抑郁癥大鼠模型構建與評價*

張慧，夏照生，胡嘉煒，許文飛，楊帆

安徽中醫(yī)藥大學針灸推拿學院（康復醫(yī)學院） 安徽合肥 230038

抑郁癥是嚴重威脅人類健康的精神情感性疾病[1-2]，其病因及發(fā)病機制尚不明確[1]，目前一線的抗抑郁藥大多存在起效慢、不良反應大等缺陷[3-6]。中醫(yī)藥治療抑郁癥療效顯著、且不良反應低，具有獨特的優(yōu)勢和特色[7-8]，但是其內(nèi)在機制尚未完全闡明。一個相對成熟穩(wěn)定的抑郁癥動物模型對于中醫(yī)藥治療抑郁癥的作用機制研究具有十分重要的作用。CUMS是目前應用最為廣泛的動物抑郁模型[2]，通過慢性、不可預知的溫和刺激（各種環(huán)境因素刺激）誘發(fā)抑郁，與人類抑郁癥發(fā)病原因較為相似。本文通過CUMS法制備抑郁癥大鼠模型，通過糖水偏好實驗及曠場實驗不動時間以檢測其行為學改變，以期為抑郁癥的相關研究提供參考。

材料與方法

1 CUMS法構建大鼠抑郁模型

1.1 實驗動物 由安徽醫(yī)科大學動物實驗中心提供（生產(chǎn)許可證號：scxk（皖）2022-001）的健康成年 SD雄性大鼠12只，于實驗室適應性飼養(yǎng)7d，飼養(yǎng)溫度24～26℃，濕度50%～70%。7 d后，予以稱體質(zhì)量及身體檢查，不合格者予以剔除，然后開始實驗。

1.2 實驗方法 大鼠隨機分為兩組（正常組和模型組），每組 6只。對模型組大鼠施以慢性不可預見性的溫和刺激[9]，每天隨機給予兩種刺激，具體日程安排見表1。

表1 實驗日程安排表

2 行為學檢測

2.1 大鼠糖水偏好率 糖水偏好率測試前，應進行糖水攝入訓練，糖水訓練后，開始測試，具體方法如下：同時給予每只測試鼠一瓶200g庶糖水（1%）和一瓶200g純凈水后，測量糖水和純凈水的消耗量，應用如下公式：糖水偏好率=糖水消耗/（純凈水消耗+糖水消耗）×100%，計算其糖水偏好率。

2.2 大鼠曠場實驗不動時間 實驗室安靜通風，光線昏暗。實驗開始后，動物放置于敞開的紙箱中心點，適應2 min后進行攝像和計時，記錄大鼠在曠場內(nèi)的5 min運動數(shù)據(jù)（主要記錄其運動的總時間及不動時間）。

3 統(tǒng)計學處理

應用 SPSS 23.0 進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料（±s）符合正態(tài)分布的用配對t檢驗，反之用非參數(shù)檢驗；對于計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學意義。

結 果

1 兩組大鼠造模后糖水偏好率及曠場實驗不動時間比較

結果發(fā)現(xiàn)，模型（CUMS）組大鼠的糖水偏好率（0.257833±0.052285）明顯低于正常組的（0.732167±0.046210）（P＜0.01）；模型（CUMS）組大鼠的曠場實驗不動時間（348.333333±8.165）明顯長于正常組的（174.333333±6.121）（P＜0.01）。見表2。

2 模型組大鼠造模前后糖水偏好率及曠場實驗不動時間比較

模型（CUMS）組大鼠造模后的糖水偏好率（0.257833±0.052285）明顯低于造模前（0.611667±0.062981）（P＜0.05）；模型（CUMS）組大鼠造模后的曠場實驗不動時間（348.333333±8.165）明顯高于造模前（218.166667±46.820580）（P＜0.05）。見表3。

表3 模型組大鼠造模前后糖水偏好率及曠場實驗不動時間比較

討 論

CUMS是目前應用最為廣泛的動物抑郁模型[2]，它模擬實際生活中抑郁癥的發(fā)病環(huán)境[9]，將實驗動物在一定的時間段連續(xù)暴露于多種不可預測的溫和性刺激下以達到建模的目的。糖水偏好率測試反映的是實驗動物內(nèi)在快感缺失狀態(tài)，是基于獎賞的行為學測試方法。曠場實驗是較為流行的研究抑郁癥的行為學測試方法，廣泛應用于抑郁癥、焦慮癥等神經(jīng)、精神疾病以及中樞藥物評篩的研究中。因此，本研究將糖水偏好率試驗和曠場試驗作為重要指標，對模型的成功進行評價。

本實驗結果表明，模型組大鼠造模后糖水偏好率較正常組有較大幅度的下降，曠場實驗不動時間明顯增多；模型組大鼠糖水偏好率和曠場實驗不動時間在造模前后的差異性顯著。上述研究結果從行為學角度佐證了大鼠抑郁癥模型的成功，并對中醫(yī)藥治療抑郁癥的作用機制研究提供了一定的參考價值。