30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑分析方法研究

張 釗，萬娜娜，梁觀鳳，林培旺，諶 偉

(上海悅聯(lián)生物科技有限公司，上海悅聯(lián)化工有限公司，上海 201512)

丁氟螨酯[1]是由日本大?；瘜W(xué)公司開發(fā)的新型?；译骖悮Ⅱ齽?，屬于非內(nèi)吸性殺螨劑，與現(xiàn)有殺蟲劑沒有交互抗性，而且可以在水和土壤中迅速分解代謝。主要作用方式為觸殺，其通過接觸進(jìn)入螨蟲體內(nèi)后，能夠在螨蟲體內(nèi)通過代謝，產(chǎn)生極具活性作用的物質(zhì)AB-1，AB-1對(duì)二點(diǎn)葉螨線粒體復(fù)合體Ⅱ具有強(qiáng)烈的抑制作用，抑制螨蟲的呼吸作用，主要用于柑橘紅蜘蛛，對(duì)小菜蛾、斜紋夜蛾、二化螟、稻飛虱、桃蚜等害蟲亦有良好防治作用。

乙螨唑[1]是由日本住友化學(xué)株式會(huì)社研發(fā)的一種全新具特殊結(jié)構(gòu)的殺螨劑，屬于非內(nèi)吸性殺螨劑，具有觸殺和胃毒作用，與大部分殺螨劑無交互抗性，有較強(qiáng)的滲透作用。作用方式主要是抑制幾丁質(zhì)的合成，抑制螨卵的胚胎形成以及從幼螨到成螨的蛻皮過程。主要防治蘋果、柑橘的紅蜘蛛，對(duì)棉花、花卉、蔬菜等作物的葉螨、始葉螨、全爪螨、二斑葉螨、朱砂葉螨等螨類也有卓越防效。

將丁氟螨酯和乙螨唑以適當(dāng)比例混配成制劑，可顯著提高藥效，擴(kuò)大防治范圍，延緩抗藥性，乙螨唑?qū)β鸭坝昨行?，而丁氟螨酯?duì)螨蟲各個(gè)生長(zhǎng)階段有很高的活性，二者的復(fù)配可有效拓寬防治期。

有關(guān)丁氟螨酯的分析方法[2-3]和乙螨唑的分析方法[4-5]已有相關(guān)報(bào)道，但兩者混配懸浮劑的分析方法還未見報(bào)道，本文采用反相高效液相色譜法，對(duì)30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑(25%+5%)中有效成分丁氟螨酯和乙螨唑同柱分析和定量，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，此方法操作快速、簡(jiǎn)便，精密度和準(zhǔn)確度均能滿足定量分析要求，能適用于產(chǎn)品質(zhì)量控制和相關(guān)分析的研究。

1 材料儀器

1.1 樣品和試劑 乙腈：色譜純；水：二次重蒸蒸餾水；丁氟螨酯標(biāo)樣：已知丁氟螨酯含量98.0%；乙螨唑標(biāo)樣：已知乙螨唑含量99.0%，流動(dòng)相：乙腈∶水=80∶20，經(jīng)0.45 μm孔徑的濾膜，并在超聲波浴槽中脫氣10 min。

1.2 儀器 高效液相色譜儀：具紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器；色譜柱：Kromasil C18/5 μmΦ4.6 mm×150 mm不銹鋼柱。

1.3 高效液相色譜操作條件 流量：1.0 mL/min；柱溫：室溫(溫差變化≤2℃)；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；進(jìn)樣體積：10 μL；保留時(shí)間：丁氟螨酯約5.6 min，乙螨唑約7.9 min。

上述操作條件是典型的，可根據(jù)儀器的特點(diǎn)對(duì)操作參數(shù)做適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果，典型的丁氟螨酯(乙螨唑)高效液相色譜圖(圖1)。

注：1—丁氟螨酯，2—乙螨唑圖1 30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑高效液相色譜圖

2 試驗(yàn)方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 稱取乙螨唑標(biāo)樣0.05 g和丁氟螨酯標(biāo)樣0.05 g(精確到0.000 2 g)分別置于2個(gè)50 mL容量瓶中，乙螨唑標(biāo)樣用乙腈稀釋至刻度，超聲振蕩5 min使樣品溶解，冷卻至室溫，搖勻；再用移液管準(zhǔn)確吸取10 mL乙螨唑標(biāo)樣溶液到丁氟螨酯標(biāo)樣的容量瓶中，加乙腈稀釋至刻度，超聲振蕩5 min使樣品溶解，冷卻至室溫，搖勻；再移取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

2.2 試樣溶液配制 稱取0.20 g樣品(精確到0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，超聲振蕩5 min使試樣溶解，冷卻至室溫，搖勻；再用移液管準(zhǔn)確吸取5 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻、過濾。

2.3 試樣的測(cè)定 在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值的重復(fù)性，待相鄰2針的響應(yīng)值變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液，試樣溶液，試樣溶液，標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4 試樣中有效含量的計(jì)算 將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中丁氟螨酯(乙螨唑)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X(%)分別按式(1)計(jì)算：

(1)

式中：

A1—標(biāo)樣溶液中丁氟螨酯(乙螨唑)峰面積的平均值；

A2—試樣溶液中丁氟螨酯(乙螨唑)峰面積的平均值；

m1—丁氟螨酯(乙螨唑)標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2—試樣的質(zhì)量，g；

f—稀釋因子，丁氟螨酯f=1，乙螨唑f=5；

P—標(biāo)樣中丁氟螨酯(乙螨唑)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 溶劑的選擇 根據(jù)2種待測(cè)物質(zhì)的溶解度性質(zhì)，選擇乙腈作為溶劑。

3.2 流動(dòng)相和檢測(cè)波長(zhǎng)選擇 通過二極管陣列檢測(cè)器對(duì)丁氟螨酯標(biāo)樣和乙螨唑標(biāo)樣進(jìn)行190～400 nm范圍內(nèi)的吸收光譜掃描(圖2～3)，由光譜信息(圖2～3)并結(jié)合分析中助劑雜質(zhì)干擾因素(圖4)，選定檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm。在乙腈、水中調(diào)節(jié)比例，將丁氟螨酯和乙螨唑進(jìn)行有效分離，同時(shí)避免助劑和雜質(zhì)干擾，最后確定為乙腈∶水=80∶20作為流動(dòng)相，在此條件下對(duì)30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑中丁氟螨酯、乙螨唑峰純度掃描，30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑中丁氟螨酯、乙螨唑的峰純度均>99.9%，30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑中丁氟螨酯、乙螨唑有效成分出峰位置無明顯物質(zhì)干擾，符合定量分析要求。

圖2 30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑中丁氟螨酯HPLC-DAD特異性掃描圖

圖3 30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑中乙螨唑HPLC-DAD特異性掃描圖

圖4 30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑制劑空白圖

3.3 分析方法的線性相關(guān)試驗(yàn) 準(zhǔn)確配制一系列不同濃度的丁氟螨酯和乙螨唑標(biāo)樣溶液，然后分別按本文中2.3測(cè)定步驟進(jìn)行分析檢測(cè)，分別以丁氟螨酯和乙螨唑的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，丁氟螨酯和乙螨唑的峰面積為縱坐標(biāo)，計(jì)算一元線性回歸方程。線性相關(guān)性測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表1，圖5、6)。

表1 分析方法的線性試驗(yàn)結(jié)果

圖5 丁氟螨酯線性關(guān)系圖

圖6 乙螨唑線性關(guān)系圖

丁氟螨酯一元線性回歸方程：y=34.031 53x+0.104 44，相關(guān)系數(shù)：R=0.998 88。

乙螨唑一元線性回歸方程：y= 418.878 52x+ 0.264 95，相關(guān)系數(shù)：R=0.998 84。

3.4 分析方法的精密度相關(guān)試驗(yàn) 任取一批30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑，按本文中2.3測(cè)定步驟連續(xù)測(cè)定丁氟螨酯、乙螨唑質(zhì)量分?jǐn)?shù)10次，分別計(jì)算其平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)。精密度測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表2)。

表2 分析方法的精密度試驗(yàn)結(jié)果

從丁氟螨酯、乙螨唑精密度測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果中可以看出，丁氟螨酯的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.011 7，變異系數(shù)為0.046 5%，

3.5 分析方法的準(zhǔn)確度相關(guān)試驗(yàn) 選取已知含量的30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑樣品，準(zhǔn)確稱取5份，并分別加入定量的丁氟螨酯、乙螨唑標(biāo)樣，然后按2.3測(cè)定步驟測(cè)定丁氟螨酯、乙螨唑標(biāo)樣的加入量，同理論值進(jìn)行比較，計(jì)算回收率。準(zhǔn)確度測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表3)。

表3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

按照本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行檢測(cè)試驗(yàn)，丁氟螨酯回收率在99.61%～100.35%之間，平均回收率為99.95%，乙螨唑回收率在99.66%～100.24%之間，平均回收率為99.97%。

4 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本文建立高效液相色譜分析方法能對(duì)30%丁氟螨酯·乙螨唑懸浮劑中有效成分進(jìn)行分離測(cè)定，且具有良好的線性、精密度和準(zhǔn)確度，操作簡(jiǎn)便，符合農(nóng)藥產(chǎn)品的質(zhì)量分析要求，適用于產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè)和控制，可以作為丁氟螨酯和乙螨唑混配制劑的分析方法。