◎方優(yōu)妮,程光明
(襄陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院,湖北 襄陽 441050)
黃芪葛根湯,為中醫(yī)名方劑。黃芪葛根湯的藥理作用研究已經(jīng)較為透徹,可改善糖尿病的糖脂代謝,穩(wěn)定血糖水平[1-2]。黃芪葛根湯的方法為水煎服,操作起來比較麻煩,降低了患者的依從性,使其不能長期堅持下來。研究主要將傳統(tǒng)的黃芪葛根湯開發(fā)成黃芪葛根袋泡茶,方便糖尿病前期患者或糖尿病患者代茶飲。
黃芪、葛根,產(chǎn)地內(nèi)蒙古,購于湖北大頂山制藥有限公司。
WK-10型中藥粉碎機,青州市邁德森制藥機械廠;YPB5002型電子天平(500 g/0.1 g),武漢華威化工儀器有限公司;DHG 恒溫電熱干燥箱,廣州市康恒儀器有限公司。
1.2.1 黃芪葛根袋泡茶的制作方法[3]
(1)黃芪→80 ℃下烘干至水分10%以下→過10目篩進(jìn)行粉碎→分包裝→殺菌。
(2)葛根→80 ℃下烘干至水分14%以下→過10目篩進(jìn)行粉碎→分包裝→殺菌。
(3)(1)+(2)→包裝(無紡布袋泡茶袋)→外包裝→成品→開水→浸泡→茶湯。
1.2.2 單因素試驗設(shè)計
在黃芪葛根湯基本配方的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探討黃芪、葛根用量對黃芪葛根袋泡茶感官品質(zhì)的影響,進(jìn)而明確不同因素的最佳用量[4]。固定葛根用量6 g,與黃芪不同配比(1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、2∶1、3∶1、4∶1),研究了黃芪和葛根的用量及其對袋泡茶感官品質(zhì)的影響,并進(jìn)行了7個梯度實驗,分別對其進(jìn)行感官評估。
1.2.3 黃芪葛根袋泡茶供試品的制備和感官品質(zhì)評價
黃芪葛根袋泡茶沖泡后的感官品質(zhì)評價標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)參考文獻(xiàn)[5]制定,取一份袋泡茶置于150 mL的茶杯中,加入沸水,浸泡3 min,上下提動茶袋,繼續(xù)浸泡5 min,將供試品溶液均分到5個小杯中,根據(jù)評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行品質(zhì)評分,取平均值[6]。黃芪葛根袋泡茶沖的感官評分標(biāo)準(zhǔn)見表1。
表1 為黃芪葛根袋泡茶的感官評價標(biāo)準(zhǔn)表
1.2.4 不同配伍比例的黃芪葛根袋泡茶湯感官品質(zhì)
將葛根與黃芪進(jìn)行不同配比(1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、2∶1、3∶1、4∶1),制備成7種不同的黃芪葛根袋泡茶,再進(jìn)行品質(zhì)評價,通過以上試驗,得出黃芪與葛根的最佳配伍比例為2∶1和3∶1。
對袋泡茶的感官質(zhì)量進(jìn)行評定,可以優(yōu)選黃芪和葛根的最佳用量,其最好的配制比是(2∶1和3∶1),亦即在此情況下配制的黃芪葛根袋泡茶,沖泡后茶湯湯色均一、呈姜黃色、清澈透亮、香氣明顯、滋味純正、口感較佳,非常適宜于糖尿病前期人群的日常代茶養(yǎng)生食用。
安捷倫1260型高效液相色譜儀(四元泵、配置DAD檢測器);BSA224S-CW分析天平(北京賽多利斯科學(xué)儀器公司);RE-201D旋轉(zhuǎn)蒸餾儀(河南益源儀表公司)等。
葛根素對照品,購自中國食品藥品檢定研究院;甲醇為色譜純;磷酸為分析純;水為純化水。葛根、黃芪飲片,購于湖北大頂山制藥有限公司。
2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性測試
色譜柱:ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動相為甲醇-0.1%磷酸(30∶70),流量為0.5 mL·min-1,測定波長為250 nm,柱溫:30 ℃,進(jìn)樣品量:10 μL理論板數(shù)按葛根素峰計應(yīng)不小于4 000[7]。
2.2.2 對照品溶液制備
精密稱取的葛根素標(biāo)準(zhǔn)品,用30%乙醇溶解后,定容至10 mL,拌勻后,即成1 mg·m L-1對照溶液,再放入5 ℃冰箱內(nèi),備用。
2.2.3 黃芪葛根袋泡茶樣品溶液的制備
取黃芪和葛根的不同用量比例(1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、2∶1、3∶1、4∶1)制成袋泡茶原料袋,精密選擇干燥至恒重的黃芪葛根袋泡茶,放入150 mL茶杯中,加入沸水,浸泡3 min后,上下提動茶葉袋,5 min后,將供試品溶液至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(58 ℃,300 r·min-1)濃縮,冷卻后再用超純水溶解并定容至50 mL,取10 mL后過0.45 μm的微孔濾膜,即得[8]。
2.2.4 黃芪葛根湯樣品溶液的制備
取黃芪、葛根等中藥飲片,取葛根和黃芪的不同配比液(2∶1、3∶1)[9],加10倍量水煎煮2次,第1次1.5 h,第2次0.5 h,合并水煎液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(58 ℃, 300 r·min-1)濃縮,冷卻后加純水溶解并定容在50 mL,再取10 mL后過0.45 μm的微孔濾膜,即得。
2.2.5 方法學(xué)考察
2.2.5.1 線性關(guān)系考察
精密吸取與“2.2.2”指標(biāo)項下葛根素對照品貯備溶液50、100、200、400、600、1 000、2 000、3 000 μL于10 mL容量的瓶內(nèi),加30%甲醇定容至刻度后,即得系列濃度的對照品溶液,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方程如下:y=98 060x+165 600,R2=0.999,說明了葛根素在25 μg·mL-1~200 μg·mL-1的范圍內(nèi),具有良好的線性關(guān)系。
2.2.5.2 精密度、穩(wěn)定性與重復(fù)性試驗
取含量50.24 μg·mL-1的對照品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,進(jìn)樣品量為10 μL,記錄峰積,并計算RSD值,供試品亦平行計算6次,以計算葛根素的真實含量[10]。
2.2.5.3 回收率實驗
試驗結(jié)果:樣品的平均回收率為98.22%,RSD=1.45%,證明此法專屬性好,重復(fù)性高。
2.2.6 含量測定及結(jié)果
按“2.2.1”項下的色譜條件進(jìn)樣,可以測定葛根素含量。結(jié)果見表2、表3。
表2 黃芪葛根袋泡茶中葛根素含量測定結(jié)果表
表3 黃芪葛根湯中葛根素含量測定結(jié)果表
本論文分別采用中藥粉末和中藥飲片為原料,制取了黃芪葛根袋泡茶和黃芪葛根湯藥,并通過高效液相色譜法研究了藥劑中主要功能成分的含量水平,從本試驗結(jié)論而言,用煎法制備中藥制劑的有效成分含量比例普遍高于茶飲法。因此,建議黃芪葛根袋泡茶采用煎法服用。
雖然煎煮方式的有效成分含量高于袋泡茶的,但具體使用上,袋泡茶也可取得很好療效,中藥茶飲預(yù)防糖尿病前期具有特殊的優(yōu)越性,中藥茶飲比較傳統(tǒng)煎劑,在口感和使用方式上具有突出的優(yōu)點,不僅可以補充某些口服類中藥制劑的缺點,而且便于病人使用,所以,中醫(yī)茶類飲品還有待研究發(fā)展與推廣[11]。