間充質(zhì)干細(xì)胞治療缺血性腦卒中的作用及機(jī)制研究

王道輝，劉擁軍，劉廣洋

腦卒中是全球第二大死亡原因，成人致死率和致殘率極高[1]。其中，缺血性腦卒中（ischemic stroke，IS）占比高達(dá)85%[2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，世界上每年約有 1500 萬(wàn)人發(fā)生缺血性腦卒中，其中 500 萬(wàn)人死亡，500 萬(wàn)人致長(zhǎng)期殘疾[3]，嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康，給家庭生活帶來(lái)巨大負(fù)擔(dān)。缺血性腦卒中損傷區(qū)域從壞死區(qū)“核心”到圍繞核心的“半暗帶”[4]，嚴(yán)重影響神經(jīng)功能和行為表現(xiàn)[5]。目前，腦血管栓塞是缺血性腦卒中的主要誘因，表現(xiàn)為暫時(shí)性的腦組織缺血，導(dǎo)致氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)輸送不足，引發(fā)腦組織損傷。并且，腦血流再灌注還會(huì)造成不可逆的二次損傷。因此，缺血性腦卒中仍是世界上有待解決的重大醫(yī)學(xué)難題?；诎l(fā)病機(jī)制，目前常用治療手段為溶栓治療，如重組組織型纖維蛋白溶酶原激活劑（recombinant tissue plasminogen activator，rt-PA）和血管內(nèi)再灌注。但是，溶栓治療具有嚴(yán)格的治療時(shí)間窗——僅4.5 h，只有極少數(shù)患者能夠在發(fā)病后及時(shí)使用藥物，完成干預(yù)治療。并且，rt-PA 的副作用存在腦出血和加重腦卒中損傷的可能性[6]。因此，新的有效治療藥物和策略一直備受世界關(guān)注。

間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cell，MSC）可從多種來(lái)源的組織分離得到，包括骨髓（bone marrow，BM）、脂肪細(xì)胞（adipose，AD）和臍帶血（umbilical cord blood，UC）等。近期一項(xiàng)研究表明，BM-MSC 傾向于腦和脊髓損傷治療，AD-MSC 傾向于卵巢損傷治療和皮膚再生，UC-MSC 傾向于肺部疾病和急性呼吸窘迫綜合征治療[7]。MSC 的多元分化特性也是科學(xué)研究的重點(diǎn)內(nèi)容，可分化為成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞等。并且，MSC 也具有分化為神經(jīng)元細(xì)胞的潛能[8]。目前，移植 MSC 已成為缺血性疾病一種新的治療手段，主要包括腦卒中、冠狀動(dòng)脈疾病和外周動(dòng)脈疾病等。多項(xiàng)研究表明，MSC 出色的神經(jīng)保護(hù)作用是治療缺血性腦卒中的重要原因[9-10]。最近一項(xiàng)研究，大鼠發(fā)生缺血性腦卒中，靜脈注射的 BM-MSC 可遷移至大腦缺血邊界區(qū)（半暗帶），分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞，減小梗死面積并恢復(fù)神經(jīng)功能[11]。缺血半暗帶存在大量處于休眠或半休眠狀態(tài)的神經(jīng)元，因此，如何挽救半暗帶細(xì)胞及其機(jī)制已經(jīng)成為缺血性腦卒中臨床治療的關(guān)鍵和熱點(diǎn)。本文就 MSC 治療缺血性腦卒中的機(jī)制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為基礎(chǔ)研究和臨床工作提供參考和指導(dǎo)。

1 MSC 治療缺血性腦卒中的作用及機(jī)制

目前的研究報(bào)道表示，MSC 主要通過(guò)旁分泌作用、免疫調(diào)節(jié)作用和抗細(xì)胞凋亡作用促進(jìn)神經(jīng)組織損傷修復(fù)，恢復(fù)神經(jīng)功能，減少腦梗死面積，促進(jìn)神經(jīng)和血管生成等，從而發(fā)揮治療缺血性腦卒中的作用。

1.1 MSC 的旁分泌作用

干細(xì)胞研究初期，人們將 MSC 這種恢復(fù)性功能歸因于干細(xì)胞的分化與再生，替代損傷細(xì)胞。例如，當(dāng)用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病時(shí)，MSC 可增殖成神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞，取代壞死細(xì)胞，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用[12]。隨著研究的不斷深入，以及 MSC 難以穿透血腦屏障的特性，更多的研究?jī)A向于認(rèn)為 MSC 的旁分泌因子，包括外泌體和胞外囊泡，是發(fā)揮治療作用的主要因素[11,13]。

在腦卒中損傷區(qū)域，MSC 可誘導(dǎo)多種生長(zhǎng)因子表達(dá)，包括腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、基質(zhì)細(xì)胞源性因子 1（stromal cell-derived factor-1，SDF-1）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子等，通過(guò)減少腦梗死面積和恢復(fù)神經(jīng)功能改善腦卒中損傷。

研究表明，相比于 MSC，外泌體具有更高的穿透血腦屏障的能力，達(dá)到梗死區(qū)域發(fā)揮治療作用[14]。大鼠腦卒中24 h 后，靜脈注射 MSC 外泌體，顯著改善神經(jīng)功能、增強(qiáng)神經(jīng)突重塑、神經(jīng)再生和血管再生[15]。并且，MSC 外泌體可通過(guò)介導(dǎo) miR-133b 轉(zhuǎn)移至星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞，調(diào)控基因表達(dá)，有助于腦卒中后的神經(jīng)突重塑和神經(jīng)功能恢復(fù)[16]。此外，使用 MSC 胞外囊泡進(jìn)行短期治療，也能達(dá)到與MSC 組類(lèi)似的改善腦卒中治療效果[17]。即使是19 ～ 20月齡的老年大鼠，MSC 胞外囊泡也可促進(jìn)大腦中動(dòng)脈栓塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）后的神經(jīng)功能恢復(fù)和梗死區(qū)域重塑[18]。以上研究結(jié)果均表明，MSC旁分泌因子對(duì)缺血性腦卒中具有較好的治療效果。

下面對(duì) MSC 旁分泌因子進(jìn)行分類(lèi)表述。

1.1.1 BDNF 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子在缺血性腦損傷的修復(fù)中具有重要作用，以 BDNF 尤為突出。這是一種促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞增殖和存活的重要神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，尤其是海馬區(qū)域，是重要的腦卒中調(diào)控因子[19]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，通過(guò)顱內(nèi)注射 BDNF可有效減少腦梗死面積。并且，MSC 轉(zhuǎn)染 BDNF 后治療MCAO 大鼠，可增加腦中的 BDNF 水平，減少病變面積，改善認(rèn)知功能和行為能力[20]。然而，新生大鼠 MCAO 后，與 MSC 治療組相比，過(guò)表達(dá) BDNF 的 MSC 治療組效果稍有提升，但并無(wú)顯著性差異[21]，可能是由于新生大鼠大腦處于活躍期，內(nèi)源性修復(fù)是 MSC 的主要治療機(jī)制。但是，這并不能證明 BDNF 減輕缺血性腦卒中的效果不明顯。進(jìn)一步的研究證明，新生小鼠缺氧缺糖誘發(fā)腦卒中，采用低溫治療手段，可誘導(dǎo) BDNF 通過(guò) p75 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體和酪氨酸激酶受體 B，激活絲裂原活化蛋白激酶，發(fā)揮神經(jīng)源性作用，修復(fù)腦卒中損傷[22]。由此可見(jiàn)，BDNF 在發(fā)揮神經(jīng)修復(fù)方面具有重要作用。

1.1.2 VEGF 研究人員發(fā)現(xiàn)，缺血半暗帶微血管密度較高的患者生存時(shí)間較長(zhǎng)，提示血管生成在腦卒中患者預(yù)后中的重要地位[23]。初步研究發(fā)現(xiàn)，MSC 胞外囊泡增加了內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，顯著激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子 3，抑制自噬和促進(jìn)血管生成，減輕腦卒中損傷[24]。在血管生成方面，VEGF 既是主要血管重塑調(diào)控因子，也是 MSC 重要旁分泌因子。研究表明，MSC 可增加內(nèi)源性 VEGF 水平，加速血管生成，增強(qiáng)血管穩(wěn)定性，增加腦缺血邊界區(qū)血管總表面積[25-26]。進(jìn)一步研究表明，MSC 不僅促進(jìn)腦組織內(nèi)皮細(xì)胞分泌 VEGF，促進(jìn)血管再生和支持缺血后神經(jīng)再生，還能激活 Notch 信號(hào)通路促進(jìn)缺血性腦卒中后血管生成[27]，并激活 Akt/ERK 信號(hào)軸發(fā)揮抗凋亡作用[28]。聯(lián)合型實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，使用缺血性心臟提取物與 MSC 共培養(yǎng)，提取物中IL-22 的上調(diào)促進(jìn) MSC 分泌 VEGF 和人惡性腦腫瘤缺失蛋白 1，并向內(nèi)皮細(xì)胞傳遞，增強(qiáng)遷移和增殖活性，促進(jìn)血管生成，修復(fù)腦卒中損傷[29]。除 VEGF 外，MSC 分泌的基質(zhì)金屬蛋白酶 2 也在調(diào)控腦卒中后的血管生成中發(fā)揮重要作用，與 VEGF 協(xié)同改善腦卒中[30]。以上研究表明，VEGF 介導(dǎo)血管生成在腦卒中修復(fù)中的不可或缺性。

1.1.3 色素上皮衍生因子 色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor，PEDF）是 MSC 重要外泌體，目前已有多項(xiàng)在眾多領(lǐng)域的研究報(bào)道。在缺血性腦卒中疾病模型中，使用 siRNA 抑制 MSC 表達(dá) PEDF，與 siRNA-NC組相比，MSC 失去了保護(hù)氧糖剝奪再灌注處理的 N2a 細(xì)胞和 MCAO 大鼠免受高爾基體應(yīng)激反應(yīng)的作用[31]。另外，MSC 分泌的 PEDF 可通過(guò)促進(jìn) PI3K/Akt/mTOR 通路磷酸化，調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝和應(yīng)激[31-32]。由此可見(jiàn)，PEDF 調(diào)控應(yīng)激是治療缺血性腦卒中的主要作用機(jī)制。

1.1.4 SDF-1 除了直接性改善作用，MSC 的促歸巢作用也得到深入研究。一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，腦卒中梗死區(qū)域的膠質(zhì)細(xì)胞能夠快速分泌 SDF-1，通過(guò)移植轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá) CXCR4（SDF-1 的受體）的 MSC，可顯著增強(qiáng) MSC 向缺血區(qū)域的遷移程度，增強(qiáng)神經(jīng)功能修復(fù)能力，減小腦梗死面積，縮短治療時(shí)間，短期內(nèi)改善大鼠行為能力[33]。這種現(xiàn)象的出現(xiàn)是因?yàn)?，SDF-1 與 CXCR4 在調(diào)節(jié)腦卒中時(shí)發(fā)揮協(xié)同作用，尤其是在缺血半暗帶尤為突出。這類(lèi)基因修飾 MSC 的方式為治療腦卒中提供新的策略。類(lèi)似的研究報(bào)道，在大鼠發(fā)生 MCAO 后的 1、4 和 7 d 靜脈注射等量 MSC，發(fā)現(xiàn)紋狀體中的 SDF-1 水平隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加，并且 MSC 也隨著時(shí)間延長(zhǎng)從皮質(zhì)向紋狀體緩慢遷移[34]。不僅如此，腦卒中大鼠給予 MSC，可誘導(dǎo)內(nèi)源性分泌的 bFGF 和 SDF-1表達(dá)水平均上調(diào)，共同發(fā)揮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)作用[35-36]。由此可見(jiàn)，SDF-1 不僅對(duì) MSC 的遷移具有重要作用，加速治療效果，而且還能促進(jìn) MSC 在病灶區(qū)域發(fā)揮更佳的修復(fù)作用。

1.1.5 其他旁分泌因子 評(píng)價(jià)缺血性腦卒中損傷程度時(shí)，腦梗死面積是重要的參考指標(biāo)。研究發(fā)現(xiàn)，BM-MSC 可顯著提升半暗區(qū) bFGF 的表達(dá)水平，減少梗死面積和改善神經(jīng)功能[26]。并且，bFGF 也具有血管重塑的能力，與 VEGF發(fā)揮協(xié)同作用[37]。音猬因子（sonic hedgehog，SHH）是一種分泌糖蛋白，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、遷移和分化。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，注射 MSC 能夠顯著增強(qiáng)小鼠腦卒中后腦部 SHH和 t-PA 蛋白表達(dá)，并且，當(dāng)聯(lián)合使用環(huán)巴胺（平滑受體抑制劑）阻斷 SHH 通路時(shí)，出現(xiàn)對(duì)立性結(jié)論。結(jié)果提示，MSC 介導(dǎo) SHH 通路，刺激 t-PA 表達(dá)和活性，發(fā)揮溶栓治療類(lèi)似效果，恢復(fù)腦卒中后神經(jīng)功能[38]。

除上述內(nèi)容中提到的 MSC 旁分泌因子之外，仍有其他因子參與 MSC 治療缺血性腦卒中的作用機(jī)制，如胰島素樣生長(zhǎng)因子 1、表皮生長(zhǎng)因子和神經(jīng)生長(zhǎng)因子等，這些因子在抑制神經(jīng)炎癥、促進(jìn)神經(jīng)再生等方面發(fā)揮作用。

1.2 MSC 的免疫調(diào)節(jié)作用

缺血性腦卒中發(fā)生時(shí)，損傷的腦組織導(dǎo)致的危險(xiǎn)相關(guān)分子模式可觸發(fā)無(wú)菌性炎癥反應(yīng)，從而快速活化缺血區(qū)與半暗區(qū)的小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞。小膠質(zhì)細(xì)胞的活化一方面具有清除碎片和分泌抗炎細(xì)胞因子能力，支持內(nèi)源性腦修復(fù)[39]；另一方面小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化分泌大量炎癥因子，引發(fā)免疫過(guò)激，易引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡。

研究發(fā)現(xiàn)，MSC 對(duì)腦卒中后的中樞免疫反應(yīng)也存在雙向調(diào)節(jié)功能：一方面可促使腦組織中的 B 細(xì)胞、NK 細(xì)胞和 T 細(xì)胞數(shù)量顯著增加，發(fā)揮免疫促進(jìn)作用[40]，另一方面，高水平的炎癥因子（閾值濃度約為 400 pg/ml）可激活MSC 免疫抑制功能[41]，從而對(duì)淋巴細(xì)胞增殖和炎癥因子產(chǎn)生雙重抑制作用，誘導(dǎo)抗炎表型[42]。

研究證實(shí)，損傷區(qū)域小膠質(zhì)細(xì)胞是 MSC 發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的重點(diǎn)靶細(xì)胞[43]。實(shí)驗(yàn)證明，腦卒中后移植過(guò)表達(dá)抗炎細(xì)胞因子 IL-13 的 MSC，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，有效調(diào)控主要聚集于受損區(qū)域皮質(zhì)與紋狀體的小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞極化，使功能表型由腦損傷的促炎 M1 表型向神經(jīng)元保護(hù)的抗炎 M2 表型轉(zhuǎn)變，減輕腦卒中炎癥反應(yīng)，促進(jìn)組織修復(fù)[44-45]。這些研究闡明了 MSC 調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞向抗炎表型轉(zhuǎn)變的機(jī)制。此外，相比于 2D 培養(yǎng)的 MSC，3D 培養(yǎng)的 MSC 降低小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)缺血損傷的促炎反應(yīng)效果更佳，顯著減少腦梗死面積，增加植入缺血組織的 MSC 細(xì)胞數(shù)量[46]。

進(jìn)一步研究表明，PI3K/Akt/RhoGTPase 是 MSC 誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞極化發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的重要信號(hào)通路[45]。并且，抑制 NF-κB 活性、分泌 IL-6 和降低 TNF-α 表達(dá)，也是 MSC 的抗炎作用機(jī)制的一部分[47]。

近期研究發(fā)現(xiàn)，炎癥在 COVID-19 誘發(fā)腦卒中時(shí)發(fā)揮關(guān)鍵性作用，通過(guò)注射 MSC 外泌體可顯著減輕神經(jīng)炎癥，促進(jìn)神經(jīng)和血管生成，改善腦卒中后功能恢復(fù)。因此，移植MSC 外泌體有望成為改善 SARS-CoV-2 介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和 COVID-19 介導(dǎo)的缺血性疾病的新治療策略[48]。

1.3 MSC 調(diào)控細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是缺血性腦卒中重要的神經(jīng)元損傷機(jī)制，MSC 可抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)的作用。研究發(fā)現(xiàn)，BM-MSC 缺氧預(yù)處理再移植治療，可通過(guò)抑制caspase-3 激活和增加缺氧誘導(dǎo)因子 1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）表達(dá)，降低缺血再灌注誘發(fā)的自身凋亡程度，顯著提高缺血性腦卒中治療效果[49]。AD-MSC 也具有優(yōu)秀的神經(jīng)保護(hù)作用，移植后產(chǎn)生的外泌體可抑制KDM6B/BMP2/BMF 信號(hào)通路，減輕 MCAO 大鼠神經(jīng)元凋亡[50]。此外，采用 MSC 治療可促使抗凋亡因子 Bcl-2 蛋白表達(dá)顯著升高，而與神經(jīng)元凋亡相關(guān) p53 蛋白表達(dá)明顯降低，增加缺血半暗區(qū)神經(jīng)元密度[51]。不僅如此，MSC 治療還可減輕缺血性腦卒中引起的小膠質(zhì)細(xì)胞焦亡，并且，缺氧預(yù)處理的 MSC 對(duì)腦出血引起損傷的治療效果更佳，進(jìn)一步減少細(xì)胞焦亡出現(xiàn)[52]。

2 基因修飾 MSC 治療缺血性腦卒中的作用

近些年來(lái)，眾多研究團(tuán)隊(duì)借助基因工程和基因編輯技術(shù)修飾 MSC，使其能特異性表達(dá)或抑制某種基因，發(fā)揮長(zhǎng)期而穩(wěn)定的疾病干預(yù)治療作用效果。研究表明，注射過(guò)表達(dá)HIF-1α 的 MSC，可顯著減少 MCAO 大鼠腦梗死面積，改善大鼠運(yùn)動(dòng)功能[53]。而通過(guò) siRNA 方法基因沉默CUEDC2 后的 MSC，能夠顯著提高其對(duì)缺血性腦卒中誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷治療效果。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，上調(diào)神經(jīng)元谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 1（glutathione peroxidase，GSH-Px）表達(dá)水平，并同時(shí)抑制 NF-kB 激活，是 siRNA-CUEDC2-MSC發(fā)揮腦卒中修復(fù)作用的機(jī)制[54]。

除了達(dá)到直接治療作用效果，提升 MSC 歸巢能力也是基因修飾的重要目的。以往研究表明，CXCL12/CXCR4是介導(dǎo) MSC 向損傷部位遷移的主要信號(hào)軸[55]。近期研究發(fā)現(xiàn)，梗死區(qū)域 CCR2（CCL2 受體）水平顯著升高，可誘導(dǎo)過(guò)表達(dá) CCL2（促炎趨化因子）的 UC-MSC 向大腦受損區(qū)域遷移，增強(qiáng)血管生成和神經(jīng)生成，減少神經(jīng)炎癥，顯著改善神經(jīng)功能和梗死面積[56]。不僅如此，MSC 過(guò)表達(dá)CCR2 也能達(dá)到類(lèi)似的治療效果[57]。提示 CCL2/CCR2 也是促 MSC 歸巢信號(hào)軸。并且，MSC 過(guò)表達(dá)神經(jīng)源性轉(zhuǎn)錄因子神經(jīng)源因子 1，也可顯著增強(qiáng) MSC 的歸巢能力，提高 MCAO 大鼠模型的 MSC 移植效率[58]。

基于以上內(nèi)容不難發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是靶向性調(diào)節(jié)表達(dá)，還是促歸巢提高治療效率，基因修飾后的 MSC 具有更多可能性，能夠突破傳統(tǒng)基因修飾的局限，在未來(lái)將會(huì)有更長(zhǎng)遠(yuǎn)的發(fā)展。

3 MSC 的給藥途徑

不同給藥途徑也是影響 MSC 治療效果的重要影響因素。血腦屏障是阻礙 MSC 進(jìn)入腦卒中病灶的主要限制條件。在腦卒中急性期內(nèi)，雖然靜脈注射 MSC 只有極少量分布于損傷區(qū)域[59]，卻顯著減輕炎癥反應(yīng)，維持血腦屏障完整性，減輕繼發(fā)性腦損傷[60]。由此可見(jiàn)，高效的給藥方式是精準(zhǔn)治療的必要條件。

研究表明，雖然顱內(nèi)給予 MSC 可靶向聚集到受損大腦，但也更具侵襲性，易造成機(jī)械損傷，不利于恢復(fù)。而相比于顱內(nèi)給藥，動(dòng)脈和靜脈內(nèi)給藥治療效果更佳[61]。例如，通過(guò)動(dòng)脈注射移植 MSC 可繞過(guò)體循環(huán)，經(jīng)血腦屏障，分布于腦卒中梗死和缺血區(qū)域[62]，但存在發(fā)生細(xì)胞栓塞和腦血流減少的風(fēng)險(xiǎn)。相對(duì)應(yīng)的，靜脈注射 MSC 需通過(guò)體循環(huán)和肺循環(huán)，最終穿透血腦屏障才能到達(dá)梗死區(qū)域，因此有效治療細(xì)胞數(shù)目更為有限，但仍可促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，減少梗死面積，安全有效，是最為常用的干細(xì)胞移植治療腦卒中的給藥方式[63]。并且，腦卒中增加血腦屏障通透性，即使采用靜脈注射，也能達(dá)到較好的 MSC 向腦損傷區(qū)域遷移的歸巢現(xiàn)象。此外，鞘內(nèi)注射和鼻內(nèi)給藥也是可選擇的給藥方式。

4 小結(jié)與展望

近些年來(lái)，從干細(xì)胞研究的簡(jiǎn)單分化與轉(zhuǎn)化認(rèn)知，到目前 MSC 機(jī)制多樣化研究的不斷深入與拓展，干細(xì)胞研究領(lǐng)域的發(fā)展也變得成熟化與新穎化。但是也不可避免地存在一些問(wèn)題。首先，MSC 機(jī)制研究存在不夠深入的缺陷，無(wú)法為精準(zhǔn)治療提供較好的研究基礎(chǔ)。并且，基于 MSC 自身的復(fù)雜性與多向性特點(diǎn)，機(jī)制探索研究的開(kāi)展也變得更加艱難。其次，探索 MSC 作用機(jī)制的方法與措施仍然較為局限，是快速發(fā)展通道上的限制性阻礙，技術(shù)革新刻不容緩。最后，MSC 獲取渠道有限，倫理要求高，制備繁瑣，研究開(kāi)展困難。

目前來(lái)看，不僅動(dòng)物實(shí)驗(yàn)確證了干細(xì)胞的治療效果，提出 MSC 治療缺血性腦卒中的可行性，在眾多臨床試驗(yàn)中，MSC 治療缺血性腦卒中也在穩(wěn)步推進(jìn)中。截至到最近，美國(guó)臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)庫(kù)中已注冊(cè)了近 1400 項(xiàng) MSC 治療相關(guān)疾病的臨床試驗(yàn)，其中 22 例是 MSC 治療缺血性腦卒中相關(guān)研究。完成的臨床試驗(yàn)證明，MSC 對(duì)缺血性腦卒中患者神經(jīng)功能具有顯著改善作用，并證實(shí)其有效性與長(zhǎng)期安全性[64-65]。在未來(lái)，將會(huì)有更多 MSC 醫(yī)學(xué)成果完成轉(zhuǎn)化，投入醫(yī)療行業(yè)，為世界人民的健康與安全保駕護(hù)航。