食品農(nóng)獸藥殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究進(jìn)展

李吉 林濤 李艷紅 黃相中 劉宏程

由于種養(yǎng)殖戶在農(nóng)作物及畜禽的種養(yǎng)殖過(guò)程中違規(guī)使用、非法添加或?yàn)E用農(nóng)獸藥，會(huì)導(dǎo)致大量農(nóng)獸藥殘留在植物或動(dòng)物體內(nèi)，如果人體長(zhǎng)期服用含有大量農(nóng)獸藥殘留的食品，就會(huì)引起毒性累積，嚴(yán)重者會(huì)發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)，甚至造成癌癥和突變。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（referance materials，RM）在食品檢測(cè)技術(shù)和質(zhì)量控制中至關(guān)重要，用以校準(zhǔn)測(cè)量裝置、評(píng)價(jià)測(cè)量方法或給材料賦值，具有足夠均勻、穩(wěn)定的特性。由于農(nóng)獸藥種類(lèi)繁多，產(chǎn)品基體成分對(duì)分析檢測(cè)會(huì)造成一定干擾。我國(guó)在純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)方面的研究較基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)完善，但目前簡(jiǎn)單用純化學(xué)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品已不能滿足食品中待測(cè)物分析的準(zhǔn)確性要求，有必要結(jié)合基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（matrix referance material，MRM）進(jìn)行校正和質(zhì)量監(jiān)測(cè)，從而有效避免基體效應(yīng)對(duì)分析成分的干擾。本文綜述了國(guó)內(nèi)外食品中農(nóng)獸藥殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的最新研究現(xiàn)狀，包括其研制流程、存在問(wèn)題和建議，以期為食品農(nóng)獸藥殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制提供一些參考和新思路。

一、基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)MRM概述

食品分析用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一般大致分為純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（MRM）。我國(guó)計(jì)量系統(tǒng)將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稱(chēng)為“reference material（RM）”，一般分為一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW）和二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW（E））?；w標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)將目標(biāo)化合物與目標(biāo)基體結(jié)合，在測(cè)定實(shí)際樣品的過(guò)程中保持與待測(cè)物相同的特性，更適用于實(shí)物校準(zhǔn)和計(jì)量傳遞。

二、農(nóng)獸藥殘留MRM的制備流程

1.MRM原料采集和加工。MRM按照物質(zhì)原料和樣品制備工藝分為天然MRM和加料MRM，天然MRM的制備來(lái)源于天然樣本篩選，或者通過(guò)飼喂、藥浴等方式模擬實(shí)際藥物污染，通過(guò)控制養(yǎng)殖或藥浴時(shí)間來(lái)制備動(dòng)物體代謝的原形藥物，常用于獸藥殘留MRM制備。農(nóng)藥以非結(jié)合形態(tài)存在于食品中，可經(jīng)過(guò)人為添加獲得含有某種已知濃度化合物的陽(yáng)性基體原料，并經(jīng)過(guò)均化、干燥、粉碎、過(guò)篩、分裝，最終獲得含有農(nóng)藥的MRM。

2.均勻性檢驗(yàn)。對(duì)分裝后的農(nóng)獸藥MRM進(jìn)行均勻性考察時(shí)，通常隨機(jī)抽取特定量的樣品，利用高效的前處理技術(shù)來(lái)判斷測(cè)量結(jié)果是否達(dá)到均一性，隨機(jī)檢測(cè)的樣品數(shù)量不低于10。單因素方差分析法（ANOVA）一般用來(lái)分析MRM的均勻性情況，還可采用目視檢驗(yàn)、科克倫檢驗(yàn)等來(lái)檢驗(yàn)被測(cè)樣品是否均一。

3.穩(wěn)定性檢驗(yàn)。穩(wěn)定性檢驗(yàn)包括短期和長(zhǎng)期，短期穩(wěn)定性是對(duì)運(yùn)輸條件的考察，長(zhǎng)期穩(wěn)定性是在特定時(shí)間下對(duì)不同儲(chǔ)存溫度的考察，以確定MRM在哪種儲(chǔ)存條件下可以保持其穩(wěn)定的特性。無(wú)論短期或長(zhǎng)期，穩(wěn)定性評(píng)價(jià)的時(shí)間均先密后疏，通過(guò)回歸曲線Y=b1X+b0判斷食品中農(nóng)獸藥是否有降解趨勢(shì)。

4.定值和不確定度評(píng)價(jià)。定值方法多采用一家或多家單位聯(lián)合定值，結(jié)果用標(biāo)準(zhǔn)值±擴(kuò)展不確定度表示。MRM研制過(guò)程中不確定度的來(lái)源多樣，包含由均勻性評(píng)價(jià)、穩(wěn)定性評(píng)價(jià)、定值引起的不確定度，即ubb、us、uchar等。定值引起的不確定度主要有兩類(lèi)，A類(lèi)不確定度（uA）可由統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算得出，B類(lèi)不確定度（uB）需綜合考慮樣品稱(chēng)量、測(cè)定儀器等實(shí)驗(yàn)過(guò)程，最終得出合成不確定度：uCRM=? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 。

三、國(guó)內(nèi)外農(nóng)獸藥殘留MRM研制現(xiàn)狀

1.我國(guó)農(nóng)獸藥殘留MRM研制現(xiàn)狀。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)（COMAR）錄入了世界內(nèi)最新、最全的RM信息，是世界上最大的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)，為國(guó)際RM的研制提供了參考。我國(guó)研制的1045個(gè)GBW（國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）已被COMAR收錄，發(fā)展進(jìn)程較快。盡管?chē)?guó)內(nèi)RM研究種類(lèi)龐雜，但有關(guān)食品農(nóng)獸藥MRM的研制仍然缺乏，涉及獸藥殘留分析的基質(zhì)主要?jiǎng)澐譃槿饧叭庵破?、蜂產(chǎn)品、水產(chǎn)品、雞蛋及蛋制品。目前我國(guó)食品領(lǐng)域農(nóng)獸藥MRM已被申請(qǐng)為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的MRM詳見(jiàn)表1。

2.國(guó)外農(nóng)獸藥殘留MRM研制現(xiàn)狀。關(guān)注食品MRM發(fā)展的海外科研組織和機(jī)構(gòu)主要有歐盟標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究所（IRMM）、美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院（NIST）、日本國(guó)家計(jì)量院（NMIJ）、韓國(guó)國(guó)家計(jì)量院（KRISS）等，各國(guó)研究組織結(jié)合自身的現(xiàn)實(shí)需求，對(duì)食品中農(nóng)獸藥MRM研制的發(fā)展點(diǎn)也有不同重視。美國(guó)NIST早期有關(guān)MRM的研制目標(biāo)集中于食品元素分析；歐盟IRMM致力于食品獸藥殘留MRM的開(kāi)發(fā)，在農(nóng)獸藥、同位素、真菌毒素等領(lǐng)域發(fā)揮出特色優(yōu)勢(shì)，其中有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（CRM）有191種；日本食品MRM的研制多數(shù)集中在糙米、洋蔥、白菜、大豆等的農(nóng)藥殘留，以及魚(yú)肉、魚(yú)油中含氯農(nóng)藥類(lèi)持久性有機(jī)污染物和重金屬污染物；韓國(guó)計(jì)量院也是較早開(kāi)展食品農(nóng)獸藥殘留MRM研制的機(jī)構(gòu)之一。通過(guò)COMAR數(shù)據(jù)庫(kù)查詢，大部分MRM的基質(zhì)為奶粉，英國(guó)政府化學(xué)家實(shí)驗(yàn)室（LGC）現(xiàn)已提供包含蔬菜、水果、肉類(lèi)、油脂、飼料等在內(nèi)的51種食品分析用MRM。

四、我國(guó)農(nóng)獸藥殘留

MRM研制存在的問(wèn)題及建議

當(dāng)前，我國(guó)農(nóng)獸藥MRM的研制與國(guó)際先進(jìn)水平仍存在差距，研制模式仍需進(jìn)一步改進(jìn)。綜合國(guó)內(nèi)外農(nóng)獸藥MRM的研制情況，食品MRM研制數(shù)目雖多，但有關(guān)農(nóng)獸殘RM研制的種類(lèi)仍然遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了檢測(cè)需要。生物基質(zhì)中與農(nóng)藥相關(guān)的RM研制甚是罕見(jiàn)，目標(biāo)基質(zhì)選擇模式單一，普遍集中于蔬果、茶葉、巧克力、籽類(lèi)、堅(jiān)果，與農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)相關(guān)的動(dòng)物代謝物方面依然欠缺，在藥食同源的中藥材領(lǐng)域MRM研制較少甚至空白。大量研究數(shù)據(jù)表明，中藥材農(nóng)藥殘留的現(xiàn)象普遍存在，其中毒死蜱、敵敵畏、樂(lè)果等常見(jiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥品種已在根類(lèi)中藥材中檢出，甚至還檢出了已被國(guó)家明令禁止使用的甲胺磷、氧樂(lè)果、水胺硫磷等高毒農(nóng)藥，影響了產(chǎn)業(yè)發(fā)展。與水果、蔬菜等其他簡(jiǎn)單基質(zhì)相比，中藥材農(nóng)藥殘留具有以下特點(diǎn)：底物次生代謝產(chǎn)物多，情況較為復(fù)雜；農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)更加嚴(yán)苛；中藥材藥用對(duì)象主要針對(duì)弱勢(shì)群體；生產(chǎn)種植者缺乏統(tǒng)一指導(dǎo)經(jīng)驗(yàn)，容易造成農(nóng)藥亂用、混用?？偟膩?lái)看，目前有關(guān)中藥材農(nóng)獸藥殘留MRM的研制尚處于空白階段，尚需科研工作者努力。

基金項(xiàng)目：云南省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（202102AE090021）；云南省基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目（202101AT070111、202201AU070045）。

作者簡(jiǎn)介：李吉（1996-），女，漢族，江蘇揚(yáng)州人，碩士研究生在讀，研究方向?yàn)槭称贩治鰴z測(cè)。