不同開口餌料及轉食策略對烏原鯉仔、稚魚生長和存活的影響

李 娟，闕延福，徐 林，朱 濱，廉 浩，王 理，喬 曄

(1.水利部中國科學院水工程生態(tài)研究所，水利部水工程生態(tài)效應與生態(tài)修復重點實驗室，武漢 430079；2.湖北中水長江生態(tài)保護研究院有限公司，武漢 430079；3.廣西大藤峽水利樞紐開發(fā)有限責任公司，廣西桂平 537200)

魚類早期生活史階段是其對外界環(huán)境最敏感的時期，也是死亡高峰時期。其中仔魚開口攝食的階段為仔魚由內源性營養(yǎng)轉向外源性營養(yǎng)的階段，這個時期在魚類早期生活史中非常重要[5，6]。所以，在混合營養(yǎng)階段選擇適口性好且營養(yǎng)全面的開口餌料直接決定規(guī)?；缗嘤某蓴7]。而轉食是魚類在人工養(yǎng)殖過程中在其早期生活史階段的必經過程，即早期仔稚魚由攝食生物活餌料完全轉食配合飼料的過程。在早期仔魚進入外源性營養(yǎng)階段開始，用人工飼料代替生物餌料的可能性已經有相關研究[8，9]，但從開口攝食開始就能完全代替生物活餌的人工飼料很少報道。

開展魚類早期生活史研究可以為魚苗培育提供重要的技術指導，開口餌料、轉食策略是影響仔魚生長、存活的重要因子[10，11]。且在苗種培育階段選擇最適開口餌料及轉食策略可以保證苗種的成活率[12-14]。目前，對烏原鯉的研究有人工繁殖、胚胎發(fā)育、精子活力、表型性狀及繁殖力、耗氧率與臨界窒息點等方面[15-18]。未發(fā)現對烏原鯉仔魚不同開口餌料及轉食策略有相關報道。本研究旨在探討不同開口餌料對烏原鯉仔魚生長、存活的影響，為烏原鯉仔魚開口餌料的選擇、轉食策略的方式及苗種培育提供理論依據，也為烏原鯉資源養(yǎng)護和人工增殖提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗用魚

2021年3月，在廣西壯族自治區(qū)來賓市紅水河魚類保護增殖站對烏原鯉親魚進行人工催產，干法受精獲得受精卵，在循環(huán)水系統(tǒng)中流水孵化獲得仔魚。選用烏原鯉初孵仔魚，全長(7.03±0.10)mm，體長(6.69±0.03)mm。

1.1.2 實驗餌料

仔魚開口餌料選擇豐年蟲、熟蛋黃、微粒子飼料。豐年蟲為皇冠大紅卵，微粒飼料為山東升索漁用飼料研究中心研發(fā)的魚苗專用微粒子配合飼料(S1#)。轉食策略中實驗餌料選擇豐年蟲、微粒子飼料、水蚯蚓。具體主要營養(yǎng)成分如表1。

表1 不同餌料的主要營養(yǎng)成分Tab.1 Main nutrition components of different diets %

1.2 實驗方法

1.2.1 不同開口餌料實驗

目前許多縣水行政執(zhí)法隊伍裝備相對落后，專用車輛常被挪作他用，辦案裝備不能及時配備和更新。專職的水行政執(zhí)法人員中具有專業(yè)水利技術職稱或法律專業(yè)知識的人員很少，知識結構欠缺。一些縣執(zhí)法網絡不完善，水行政執(zhí)法難以有效開展。

分為蛋黃、豐年蟲、人工微粒飼料3種不同開口餌料投喂組，每組設置3個平行。選用5日齡烏原鯉魚苗置于培育框(120 cm×100 cm×50 cm)中培育，培育框固定在循環(huán)水養(yǎng)殖缸內。取同批次4日齡仔魚，每框隨機放養(yǎng)200尾。實驗周期為15 d。實驗選取烏原鯉5、10、15、20日齡不同開口餌料魚苗進行生長指標測量，并記錄魚苗死亡尾數。

每日8：00、12：00、16：00、20：00分別進行投喂，每日吸污，實驗期間采用YSI水質分析儀記錄水體理化參數，水溫維持在22～25 ℃，氨氮含量處于安全范圍，溶解氧>6.0 mg/L。

1.2.2 轉食策略實驗

選用5日齡烏原鯉魚苗置于循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中的養(yǎng)殖缸中培育，在養(yǎng)殖缸中設置小網箱。依據轉食策略不同，共設計T20水蚯蚓組、T20微粒子組、T35水蚯蚓組、T35微粒子組4個實驗組和1個對照組。每組2個重復，每個重復100尾健康烏原鯉幼苗。對照組整個實驗期間只投喂豐年蟲；T20水蚯蚓組用豐年蟲開口15 d后轉食投喂水蚯蚓30 d；T20微粒子組用豐年蟲開口15 d后轉食投喂微粒子飼料30 d；T35水蚯蚓組用豐年蟲開口30 d后轉食投喂水蚯蚓15 d；T35微粒子組用豐年蟲開口30 d后轉食投喂微粒子飼料15 d。

每組隨機挑選10尾幼苗，測量全長(精確到0.5 mm)、體長(精確到0.5 mm)、體質量(精確到0.000 1 g)、死亡數量等數據。實驗期間采用YSI水質分析儀記錄水體理化參數，水溫維持在22～27 ℃，氨氮含量處于安全范圍，溶解氧>6.0 mg/L。

1.3 數據分析

用EXCEL2019進行常規(guī)計算后，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析實驗數據，各實驗組間差異顯著性利用單因素方差分析(One-way ANOVA)檢驗，顯著性檢驗采用Duncan′s multiplerange test法比較，P<0.05為顯著性標準，數值以平均值±標準差(X±SD)表示。

1.4 計算公式

仔魚生長特性以特定生長率(SGR)描述：

SGR=100%×(lnWt-lnW0)/t

K=(W/L3)×100

其中：SGR為特定生長率(%/d)，W0和Wt分別為初始體質量和培育td后的體質量(g)，t為實驗時間(d)；K為魚體肥滿度，W為魚體體質量(g)，L為魚體體長(mm)。

2 結果

2.1 不同開口餌料對仔魚生長的影響

2.1.1 對全長、體長和體質量的影響

不同開口餌料的仔魚全長變化如表2所示。仔魚5日齡開始投喂后5 d內蛋黃組全長增長最慢，微粒子組、豐年蟲組仔魚全長差異不顯著。投喂10 d后，豐年蟲組增長最快，其次為微粒子飼料組。在實驗周期內，蛋黃組仔魚全長增長速度最慢，豐年蟲組仔魚全長增長速度最快。在投喂10 d至實驗結束，豐年蟲組仔魚全長顯著高于微粒子組和蛋黃組，存在差異顯著。對烏原鯉仔魚體長影響與全長基本一致，僅在投喂5 d后存在差異，豐年蟲組體長增長最快，與微粒子組差異不顯著，與蛋黃組差異顯著。

表2 不同開口餌料下烏原鯉仔魚的生長指標Tab.2 Growth indexs of P.merus larvae under different initial feeding

不同開口餌料對各組仔魚體質量影響均隨日齡增長而增長，但三組仔魚體質量增長速度存在差異。在投喂5 d(10日齡)，豐年蟲組增長最快，與微粒子組和蛋黃組存在顯著差異。該趨勢一直持續(xù)到實驗結束(20日齡)，且差異越來越顯著。在此期間，微粒子組與蛋黃組烏原鯉仔魚的體質量存在顯著性差異。

2.1.2 對SGR的影響

不同開口餌料組仔魚SGR隨著實驗時間延長，整體開始下降并表現出一定的差異。5～10日齡，豐年蟲組仔魚SGR顯著高于微粒子組和蛋黃組；10～15日齡，豐年蟲組仔魚SGR最高，為(8.24±3.56)%/d，且與微粒子組差異不顯著，與蛋黃組差異顯著，SRG最低，為(-0.63±2.49)%/d(圖1)。

圖1 不同開口餌料下烏原鯉仔魚特定生長率變化Fig.1 Specific growth rate of P.merus larvae under different initial feeding同日齡肩標字母不同表示有顯著差異性(P<0.05)。

2.1.3 對存活率的影響

烏原鯉仔魚從5日齡開始投喂至20日齡，在實驗過程中，未出現非正常的大量死亡現象。不同開口餌料組對烏原鯉仔魚存活率存在一定差異。實驗結束時(20日齡)，存活率最高是豐年蟲組，為(90.50±1.32)%，實驗中一直高于且與其他2組存在顯著差異；其次是微粒子組，為(86.50±1.32)%；蛋黃組存活率最低，為(60.83±1.76)%，實驗結束時，與微粒子組存活率存在顯著性差異(表3)。

表3 不同開口餌料下烏原鯉仔魚存活率Tab.3 Survival rate of P.merus larvae under different initial feeding %

2.1.4 對仔魚肥滿度的影響

投喂5 d，開始統(tǒng)計各實驗組的仔魚肥滿度指標。從表4實驗結果看，10日齡時豐年蟲組烏原鯉仔魚肥滿度最高，其次為微粒子組，蛋黃組最低，三組間不存在顯著性差異。15日齡時，豐年蟲組仔魚肥滿度持續(xù)最高，其次為微粒子組，最低為蛋黃組，其中豐年蟲組仔魚肥滿度顯著高于蛋黃組，與微粒子不存在顯著性差異。實驗結束(20日齡 )時，豐年蟲組仔魚肥滿度顯著高于微粒子組與蛋黃組，微粒子組與蛋黃組仔魚肥滿度存在顯著差異。

2.2 不同轉食策略對稚魚的影響

不同轉食策略對烏原鯉稚魚全長、體長、體質量、存活率和SGR的影響見表5。在全長方面，T35水蚯蚓組的全長顯著高于T20水蚯蚓組、T35微粒子組、T20微粒子組、對照組，存在顯著差異。在體長方面，T35水蚯蚓組生長最快，為(19.14±0.29)mm，其次為T20水蚯蚓組，為(18.29±0.42)mm，再次是T35微粒子組，為(17.55±0.23)mm，最低為對照組，僅(16.83±0.51)mm。在體質量上，在45 d實驗結束時，T35水蚯蚓組生長最快，體質量達(0.159 7±0.014 7)g，與其余實驗組體質量差異顯著，其余實驗組間體質量差異不顯著。對存活率的影響，在實驗過程中，未出現非正常大量死亡現象。實驗結束時，不同轉食策略實驗組存活率存在明顯差異。T35水蚯蚓組仔魚存活率最高(87.25±1.25)%，與對照組(83.25±2.25)%、T20水蚯蚓組(84.75±0.75)%差異不顯著，與T20微粒子組差異顯著。不同的轉食策略下，各組SGR表現出一定差異。T35水蚯蚓組SGR為(8.10±0.83)%/d，顯著高于其余轉食組；其次是T35微粒子組SGR為(7.34±0.40)%/d，與T35微粒子組、T20水蚯蚓、T20微粒子組差異不顯著；對照組SGR最低，為(6.88±0.73)%/d。

表5 不同轉食策略下烏原鯉仔稚魚的生長指標、存活率和SGRTab.5 Growth indexes and survival rate of P.merus in larvae、juvenile and SGR under different weaning strategies

3 討論

3.1 不同開口餌料對烏原鯉仔魚生長和存活率的影響

本研究結果表明豐年蟲組的烏原鯉仔魚生長指標、成活率顯著優(yōu)于微粒子組、蛋黃組。豐年蟲組烏原鯉仔魚在實驗過程中保持較快的生長，較高的存活率；而微粒子組在10日齡前，全長、體長、肥滿度與豐年蟲組未出現顯著差異，但體重、存活率等指標與豐年蟲組顯著差異，隨著投喂時間延長，生長速度變慢，各指標均與豐年蟲組出現顯著差異，這說明隨著開口時間延長人工配合飼料不能滿足仔魚生長需要。在實驗中蛋黃組投喂5日后，烏原鯉仔魚體長、體重、特定生長率均與豐年蟲組出現顯著差異，表明蛋黃不適合烏原鯉仔魚作為長期的開口餌料。實驗結束時(投喂15日)，蛋黃組烏原鯉仔魚生長指標均顯著低于豐年蟲組、微粒子組，存活率僅(60.83±1.76)%，特定生長率甚至低于0，出現負增長(圖1)。這與葉繼丹等[21]對中華鱘(Acipensersinensis)、吳興兵等[22]對四川裂腹魚(SchizothoraxkozloviNikolsky)、王萬良等[23]對黑斑原鮡(Glyptosternummaculatum)、易建華[24]對胭脂魚(Myxocyprinusasiaticus)的開口餌料研究結果一致，就單一開口餌料來說，投喂天然餌料優(yōu)于配合飼料。主要原因可能是在自然水體中，烏原鯉屬于雜食性魚類，以小型螺螄、蚌類、蜆類為主，而蛋黃的營養(yǎng)物質相較于豐年蟲和微粒子飼料較為單一，無法滿足烏原鯉仔魚長期生長發(fā)育的需求，造成較高的死亡率和生長緩慢。因此，本研究結果表明在烏原鯉仔魚開口階段，投喂豐年蟲能滿足仔魚生長發(fā)育需要，同時保證較高的存活率。

3.2 不同轉食策略對烏原鯉仔稚魚生長和存活率的影響

根據郭忠娣等[9]對胭脂魚、HAMLIN等[25]對黑線鱈(Melanogrammusaeglefinus)和BASKERVILLE-BRIDGES等[26]對太平洋鱈(Gadusmacrocephalus)的研究發(fā)現，轉食開始的時間不同會顯著影響到魚苗轉食期的生長和存活以及魚苗是否能夠成功攝食配合飼料，過早轉食飼料會影響仔魚對食物的消化，造成消極影響，過晚轉食飼料則會造成養(yǎng)殖成本的浪費。本實驗也證實了不同轉食起點的各組烏原鯉魚苗生長和存活存在一定的差異。各組魚苗的存活率中15日齡轉食微粒子組最低，對照組、15日齡轉食水蚯蚓組、30日齡轉食微粒子組存活率差異不顯著，30日齡轉食水蚯蚓組存活率最高。T20微粒子組與T35微粒子組隨著轉食飼料時間延后，轉食后體重、體長、特定生長率、存活率有所增大，分析原因可能為仔、稚魚消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，對人工配合飼料消化能力弱；較早開始投喂飼料部分仔、稚魚未適應人工飼料，導致較高的死亡率。而在投喂開口餌料豐年蟲后轉食水蚯蚓能大大提高仔、稚魚的體重、體長、特定生長率、存活率等指標，但由于水蚯蚓體內富集大量致病菌、有機磷、有機氯和重金屬等毒害物質，會導致幼魚階段某些疾病發(fā)生，需要在投喂前做好消毒工作。

4 結論

本次實驗結果表明，烏原鯉仔魚開口階段豐年蟲為最佳的開口餌料，投喂豐年蟲能滿足仔魚生長發(fā)育需要，同時保證較高的存活率。轉食策略中延后轉食時間起點和轉食水蚯蚓，烏原鯉仔稚魚的全長、體長、體重有增大趨勢，本實驗中30日齡 轉食水蚯蚓效果最佳。