馬美玲, 楊明霞, 張麗娟, 朱曉東, 鄧德強(qiáng), 丁然然

(1新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院, 烏魯木齊 830017; 2烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院科教科, 烏魯木齊 830000)

2型糖尿病(Type2diabetesmellitus,T2DM)是指胰島素抵抗或分泌缺陷導(dǎo)致的以高血糖、高血脂為特征的慢性代謝性疾病[1-2]。據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟統(tǒng)計結(jié)果顯示2021年全球糖尿病患者約為5.37億[3-4],我國作為糖尿病患者最多的國家,預(yù)計到2045年患者將超過1.74億[5-6]。T2DM的中醫(yī)臨床癥狀主要是脾虛濕盛[7],治法首選培土化濕法[8]。消渴健脾膠囊是烏魯木齊中醫(yī)醫(yī)院名老中醫(yī)許公平主任根據(jù)幾十年臨床經(jīng)驗,結(jié)合新疆地區(qū)人群體質(zhì)條件、氣候因素及生活飲食習(xí)慣而研發(fā)的院內(nèi)制劑,該方組由蒼術(shù)、白術(shù)、茯苓等多味中藥組成,具有健脾燥濕、行氣和胃、祛濁化郁的功效,在治療脾虛濕盛型2型糖尿病療效顯著[9-10]。本研究通過建立脾虛濕盛2型糖尿病模型,比較現(xiàn)代工藝與傳統(tǒng)工藝制備的消渴健脾膠囊對脾虛濕盛型T2DM的治療效果,現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器7600P拜安進(jìn)血糖儀、拜安進(jìn)血糖試紙(安晟信糖尿病保健股份公司);無菌注射器(國安醫(yī)械科技有限公司);ZL-019A大小鼠飲食飲水監(jiān)測系統(tǒng)(安徽耀坤生物科技有限公司);體重秤、Y-3102大鼠代謝籠(上海玉研科學(xué)儀器有限公司)。

1.2 試藥消渴健脾膠囊現(xiàn)代工藝(白術(shù)、蒼術(shù)采用揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合工藝;茯苓、茵陳、梔子等采用水提法;厚樸、葛根等采用醇提法,各味中藥由烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院制劑中心提供,使用時用生理鹽水配制成藥濃度為1 g/mL的藥液)。消渴健脾膠囊傳統(tǒng)工藝(由蒼術(shù)、白術(shù)、茯苓等組成,水煎 2 h,濾渣,制成給藥濃度為1 g/mL的藥液,由烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院制劑中心制備)。鏈脲佐菌素(美國Sigma公司,批號010-83004443);檸檬酸鈉(成都市科龍化工試劑廠,批號CA8號6132-04-3);檸檬酸(上海青浦群力化工廠,批號20200107);氯化鈉注射液(新疆華世丹藥業(yè)股份有限公司,批號19022701)?；A(chǔ)飼料購于新疆醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心;高脂飼料(北京愛博港生物有限公司,按成分重量百分比其組成為:基礎(chǔ)飼料67.7%、豬油10%、蔗糖20%、膽固醇2.0%、膽酸鹽0.3%)。

1.3 實驗動物SPF級雄性SD大鼠60只,6～ 8周齡,體重(200±20)g,購自新疆醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心(動物許可證號SYXK(新)2018-0001)。所有大鼠自由飲食,飼養(yǎng)于潔凈動物房內(nèi),室溫(22±1)℃,相對濕度(35±5)%,保持正常晝夜節(jié)律。

1.4 脾虛濕盛T2DM模型建立將60只SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)抽取10只為正常組,給予普通飼料喂養(yǎng),其余50只大鼠連續(xù)給予高脂高糖飼料飼養(yǎng)4周后,禁食12 h腹腔注射2次鏈脲佐菌素(STZ)溶液35 mg/kg造模,2次注射間隔7 d,當(dāng)隨機(jī)血糖≥16.7 mmol/L視為T2DM大鼠造模成功。選取T2DM造模成功的大鼠進(jìn)行脾虛濕盛證型造模[11-12],采用過勞+飲食不節(jié)+濕熱環(huán)境法:大鼠每天在水迷宮游泳30 min,單日喂食高脂飼料、雙日喂食大白菜(大白菜喂食量不限,自由進(jìn)水),3周后將大鼠放入人工氣候艙1周[溫度(32±0.5)℃、濕度(65±0.5)%)],大鼠出現(xiàn)倦怠懶動、扎堆取暖、毛色晦暗、糞便稀溏或帶黏液表明造模成功。

1.5 分組與給藥采用隨機(jī)數(shù)表法將造模成功的脾虛濕盛T2DM大鼠分為模型組、消渴健脾膠囊現(xiàn)代工藝中、高劑量組,消渴健脾膠囊傳統(tǒng)工藝中、高劑量組,每組10只。正常組、模型組每天給予等量生理鹽水5 mL/kg體重,現(xiàn)代工藝中、高劑量組分別給予消渴健脾膠囊溶液100、200 mg/kg體重,傳統(tǒng)工藝中、高劑量組分別給予消渴健脾水煎液100、200 mg/kg體重,各組大鼠每天灌胃1次,連續(xù)4周,日常給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)。

1.6 指標(biāo)的測定

1.6.1 大鼠一般狀態(tài)測定 觀察各組大鼠在進(jìn)食時精神狀態(tài),活動情況,皮毛光澤度。

1.6.2 大鼠體重的測定 采用大鼠體重秤測定各組大鼠造模前、造模后、給藥后的體重。

1.6.3 大鼠飲食量、飲水量和尿量的測定 飲食量測定:每次測定前清空各組飼料,重新稱取100 g,于第二日同一時間稱取剩余飼料,計算飲食量差。飲水量測定:每次測定前清空各組飲水杯,重新量取100 mL,于第二日同一時間量取剩余水量,計算飲水量差。尿量測定:在各組大鼠代謝籠放置尿液收集器,記錄開始監(jiān)測時間,于第二日同一時間量取尿量。

1.6.4 大鼠空腹血糖(FBG)的測定 各組大鼠連續(xù)給藥4周后,禁食不禁水12 h,尾尖采血,采用血糖儀測定FBG水平。

2 結(jié)果

2.1 各組T2DM大鼠給藥前后一般狀態(tài)的比較給藥后正常組大鼠精神良好,飲食飲水及二便均正常,活潑好動,毛發(fā)雪白順滑有光澤;模型組大鼠多飲、多食、多尿現(xiàn)象明顯,大便不成型,精神萎靡不振、活動減少,體毛粗糙泛黃無光澤,并有掉毛現(xiàn)象。與給藥前比較,給藥后現(xiàn)代工藝與現(xiàn)代工藝中、高劑量組大鼠多飲、多食、多尿現(xiàn)象及精神狀態(tài)得到明顯改善,傳統(tǒng)工藝組三多現(xiàn)象及毛發(fā)、精神狀態(tài)改善最好。

2.2 各組大鼠給藥前后體重的比較與正常組比較,各組大鼠造模結(jié)束后體重均下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,給藥后傳統(tǒng)工藝組與現(xiàn)代工藝組大鼠體重均增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。給藥后傳統(tǒng)工藝組與現(xiàn)代工藝組比較大鼠體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1。

表1 各組大鼠給藥前后體重的比較/g

2.3 各組大鼠給藥前后飲食量指標(biāo)的比較與正常組比較,模型組大鼠飲食量增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,傳統(tǒng)工藝中、高劑量組和現(xiàn)代工藝中、高劑量組大鼠給藥2周后飲食量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與現(xiàn)代工藝中、高劑量組比較,傳統(tǒng)工藝中、高劑量組大鼠給藥2周后飲食量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表2 各組大鼠給藥前后飲食量指標(biāo)的比較/g

2.4 各組大鼠給藥前后飲水量的比較與正常組比較,模型組大鼠飲水量增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,現(xiàn)代工藝中、高劑量組與傳統(tǒng)工藝中、高劑量組大鼠給藥2周后飲水量下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與現(xiàn)代工藝中、高劑量組比較,傳統(tǒng)工藝中、高劑量組大鼠給藥2周后飲水量下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表3。

表3 各組大鼠給藥前后飲水量的比較/mL

2.5 各組大鼠給藥前后尿量的比較與正常組比較,模型組大鼠尿量增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,現(xiàn)代工藝中、高劑量組與傳統(tǒng)工藝中、高劑量組大鼠給藥2周后尿量減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與現(xiàn)代工藝中、高劑量組比較,傳統(tǒng)工藝中、高劑量組大鼠給藥2周后尿量下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表4。

表4 各組大鼠給藥前后尿量的比較/mL

2.6 各組大鼠給藥前后FBG的比較與正常組比較,模型組FBG水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,現(xiàn)代工藝中、高劑量組與傳統(tǒng)工藝中、高劑量組FBG水平降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表5。

表5 各組大鼠給藥前后FBG比較/(mmol/L)

3 討論

本研究結(jié)果顯示,與給藥前相比,消渴健脾膠囊現(xiàn)代工藝組和傳統(tǒng)工藝組大鼠在灌胃給藥后FBG均產(chǎn)生顯著性差異?，F(xiàn)代工藝中葛根、大黃、梔子等通過醇提法和水提法,藥液中葛根素、大黃酚、梔子苷等有效成分含量高,說明現(xiàn)代工藝制備的消渴健脾膠囊在調(diào)節(jié)脾虛濕盛2型糖尿病FBG方面,與傳統(tǒng)工藝制備的消渴健脾膠囊無差異。但三多癥狀、大鼠毛發(fā)、二便、精神狀態(tài)的對比顯示,傳統(tǒng)工藝組比現(xiàn)代工藝組改善更加明顯。

消渴健脾膠囊中蒼術(shù)和白術(shù)為君藥,以其苦溫性燥,最善除濕運脾;以茯苓、厚樸為臣藥,健脾行氣化濕,消脹除滿;佐以茵陳、梔子等,理氣機(jī)、調(diào)腑氣;使以葛根、車前子等,利經(jīng)絡(luò)之濕[13]。傳統(tǒng)工藝制備的消渴健脾膠囊各藥共煎,君臣佐使配合產(chǎn)生更好的藥性,發(fā)揮最好的療效,而現(xiàn)代工藝經(jīng)過揮發(fā)油包合使蒼術(shù)白術(shù)君臣之間的配伍減少,水提、醇提法將葛根、車前子之間的配伍分開,雖然藥物有效成分均在含量也高,卻無法達(dá)到相輔相成的作用,對大鼠一般狀態(tài)的改善效果也不理想。

綜上所述,現(xiàn)代工藝與傳統(tǒng)工藝制備的消渴健脾膠囊均可降低血糖、增加體重,但傳統(tǒng)工藝在改善大鼠精神狀態(tài)、毛發(fā)、飲食量、飲水量、尿量方面表現(xiàn)更優(yōu)。