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      超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定藤黃藥材中5種成分的含量

      2023-07-26 16:12:28王超郭春梅程紅新史延通
      品牌與標準化 2023年3期
      關鍵詞:串聯(lián)質(zhì)譜法藤黃超高效液相色譜

      王超 郭春梅 程紅新 史延通

      【摘要】目的:采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)法建立同時測定藤黃藥材中藤黃酸、轉(zhuǎn)位藤黃酸、藤黃酸B、異藤黃酸、新藤黃酸5種成分的含量。方法:藤黃藥材經(jīng)75%乙醇水超聲提取,以ZORBAX Eclipse Plus C18為色譜柱、0.1%甲酸水-乙腈(30∶70,V/V)為流動相,流速為0.4 mL/min,柱溫為35℃;質(zhì)譜采用電噴霧離子(ESI)源、正離子掃描的多反應監(jiān)測(MRM)模式進行定量分析。結果:藤黃酸、轉(zhuǎn)位藤黃酸、藤黃酸B、異藤黃酸、新藤黃酸分別在51.00~1020、3.749~74.98、8.675~ 173.5、60.00~1200、47.95~959 ng/mL(r均大于0.9990)的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關系。5種成分的平均加樣回收率分別為97.2%、98.1%、97.9%、97.0%、99.3%,RSD分別為2.1%、2.1%、2.3%、1.9%、2.1%。藤黃藥材中上述5種成分含量分別為22.98%~ 23.63%、1.28%~1.35%、2.78%~2.89%、26.13%~26.54%、22.29%~22.40%。結論:該方法操作簡便、準確、可靠,可用于藤黃藥材的多指標成分定量測定。

      【關鍵詞】超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法;藤黃;含量測定

      【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.03.033

      Simultaneous Determination of Contents of 5 Components in Gamboge by UPLC-MS/MS

      WANG Chao,GUO Chunmei,CHENG Hongxin,SHI Yantong

      (Liaoning Institute for Drug Control,Liaoning Shenyang 110036,China)

      Abstract:Objective:To establish an ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS / MS)method for the simultaneous determination of Gambogic acid,Gambogellic acid,Morellic acid,Isogambogic acid and Gambogenic acid in Gamboge. Methods:Gamboge was extracted by ultrasonic extraction with 75% ethanol-water. The determination was performed on ZORBAX Eclipse Plus C18 column with mobile phase consisted of 0.1 % formic acid solution-acetonitrile(30∶70,V/V)at the flow rate of 0.4 mL/min. The column temperature was 35℃. For quantitation,the electrospray ionization(ESI)source was applied to carry out the positive ion scanning with multiple reaction monitoring(MRM)mode. Results:The linear range of Gambogic acid,Gambogellic acid,Morellic acid,Isogambogic acid and Gambogenic acid were 51.00~1020、3.749~74.98、8.675~173.5、60.00~1200、47.95~959 ng/ mL(all r≥0.9990)respectively,which showed a good linear relationship within the concentration range. The average recoveries were 97.2 %,98.1 %,97.9 %,97.0 %,99.3 %,and RSDs were 2.1%,2.1%,2.3%,1.9%,2.1%,respectively. The content of the above five components were 22.98%~23.63%、1.28%~1.35%、2.78%~2.89%、26.13%~26.54%、22.29%~22.40%,respectively. Conclusion:The method issimple,accurate and reliable,which could be used as the quantitative determination of multiple index components of Gamboge.

      Key words:UPLC-MS/MS;gamboge;content determination

      藤黃為藤黃科藤黃屬植物藤黃Garcinia hanburyi Hook. f.的樹脂[1],最早出自《海藥本草》,現(xiàn)收錄于《中藥大辭典》[2]。藥理學研究表明,藤黃具有抗腫瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等作用[3-7],藤黃酸和新藤黃酸等成分是藤黃的主要成分[8-9]。目前,關于藤黃含量測定的研究文獻報道較少[10-11],因此有必要建立一種藤黃中多組分的同時含量測定方法。

      UPLC-MS/MS(超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜)法是以超高效液相作為分離系統(tǒng)、質(zhì)譜作為檢測系統(tǒng)的分析技術,該分析技術將超高效液相高分離度的優(yōu)勢與質(zhì)譜高靈敏度的特性相結合,具備分離能力強,分析時間短,靈敏度高,專屬性強等優(yōu)點,廣泛應用于中藥材的定性定量分析。本研究基于UPLCMS/MS技術建立了同時測定藤黃中藤黃酸、轉(zhuǎn)位藤黃酸、藤黃酸B、異藤黃酸、新藤黃酸5種成分含量的方法,以期為藤黃藥材質(zhì)量控制及應用提供參考依據(jù)。

      1材料與方法

      1.1儀器

      超高效液相色譜儀串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀(Xevo TQ,美國Waters公司);電子天平(XP26,瑞士METTLER TOLEDO公司);超純水儀(Milli-Q Advantage A10,美國Millipore公司);超聲清洗器(AS3120A,天津奧特賽恩斯儀器有限公司)。

      1.2材料

      藤黃酸(批號111966-201401)來自中國食品藥品檢定研究院;轉(zhuǎn)位藤黃酸(批號10594)來自上海詩丹德標準技術服務有限公司;藤黃酸B(批號J15 GB 150695)來自上海源葉生物科技有限公司;異藤黃酸(批號CFS202001)、新藤黃酸(批號CFS202002)來自武漢天植生物技術有限公司;藤黃對照藥材(編號S-01~S-05,批號121215-200602)來自中國食品藥品檢定研究院;色譜純甲醇、色譜純乙腈、色譜純乙醇(德國Merck公司);質(zhì)譜級甲酸(美國Sigma公司)。

      1.3方法

      1.3.1色譜條件

      色譜柱為ZORBAX Eclipse Plus C18柱(2.1×100 mm 1.8-Micron);流動相為0.1%甲酸水-乙腈(30∶70,V/V);流速為0.4 mL/min;柱溫為35℃;進樣量為2μL。

      1.3.2質(zhì)譜條件

      離子源為電噴霧離子(ESI)源,正離子掃描,多反應監(jiān)測(MRM)模式;毛細管電壓為3.0 kV;脫溶劑溫度為550℃;錐孔氣流速為50 L/Hr;脫溶劑氣流速為850 L/Hr;碰撞氣流速為0.15 mL/min;碰撞氣為氬氣;其他參數(shù)見表1。

      1.3.3對照品儲備液的制備

      精密稱取藤黃酸、轉(zhuǎn)位藤黃酸、藤黃酸B、異藤黃酸、新藤黃酸對照品適量,分別置于10 mL量瓶中,加甲醇適量,超聲溶解后,加甲醇定容,配制成質(zhì)量濃度分別為藤黃酸510.0μg/ mL、轉(zhuǎn)位藤黃酸499.9μg/mL、藤黃酸B 399.9μg/mL、異藤黃酸479.4μg/mL、新藤黃酸433.7μg/mL的對照品儲備液。精密吸取上述各單一對照品儲備液適量,加甲醇配制為上述成分質(zhì)量濃度依次為10.20、0.7498、12.00、0.959、1.735μg/mL的混合對照品儲備液。

      1.3.4供試品溶液的制備

      取藤黃藥材約5 mg,精密稱定,置于50 mL量瓶中,加75%乙醇水80 mL,浸泡5 min,超聲處理10 min,放冷至室溫,用75%乙醇水定容,搖勻,經(jīng)0.22μm濾膜過濾,取續(xù)濾液0.5 mL,置于50 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。

      2結果與分析

      2.1色譜-質(zhì)譜條件的優(yōu)化

      通過全掃描模式確定母離子并對錐孔電壓進行優(yōu)化,通過不斷增加碰撞能量確定合適的子離子,最終確定5種成分各自的定量、定性離子對。由于待測成分復雜且成分中具有極性相近的同分異構體,因此比較了甲醇-水、乙腈-水、乙腈-甲酸溶液、乙腈-乙酸銨溶液等多種流動相系統(tǒng),結果發(fā)現(xiàn),在流動相中加入適量的甲酸可以使同分異構體達到基線分離,因此選擇乙腈-甲酸溶液作為流動相。各化合物在正、負離子模式下均有響應,但當流動相系統(tǒng)中加入甲酸后,負離子模式響應明顯降低,因此選擇在正離子模式下進行檢測。

      2.2樣品前處理條件的選擇

      考察了甲醇、乙醇、乙腈三種不同提取溶劑及25%、50%、75%、100%四種不同溶劑質(zhì)量分數(shù)藤黃中各成分含量的影響,結果顯示,不同提取溶劑對提取效率的影響不大,當以75%乙醇作為提取溶劑時提取效果相對較好,因此選擇75%乙醇作為提取溶劑。比較直接超聲處理和浸泡后超聲處理兩種不同超聲提取方法,結果顯示,在相同提取時間下,浸泡后超聲提取液的含量高于直接超聲提取液,最終選用浸泡后超聲提取法。比較浸泡5、10、15 min和超聲10、15、20、30 min的結果,發(fā)現(xiàn)延長浸泡時間和提取時間對各成分的含量無顯著影響,最終選擇浸泡5 min后超聲提取10 min。

      2.3方法學考察

      2.3.1專屬性

      分別取空白溶劑、混合對照品溶液和供試品溶液適量,按照上述條件進樣測定,色譜圖見圖1。由圖1可知,待測成分的分離良好,空白無雜質(zhì)峰干擾,表明本方法專屬性較強。

      2.3.2線性關系

      分別精密吸取混合對照品儲備液0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 mL,置于10 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,制成系列質(zhì)量濃度的對照品溶液,按照上述條件進樣測定,以各成分的質(zhì)量濃度(X)為橫坐標、峰面積(Y)為縱坐標,繪制標準曲線并進行回歸分析,得各組分的回歸方程和線性范圍,結果見表2,表明藤黃中各成分在相應的濃度范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關系。

      2.3.3精密度試驗

      取混合對照品溶液,按照上述條件連續(xù)進樣測定6次,計算5種成分峰面積的RSD值,結果顯示,藤黃酸、轉(zhuǎn)位藤黃酸、藤黃酸B、異藤黃酸、新藤黃酸的RSD分別為1.7%、1.8%、2.2%、1.8%、2.6%,表明儀器精密度良好。

      2.3.4重復性試驗

      稱取藤黃藥材粉末約5 mg,精密稱定,平行稱取6份,按上述操作制備供試品溶液,進樣測定,計算藤黃酸、轉(zhuǎn)位藤黃酸、藤黃酸B、異藤黃酸、新藤黃酸的含量分別為23.31%、1.28%、2.88%、26.18%、22.08%,RSD分別為1.8%、2.8%、2.9%、1.8%、1.9%,表明方法重復性良好。

      2.3.5定性試驗

      稱取藤黃藥材粉末約5 mg,按上述操作制備供試品溶液,放置在4℃恒溫進樣器中,分別于制備后0、2、4、8、12、24 h進樣測定,結果顯示藤黃酸、轉(zhuǎn)位藤黃酸、藤黃酸B、異藤黃酸、新藤黃酸峰面積的RSD分別為1.9%、2.9%、2.8%、2.0%、3.0%,表明供試品溶液在4℃恒溫進樣器中放置24 h內(nèi)穩(wěn)定。

      2.3.6加樣回收試驗

      取同一藤黃藥材約2.5 mg,精密稱定,平行稱取9份,分別精密加入混合對照品溶液,使加入各成分含量分別為供試品中相應成分含量的50%、100%、150%,按上述操作制備供試品溶液,進樣測定,計算加樣回收率,結果見表3,藤黃中5種成分的平均回收率為95.1%~101.6%,表明該方法準確度良好。

      2.4樣品含量測定

      精密稱取編號為S-01~S-04的藤黃藥材粉末約0.5 mg,按上述操作制備供試品溶液,進樣測定,采用外標法計算樣品中各成分的含量,結果見表4。

      3結論

      本研究建立了一種同時測定藤黃藥材中5種成分含量的UPLC-MS/MS方法。該法快速、簡便、準確度高,可為藤黃藥材質(zhì)量控制及應用提供參考依據(jù)可為藤黃藥材的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

      【參考文獻】

      [1]鄭趙情,張莉,沈凱凱,等.藤黃的研究進展[J].世界中醫(yī)藥,2016,11(7):1180-1188.

      [2]南京中醫(yī)藥大學.中藥大辭典(下冊)[M].第2版.上海:上??茖W技術出版社,2006.

      [3]張莉,蔡雙璠,孔思遠,等.中國藤黃屬植物的藥理作用研究進展[J].世界中醫(yī)藥,2016,1(7):1189-1194.

      [4]戰(zhàn)鶴,韓璐,何忠梅,等.藤黃有效成分的納米囊制備及其抗糖尿病活性評價[J].中國藥房,2022,33(9):1075-1081.

      [5]HATAMI E,JAGGI M,CHAUHAN S C,et al. Gambogic acid: a shining natural compound to nanomedicine for cancer therapeutics[J]. Biochimica et Biophysica Acta(BBA)-Reviews on Cancer,2020,1874(1):188381.

      [6]Liu Y,Chen Y,Lin L,et al. Gambogic Acid as a Candidate for Cancer Therapy:A Review[J]. International Journal of Nanomedicine,2020,Volume 15:10385-10399.

      [7]李麗梅,周俊,婁潔,等.大苞藤黃中的一個新黃酮及其抗煙草花葉病毒活性[J].中國中藥雜志,2015,21(4):4205-4207.

      [8]周安,李慶林,彭代銀,等.高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法鑒定中藥藤黃中橋環(huán)類化合物[J].藥學學報,2008(8):838-842.

      [9]楊虹,叢曉東,王崢濤.藥用藤黃化學成分的研究[J].中國藥學雜志,2008,43(12):900-902.

      [10]趙夢中,成志平,馬靜,等.HPLC法測定藤黃藥材中藤黃酸的含量[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2020,26(1):32-34.

      [11]林青華,林宏英,魏雅蕾,等.高效液相色譜法測定藤黃藥材中藤黃酸與新藤黃酸的含量[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐,2014,28(6):25-28.

      【作者簡介】

      王超,女,1985年出生,副主任藥師,研究方向為藥品非法添加及化妝品理化檢驗。

      郭春梅,女,1966年出生,高級工程師,研究方向為食品、化妝品檢驗。

      程紅新,女,1966年出生,高級工程師,研究方向為食品、化妝品檢驗。

      史延通,男,1975年出生,正高級研究員,研究方向為化妝品業(yè)務管理。

      (編輯:侯睿琪)

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