許麗文,秦紅艷,王衍莉,李嘉琪,張寶香※,劉方圓
(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所,吉林 長春 130112;2.吉林特研生物技術(shù)有限責(zé)任公司,吉林 長春 130122)
軟棗獼猴桃(Actinidia arguta)是獼猴桃科、獼猴桃屬的一種多年生雌雄異株藤本植物,原產(chǎn)于亞洲,具有觀賞價值和傳統(tǒng)藥用價值;是我國東北地區(qū)重要的漿果資源,也是非常健康的漿果類食品,被譽為‘水果之王’。軟棗獼猴桃含有多種生物活性化合物,可從果實、葉、花和莖等部位中獲得[1],如黃酮化合物、多糖類、多酚化合物和膳食纖維等,這些生物活性分子具有公認的促進健康的特性,有很大潛力用于多種食品配方[2]。
軟棗獼猴桃具有降血糖、抗氧化和抗炎等作用,其中最受關(guān)注的是通便潤腸功效,生活中可用于緩解便秘[3]等癥狀。功能性便秘是生活中常見的問題。據(jù)報道,在西方人口中,老年人中的便秘發(fā)生率高達24%,女性群體患病率更高[4]。預(yù)防便秘要有均衡的飲食,包括麩皮、全麥谷物、新鮮水果和蔬菜,以及大量飲水和定期鍛煉。治療便秘通常會選擇藥物,如瀉藥、大便軟化劑、潤滑劑和滲透劑等,也會選擇一些已被證明用于治療便秘的草藥或天然產(chǎn)品,包括蘆薈、車前草、益生菌和大黃[5-7]等。便秘屬于功能性胃腸疾病,影響高達14%的世界人口,部分水果可緩解便秘。已有研究報道,食用獼猴桃可以減少老年患者的便秘發(fā)生率[3]。獼猴桃與軟棗獼猴桃都屬于獼猴桃屬,但關(guān)于軟棗獼猴是否緩解便秘的報道很少。因此,本文以軟棗獼猴桃為研究對象,研究不同加工方式的軟棗獼猴桃(全果、去皮帶籽和去皮去籽)對小鼠的潤腸作用。通過對3 種樣品的成分分析以及分別對便秘模型小鼠進行飼喂,分析小鼠體重、采食量和排便情況的變化,研究其潤腸通便作用和改善胃腸道的功能。
SPF 級健康雌雄性昆明小鼠,6 月齡,體質(zhì)量(37±2)g,動物倫理審查批號:No.ISAPSAEC-2021-62M,購自遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司,許可證號為SCXK(遼)2020-0001。試驗過程中給予小鼠普通飼料,室溫(24 ± 2)℃,相對濕度為60%~70%。軟棗獼猴桃(吉林市左家實驗基地培育)、蒙脫石散,規(guī)格:每袋3g,批號:U12324,搏?!嫫丈ㄌ旖颍┲扑幱邢薰旧a(chǎn)、小鼠維持飼料購自遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司,軟棗獼猴桃活性含片(3 g/片)采用超低溫冷凍干燥和超微粉碎等技術(shù)制備而成,最大程度保留了軟棗獼猴桃營養(yǎng)成分和活性成分。
1.2.1 軟棗獼猴桃的成分分析 將鮮的軟棗獼猴桃處理為3 種樣品,樣品1 為全果軟棗獼猴桃,樣品2 為去皮帶籽軟棗獼猴桃,樣品3 為去皮去籽軟棗獼猴桃,每個樣品3 個重復(fù),送往南京卡文思檢測技術(shù)有限公司進行成分分析,測量黃酮、可溶性淀粉、粗脂肪、多酚、膳食纖維、單寧、總糖、可溶性蛋白、多糖、可溶性總糖、總酸、總果膠、花青素、酸性蛋白酶APC 酶活和水的含量。
1.2.2 試驗動物分組 選取48 只雌雄各半的6 月齡昆明種小鼠,體重為(40±3)g,隨機分為8 組:第1 組為空白對照組、第2 組為便秘模型對照組、第3 組為飼喂正常小鼠樣品1、第4 組為飼喂正常小鼠樣品2、第5 組為飼喂正常小鼠樣品3、第6 組為飼喂模型小鼠樣品1、第7 組為飼喂模型小鼠樣品2、第8 組為飼喂模型小鼠樣品3。
1.2.3 飼喂軟棗獼猴桃和造模 對模型組和模型小鼠,連續(xù)14 天灌胃蒙脫石散[100 mg(/kg d)]。軟棗獼猴桃取3 種樣品進行組織研磨,成泥狀后稱重,生理鹽水進行稀釋。每天上午各組灌胃給予相應(yīng)軟棗獼猴桃,空白對照組給予等量基質(zhì)溶液,劑量為400mg/kg,1 次/d,連續(xù)飼喂28 d。全部小鼠自由采食和飲水。
1.2.4 檢測指標與方法 觀察各組小鼠活動和精神狀態(tài),記錄飼喂軟棗獼猴桃第7、14、21 和28 天的體重增量,計算方法為第7、14、21 和28 天的體重減去飼喂前的初體重。記錄采食量、糞便粒數(shù)和糞便形狀及顏色。
1.2.5 統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析,各組計數(shù)資料用±s 表示。符合正態(tài)分布,組間比較用單因素方差(One way ANOVA)分析,同時做最小顯著性法(LSD)兩兩比較進行統(tǒng)計學(xué)分析。以P <0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
將全果軟棗獼猴桃(1 號樣品)、去皮帶籽軟棗獼猴桃(2 號樣品)和去皮去籽軟棗獼猴桃(3 號樣品),3 種樣品進行成分分析。表1 結(jié)果表明,1 號樣品中的黃酮、可溶性淀粉、粗脂肪、總酚、總淀粉和總膳食纖維的含量顯著高于2 號和3 號樣品的含量(P <0.05)。2 號樣品中的總糖、可溶性蛋白、多糖、可溶性總糖和總酸含量顯著高于1 號樣品和3 號樣品的含量(P<0.05)。3 號樣品中的總果膠、花青素、酸性蛋白酶APC 酶活和含水量顯著高于2 號樣品和3 號樣品(P <0.05)。
表1 軟棗獼猴桃3 種樣品的成分分析Table 1 Component analysis of three samples of A. arguta
飼喂小鼠蒙脫石散14 d建立便秘模型,測量其體重,記錄排便粒數(shù)及糞便顏色和形狀。結(jié)果如表2 所示,與對照組比較,造模組中小鼠的體重和采食量顯著下降(P<0.05),排便粒數(shù)顯著減少(P<0.05),糞便顏色為黑色且糞便干癟粒小,如圖1 所示。以上結(jié)果表明便秘小鼠模型建立成功。
圖1 便秘模型小鼠的糞便Fig.1 Feces of constipation model mice
表2 便秘小鼠模型的建立Table 2 Establishment of constipation mouse model
表3 顯示,各組小鼠體重增量,飼喂小鼠軟棗獼猴桃第7 天,第6 組和第3 組的體重增量顯著高于第1 組(P<0.05);飼喂小鼠軟棗獼猴桃第14 天,第6 組和第3 組的體重增量顯著高于第1 組(P<0.05),隨著飼喂天數(shù)的增加,第6 組和第3 組小鼠體重增量逐漸降低。結(jié)果表明,飼喂小鼠全果后第7 天體重增量最高。
表3 軟棗獼猴桃3 種樣品對便秘小鼠體重增量的分析Table 3 Analysis of weight gain of constipation mice with three samples of A. arguta
由表4 可知,飼喂小鼠3 種軟棗獼猴桃樣品后7d,第3 組和第6 組的小鼠采食量最多,且顯著高于其他組(P <0.05)。飼喂小鼠3 種樣品后21 d,第6 組小鼠的采食量顯著高于其他組(P<0.05)。同時還發(fā)現(xiàn),在飼喂小鼠3 種樣品后28 d,第5 組小鼠的采食量顯著高于其他組(P<0.05)。以上結(jié)果表明,適量食用軟棗獼猴桃有助于提高小鼠的采食量。
表4 軟棗獼猴桃3 種樣品對便秘小鼠采食量的分析Table 4 Analysis of food intake of constipation mice with three samples of A. arguta
由表5 和表6 可知,3 種軟棗獼猴桃樣品飼喂小鼠后7 d,第3 組和第6 組小鼠的排便粒數(shù)最多,且顯著高于其他組(P <0.05)。同時,由表6 可知,飼喂小鼠軟棗獼猴桃3 種樣品后7 d,第3、4 和5 組小鼠的糞便由褐色變?yōu)辄S色并且濕潤,第6、7 和8 組的小鼠糞便顏色由黑色、干癟小粒形狀變?yōu)辄S色、橢圓形。飼喂軟棗獼猴桃樣品1 后28 d,小鼠出現(xiàn)腹瀉癥狀,見圖2。以上結(jié)果表明,全果軟棗獼猴桃的通便作用最明顯。
圖2 飼喂全果的正常小鼠和造模小鼠28 d 時的排便情況Fig.2 Situation of normal mice and model mice fed with the whole fruit at 28 days
近年來,人們對一些小品種或稀有的水果越來越感興趣,如山楂、沙棘、枸杞、越桔和獼猴桃等,這些水果都含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),對人體健康具有增益作用[8,9]。軟棗獼猴桃營養(yǎng)豐富,富含豐富的維生素C,是豐富的膳食纖維來源。軟棗獼猴桃屬于獼猴桃科獼猴桃屬,與獼猴桃屬于同一屬。關(guān)于獼猴桃的報道很多,但對軟棗獼猴桃的研究相對較少。獼猴桃常用于緩解多種疾病的癥狀,包括消化問題、消化不良、風(fēng)濕和痔瘡。獼猴桃潛在的健康和治療益處來自其豐富的營養(yǎng)成分,以及許多不同化合物協(xié)同作用,這種營養(yǎng)豐富的食品富含有益的維生素、礦物質(zhì)和化合物,對身體健康至關(guān)重要。獼猴桃果實最明顯的好處之一是改善胃腸系統(tǒng),促進良好菌群的生長,同時抑制有害菌群的生長[10],促進胃腸道的消化功能。
為了解軟棗獼猴桃的主要營養(yǎng)成分,將軟棗獼猴桃處理為3 種樣品,分別為全果軟棗獼猴桃、去皮帶籽軟棗獼猴桃和去皮去籽軟棗獼猴桃,將3 種樣品進行營養(yǎng)成分比對分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),3 種樣品均含有黃酮、可溶性淀粉、粗脂肪、酚、膳食纖維、糖、酸、果膠、花青素、酸性蛋白酶ACP 酶活和單寧,其中全果軟棗獼猴桃中的黃酮、可溶性淀粉、粗脂肪、酚、膳食纖維和單寧的含量最高,顯著高于去皮帶籽軟棗獼猴桃和去皮去籽軟棗獼猴桃。這些結(jié)果表明,全果軟棗獼猴桃中的黃酮、可溶性淀粉、粗脂肪、酚、膳食纖維和單寧營養(yǎng)成分在某些疾病中可能發(fā)揮了重要作用。有研究報道,軟棗獼猴桃濾液能夠調(diào)節(jié)家兔的胃腸運動[11],而與軟棗獼猴桃同屬的獼猴桃中也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果,證實高膳食纖維獼猴桃能夠顯著緩解便秘功效[12,13]。獼猴桃中黃酮[14]和多糖[15-19]成分可能是一種潛在的抗氧化劑和免疫調(diào)節(jié)劑,可用于食品和醫(yī)藥工業(yè)的功能性食品和保健食品的研制,以治療某些癌癥和胃腸道系統(tǒng)疾病[2]。有研究證實,軟棗獼猴桃多糖、黃酮有潤腸通便[20]和防治失眠[21]的作用。軟棗獼猴桃與獼猴桃同屬于獼猴桃屬,獼猴桃中的營養(yǎng)成分具有抗衰老、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)的功能,全果軟棗獼猴桃中的營養(yǎng)成分可能也具有這些類似的功能,但還需進一步的研究。
本文通過小鼠便秘造模實驗來研究軟棗獼猴桃(全果、去皮帶籽和去皮去籽)對潤腸活性的影響,通過測量小鼠體重、采食量、排便粒數(shù)、糞便顏色和形狀等指標來評估潤腸活性的功能。結(jié)果發(fā)現(xiàn),全果軟棗獼猴桃對便秘者和非便秘者的腸道健康和大便形成方面具有促進功能。小鼠動物試驗結(jié)果顯示,全果軟棗獼猴桃能夠顯著提高小鼠的體重增量和小鼠的采食量,同時能夠促進大便的形成和提高潤腸活性。全果軟棗獼猴桃治療便秘的效果比軟棗獼猴桃去皮帶籽和去皮去籽的效果更好,但是,食用全果軟棗獼猴桃要適量,否則會導(dǎo)致腹瀉。綜上,全果軟棗獼猴桃的潤腸通便效果最佳?,F(xiàn)有關(guān)于軟棗獼猴桃調(diào)節(jié)胃腸道系統(tǒng)的功能和緩解便秘的研究較少,但關(guān)于其同屬的獼猴桃的相關(guān)作用研究較多。Moughan 等[22]研究發(fā)現(xiàn)了,獼猴桃能夠提高腸道粘蛋白的產(chǎn)生,可能有助于維持粘液層和腸道屏障,軟棗獼猴桃也可能具有提高腸道粘蛋白的作用。另外,軟棗獼猴桃的潤腸通便作用有可能與腸道微生物有關(guān),研究發(fā)現(xiàn)獼猴桃是選擇性促進腸道乳酸菌生長的益生素[10,23],可促進有益菌的生長,抑制有害菌的生長[24,25],同時改善腸道功能[26]。本文的研究結(jié)果表明,全果軟棗獼猴桃可能對胃腸道健康的功效更好,通便潤腸活性更顯著,這與研究食用太陽金獼猴桃果皮能夠改善胃腸道健康的結(jié)果一致[27]。
綜上所述,全果軟棗獼猴桃中膳食纖維、黃酮和果膠成分顯著高于去皮帶籽和去皮去籽軟棗獼猴桃,可能與促進腸道系統(tǒng)功能和潤腸活性有關(guān),能夠改變排便頻率和改變大便形成時間。軟棗獼猴桃能夠治療便秘,促進腸道運動,提高潤腸活性,緩解消化問題。本文為研發(fā)新型改善便秘產(chǎn)品的開發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。