管慶霞，周小影，呂邵娃，楊芳芳，聶澤卉，林澤瑜，王艷宏

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150000）

中藥復(fù)方湯劑乃是中醫(yī)藥之瑰寶，以“君、臣、佐、使 ”為組方原則，以“相須 、相使 、相惡”為作用規(guī)律，不僅解決了復(fù)雜病情難以用藥的問題，還克服了單味中藥的藥味偏性，得以減少不良反應(yīng)、提高臨床療效，是中醫(yī)主要的用藥方法，也是中醫(yī)藥整體觀念和辨證論治的集中體現(xiàn)［1，2］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)為解決用藥不方便、不易攜帶、藥材利用率低等問題，將傳統(tǒng)湯劑制備成顆粒、浸膏、飲片等現(xiàn)代新劑型，但其在制備過程中往往因以“唯成分論”為指導(dǎo)，而致使中藥復(fù)方湯劑的藥效被不同程度的窄化及弱化。中藥中多含有難溶性及脂溶性等有效成分如葛根素、黃芩苷、丹參酮Ⅱ A、大黃素等，它們水溶性極低，導(dǎo)致中藥的有效成分難以被有效利用?，F(xiàn)代科學(xué)使用脂質(zhì)體、固體分散體、微囊等技術(shù)增加其溶解度［3］，但同時也存在了許多隱患，如：卵磷脂中的溶血磷脂；吐溫-80 ℃中殘留過氧化氫；合成的表面活性劑或高濃度的表面活性劑產(chǎn)生胃腸道刺激或毒性等問題屢見不鮮［4，5］。

中藥復(fù)方通過多味藥的配伍，不僅中和單味藥性味單一的問題，而且實現(xiàn)協(xié)同增效的作用，無需添加輔料或借助特殊工藝及設(shè)備，從而減少使用輔料增溶等帶來的安全性隱患。中藥復(fù)方共煎后產(chǎn)生復(fù)雜的物理化學(xué)變化，湯劑中的各成分并不只以單成分形式存在，更多是以脂類、蛋白質(zhì)、多糖及碳水化合物等代謝物中間產(chǎn)物聚集體；單分子自發(fā)聚集體；單分子與代謝物之間的聚集體的形式在水溶液中形成凝膠、纖維、膠束、囊泡等，對溶解度的影響是其外在的表現(xiàn)［6］。

1 中藥復(fù)方湯劑自組裝納米相態(tài)的研究現(xiàn)狀

中藥湯劑是含真溶液、膠體溶液、乳濁液和混懸液的一個復(fù)雜的多分散相體系。有研究者提出中藥復(fù)方湯劑自組裝過程與化學(xué)合成不同，是指分子或部分分子通過氫鍵、范德華力、π-π 堆積、陽離子-π 吸附等非共價鍵作用在沒有人為干預(yù)的情況下自發(fā)形成有序聚體，將難溶性或脂溶性成分藥物包裹在凝膠、纖維、膠束、囊泡中，從而起到增溶、助溶等作用［7，8］；也可能是存在多種天然成分如：蛋白質(zhì)、皂苷、樹膠、黏液質(zhì)、甾醇等在制劑制備過程中可自組裝形成膠團(tuán)從而發(fā)揮其增溶作用；也可能是其他因素造成，如pH、溶劑等的物理化學(xué)環(huán)境改變［9］。

中藥成分復(fù)雜，多含有皂苷類、生物堿類、多糖類、黃酮類等，其中氨基酸、糖、核苷堿基、甾體、三萜、香豆素等在分子間可形成氫鍵、π-π 作用、范德華力等非共價鍵作用，從而促使分子有序排列形成聚集體［10］。如：堿基分子自身具有許多氫鍵給體和受體的位點，可形成氫鍵和 π-π 作用，有利于自組裝的形成；以膽固醇和膽甾酸為主的甾體，有疏水骨架和疏水烷基側(cè)鏈，又有芳環(huán)部分提供的 π-π 作用，可與連接臂提供的氫鍵作用、甾體提供的范德華力協(xié)同作用從而實現(xiàn)自組裝；香豆素其母核結(jié)構(gòu)是α-苯并吡喃酮，具有很強(qiáng)的 π-π 堆積作用，同時香豆素基團(tuán)還是很強(qiáng)的熒光基團(tuán)，因此常被用于組裝體系；抗壞血酸骨架上的多個羥基容易在分子間形成氫鍵，促進(jìn)分子有序排列形成組裝體；氨基酸具有易修飾的氨基和羧基官能團(tuán)，容易通過酰胺鍵將其連接起來得到不同序列的多肽結(jié)構(gòu)，分子間形成的氫鍵可促使氨基酸單元有序排列形成組裝體，而且在自組裝過程中氨基酸分子的手性通常會被放大，形成納米相態(tài)［10］。中藥中還廣泛存在樹膠、纖維素、淀粉、黏液質(zhì)、菊糖、鞣質(zhì)和蛋白質(zhì)不易溶于水且分子量大的物質(zhì)，在制劑過程中常常因被認(rèn)為是無效成分被除去。而這些成分在煎煮過程中會形成親水性膠體溶液，多糖類水解后可生成單糖或低聚糖，蛋白質(zhì)的分解產(chǎn)物聚集體分散于介質(zhì)中時，則可構(gòu)成高分子溶液或多項不均勻分散體系，從而增加溶液的穩(wěn)定性和溶解度［11］。但是方劑間的配伍不同，所形成膠團(tuán)性質(zhì)有所不同，其呈現(xiàn)增溶作用也不同。

2 中藥復(fù)方湯劑自組裝納米相態(tài)形成原理

分子的自組裝普遍存在，肽鏈組裝成蛋白質(zhì)和核酸、配體與受體的聯(lián)系等都是自組裝形式，且其分子的結(jié)構(gòu)決定了自組裝單元的性質(zhì)，它們通常處于平衡狀態(tài)或亞穩(wěn)態(tài)狀態(tài)［12］。自組裝過程具有以下五個顯著特征：（1）一組相同或不同的分子，或相互作用的大分子的片段聚集使分子從較無序的狀態(tài)（溶液、無序聚合）轉(zhuǎn)化為更有組織的最終態(tài)（晶體、復(fù)合大分子）；（2）分子的自組裝需要通過非共價鍵的吸引力與排斥力來平衡分子間的相互作用；（3）聚合物必須具有可逆性，即分子間聚合與分離的傾向力應(yīng)相當(dāng)，會受熱能顯著影響，從而允許聚合中的組件調(diào)整它們的位置、相互作用的強(qiáng)度等；（4）自組裝過程通常發(fā)生在溶液中或在界面上，其各成分與周圍介質(zhì)有強(qiáng)烈相互作用，且這個影響是自始至終的；（5）分子必須是可移動的，并且溶液在熱攪拌中使分子以適當(dāng)?shù)姆较蜻M(jìn)入自組裝聚集體中［6］。分子自組裝過程意味著系統(tǒng)的熵增加，當(dāng)一個作用力大到足夠克服熵時，系統(tǒng)就可能會發(fā)生自發(fā)自組裝，另外從生物學(xué)上看兩親性分子是形成的自組裝的關(guān)鍵，而兩親性分子在水溶液中的自組裝是由疏水效應(yīng)所驅(qū)動的［6］。中藥復(fù)方湯劑中的皂苷類、多糖類、蛋白質(zhì)等多成分在自組裝過程中都起著一定的作用，其在煎煮過程中可能發(fā)生的自組裝過程如圖1 所見。

圖1 中藥復(fù)方湯劑在煎煮過程中可能發(fā)生的自組裝過程Fig 1 Possible self-assembly process of traditional Chinese medicine compound decoction in the process of decoction

3 中藥復(fù)方湯劑多成分自組裝納米相態(tài)形成原理

3.1 皂苷類成分自組裝納米相態(tài)形成原理

皂苷是一種含有三萜類或螺苷元的疏水區(qū)域以及一條或多條親水性糖鏈組成的兩親性化合物，稱為糖苷配基，通過美拉德反應(yīng)不僅能表現(xiàn)出良好的表面活性及乳化作用，還能減少產(chǎn)生全身性毒性作用的可能性［13］。五環(huán)三萜類材料具有剛性和手性的中心納米骨架，大多數(shù)五環(huán)三萜類藥物的分子長度為1.2～1.3 nm 的，無論是無環(huán)還是脂環(huán)三萜類天然成分因為其具有柔性側(cè)鏈可折疊成許多不同的構(gòu)象，故適合用于納米相態(tài)的自組裝［14］。五環(huán)三萜類的自組裝主要是因為分子間的羧基和羥基的氫鍵和非極性三萜類骨架的分散力，而三萜類骨架和官能團(tuán)空間方向的差異可能對自組裝過程產(chǎn)生顯著影響［15］。也有研究發(fā)現(xiàn)皂苷在一定條件下自組裝形成膠束，苷元具有不同程度的親脂性，糖鏈具有很強(qiáng)的親水性，其可顯著增加難溶性物質(zhì)的溶解，而膠束的大小、形狀和結(jié)構(gòu)取決于其植物來源、溫度、pH、電解質(zhì)濃度等［16，17］。皂苷的表面活性可以將疏水藥物包裹在疏水心中，作為藥物的單載體或復(fù)合載體材料發(fā)揮增溶作用。Bag 等［15］研究齊墩果酸在水介質(zhì)及非水介質(zhì)中的自組裝能力發(fā)現(xiàn)齊墩果酸可中水介質(zhì)中包裹熒光團(tuán)或阿霉素等藥物自組裝形成納米凝膠，包括藥物阿霉素等分子，并且認(rèn)為這種自組裝被認(rèn)為是由分子間力驅(qū)動，如涉及羧基和羥基的氫鍵。因為糖苷和糖鏈具有多樣性，導(dǎo)致皂苷作為表面活性劑具有差異，故皂苷的自組裝機(jī)制也存在差異，中藥中皂苷類的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理如表1 所示。皂苷其苷元結(jié)構(gòu)的不同，可分為三萜皂苷和甾體皂苷；皂苷根據(jù)糖鏈的數(shù)量可分為單糖、雙糖和三糖鏈皂苷，糖鏈通常含有一個或幾個單糖基［18］。三萜皂苷的糖鏈主要連接到苷元的C-3 和C-28 位；甾體皂苷的糖鏈通常連接在螺甾烷型皂苷的C-3 位和呋喃甾烷型皂苷的C-3 和C-26 位，其中二糖鏈皂苷構(gòu)成親水-疏水-親水三嵌段結(jié)構(gòu)，容易自組裝形成膠束和囊泡［18］。如甘草皂苷具有內(nèi)疏水基團(tuán)（三萜苷）和外親水基團(tuán)（兩種葡萄糖醛酸），內(nèi)部疏水性基團(tuán)鏈接難溶性成分，親水性基團(tuán)使得納米相態(tài)溶于水溶液，使其可以在水溶液中形成球形膠束，提高難溶性的溶解度［19］。

表1 皂苷類的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理Tab 1 Structural characteristics of saponins and the principle of nanophase formation by self-assembly

3.2 多糖類成分自組裝納米相態(tài)形成原理

大多數(shù)天然多糖具有羥基、羧基等親水基團(tuán)，當(dāng)親水性聚合物鏈與疏水段接枝時，合成了兩親性共聚物［24］。當(dāng)與水環(huán)境接觸時，聚合物兩親分子通過在疏水基團(tuán)之間進(jìn)行分子內(nèi)或分子間的關(guān)聯(lián)而自發(fā)地形成膠束或膠束狀聚集體。由于分子鏈上存在各種可衍生基團(tuán)，多糖可輕易地進(jìn)行化學(xué)和生物化學(xué)修飾，產(chǎn)生了多種多糖衍生物，為了最小化界面自由能，兩親性分子在界面處通過自組裝與組件形成球形膠束，并在球形膠束內(nèi)部重組轉(zhuǎn)化為圓柱狀或形成薄膜，最后形成囊泡。Iitsuka 等［26］檢測多種湯劑中的納米顆粒發(fā)現(xiàn)主要由碳（93.49%）組成，其次是氧（3.95%），通過比較納米顆粒與數(shù)據(jù)庫中的拉曼光譜波形的相似性，預(yù)測納米顆粒由阿拉伯半乳聚糖、纖維素等多糖組成。親水基團(tuán)能與生物組織形成非共價鍵，形成生物粘附性，以生物黏附多糖為載體的納米顆粒載體可延長其停留時間，從而停留時間負(fù)荷藥物吸收率［24，26］。Wang 等［27］經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)白及多糖主干結(jié)構(gòu)由1、2-或1、4-鏈的甘露糖殘基組成，甘露糖C-2 支鏈上還有己糖殘基，存在大量的羥基，在遇水后易發(fā)生交聯(lián)，長鏈大分子從舒展?fàn)顟B(tài)逐漸纏結(jié)形成分子間氫鍵阻礙水分子的自由運動，從而具有黏性，且黏性在pH≥5.0 時，黏性顯著增加，進(jìn)而對難溶性成分進(jìn)行包封，可作為控釋系統(tǒng)、生物黏附靶向系統(tǒng)的賦形劑。多種中藥中富含多糖，因其具有獨特的結(jié)構(gòu)特點可自組裝形成納米相態(tài)，中藥中多種多糖類的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理如表2 所示。

表2 多糖類的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理Tab 2 Structural characteristics of polysaccharides and the principle of nanometer phase state self-assembly

3.3 蛋白質(zhì)類成分自組裝納米相態(tài)形成原理

天然蛋白質(zhì)是形狀近似球型形或橢圓形的復(fù)雜的生物大分子，其分子內(nèi)部為具有疏水性氨基酸殘基，分子外部是具有親水性的氨基酸殘基。蛋白具有3 個結(jié)構(gòu)域，分別為50～70 個殘基的兩親性N-末端區(qū)，72 個殘基的中心疏水結(jié)構(gòu)域和可變長度的兩親性C-末端［36］，這使得大多數(shù)蛋白質(zhì)分子具有吸附在油水和空氣-水界面上的能力，并能有效地作為乳液和泡沫的穩(wěn)定劑，且在水介質(zhì)結(jié)構(gòu)中的通常與多糖結(jié)合形成凝膠的顯微結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)從而達(dá)到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)-水相互作用的平衡［37］。其分子內(nèi)或分子之間的氫鍵、疏水作用、靜電及范德華力等相互作用力使其具有特異性識別能力與結(jié)合作用，從而使其與其他成分容易自組裝形成膠束。中藥湯劑在煎煮過程中并非是一個單純的熱水抽提過程而是可能發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)過程（美拉德反應(yīng)）和物理過程（超分子自組裝）等。中藥植物、動物等的還原糖與氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)等含有游離氨基的化合物之間可產(chǎn)生非酶促褐變反應(yīng)，又稱為美拉德反應(yīng)［36］。加熱是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化的驅(qū)動力，蛋白分子內(nèi)部含疏水基團(tuán)，當(dāng)?shù)鞍捉Y(jié)構(gòu)發(fā)生變化的時候，疏水基團(tuán)暴露出來，在水溶液中非極性分子或非極性基團(tuán)相互靠近而積聚，此過程為蛋白質(zhì)的疏水作用［38］。加熱煮沸的過程引起蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化，即三級結(jié)構(gòu)的部分展開和二級結(jié)構(gòu)的構(gòu)象變化，然后一些特定的區(qū)域，如疏水位點或游離的-SH 基團(tuán)暴露出來，蛋白質(zhì)通過疏水作用形成聚集體形成膠束［39］。組成蛋白質(zhì)的氨基酸多含或帶正電或帶負(fù)電的可解離側(cè)鏈，異種電荷互相吸引，同種電荷互相排斥，電荷間相互作用產(chǎn)生靜電［40］。若蛋白質(zhì)中含有巰基，也可以通過加熱，使分子形成二硫鍵，以二硫鍵交聯(lián)自組裝形成凝膠結(jié)構(gòu)［41］。甘草蛋白因其特有酰胺基團(tuán)與季銨離子可在水溶液中發(fā)生靜電等作用使其可實現(xiàn)對難溶性成分的自組裝成納米相態(tài)［42］。蛋白質(zhì)自組裝是分子間及分子內(nèi)的相互作用和相互平衡的過程，因此蛋白質(zhì)種類不同會導(dǎo)致自組裝形成過程有所不同，中藥中蛋白質(zhì)類的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理如表3 所示。

表3 蛋白質(zhì)類的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理Tab 3 Structural characteristics of proteins and the principle of nanophase formation by self-assembly

3.4 其他

在此基礎(chǔ)上，還有研究者發(fā)現(xiàn)中藥湯劑自組裝形成納米相態(tài)達(dá)到增溶增效的作用不只僅限于以上成分，已有研究者發(fā)現(xiàn)中藥天然分子如粳米中的淀粉、石膏中的無機(jī)硫酸鈣、植物中的木質(zhì)素、黃酮類、生物堿、有機(jī)酸、微量元素等［46-49］都可自組裝形成納米相態(tài)。中藥中其他類成分的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理如表4 所示。中藥天然小分子大黃酸可以通過π-π 堆積、氫鍵和其他非共價相互作用下不需要任何結(jié)構(gòu)修飾或傳遞載體從而實現(xiàn)自組裝過程［50］。天然小分子小檗堿和肉桂酸也可以自組裝成具有修飾性抗菌活性的天然納米相態(tài)，其主要由氫鍵和π-π 疊加相互作用控制，且抑制作用遠(yuǎn)優(yōu)于一些一線抗生素，如諾氟沙星、阿莫西林和四環(huán)素［47］。利用中藥中天然成分在經(jīng)過煎煮自組裝形成納米相態(tài)不僅解決了添加劑帶來的一系列問題還能有效承遞在現(xiàn)代制劑研究中所丟失的中藥復(fù)方藥性，很可能是一個很有前途現(xiàn)代制劑研究方向。

表4 其他類中藥成分的結(jié)構(gòu)特點及其自組裝形成納米相態(tài)原理Tab 4 Structural characteristics of other kinds of traditional Chinese medicine components and the principle of nano-phase formation by self-assembly

4 中藥復(fù)方湯劑自組裝納米相態(tài)增效機(jī)制

甘草歷有和中緩急、調(diào)和諸藥之功效，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對甘草調(diào)和諸藥之功效進(jìn)行深入之研究發(fā)現(xiàn)甘草次生代謝物中具有生物活性有三萜皂苷、各類黃酮、香豆素、多糖和其他酚類等，其中三萜皂苷類（甘草酸等）、黃酮類（甘草苷、異甘草苷等）及甘草多糖多為兩親性成分，甘草中的三萜皂苷含有非極性皂苷和水溶性側(cè)鏈，其可以顯著增加難溶性成分的溶解度，易在水煎煮過程中形成納米粒［21］。難溶性成分柴胡皂苷-a、柴胡皂苷-b1、黃芩苷等是柴胡、黃芩的主要活性成分，但因為溶解度問題，其生物利用度常常難以提高。有研究者發(fā)現(xiàn)在復(fù)方湯劑中甘草皂苷及其衍生物能夠?qū)Σ窈碥?a、柴胡皂苷-b1起到的顯著增溶作用［54］。王舒琪等［55］通過對桃核承氣湯中油水分配系數(shù)與指標(biāo)成分含量的研究，驗證了甘草的增溶作用，其增溶通過甘草酸自組裝形成膠束來實現(xiàn)。Zhou 等［56］從麻杏石甘湯中成功地分離出膠體粒子，發(fā)現(xiàn)其有效成分麻黃堿（99.7%）和偽麻黃堿（95.5%）通過甘草皂苷自組裝成納米膠束，有效成分可以溶解在膠束的不同區(qū)域，如疏水核心、柵欄層或膠束外表面，從而有效提高其生物利用度。

除甘草外還有多種中藥中的成分都可起到表面活性劑、乳化劑或增溶劑作用。李暢等［31］研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿多糖與淫羊藿苷、寶藿苷Ⅰ形成了新的膠束復(fù)合物，從而實現(xiàn)淫羊藿多糖對難溶性黃酮成分淫羊藿苷和寶藿苷Ⅰ的增溶作用。Meng 等［57］分別對黃連解毒湯上清液和天然沉淀物進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)黃芩苷和小檗堿可自組裝形成納米顆粒。Li 等［58］進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)小檗堿和黃芩苷形成天然的納米顆粒對過敏性腸綜合征有協(xié)同作用是由于自組裝的形成而不是簡單的混合而實現(xiàn)的。Liu 等［31］系統(tǒng)地研究了黃芪多糖對15 種黃酮類化合物在水溶液中的溶解度和穩(wěn)定性的影響，發(fā)現(xiàn)黃芪多糖對黃酮苷元的增溶作用大于對黃酮苷的增溶作用，且黃芪多糖和黃酮類化合物可形成1∶1 復(fù)合物，此復(fù)合物將低溶解度的黃酮類包裹于納米相態(tài)中，來實現(xiàn)增溶以提高的生物利用度。醋炒柴胡多糖是一種酸性多糖，其糖醛酸含量為61.16%，其獨特的支化結(jié)構(gòu)和醛酸殘基可以增強(qiáng)氫鍵的分子內(nèi)相互作用［27］，此外，醛酸殘基還可增強(qiáng)多糖分子的電負(fù)性，從而加強(qiáng)了氫鍵的分子間相互作用，使其能在水溶液中自發(fā)聚集形成納米相態(tài)，將難溶性成分黃芩苷與大黃酸包裹其中，使黃芩苷和大黃酸的溶解度分別提高15 倍和49.6 倍。

中藥各成分大多通過在體外或體內(nèi)自組裝過程形成納米相態(tài)從而提高藥效。有效成分在體內(nèi)可通過一個序列的自組裝酶反應(yīng)，如與大腸桿菌中的一對蛋白-肽的相互作用自組裝形成納米相態(tài)，通過藥物外排泵和溶酶體隔離、胞吐，有效成分靶向給藥。納米粒子還可以與如肝或脾臟中的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞或循環(huán)的單核細(xì)胞自然吸收外來微粒實現(xiàn)細(xì)胞的內(nèi)部積累［51］。其在體外形成納米相態(tài)，可以影響藥物水平、抗原性、位置和作用持續(xù)時間。納米粒子親水性基團(tuán)朝外，可定向結(jié)合癌細(xì)胞表面的透明質(zhì)酸受體進(jìn)而進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，而疏水性基團(tuán)朝內(nèi)，可包裹疏水的藥物，藥物載體與還原劑作用后，二硫鍵斷開導(dǎo)致球形膠束破裂，進(jìn)而將藥物分子釋放出來，可控的還原響應(yīng)膠束可使疏水藥物分子在靶向細(xì)胞內(nèi)的傳遞和釋放，有效阻止藥物在細(xì)胞內(nèi)過多的積累，降低毒副作用，實現(xiàn)對癌細(xì)胞的治療［52，53］。對于治療癌癥而言，70～200 nm 的納米相態(tài)為理想尺寸。特別對于肝靶向性疾病，正常肝竇內(nèi)皮細(xì)胞有直徑為50～200 nm，直徑小于200 nm 的納米相態(tài)可以通過正弦開窗進(jìn)入肝臟。當(dāng)肝臟發(fā)生病變，如肝細(xì)胞癌的情況下，內(nèi)皮細(xì)胞的孔直徑可增加到400～600 nm，納米相態(tài)的滲透率和外滲性將會增強(qiáng)，更加有利于納米相態(tài)的吸收［59］。故中藥復(fù)方湯劑自組裝的形成納米相態(tài)不僅能保證中藥復(fù)方藥性的完整承遞，而且能提高生物利用度，增加藥物在體內(nèi)分布的時間等。

5 中藥復(fù)方湯劑自組裝納米相態(tài)表征方法

中藥復(fù)方湯劑自組裝納米相態(tài)可利用電噴霧質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、核磁共振、紫外可見分光光度計、傅里葉變換紅外線、熒光光譜學(xué)等方法［31，58］進(jìn)行綜合分析。為確定納米相態(tài)，需通過其形狀、大小、晶體結(jié)構(gòu)等參數(shù)，觀察納米相態(tài)的顯微結(jié)構(gòu)還需采用掃描電子顯微鏡（SEM）、共聚焦激光掃描顯微鏡（LSCM）、透射電子顯微鏡（TEM）、原子力顯微鏡（AFM）、動態(tài)光散射儀（DLS）、差示掃描量熱法（DSC）等對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步表征、分析［54］。SEM、TEM 技術(shù)被廣泛用于納米相態(tài)的表征［60］。Chen等［60］利 用SEM 和TEM 對 黃 芩 苷 和 小 檗 堿 復(fù) 合 物的形態(tài)進(jìn)行了表征，發(fā)現(xiàn)自組裝的納米相態(tài)為均勻的球形納米粒子，用DLS 對其進(jìn)行了檢測，表明其平均粒徑為174 nm。Ping 等［46］對白虎湯采用TEM分析表明其納米相態(tài)粒徑為100 nm，且顆粒邊緣光滑和清晰。

6 展望

湯劑是我國最古老、應(yīng)用最廣泛的傳統(tǒng)經(jīng)典劑型之一。數(shù)千年來，湯劑以其多成分的多效性、綜合性作用及吸收快等優(yōu)勢，備受歷代醫(yī)家推崇和患者信賴。但現(xiàn)代制備過程中為提高其便攜使用使其藥性有所損失，現(xiàn)代研究者對于如何完整傳承其藥性也是層見疊出，如“組分藥物”、“中藥復(fù)方多元釋藥設(shè)計理論”、及 “物質(zhì)粗糙集理論”等［1，2］。中藥復(fù)方在煎煮過程中形成的物質(zhì)基礎(chǔ)復(fù)雜，其中皂苷類、生物堿類、多糖類、黃酮類等成分不僅可以發(fā)揮其藥理作用還能自組裝形成納米相態(tài)，其納米相態(tài)可包載難溶性及脂溶性的有效成分與載體一起協(xié)同發(fā)揮藥效，實現(xiàn)增溶增效。由于中藥復(fù)方湯劑的納米相態(tài)可實現(xiàn)緩釋效應(yīng)，使其在體內(nèi)可實現(xiàn)恒速穩(wěn)定釋放及靶向性，故還可實現(xiàn)“歸經(jīng)”效果。如進(jìn)一步研究中藥復(fù)方湯劑納米相態(tài)，對其進(jìn)行優(yōu)化、現(xiàn)代化研究，可為中藥制劑現(xiàn)代化邁出新的一步，大大提高湯劑的使用效果，亦有助于傳承中醫(yī)藥的精氣真髓。

作者貢獻(xiàn)度說明：

管慶霞、周小影：論文資料查詢及撰寫；呂邵娃、楊芳芳、聶澤卉、林澤瑜：文獻(xiàn)查找及表格制。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。