效成分的損耗；對(duì)丹參莖葉的質(zhì)量進(jìn)行控制，參照《中國(guó)藥典(一部)》(2020版)中的相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)[9]，建立丹參莖葉水分(質(zhì)量分?jǐn)?shù))、水溶性浸出物、灰分限度等常規(guī)檢查項(xiàng)的標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)建立相應(yīng)的薄層色譜鑒別方法、高效液相色譜法對(duì)丹參莖葉中的丹酚酸B及迷迭香酸進(jìn)行含量測(cè)定，以期為丹參莖葉的加工、有效儲(chǔ)存和后續(xù)研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

DZTW型電子調(diào)溫電熱套，天津市靜?？h工興電器廠(chǎng)；BS-6KH型電子天平，上海友聲衡器有限公司；FA 2004型分析電子天平，上海良平儀器儀表有限公司；101-1-S型電熱鼓風(fēng)干燥箱，成都雅源科技有限公司；RE-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHZ-D(Ⅲ)型循環(huán)水式多用真空泵，成都康宇科技有限公司；DZF-6050A型真空干燥箱，北京中興偉業(yè)儀器有限公司；TD1000W型電子萬(wàn)用爐、SX2-12-10型箱式電阻爐，北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司；P230Ⅱ型高效液相色譜儀，大連依利特分析儀器有限公司。

1.2 試劑與材料

丹參莖葉批次1(20180101、20180102、20180120、20180128、20180202、20180622、20180623和20190108)，四川德陽(yáng)中江縣集鳳鎮(zhèn)林家溝村；丹參莖葉批次2(20200106)，四川巴中巴州區(qū)方山雁村；磷酸(分析純)、甲醇和乙腈(色譜純)，成都市科隆化學(xué)品有限公司；迷迭香酸對(duì)照品(HPLC級(jí))、丹酚酸B對(duì)照品(HPLC級(jí))、咖啡酸對(duì)照品(HPLC級(jí))、蘆丁對(duì)照品(HPLC級(jí))、原兒茶醛對(duì)照品(HPLC級(jí))，四川省維克奇生物科技有限公司；水為純凈水。

1.3 丹參莖葉產(chǎn)地加工方法

1.3.1 丹參莖葉前處理

2批丹參莖葉分別采自四川省德陽(yáng)市中江縣集鳳鎮(zhèn)林家溝村1組(批號(hào)20180101)和11組(批號(hào)20180102)，新鮮的丹參莖葉經(jīng)切成3 cm的段狀，每批丹參莖葉按質(zhì)量均分成6份，每批分別采用40 ℃恒溫烘干、50 ℃恒溫烘干、60 ℃恒溫烘干、40～60 ℃梯度烘干、陰干、曬干。按照《中國(guó)藥典(四部)》(2020年版)中0832法項(xiàng)的要求測(cè)定水分。

1.3.2 丹參莖葉含量測(cè)定方法

供試品的制備：平行取12份丹參莖葉粉末，每批取約1 g，精密稱(chēng)定后置于100 mL具塞錐形瓶中，精密移取體積分?jǐn)?shù)80%甲醇50 mL，稱(chēng)定質(zhì)量，超聲處理(140 W，42 kHz)30 min后放置冷卻，再稱(chēng)定質(zhì)量，用80%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，即得樣品。

對(duì)照品的制備：取迷迭香酸、丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加入80%甲醇分別制成74.53 和10.00 μg/mL的溶液，即得對(duì)照樣品。

色譜條件[4]：色譜柱為Supersil ODS2色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)，流動(dòng)相為甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B)，梯度洗脫(0～8 min 16%～18% A、8～25 min 18%～35% A、25～38 min 35%～44% A、38～58 min 44%～40% A、58～70 min 40%～16% A、70～72 min 16%～16% A)，流速為1.0 mL/min，柱溫為30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm，進(jìn)樣量為10 μL。

1.4 丹參莖葉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立方法

1.4.1 水溶性浸出物的測(cè)定

參照《中國(guó)藥典(四部)》(2020版)通則中2201冷浸法測(cè)定水溶性浸出物的方法。取丹參莖葉粉末約3 g(過(guò)三號(hào)篩)，精密稱(chēng)定后置于250 mL的錐形瓶中，精密加水100 mL，密塞，冷浸，前6 h內(nèi)不斷振搖后，再靜置18 h，用干燥濾器迅速過(guò)濾，精密量取續(xù)濾液20 mL，置于已干燥至恒質(zhì)量的蒸發(fā)皿中，在水浴鍋上蒸干后，轉(zhuǎn)移至105 ℃鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥3 h，再置于干燥器中冷卻30 min，精密稱(chēng)定質(zhì)量。

1.4.2 總灰分的測(cè)定

參照《中國(guó)藥典(四部)》(2020版)通則中2302測(cè)定總灰分的方法。取丹參莖葉粉末約4 g(過(guò)三號(hào)篩)，置熾灼至恒質(zhì)量的坩堝內(nèi)，精密稱(chēng)定，用電子萬(wàn)用爐緩緩熾熱，至完全碳化時(shí)(碳化由黑色至白色時(shí))，緩緩轉(zhuǎn)移至箱式電阻爐，逐漸升高溫度至550 ℃，使完全碳化至恒質(zhì)量，根據(jù)殘?jiān)|(zhì)量，計(jì)算供試品中總灰分含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。

1.4.3 酸不溶性灰分的測(cè)定

取所得總灰分，在坩堝中小心加入稀鹽酸10 mL，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10 min，表面皿用熱水5 mL沖洗，洗液并入坩堝中，用無(wú)灰濾紙濾過(guò)，坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上，用AgNO3溶液檢測(cè)洗滌的濾液不顯氯化物為止。濾渣連同濾紙轉(zhuǎn)移至同一坩堝中，用電子萬(wàn)用爐熾灼至全部碳化為白色，緩緩轉(zhuǎn)移至箱式電阻爐，逐漸升高溫度至550 ℃，使完全碳化至恒質(zhì)量，根據(jù)殘?jiān)|(zhì)量，計(jì)算供試品中酸不溶性灰分含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。

1.4.4 丹參莖葉TLC薄層鑒別方法的建立

對(duì)照品溶液的制備：取迷迭香酸及丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加入80%甲醇分別制成1.12和2.00 mg/mL的溶液作為對(duì)照品溶液。

供試品溶液的制備：取丹參莖葉粉末0.2 g，加甲醇-水溶液(體積比為3∶ 1)25 mL，加熱回流1 h，濾過(guò)，濾液濃縮至1 mL作為供試品溶液。

展開(kāi)劑的制備：分別吸取乙酸丁酯-甲酸-水溶液(體積比為10∶ 2∶ 3)共30 mL于展開(kāi)缸，加蓋密閉10 min，即得。

展開(kāi)：用經(jīng)無(wú)水乙醇清洗后的毛細(xì)吸管吸取上述3種溶液(對(duì)照品丹酚酸B、迷迭香酸、供試品溶液)各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，緩緩放入裝有展開(kāi)劑的展開(kāi)缸中，展至約8 cm后取出，晾干，在紫外燈光(365 nm)下檢視。

1.4.5 丹參莖葉含量測(cè)定方法的建立

對(duì)照品的制備：取迷迭香酸、丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加入80%甲醇制成223.0 μg/mL迷迭香酸和135.9 μg/mL丹酚酸B的對(duì)照品溶液。

供試品的制備：取丹參莖葉粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.5 g，精密稱(chēng)定，置于具塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇25 mL，稱(chēng)定質(zhì)量，超聲處理(140 W，42 kHz)30 min，放冷，再稱(chēng)定質(zhì)量，用80%甲醇補(bǔ)足減失質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

色譜條件：色譜柱為Supers:1 ODS 色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，等度洗脫為乙腈-0.1%磷酸溶液(體積比為22∶ 78)，流速為1.2 mL/min，波長(zhǎng)為265 nm，進(jìn)樣體積為10 μL。

1.4.6 方法學(xué)考察

精密度：取丹參莖葉粉末(過(guò)三號(hào)篩，批號(hào)為20180101-1，下同)約0.5 g，制備供試品溶液，然后按照色譜條件進(jìn)行含量測(cè)定，精密吸取同一供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，

穩(wěn)定性：取丹參莖葉粉末約0.5 g，制備供試品溶液，然后按色譜條件進(jìn)行含量測(cè)定，精密吸取同一供試品溶液，分別于 0、2、4、8、12和24 h后進(jìn)樣。

重復(fù)性：取丹參莖葉粉末約0.5 g，精密稱(chēng)定，平行制備供試品溶液6份，然后按照色譜條件進(jìn)行含量測(cè)定，樣品質(zhì)量換算后，計(jì)算單位峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)值。

線(xiàn)性關(guān)系：配制高濃度迷迭香酸對(duì)照品溶液，稀釋為5個(gè)梯度濃度的溶液，配制高濃度丹酚酸B對(duì)照品溶液，稀釋為6個(gè)梯度濃度的對(duì)照品溶液，分別進(jìn)行液相色譜測(cè)定其含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。

含量測(cè)定：取不同批次丹參莖葉藥材粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.5 g，平行制備9份供試品溶液后利用色譜條件測(cè)定其含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 丹參莖葉產(chǎn)地加工結(jié)果

將干燥后的丹參莖葉編號(hào)，林家溝村1組編號(hào)分別為180101-1、180101-2、180101-3、180101-4、180101-5和180101-6；林家溝村11組編號(hào)分別為180102-1、180102-2、180102-3、180102-4、180102-5和180102-6，分別打粉后過(guò)三號(hào)篩，測(cè)定水分，結(jié)果詳見(jiàn)表1。由表1可知：不同干燥方式的水分差異較大，依據(jù)平均值的±20%規(guī)定其限度，規(guī)定最終丹參莖葉中的水分含量都不超過(guò)12%，符合《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究制定技術(shù)要求》[10]中的相關(guān)要求。

表1 丹參莖葉水分測(cè)定結(jié)果

2.2 不同產(chǎn)地丹參莖葉藥材最優(yōu)加工方法結(jié)果

以主要成分迷迭香酸與丹酚酸B含量為指標(biāo)，采用高效液相色譜法對(duì)迷迭香酸和丹酚酸B進(jìn)行含量測(cè)定。將丹酚酸B對(duì)照品溶液、迷迭香酸對(duì)照品溶液和12批供試品依次注入高效液相色譜儀，得到各批次有效成分峰面積，經(jīng)計(jì)算后得到迷迭香酸和丹酚酸B的含量進(jìn)行1∶ 1綜合加權(quán)評(píng)分，詳見(jiàn)表2。

表2 12批丹參莖葉藥材有效成分

由表2可知，兩個(gè)產(chǎn)地的陰干的綜合加權(quán)評(píng)分分別為100.00和85.90，平均為92.95；梯度烘干時(shí)的綜合加權(quán)評(píng)分分別為83.83和96.25，平均為90.04，說(shuō)明陰干時(shí)丹參莖葉的迷迭香酸與丹酚酸B含量都較高。梯度烘干(40～60 ℃)效果次之，低溫等度烘干對(duì)丹參莖葉中迷迭香酸和丹酚酸B含量有一定的影響。此外，曬干對(duì)丹參莖葉有效成分含量影響較大，同一批次丹參莖葉，與陰干相比，迷迭香酸減少了10.18 mg/g，在采收加工時(shí)應(yīng)注意避免陽(yáng)光暴曬。

陰干時(shí)的綜合加權(quán)評(píng)分最高，梯度烘干(40～60 ℃)次之，同時(shí)考慮到梯度烘干較麻煩且浪費(fèi)能源，增加成本，且在大規(guī)模進(jìn)行烘干時(shí)，不易在一定時(shí)間內(nèi)控制其溫度，造成不同批次質(zhì)量差異較大。陰干雖然耗時(shí)較長(zhǎng)，但對(duì)丹參莖葉中迷迭香酸和丹酚酸B含量影響較小，還能節(jié)約能源，所以選取陰干為最佳干燥方式。

2.3 丹參莖葉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2.3.1 水溶性浸出物結(jié)果

丹參莖葉后期擬開(kāi)發(fā)為生物肥料，因此本研究測(cè)定了其水溶性浸出物的含量，結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知：各批次間的水溶性浸出物含量差異不大，都在24.35%～26.51%范圍內(nèi)，依據(jù)平均值的±20%規(guī)定其限度，并規(guī)定最終丹參莖葉中的水溶性浸出物都不少于21%，可見(jiàn)此結(jié)果符合《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究制定技術(shù)要求》中的相關(guān)要求。

表3 水溶性浸出物測(cè)定結(jié)果

2.3.2 灰分標(biāo)準(zhǔn)的建立

灰分是指藥材經(jīng)高溫灼燒后殘留下來(lái)的無(wú)機(jī)物，灰分指標(biāo)可以評(píng)定藥材是否被污染或摻假。如果灰分含量超標(biāo)，說(shuō)明了原藥材中可能混有雜質(zhì)或在加工過(guò)程中可能混入一些泥沙等污染物。本研究測(cè)定了丹參莖葉的總灰分含量，結(jié)果見(jiàn)表4。由表4可知：各批次間的灰分含量在11.28%～12.96%范圍內(nèi)，差異不大，依據(jù)平均值的±20%規(guī)定其限度，并規(guī)定最終丹參莖葉中的灰分含量都不少于13%，此結(jié)果符合《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究制定技術(shù)要求》中的相關(guān)要求。

表4 總灰分測(cè)定結(jié)果

2.3.3 酸不溶性灰分結(jié)果

酸不溶性灰分指標(biāo)能表明污染的泥沙和藥材中原來(lái)存在的微量氧化硅等物質(zhì)的量。本研究在總灰分的基礎(chǔ)上，測(cè)定其酸不溶灰分的含量，結(jié)果見(jiàn)表5。根據(jù)殘?jiān)|(zhì)量，計(jì)算供試品中酸不溶性灰分含量。由表5可知：各批次間的酸不溶灰分含量在1.09%～2.06%范圍內(nèi)，差異不大，依據(jù)平均值的±20%規(guī)定其限度，并規(guī)定最終丹參莖葉中的酸不溶灰分都不少于1.81%，此結(jié)果符合《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究制定技術(shù)要求》中的相關(guān)要求。

表5 酸不溶性灰分測(cè)定結(jié)果

2.3.4 丹參莖葉TLC薄層鑒別方法結(jié)果

薄層色譜法(TLC)是根據(jù)比移值(Rf)來(lái)進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的方法，更是一種快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。采用薄層色譜法對(duì)丹參莖葉中的活性物進(jìn)行分析，結(jié)果如圖1所示。由圖1可知：供試樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的斑點(diǎn)與位置(Rf值一致)一致，顯現(xiàn)相同顏色的熒光斑點(diǎn)，說(shuō)明采用TLC法可快速鑒別丹參莖葉中的迷迭香酸和丹酚酸B。

1—丹酚酸B對(duì)照品；2—迷迭香酸對(duì)照品；3～4—供試品圖1 丹參莖葉TLC分析結(jié)果Fig.1 TLC diagram of stem and leaf of S. miltiorrhiza

2.3.5 丹參莖葉含量(HPLC)測(cè)定方法及結(jié)果

為了更精確測(cè)定丹參莖中迷迭香酸和丹酚酸B的含量，建立HPLC分析方法，通過(guò)改進(jìn)流動(dòng)相種類(lèi)、檢測(cè)波長(zhǎng)和供試品制備方法，以出峰時(shí)間和分離度為指標(biāo)，最后確定含量測(cè)定條件，并進(jìn)行HPLC分析方法學(xué)的考察。迷迭香酸、丹酚酸B對(duì)照品液相HPLC色譜圖詳見(jiàn)圖2。供試品溶液HPLC色譜圖詳見(jiàn)圖3。由圖2～3可知：丹酚酸B和迷迭香酸出峰良好，分離度達(dá)到要求，同時(shí)在供試品色譜中，兩種成分出峰時(shí)間與對(duì)照品色譜相同，經(jīng)對(duì)照品指認(rèn)，峰1和2分別代表迷迭香酸和丹酚酸B，其他峰為其他活性物質(zhì)峰，由于條件有限，未進(jìn)行液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)分析。因此在后續(xù)研究中，將對(duì)其他峰所代表的活性物質(zhì)進(jìn)行分析。所以在該色譜條件下，僅可用于測(cè)定丹參莖葉中的丹酚酸B及迷迭香酸的含量。

圖2 迷迭香酸、丹酚酸B對(duì)照品HPLC色譜圖Fig.2 HPLC diagram of rosmarinic acid and salvianolic acid B as control substances

圖3 供試品HPLC色譜分析Fig.3 HPLC chromatogram of the tested product

精密度結(jié)果見(jiàn)表6，并計(jì)算其RSD。由表6可知：迷迭香酸峰面積RSD值為2.43%，丹酚酸B峰面積RSD值為4.35%，表明儀器精密度良好。

表6 丹參莖葉含量測(cè)定精密度結(jié)果

穩(wěn)定性結(jié)果見(jiàn)表7，計(jì)算其RSD值。由表7可知，迷迭香酸峰面積RSD值為4.72%，丹酚酸B峰面積RSD值為5.07%，表明供試品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

表7 丹參莖葉含量測(cè)定穩(wěn)定性結(jié)果

重復(fù)性結(jié)果見(jiàn)表8，對(duì)樣品進(jìn)行質(zhì)量換算后，計(jì)算單位峰面積RSD值。由表8可知，迷迭香酸峰面積RSD值為9.33%，丹酚酸B峰面積RSD值為4.32%，表明該方法重復(fù)性良好。

表8 丹參莖葉含量測(cè)定重復(fù)性結(jié)果

迷迭香酸線(xiàn)性考察結(jié)果見(jiàn)表9，并以縱軸為迷迭香酸對(duì)照品峰面積，橫軸為迷迭香酸對(duì)照品濃度，建立坐標(biāo)軸，得到迷迭香酸對(duì)照品線(xiàn)性回歸方程Y=6 452.3X-44 448，R=0.999 9。由表9可知：迷迭香酸的質(zhì)量濃度在22.64 ～679.00 μg/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，可適用于丹參莖葉中的迷迭香酸含量測(cè)定。

表9 丹參莖葉含量測(cè)定迷迭香酸線(xiàn)性結(jié)果

丹酚酸B的線(xiàn)性考察結(jié)果見(jiàn)表10，并以縱軸為丹酚酸B對(duì)照品峰面積，橫軸為丹酚酸B對(duì)照品濃度，建立坐標(biāo)軸，得到丹酚酸B對(duì)照品線(xiàn)性回歸方程Y=7 667.5X-157 527，R=0.999 8。由表10可知：丹酚酸B的質(zhì)量濃度在25.81 ～826.00 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，可用于丹參莖葉中丹酚酸B的含量測(cè)定。

表10 丹參莖葉含量測(cè)定丹酚酸B線(xiàn)性結(jié)果

2.3.6 不同批次丹參莖葉含量測(cè)定結(jié)果

取不同批次丹參莖葉藥材粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.5 g，制備供試品溶液，平行制備9份供試品溶液測(cè)定其含量，結(jié)果見(jiàn)表11。由表11可知：各批次間的迷迭香酸及丹酚酸B含量差異相對(duì)較大，平均值分別為0.76%和0.29%。依據(jù)平均值的±20%規(guī)定其限度，規(guī)定丹參莖葉中迷迭香酸和丹酚酸B的含量分別不低于0.61%和0.23%。，符合《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究制定技術(shù)要求》中的相關(guān)要求。

表11 9批丹參莖葉含量測(cè)定結(jié)果

參照《中國(guó)藥典》(2020年版)的相關(guān)項(xiàng)，對(duì)丹參莖葉水溶性浸出物的量、總灰分含量及酸不溶性灰分含量制定標(biāo)準(zhǔn)，制定采用薄層色譜法對(duì)丹參莖葉進(jìn)行鑒別的方法及采用高效液相色譜法對(duì)迷迭香酸和丹酚酸B含量測(cè)定方法，方法學(xué)考察結(jié)果表明本方法穩(wěn)定可行。測(cè)定9批次丹參莖葉丹迷迭香酸和丹酚酸B含量并規(guī)定其限度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：不同產(chǎn)地丹參莖葉中迷迭香酸和丹酚酸B含量有明顯差異。為防止丹參莖葉資源以次充好，建立其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并對(duì)其規(guī)定限度是極有必要的?！吨袊?guó)藥典(一部)》(2020年版)中丹參項(xiàng)下丹酚酸B“含量測(cè)定”規(guī)定，在丹參干燥品中，含丹酚酸B不得少于3.0%。而在本研究中規(guī)定，丹參莖葉干燥品中，含丹酚酸B不得少于0.23%。對(duì)丹參和丹參莖葉中主要成分含量下限進(jìn)行比較，與丹參相比，丹參莖葉丹酚酸B含量偏低，且含有不低于0.61%的迷迭香酸，但丹參莖葉中不含丹參酮類(lèi)成分，可以推斷，丹酚酸B主要存在于丹參形成層以?xún)?nèi)，部分存在與丹參莖葉中。經(jīng)查閱文獻(xiàn)[11-12]，丹參酮主要存在于丹參形成層以外(即根皮部分，包括丹參須根)，進(jìn)一步驗(yàn)證上述猜想的正確性。

3 結(jié)論

對(duì)丹參莖葉產(chǎn)地加工方法進(jìn)行考察，結(jié)果表明，陰干最為適合，也符合目前綠色、節(jié)能的發(fā)展要求。研究所建立的水分、水溶性浸出物、總灰分及酸不溶性灰分標(biāo)準(zhǔn)能較好地控制丹參莖葉原藥材的質(zhì)量。建立的薄層色譜法對(duì)丹參莖葉藥材進(jìn)行鑒別，采用高效液相色譜法對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定，按干燥品計(jì)算，丹酚酸B(C36H30O16)和迷迭香酸(C18H16O8)分別不得少于0.23%和0.61%。初步研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地丹參莖葉質(zhì)量有明顯差異，在后續(xù)研究過(guò)程中，將采收不同地區(qū)多批次丹參莖葉進(jìn)行建模，為丹參莖葉的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)(有機(jī)肥、飼料、獸藥和化妝品等)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。