姜玫宏　葛金山　程金龍　彭宇晗　姜淑貞　朱元召

摘要： 以3種加工處理的中草藥飼喂斷奶仔豬，研究其對斷奶仔豬生長、腹瀉、免疫、血清脂與酶及抗氧化等指標(biāo)的影響。120頭28±2日齡杜長大斷奶仔豬分4組，3組中草藥處理組飼糧分別含2%粉碎復(fù)方中草藥、2%復(fù)方中草藥提取液和2%發(fā)酵復(fù)方中草藥，對照組飼糧不含中草藥，試驗(yàn)期為28 d。結(jié)果表明，與對照組相比，粉碎中草藥組斷奶仔豬料質(zhì)量比（F/G）、總蛋白（TP）含量、球蛋白（GLB）含量、總抗氧化能力（T-AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）含量均有顯著差異（P<0.05）；中草藥提取液組平均日增質(zhì)量（ADG）、F/G、試驗(yàn)全期腹瀉指數(shù)、免疫球蛋白G（IgG）含量、白蛋白（ALB）含量、GLB含量、TP含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）含量、堿性磷酸酶（ALP）含量、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）含量、總抗氧化能力（T-AOC）、SOD含量和丙二醛（MDA）含量均有顯著差異（P<0.05）；發(fā)酵中草藥組ADG、平均日采食量（ADFI）、F/G、腹瀉指數(shù)、血清IgG含量、免疫球蛋白A（IgA）含量、免疫球蛋白M（IgM）含量、ALB含量、GLB含量、TP含量、總膽固醇（TC）含量、甘油三酯（TG）含量、ALT含量、AST含量、ALP含量、GSH-PX含量、過氧化氫酶（CAT）含量、T-AOC、SOD含量和MDA含量均有顯著變化（P<0.05）。由此可見，與對照組及粉碎中草藥組、中草藥提取液組相比，發(fā)酵中草藥組中草藥經(jīng)菌酶協(xié)同先好氧后厭氧異步發(fā)酵能較好地改善斷奶仔豬生長性能，具有抗腹瀉、增強(qiáng)機(jī)體免疫和抗氧化功能，提示與中草藥功效增強(qiáng)和發(fā)酵代謝產(chǎn)物作用疊加有關(guān)。

關(guān)鍵詞： 菌酶協(xié)同；異步發(fā)酵；復(fù)方中草藥；斷奶仔豬；生長；免疫

中圖分類號： S816.7 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A 文章編號： 1000-4440（2023）01-0126-08

Effects of bacteria-enzymes synergistic asynchronous fermentation of Chinese herbal medicine on growth， diarrhea， immunity and antioxidant of weaned piglets

JIANG Mei-hong¹， GE Jin-shan²， CHENG Jin-long³， PENG Yu-han¹， JIANG Shu-zhen⁴， ZHU Yuan-zhao^1，5

（1.Anhui Science and Technology University， Fengyang 233100， China;2.Shandong Zhongcheng Feed Technology Co.， Ltd.， Feicheng 271600， China;3.Jiangsu Unison Biotechnology Development Co.， Ltd.， Suqian 223800， China;4.Shandong Agricultural University， Taian 271000， China;5.Hebei Heliomy Biotechnology Co.， Ltd.， Qingxian 062650， China）

Abstract： The effects of three processed Chinese herbal medicines on growth， diarrhea， immunity， serum lipids and enzymes and antioxidant of weaned piglets were studied. One hundred and twenty Duroc-Landrace-Yorkshire weaned piglets at 28±2 days of age were divided into four groups. The control group was fed with no Chinese herbal medicine， and the crushed Chinese herbal medicine group， Chinese herbal extract group and fermented Chinese herbal medicine group were fed with 2% crushed Chinese herbal medicine， 2% compound Chinese herbal medicine extract and 2% fermented Chinese herbal medicine， respectively. The experiment lasted for 28 days. Compared with the control group， the crushed Chinese herbal medicine group was significantly different in the ratio of feed and gain （F/G）， total protein （TP） content， globulin （GLB） content， total antioxidant capacity （T-AOC） and superoxide dismutase （SOD） content （P<0.05）， the Chinese herbal medicine extract group was significantly different in average daily gain （ADG）， F/G， diarrhea index， immunoglobulin G （IgG） content， albumin （ALB） content， GLB content， TP content， alanine aminotransferase （ALT） content， aspartate aminotransferase （AST） content， alkaline phosphatase （ALP） content， glutathione peroxidase （GSH-PX） content， T-AOC， SOD content and malonaldehyde （MDA） content （P<0.05）， and the fermented Chinese herbal medicine group was significantly different in ADG， average daily feed intake （ADFI）， F/G， diarrhea index， IgG content， immunoglobulin A （IgA） content， immunoglobulin M （IgM） content， ALB content， GLB content， TP content， total cholesterol （TC） content， triglyceride （TG） content， ALT content， AST content， ALP content， GSH-PX content， catalase （CAT） content， T-AOC， SOD content and MDA content （P<0.05）. Compared with the control group， crushed Chinese herbal medicine group and Chinese herbal medicine extract group， the fermented Chinese herbal medicine group can improve the growth performance of weaned piglets， enhance immune and antioxidant functions， and has anti-diarrhea by aerobic and anaerobic asynchronous fermentation with bacteria and enzymes， suggesting that it is related to the superposition between the enhanced effect of Chinese herbal medicine and fermentation metabolites.

Key words： bacteria-enzymes synergy;asynchronous fermentation;compound Chinese herbal medicine;weaned piglets;growth;immunity

自2020年飼用抗生素禁用以來，中草藥因能通過適度調(diào)節(jié)和系統(tǒng)整合來平衡體內(nèi)各項(xiàng)機(jī)能^[1]、含有多糖等多種活性物質(zhì)而發(fā)揮獨(dú)特的免疫調(diào)節(jié)和抗氧化等功效^[2]、具有耐受性低和副作用少等特點(diǎn)^[3]，已成為抗生素替代品主要研究方向之一。中草藥藥效與加工處理方法有關(guān)，采取粉碎工藝時，中草藥堅(jiān)硬的細(xì)胞壁不能被徹底物理裂解，胞內(nèi)所含活性成分不能充分釋放；采用水和有機(jī)溶劑提取時，中草藥種類、有效成分的溶解性以及提取溫度、壓力和質(zhì)量濃度的差異等都會影響中草藥藥效發(fā)揮，并且應(yīng)用成本高。而中草藥經(jīng)有益菌發(fā)酵后，能增強(qiáng)與微生物種群的協(xié)同作用，釋放更多活性成分，提高藥效，減輕毒性^[4-5]。此外，發(fā)酵中草藥不僅具有治療疾病和保健作用，還可增強(qiáng)免疫力、提高產(chǎn)品品質(zhì)、減少應(yīng)激反應(yīng)^[6-7]，調(diào)節(jié)腸道微生物菌群^[8]。

仔豬的斷奶應(yīng)激會導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，增加發(fā)病率和死亡率^[9]。吳東等^[10]研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵中草藥可改善仔豬健康狀況，增強(qiáng)胃腸道代謝吸收功能。郭建來等^[11]發(fā)現(xiàn)發(fā)酵復(fù)方黨參可提高斷奶仔豬抗病能力。上述有關(guān)發(fā)酵中草藥研究多在厭氧和無酶協(xié)同條件下進(jìn)行，單一厭氧發(fā)酵對植物細(xì)胞壁降解作用有限。因此，本研究擬優(yōu)選復(fù)合有益菌和復(fù)合酶，采用菌酶聯(lián)合、先好氧再厭氧的二步發(fā)酵法，對配伍的抑菌型復(fù)方中草藥進(jìn)行異步發(fā)酵，通過纖維素酶和好氧菌發(fā)酵以增加微生物對中草藥細(xì)胞壁的降解能力，從而促進(jìn)中草藥活性成分的釋放，通過厭氧發(fā)酵疊加發(fā)揮微生態(tài)的菌群調(diào)控作用，并比較研究粉碎中草藥、中草藥提取物對斷奶仔豬生長、腹瀉、血清免疫、脂、酶、抗氧化指標(biāo)影響的差異，以期為異步酶解發(fā)酵中草藥應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 復(fù)方中草藥及配伍 將十大功勞葉、苦木、石榴皮、馬齒莧和鬼針草分別粉碎過40目篩，按6∶4∶4∶3∶3比例混合。中草藥購自亳州市乾元動物藥業(yè)有限公司。

1.1.2 酶 纖維素酶：酶活性為10 000 U/g；復(fù)合酶：由蛋白酶5 000 U/g、甘露聚糖酶200 U/g、α-淀粉酶250 U/g、葡聚糖酶10 000 U/g組成。均由廣東溢多利生物股份科技有限公司提供。

1.1.3 菌株 2×10¹⁰CFU/g枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）和1×10¹⁰CFU/g植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）由江蘇優(yōu)仕生物科技發(fā)展有限公司提供。

1.2 復(fù)方中草藥提取液制備

采用水煎煮提取法。復(fù)方中草藥與水的比例為1∶3。先用50%總水量浸泡粉碎中草藥2 h，并加熱沸騰煎煮30 min，濾出汁液。再加余下的50%水，煎煮20 min，濾出汁液。將2次濾出汁液合并混勻，制備得到復(fù)方中草藥提取液。

1.3 發(fā)酵復(fù)方中草藥制備

采用菌酶聯(lián)合異步發(fā)酵法。第一步進(jìn)行菌酶協(xié)同好氧發(fā)酵：按表1原料組成，先將玉米粉、豆粕粉與復(fù)方中草藥、纖維素酶和復(fù)合酶按比例混合均勻，再將50%紅糖、枯草芽孢桿菌放入50%的40～45 ℃溫水中，活化30～45 min后，均勻接種至上述混合物中，37 ℃條件下好氧發(fā)酵20 h。第二步進(jìn)行厭氧發(fā)酵：先將余下的50%紅糖、植物乳桿菌放入50%的40～45 ℃溫水中，活化30～45 min，均勻接種至好氧發(fā)酵后的混合物中，密閉，37 ℃條件下厭氧發(fā)酵5 d，制備得到發(fā)酵復(fù)方中草藥。

1.4 試驗(yàn)分組與飼糧

120頭28±2日齡杜長大斷奶仔豬被分為4組，各組設(shè)3個重復(fù)，各重復(fù)飼養(yǎng)10頭。對照組飼糧無中草藥，粉碎中草藥組、中草藥提取液組和發(fā)酵中草藥組分別飼喂含2%粉碎復(fù)方中草藥、2%復(fù)方中草藥提取液、2%發(fā)酵復(fù)方中草藥的試驗(yàn)組飼糧。試驗(yàn)期共28 d，每天14：00清掃豬舍，每周進(jìn)行一次消毒，保持豬舍良好通風(fēng)。飼糧中所含的粉碎復(fù)方中草藥、復(fù)方中草藥提取液和發(fā)酵復(fù)方中草藥的組成及含量見表1，飼糧配方與營養(yǎng)水平見表2。

1.5 主要試驗(yàn)儀器

MindrayBS-200型全自動生化分析儀、Multiskan GO型酶標(biāo)儀。

1.6 指標(biāo)測定

1.6.1 生長性能 每天結(jié)料與記錄仔豬采食量。在試驗(yàn)第1 d、第14 d和第28 d早晨06：00，稱量已空腹12 h的仔豬質(zhì)量。計(jì)算平均日增質(zhì)量（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料質(zhì)量比（F/G）。

1.6.2 腹瀉指數(shù) 每天觀察記錄斷奶仔豬糞便和腹瀉情況，按表3進(jìn)行評分，評分由5人組成的評分組分別打分，取平均值。再計(jì)算斷奶仔豬試驗(yàn)第1～2周、第3～4周和全期1～4周的腹瀉指數(shù)，腹瀉指數(shù)=糞便評分之和/仔豬頭數(shù)。

1.6.3 免疫指標(biāo) 在試驗(yàn)第28 d，對斷奶仔豬停料不停水24 h，1頭采集10 ml前腔靜脈血。將全血于4 ℃靜置10 min后，再經(jīng)3 000 r/min離心15 min，分離出血清。測定血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）及總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）和球蛋白（GLB）的含量。

1.6.4 血清脂與酶 包括谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、乳酸脫氫酶（LDH）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）。

1.6.5 血清抗氧化指標(biāo) 包括過氧化氫酶（CAT）、總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）及丙二醛（MDA）。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用IBM SPSS 21.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用鄧肯氏法多重比較檢驗(yàn)，P<0.05 為差異顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌酶協(xié)同異步發(fā)酵中草藥對斷奶仔豬生長性能的影響

由表4可知，與對照組相比，粉碎中草藥組斷奶仔豬F/G顯著降低17.20%（P<0.05）；中草藥提取液組平均日增質(zhì)量提高28.86%（P<0.05），F(xiàn)/G顯著降低15.59%（P<0.05）；發(fā)酵中草藥組平均日增質(zhì)量和平均日采食量分別顯著提高40.27%和16.82%（P<0.05），F(xiàn)/G顯著降低16.67%（P<0.05）。3種加工方式中草藥組間平均日增質(zhì)量和F/G均無顯著差異`（P>0.05）；與粉碎中草藥組相比，中草藥提取液組平均日采食量無顯著差異（P>0.05），發(fā)酵中草藥組仔豬平均日采食量顯著提高15.77%（P<0.05）；平均日采食量在中草藥提取液組與發(fā)酵中草藥組間無顯著差異（P>0.05）。

2.2 菌酶協(xié)同異步發(fā)酵中草藥對斷奶仔豬抗腹瀉的影響

表5顯示，相對于對照組，粉碎中草藥組腹瀉指數(shù)在試驗(yàn)各期均無顯著變化（P>0.05），中草藥提取液組腹瀉指數(shù)在前期和后期無顯著降低（P>0.05），但在全期顯著降低39.97%（P<0.05）；發(fā)酵中草藥組腹瀉指數(shù)在前期、后期和全期分別降低33.15%、74.96%和46.71%，差異均顯著（P<0.05）。3種加工方式中草藥組間腹瀉指數(shù)在前期和全期均無顯著不同；在后期，僅發(fā)酵中草藥組腹瀉指數(shù)較粉碎中草藥組顯著降低62.44%（P<0.05）。

2.3 菌酶協(xié)同異步發(fā)酵中草藥對斷奶仔豬免疫功能的影響

表6顯示，相對于對照組，粉碎中草藥組仔豬血清球蛋白和總蛋白的含量均有顯著提高（P<0.05），中草藥提取液組血清免疫球蛋白G、白蛋白、球蛋白和總蛋白的含量均顯著提高（P<0.05），發(fā)酵中草藥組血清免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、白蛋白、球蛋白和總蛋白的含量分別顯著提高14.58%、15.38%、35.71%、39.57%、47.28%和44.77% （P<0.05）。3種加工方式中草藥組間免疫球蛋白G和免疫球蛋白M水平均無顯著不同（P>0.05），中草藥提取液組球蛋白含量較粉碎中草藥組顯著提高15.00%（P<0.05）。發(fā)酵中草藥組球蛋白含量較粉碎中草藥組和中草藥提取液組分別顯著提高34.02%和16.54%（P<0.05），免疫球蛋白A和白蛋白的含量較粉碎中草藥組分別顯著提高13.64%和22.47%（P<0.05），總蛋白含量較粉碎中草藥組和中草藥提取液組分別顯著提高30.20%和14.12%（P<0.05）。

2.4 菌酶協(xié)同異步發(fā)酵中草藥對斷奶仔豬血清脂和酶的影響

由表7可知，發(fā)酵中草藥組各血清脂和酶指標(biāo)含量最低。與對照組相比，粉碎中草藥組斷奶仔豬血清各脂、酶含量均無顯著差異（P>0.05），中草藥提取液組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶的含量分別顯著降低20.34%、18.75%和9.88% （P<0.05），發(fā)酵中草藥組總膽固醇、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶的含量分別顯著降低27.46%、20.51%、28.82%、23.12%和14.70%（P<0.05）。3種加工方式中草藥組間甘油三酯、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶和乳酸脫氫酶均無顯著變化（P>0.05），發(fā)酵中草藥組總膽固醇含量較粉碎中草藥組和中草藥提取液組分別顯著降低22.18%和10.46%（P<0.05），發(fā)酵中草藥組和中草藥提取液組谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量較粉碎中草藥組分別顯著降低25.00%和16.07%（P<0.05）。

2.5 菌酶協(xié)同異步發(fā)酵中草藥對斷奶仔豬抗氧化性能的影響

由表8可知，與對照組相比，粉碎中草藥組斷奶仔豬血清總抗氧化能力和超氧化物歧化酶含量分別顯著提高15.50%和10.76%（P<0.05）；中草藥提取液組谷胱甘肽過氧化物酶含量、總抗氧化能力和超氧化物歧化酶含量分別顯著提高12.02%、22.51%和16.73%（P<0.05），丙二醛含量顯著降低24.41%（P<0.05）；發(fā)酵中草藥組谷胱甘肽過氧化物酶含量、過氧化氫酶含量、總抗氧化能力和超氧化物歧化酶含量分別顯著提高13.17%、50.44%、42.80%和38.42%（P<0.05），丙二醛含量顯著降低33.66%（P<0.05）。3種加工方式中草藥組間谷胱甘肽過氧化物酶含量和丙二醛含量均無顯著差異（P>0.05）；發(fā)酵中草藥組總抗氧化能力和過氧化氫酶含量較粉碎中草藥組分別顯著提高23.64%和45.15%（P<0.05），超氧化物歧化酶含量較粉碎中草藥組和中草藥提取液組分別顯著提高24.98%和18.59%（P<0.05）。

3 討論

3.1 不同加工方式中草藥對斷奶仔豬生長性能的影響

研究結(jié)果表明，發(fā)酵絞股藍(lán)、地黃根等中藥可促進(jìn)斷奶仔豬生長代謝，減少糞便有害氣體排放^[12]。斷奶仔豬飼喂0.40%由乳酸菌、芽孢桿菌和酵母菌發(fā)酵的黨參、黃芪等5種復(fù)方中草藥，ADG顯著提高25.05%、F/G顯著降低25.00%^[13]，本試驗(yàn)發(fā)酵中草藥組與上述結(jié)果較為相似。用乳酸菌、枯草芽孢桿菌和酵母菌發(fā)酵黃芪、白術(shù)等復(fù)方中草藥，2.00%發(fā)酵中草藥組較未發(fā)酵組斷奶仔豬ADG顯著提高^[14]。本試驗(yàn)發(fā)酵中草藥組ADG較對照組顯著提高，較未發(fā)酵粉碎中草藥組ADG有一定程度提高，而粉碎中草藥組ADG較對照組無顯著提高。中草藥堅(jiān)硬的細(xì)胞壁主要含木質(zhì)素、纖維素、果膠等結(jié)構(gòu)成分，因不易被裂解，影響胞內(nèi)活性成分的釋放，從而影響中草藥的功效。本試驗(yàn)采用芽孢桿菌先好氧、乳酸菌后厭氧，并與纖維素酶協(xié)同的異步發(fā)酵方式，試驗(yàn)結(jié)果不僅提示菌酶共同發(fā)酵能較充分降解中草藥致密的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，更多地釋放被細(xì)胞壁包裹的胞內(nèi)活性物質(zhì)，還說明過40目篩的粉碎加工處理方式對中草藥細(xì)胞壁的分解作用仍有限。此外，菌酶協(xié)同異步發(fā)酵還產(chǎn)生大量有機(jī)酸和內(nèi)源性酶，能夠減輕中草藥苦味，改善飼糧適口性，促進(jìn)消化吸收^[15]，從而改善斷奶仔豬生長、降低料質(zhì)量比。本試驗(yàn)中草藥提取液組較無中草藥對照組顯著提高斷奶仔豬平均日增質(zhì)量，而粉碎中草藥組平均日增質(zhì)量與對照組差異不顯著，說明中草藥的煎煮水提取加工方式與普通粉碎處理對仔豬生長性能的影響不同。

3.2 菌酶協(xié)同異步發(fā)酵中草藥對斷奶仔豬腹瀉與免疫功能的影響

健康仔豬胃腸道微生物保持相對穩(wěn)定狀態(tài)，斷奶應(yīng)激使腸壁黏膜屏障功能受損，消化功能紊亂，同時自身免疫機(jī)制還未成熟，致病性微生物大量繁殖，腹瀉頻發(fā)^[16]。張玉千^[17]用嗜酸乳桿菌、安琪啤酒酵母和植物乳桿菌發(fā)酵五倍子、女貞子、山楂、甘草和厚樸等中藥渣，仔豬經(jīng)飼喂后，腹瀉率顯著降低73.65%。發(fā)酵復(fù)方中草藥使仔豬腹瀉率顯著降低65.23%^[18]。添加0.20%發(fā)酵茯苓、黃芪、陳皮等復(fù)方中草藥，斷奶仔豬血清IgG含量和TP含量分別顯著提高9.78%和6.48%，IgA含量和IgM含量無顯著不同^[19]。本試驗(yàn)發(fā)酵中草藥具有抗腹瀉和增強(qiáng)免疫功能作用，較對照組腹瀉指數(shù)在試驗(yàn)各期均顯著降低，試驗(yàn)4周后腹瀉指數(shù)下降46.71%，血清IgG、IgA、IgM、ALB、GLB、TP含量均顯著提高，與上述研究結(jié)果稍有差異，這與復(fù)方中草藥配伍、功效和發(fā)酵處理有關(guān)。本試驗(yàn)所選十大功勞葉能消炎止瀉^[20]，石榴皮鞣花酸具有修復(fù)腸道損傷和抗腹瀉功能^[21]，馬齒莧粗多糖能抑制有害微生物^[22]，苦木能燥濕止痢^[23]，苦木、馬齒莧中所含生物堿類、皂苷類化合物有抑菌抗病毒和增強(qiáng)機(jī)體免疫力功效^[24-25]。發(fā)酵中藥還可完善腸道功能^[26]，促進(jìn)對飼糧的消化吸收。粉碎中草藥組較對照組腹瀉指數(shù)及IgG、IgA、IgM、ALB含量無顯著變化，提示與普通粉碎加工對中草藥細(xì)胞壁物理破壁不充分有關(guān)。中草藥提取液組較對照組腹瀉指數(shù)降低，血清IgG、ALB、GLB、TP含量均顯著提高，反映中草藥水提取工藝能增強(qiáng)藥效，石榴皮提取物中鞣花酸能減輕小鼠結(jié)腸炎癥狀的結(jié)果間接佐證此推測^[27]。

3.3 不同加工方式中草藥對斷奶仔豬血清脂、酶的影響

TC、TG含量是機(jī)體對脂類物質(zhì)吸收利用的指標(biāo)。添加由當(dāng)歸、川芎等13種原料配伍的復(fù)方中草藥，家兔血清TC、TG含量分別顯著降低9.67%和40.00%^[28]。本試驗(yàn)發(fā)酵中草藥組仔豬血清脂含量較對照組均顯著降低，粉碎中草藥組和中草藥提取液組均無顯著變化，表明發(fā)酵中草藥能增強(qiáng)仔豬脂肪代謝、降低體內(nèi)脂肪沉積，其機(jī)理尚需進(jìn)一步研究。

血清酶反映機(jī)體物質(zhì)代謝和健康狀況。ALT、AST和ALP主要存在于肝細(xì)胞胞漿和線粒體中，反映肝臟代謝機(jī)能和損傷程度。LDH主要存在于腎臟中，與細(xì)胞活性功能相關(guān)。添加由杜仲、黃芪、山楂、甘草配伍的復(fù)方中草藥，仔豬血清ALT、AST含量分別顯著降低6.02%和7.86%^[29]。發(fā)酵北蒼術(shù)組斷奶仔豬血清ALT含量顯著降低3.81%，AST含量無顯著變化^[30]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比，中草藥提取液組和發(fā)酵中草藥組均顯著降低仔豬血清AST、ALT和ALP的水平，而添加粉碎中草藥不能顯著改善血清酶的含量，這與上述結(jié)果存在一定差異，推測與復(fù)方中草藥組成及加工方式有關(guān)。本試驗(yàn)苦木中所含苦木總生物堿具有降低轉(zhuǎn)氨酶活性功效^[25]，尤其是中草藥經(jīng)長時間高溫煎煮提取或發(fā)酵處理，細(xì)胞內(nèi)生物堿類、粗多糖等有效物質(zhì)能更多釋放，藥效增強(qiáng)，保證了仔豬肝臟等器官的正常發(fā)育和健康。

3.4 不同加工方式中草藥對斷奶仔豬血清抗氧化性能的影響

抗氧化能力反映動物機(jī)體應(yīng)激程度和健康狀況。斷奶應(yīng)激反應(yīng)使仔豬機(jī)體自由基代謝失常，抗自由基系統(tǒng)損傷過度，誘發(fā)疾病。研究結(jié)果表明，發(fā)酵中草藥組較對照組仔豬血清GSH-PX含量、SOD含量和T-AOC分別顯著提高21.46%、15.75%和16.71%，MDA含量顯著降低24.87%^[14]。斷奶仔豬飼喂經(jīng)枯草芽孢桿菌發(fā)酵的中草藥，血清總超氧化物歧化酶含量和GSH-PX含量顯著提高，MDA含量無顯著不同^[31]。用植物乳桿菌發(fā)酵黃芩藥渣比未發(fā)酵組和對照組有更明顯的抗氧化功能^[32]。本試驗(yàn)發(fā)酵中草藥組斷奶仔豬血清T-AOC和GSH-PX、SOD、CAT含量較對照組均顯著提高，MDA含量顯著降低，較粉碎中草藥組T-AOC和SOD、CAT含量均顯著提高；中草藥提取液組較對照組T-AOC和GSH-PX、SOD含量均顯著提高，MDA含量顯著降低，這是由于本試驗(yàn)所用十大功勞葉、鬼針草、石榴皮和馬齒莧均有抗氧化功效^[24，33-35]，石榴皮多糖、馬齒莧有還原能力和清除自由基作用^[36-37]。但除T-AOC和SOD含量外，粉碎中草藥組并未顯著改善仔豬血清抗氧化功能，而菌酶協(xié)同異步發(fā)酵中草藥能增加中草藥抗氧化等活性成分的釋放。中草藥經(jīng)混菌發(fā)酵后，纖維含量顯著降低，且發(fā)酵后大部分物質(zhì)含量有不同程度提高^[38]。

4 結(jié)論

與對照和粉碎中草藥相比，采用菌酶協(xié)同異步發(fā)酵十大功勞葉、苦木、石榴皮、鬼針草、馬齒莧配伍的抑菌性復(fù)方中草藥，可改善斷奶仔豬生長狀況，減少腹瀉，提高機(jī)體代謝、免疫、抗氧化功能，其機(jī)制可能是中草藥的抑菌功效、菌酶裂解中草藥細(xì)胞壁后增加中草藥活性成分的釋放功效以及活菌等發(fā)酵代謝產(chǎn)物對胃腸道菌群平衡調(diào)控的三重疊加作用。

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