陳思琪,黃子慧

南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院,江蘇 南京 210021

慢性難愈性創(chuàng)面是指經(jīng)1個月以上臨床規(guī)范治療仍未愈合也無愈合傾向的創(chuàng)面[1]。在各種病理因素的影響下,創(chuàng)面自我修復(fù)機制紊亂,無法按照正常愈合階段達到解剖和功能上的完整性,就形成了慢性難愈性創(chuàng)面[2],其類別主要包括靜脈性潰瘍、缺血性潰瘍、壓力性潰瘍、代謝性潰瘍及感染性潰瘍等[3]。該病治療難度大、時間長、費用高,且并發(fā)癥多、病死率高,嚴重損害患者的身心健康和生活質(zhì)量[4]。隨著社會人口老齡化,該病發(fā)病人數(shù)日益增加,給社會帶來巨大經(jīng)濟負擔(dān),已成為外科臨床研究的難點和熱點。

慢性難愈性創(chuàng)面的形成機制十分復(fù)雜,一方面是當(dāng)機體受損后,免疫系統(tǒng)激活,大量細胞因子、趨化因子、蛋白水解酶和活性氧被免疫細胞釋放,免疫細胞的過度增長和炎癥反應(yīng)時間的延長使傷口修復(fù)過程失調(diào)[5-6];另一方面則是血管新生減少,創(chuàng)面血氧供應(yīng)不足導(dǎo)致膠原蛋白合成不足,成纖維細胞、表皮細胞的增殖和遷移受限,也導(dǎo)致創(chuàng)面愈合延遲[7]。

Notch信號通路是一個在進化上非常保守的跨膜受體蛋白家族,能夠調(diào)控多種細胞的生長、發(fā)育、分化和凋亡,在組織重塑過程中發(fā)揮重要作用[8]。該通路由4種受體(Notch1、Notch2、Notch3、Notch4)和5種配體(DLL1、DLL3、DLL4,JAG1、JAG2)組成[9]。大多數(shù)情況下,相鄰細胞膜上的Notch受體與配體結(jié)合后,γ-分泌酶復(fù)合物水解被激活的受體,水解的Notch細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(notch intracellular domain,NICD)通過其核定位信號易位至細胞核,結(jié)合并激活DNA結(jié)合重組信號結(jié)合蛋白Jκ(RBP-Jκ)影響Notch靶基因轉(zhuǎn)錄,從而促進Hes和Hey在內(nèi)的一系列下游靶基因的表達,發(fā)揮其生物學(xué)作用[10-11]。

研究表明,Notch信號通路在多種慢性難愈性創(chuàng)面修復(fù)中發(fā)揮重要作用,主要與其參與調(diào)控上皮巨噬細胞和血管內(nèi)皮細胞再生等傷口愈合階段、促進血管生成、參與細胞遷移及上皮化形成等作用相關(guān)[12-15]。

1 Notch信號通路參與慢性難愈性創(chuàng)面的發(fā)展與修復(fù)

1.1 Notch信號與巨噬細胞極化巨噬細胞是一群具有高度可塑性和異質(zhì)性的免疫細胞,貫穿了整個創(chuàng)面修復(fù)過程。巨噬細胞的表型和功能在不同刺激因子作用下可發(fā)生改變,極化為M1型和M2型[16]。M1型是經(jīng)典活化型巨噬細胞,可分泌大量炎性細胞因子和趨化因子,促進免疫應(yīng)答,在創(chuàng)面修復(fù)早期——炎癥階段發(fā)揮重要作用[17]。M2型是交替活化型巨噬細胞,可分泌大量抑炎細胞因子發(fā)揮抗炎效應(yīng),并促進組織修復(fù)與再上皮化[18]。由于巨噬細胞極化是動態(tài)可逆的,因此促進巨噬細胞由M1向M2型轉(zhuǎn)換是創(chuàng)面由炎癥反應(yīng)轉(zhuǎn)為修復(fù)性反應(yīng)的關(guān)鍵[19]。

巨噬細胞上的Notch信號能促進巨噬細胞向M1型極化,并激活巨噬細胞促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生[20]。研究表明,DLL4/Notch1軸在促進巨噬細胞M1型極化方面起關(guān)鍵作用,同時能夠阻斷巨噬細胞M2型極化[21]。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)通過激活巨噬細胞Notch1/核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信號通路誘導(dǎo)M1型巨噬細胞極化,特異性敲除巨噬細胞Notch1可以減少LPS誘導(dǎo)的M1型巨噬細胞極化,減少炎癥因子分泌[22]。此外,還有研究發(fā)現(xiàn)Notch信號通路可通過激活下游信號分子Hes1調(diào)節(jié)巨噬細胞表面的 SIRP-α蛋白從而使巨噬細胞的表型向M1極化[23]。

Notch通路對巨噬細胞表型的調(diào)控作用與其他多條信號通路存在相互協(xié)調(diào)作用。研究發(fā)現(xiàn),Notch1通過NF-κB轉(zhuǎn)錄途徑促進M1型巨噬細胞極化[20]。NF-κB通路還是TLRs和Notch通路的交集通路。在誘導(dǎo)M1型巨噬細胞極化的過程中,Notch通路與TLR通路之間存在相互作用,是通過上調(diào)NF-κB促進IRF8蛋白合成實現(xiàn)的[24]。NF-κB蛋白還可通過直接與NICD結(jié)合獨立于RBP-J而起作用,激活非經(jīng)典Notch信號通路[25]。研究發(fā)現(xiàn),紅景天苷在抑制M1巨噬細胞活化的同時下調(diào)了Notch1、Hes1的蛋白表達,其作用機制可能是通過抑制NF-κB通路的活性實現(xiàn)的[26]。

1.2 Notch信號與炎癥反應(yīng)創(chuàng)面炎癥反應(yīng)可刺激產(chǎn)生細胞因子并募集中性粒細胞和巨噬細胞,吞噬并能夠清除創(chuàng)面細菌和其他異物,促進創(chuàng)面愈合。然而,創(chuàng)面炎癥過度表達則會導(dǎo)致創(chuàng)面組織的穩(wěn)態(tài)失衡和愈合延遲[27]。創(chuàng)面炎癥反應(yīng)受到炎癥因子、趨化因子、生長因子等多種細胞因子的調(diào)控。

研究表明,在創(chuàng)面愈合過程中,Notch信號缺失能夠降低炎癥細胞因子的表達,導(dǎo)致創(chuàng)面早期愈合延遲;而在創(chuàng)面愈合晚期,巨噬細胞中Notch信號的激活有可能會導(dǎo)致創(chuàng)面過度炎癥反應(yīng),抑制Notch信號可以降低炎癥因子的表達,促進創(chuàng)面修復(fù)[28]。

白細胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等是重要的炎癥因子,對早期創(chuàng)面愈合有重要作用。TNF-α可通過誘發(fā)多種炎癥因子的表達、調(diào)節(jié)免疫功能和促進角質(zhì)細胞的遷移與增殖等方式促進創(chuàng)面的愈合[29]。IL-1能夠增強白細胞與內(nèi)皮細胞的黏附、促進成纖維細胞增殖[30]。IL-6能夠激活機體的防御機制,參與炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答,以防機體進一步受損[31]。研究表明,高水平的炎癥因子伴隨著Notch信號的激活,抑制Notch信號通路則能夠抑制炎癥因子的過度表達[32-33]。

炎癥早期釋放的炎性介質(zhì)能夠促進金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)的表達。MMPs是一組內(nèi)在Zn2+外在Ca2+依賴性酶家族,高水平的MMPs一方面可引起細胞外基質(zhì)廣泛水解,基膜破壞,進一步加重炎性細胞浸潤;另一方面可通過降解血管管壁細胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)骨架抑制血管重塑,最終導(dǎo)致潰瘍不易愈合[34-35]。許多研究證明,MMPs的異常表達是糖尿病足潰瘍、慢性下肢潰瘍等多種慢性難愈性創(chuàng)面愈合受損的關(guān)鍵因素[36-37]。在糖尿病動物模型中,抑制Notch信號通路能夠降低 MMP-9 的過表達,從而維持細胞外基質(zhì)穩(wěn)態(tài),改善膠原的累積,加速創(chuàng)面的愈合[38]。在燒傷家兔模型中,阻斷Notch通路后,MMP-2、MMP-9生成增多,血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth tactor,VEGF)和VEGFR-2生成減少,血管生成被抑制,創(chuàng)面愈合受阻[39]。

1.3 Notch信號與新生血管生成新生血管是創(chuàng)面血氧供應(yīng)和營養(yǎng)的保證,其形成過程主要包括內(nèi)皮細胞芽生、尖端細胞遷移、莖細胞增殖等[40]。VEGF家族是血管新生和修復(fù)的關(guān)鍵因素,主要通過與其家族受體VEGFR相結(jié)合來調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞的遷移、增殖和募集,并促進血管通透性增加[41]。VEGF通路及其下游Notch信號是新生血管形成的關(guān)鍵調(diào)控因子,尖端細胞和莖細胞的生成過程受其調(diào)節(jié)[42-43]。

DLL4作為Notch信號通路的配體之一,當(dāng)血管生成時,主要表達在血管出芽最前端的內(nèi)皮尖端細胞,它與VEGF一起相互作用共同調(diào)控莖細胞與尖端細胞的分化、遷移和增殖等過程[10,44]。VEGF作為DLL4上游的信號調(diào)節(jié)因子,能增加DLL4的表達,而DLL4是通過上調(diào)VEGFR1、下調(diào)VEGFR2來抑制血管內(nèi)皮細胞的過度增殖[45]。即VEGF對DLL4/Notch信號通路具有正向調(diào)控作用,而DLL4/Notch信號通路能夠?qū)EGF進行負反饋調(diào)節(jié)。在血管內(nèi)皮細胞中,DLL4/Notch信號通路的主要作用是抑制新生血管過量芽生,避免血管生成不良,改善血管灌注,促進功能血管網(wǎng)的形成[46]。有研究報道,消腫止痛合劑可以通過抑制 Dll4/Notch 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)促進新生血管生成,增加大鼠皮瓣微血管數(shù)量、密度,進而提高皮瓣成活率[47]。

JAG1是正常血管新生的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,廣泛表達于內(nèi)皮細胞的尖端細胞中。JAG1的表達上調(diào),能促進血管出芽、分支,是加快內(nèi)皮損傷修復(fù)的重要途徑[48],而內(nèi)皮細胞上JAG1的缺失可導(dǎo)致血管平滑肌和血管出現(xiàn)致命缺陷[49]。JAG1能夠拮抗DLL4介導(dǎo)的Notch信號通路的抑制血管芽生作用[50],還可以直接傳遞JAG1/Notch信號給尖端細胞來調(diào)節(jié)VEGFR3的表達,以促進血管生成[51],截斷Notch1/JAG1信號通路[46]。有學(xué)者建立小鼠遺傳模型,觀察JAG1在傷口愈合動力學(xué)和血管生成中的作用,發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮細胞JAG1的過度表達增加了血管密度、成熟度和功能性,從而加速了傷口愈合[52]。

1.4 Notch信號通路與細胞增殖、遷移與上皮化成纖維細胞在組織修復(fù)過程中起到重要作用,當(dāng)組織受損時,成纖維細胞能夠分化為肌成纖維細胞并產(chǎn)生豐富的細胞外基質(zhì)和膠原纖維,提供結(jié)構(gòu)支架,與新生毛細血管等共同形成肉芽組織填補傷口缺損,為表皮細胞的覆蓋創(chuàng)造條件[53]。在慢性創(chuàng)面愈合過程中,成纖維細胞向肌成纖維細胞分化受阻,傷口無法通有序愈合[54],其作用機制可能與Notch通路的調(diào)控作用有關(guān)。有學(xué)者觀察到DAPT阻斷或抑制Notch信號后成纖維細胞增殖明顯減少,分化能力也逐漸減弱[55-56]。激活成纖維細胞上的Notch信號通路能夠促進α-平滑肌肌動蛋白(α-smoot muscle actin,α-SMA)分泌,而α-SMA是成纖維細胞向肌成纖維細胞轉(zhuǎn)化過程中的特征性表達[57]。用JAG1處理的角化細胞上清液培養(yǎng)成纖維細胞可促進成纖維細胞增殖以及I型膠原蛋白、Ⅱ型膠原蛋白分泌[58]。

人角質(zhì)形成細胞(human normol keratinocyte,HNK)占上皮細胞的80%,在分化過程中可合成角蛋白構(gòu)成皮膚角質(zhì)層。當(dāng)創(chuàng)面受損時,HNK通過改變自身表型降解與鄰近細胞間的連接,從損傷邊緣遷移至損傷局部并增殖[59-60]。HNK的適當(dāng)遷移和增殖是創(chuàng)面再上皮化的保障[61]。反之,HNK增殖受阻則會導(dǎo)致慢性難愈性創(chuàng)面的發(fā)生。研究表明,激活Notch信號通路能夠提升人永生化角質(zhì)形成細胞(human keratinocytes,HaCaT)的增殖和遷移能力[62]。有學(xué)者構(gòu)建Notch信號通路激活的HaCaT與成纖維細胞共培養(yǎng)系統(tǒng),發(fā)現(xiàn)用γ-分泌酶抑制劑阻斷Notch通路后,角質(zhì)細胞生長因子(keratinocyte growth factor,KGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1) 的分泌會明顯下降[55]。敲低HaCaT細胞中NCSTN基因可以降低γ-分泌酶活性,削弱其對Notch信號通路的抑制,促進HaCaT細胞增殖[63]。王義等[62]報道人脂肪干細胞通過Notch信號通路促進裸鼠創(chuàng)面上皮再生與愈合,其機制可能與促進HNK的增殖與遷移有關(guān)。在兔耳創(chuàng)傷模型研究中,通過激活與阻斷JAG1/Notch信號通路比較發(fā)現(xiàn),Notch信號通路通過改變HNK表型影響其增殖、分化及分泌特性[58]。

表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)是廣泛存在于人體多種組織的一種多肽因子,與其受體EGFR結(jié)合后可激活調(diào)控細胞增殖的調(diào)節(jié)生長基因,具有刺激HNK增生、分化,加快創(chuàng)傷愈合的作用[64-65]。Notch1通路也是HNK增殖的關(guān)鍵因素。然而,Roy等[66]研究發(fā)現(xiàn),EGF能夠?qū)otch1的表達產(chǎn)生負面影響,并猜測這可能是因為HNK的最佳增殖狀態(tài)需要一個適合的Notch1表達水平,而EGF通過調(diào)節(jié)Notch1的表達來維持這種平衡。研究發(fā)現(xiàn),EGF與Notch1信號通路存在著交互作用,其受體EGFR能夠負向調(diào)節(jié)Notch1,維持細胞的增殖,并抑制細胞的分化[67]。王建峰等[68]研究發(fā)現(xiàn),黃芩苷抑制HNK的活性的機制可能與抑制Notch信號通路活性有關(guān),這也從另一方面驗證了Roy的猜想。

表皮干細胞(epidermal stem cells,ESCs)通過免疫調(diào)節(jié)、表皮再生、血管再生和膠原沉積等作用參與創(chuàng)面修復(fù)的全過程[69]。機體損傷后,ESCs遷移到損傷部位參與受損組織的再生,刺激駐留祖細胞的增殖和分化,通過分泌生長因子和重塑基質(zhì)促進損傷細胞的修復(fù)[70-71]。施彥等[72]研究發(fā)現(xiàn),大鼠慢性潰瘍模型中創(chuàng)面組織免疫組化染色BrdU/Hes1雙染陽性細胞率上升,JAG1、Notch1表達上調(diào),并據(jù)此推測JAG1與Notch1結(jié)合后激活Hes1通路,參與并促進ESCs的增殖,加速創(chuàng)面愈合。Yang等[73]研究表明,下調(diào)Notch信號通路的JAG1配體能夠顯著降低ESCs的體外遷移。此外,在糖尿病小鼠創(chuàng)面模型中,過度表達的JAG1能夠促進皮膚善創(chuàng)面愈合,其機制可能與JAG1促進ESCs的遷移有關(guān)。還有報道稱Notch信號高度激活能夠促使ESCs分化為角質(zhì)形成細胞[74]。

2 外用中藥靶向Notch信號通路干預(yù)慢性難愈性創(chuàng)面

慢性難愈性創(chuàng)面在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中尚未發(fā)現(xiàn)明確病名記載,根據(jù)其臨床表現(xiàn)可歸為“瘡瘍”范疇,病因病機多為臟腑虧虛、濕熱互結(jié)、氣血瘀滯,日久臟腑功能失司,營衛(wèi)阻滯,肌膚失養(yǎng),久而創(chuàng)面潰爛,纏綿難愈[75]?！夺t(yī)學(xué)源流論》云:“外科之法,最重外治。”外治之法可使藥力直達病所,提高臨床療效。中藥及其復(fù)方制劑外用治療慢性難愈性瘡面療效顯著,種類繁多,然而其中大部分作用機制尚不明確。

2.1 中藥單體外用中藥能夠多靶點干預(yù)慢性難愈性創(chuàng)面的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸,但中藥復(fù)方成分復(fù)雜,作用機制尚不明確。目前,直接使用中藥單體外用治療慢性難愈性創(chuàng)面的研究相對較少,能夠靶向Notch信號通路作用的主要有紫草素和表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)。紫草具有清熱解毒、活血消腫的功效,現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn),從紫草中萃取的紫草素是茶醌類天然色素,以紫草醌及其衍生物為主要成分,具有抗炎、殺菌等作用,對皮膚潰瘍愈合有重要作用[76]。研究發(fā)現(xiàn),紫草素外用可降低糖尿病大鼠慢性潰瘍創(chuàng)面炎癥指標(biāo),提高創(chuàng)面肉芽組織中羥脯氨酸含量,促進膠原合成,上調(diào)VEGF,下調(diào)Notch1蛋白表達,促進新生血管形成。謝軍等[77]認為,紫草素可能通過協(xié)調(diào)VEGF通路與DLL4/Notch1通路之間的負反饋機制來促進新生血管的形成及創(chuàng)面愈合。陳微等[78]通過體外研究發(fā)現(xiàn),紫草素呈劑量依賴性地抑制HaCaT細胞的增殖,并誘導(dǎo)細胞凋亡,Notch-1信號通路在其中起了重要作用。EGCG是從茶葉中分離出的兒茶素類單體,具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗氧化等作用[79]。EGCG能夠通過抑制Notch1信號通路的活化調(diào)節(jié)早期炎癥效應(yīng)[80-81]。研究表明[82],EGCG可直接與小鼠巨噬細胞中Notch1特異性結(jié)合,降低糖尿病小鼠創(chuàng)面Notch1表達水平,進而下調(diào)炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表達,減輕巨噬細胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng),促進創(chuàng)面愈合,其作用機制可能與促M1型巨噬細胞向M2型極化有關(guān)。

2.2 中藥復(fù)方外用中藥復(fù)方制劑以其安全有效的優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用于慢性難愈性創(chuàng)面的治療中,目前報道靶向Notch通路治療慢性難愈性創(chuàng)面的主要藥物有生肌橡皮膏、紫朱軟膏及肛癰方。其中生肌橡皮膏應(yīng)用較為廣泛,由當(dāng)歸、生血余、橡皮粉、生地黃、生石膏、龜甲、爐甘石等組成,主要功效為生肌斂瘡,能止癢收斂,吸收創(chuàng)面分泌物,起到防腐收斂,保護創(chuàng)面的作用[83]。朱朝軍等[84]觀察到生肌橡皮膏在促進糖尿病大鼠潰瘍早中期愈合的過程中,隨著瘡面面積的縮小,組織內(nèi)VEGF的表達先升高后降低,而Notch1在組織內(nèi)的表達趨勢與VEGF相反,這表明生肌橡皮膏在促進創(chuàng)面愈合的過程中Notch信號起到一定干預(yù)作用,其作用機制可能與促進血管新生相關(guān)。李博文等[85]應(yīng)用生肌橡皮膏治療糖尿病大鼠足潰瘍,發(fā)現(xiàn)創(chuàng)面Notch1的表達被抑制,同時炎癥因子IL-2、IL-6、TNF-α的表達下降,創(chuàng)面炎癥反應(yīng)減輕,愈合速度加快。羅澤琴等[86]將自制生肌膏運用于肛周膿腫術(shù)后,發(fā)現(xiàn)其可促進大鼠肛周膿腫術(shù)后創(chuàng)面愈合,其作用機制也與抑制創(chuàng)面Notch1表達,下調(diào)炎癥因子水平相關(guān)。紫朱軟膏主要由紫草、朱砂、阿膠、龍血竭、冰片、黃芪制成。方中紫草活血涼血,朱砂解毒祛腐,二者同為君藥,共奏清熱解毒祛腐之效;黃芪補氣生肌,阿膠補血滋陰,血竭活血定痛、生肌斂瘡,為治療潰瘍不斂的主要藥物,共為臣藥;冰片為佐藥,能夠通透肌膚、鎮(zhèn)靜止痛。諸藥合用,共奏清熱解毒、祛腐生肌、補氣益血之功效[87]。韓強等[88]報道紫朱軟膏可能是通過抑制Notch信號通路來降低糖尿病足潰瘍大鼠創(chuàng)面炎癥因子和炎癥趨化因子水平,減輕創(chuàng)面炎癥反應(yīng)強度,并提高生長因子TGF-α、TGF-β表達,促進創(chuàng)面愈合。肛癰方主要由當(dāng)歸、黃柏、延胡索、乳香、珍珠粉和冰片組成。方中水牛角清熱涼血、解毒定驚,牡丹皮清熱涼血、活血化瘀,兩藥配伍活血化瘀,能夠促進創(chuàng)面血液循環(huán),增加血管通透性,有效緩解創(chuàng)面水腫及滲液;黃芪升陽舉陷、托毒生肌;穿山甲與皂角刺二藥相須為用,具有消腫散結(jié)、托毒透膿之效。研究發(fā)現(xiàn)[89],肛癰方能夠通過下調(diào)創(chuàng)面炎癥因子IL-2、IL-6、TNF-α水平,有效抑制大鼠肛周膿腫創(chuàng)面炎癥反應(yīng),促進創(chuàng)面愈合,其機制可能與下調(diào)Notch1、TGF-β1的表達有關(guān)。

3 小結(jié)

Notch信號通路作為人體內(nèi)重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,參與多種生理活動,可以通過調(diào)節(jié)巨噬細胞極化、促進炎癥反應(yīng)、促進血管新生、加速創(chuàng)面再上皮化等多種途徑參與慢性難愈性創(chuàng)面的修復(fù)。目前,關(guān)于Notch信號通路在慢性難愈性創(chuàng)面中的研究仍存在以下問題:(1)有關(guān)Notch信號通路在慢性難愈性創(chuàng)面中的研究不統(tǒng)一,通過激活或是抑制該信號通路從而達到治療目的仍有爭議,這可能與研究所使用的動物模型、創(chuàng)面類型與分期、具體作用機制有關(guān);(2)通過該信號通路治療慢性難愈性創(chuàng)面作用的靶點尚不清晰,僅以少數(shù)幾個經(jīng)典靶點蛋白做支撐,無法系統(tǒng)判斷該通路在慢性創(chuàng)面愈合中的參與程度,與其他信號通路之間的交互作用同樣缺乏系統(tǒng)研究;(3)大部分中藥復(fù)方制劑調(diào)控Notch信號通路發(fā)揮作用的具體機制尚不明朗,多是以某一下游或上游關(guān)鍵靶點蛋白表達水平做支撐佐證相應(yīng)的觀點,少有對多個靶點蛋白進行系統(tǒng)的研究。今后,還需進一步明確各靶點間的相互作用,對中藥靶向Notch通路治療慢性難愈性創(chuàng)面進行更為系統(tǒng)的研究,有助于該病特異性治療藥物的研發(fā)。