王迎秋, 盧 蕾, 鮑彩麗, 張曉峰

(1. 同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科,上海 200090; 2. 同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院臨床營(yíng)養(yǎng)科,上海 200090)

產(chǎn)生針對(duì)食物抗原的IgG抗體是健康個(gè)體正常免疫反應(yīng)的一部分,食物不良反應(yīng)之一食物不耐受是機(jī)體的免疫系統(tǒng)針對(duì)某種或多種食物發(fā)生的過(guò)度保護(hù)性免疫反應(yīng),食物顆粒與食物特異性IgG抗體形成免疫復(fù)合物,可引起所有組織發(fā)生炎癥反應(yīng),從而影響機(jī)體多系統(tǒng)、器官的功能[1-2],如胃腸道癥狀、蕁麻疹、鼻炎等[3],目前對(duì)食物不耐受的研究已成為各國(guó)學(xué)者的研究熱點(diǎn)之一。橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis, HT)是一種常見(jiàn)的自身免疫性甲狀腺疾病,其特點(diǎn)為淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和甲狀腺組織的進(jìn)行性破壞,最終導(dǎo)致甲狀腺功能減退,因目前不能從根本上治愈HT,使得患者感覺(jué)很困惑及無(wú)助。Fasano[4]發(fā)現(xiàn)發(fā)生自身免疫性疾病的3種因素: 特定基因、特定觸發(fā)因素以及干擾免疫系統(tǒng)自我調(diào)節(jié)能力的腸道滲透性改變(漏腸),漏腸會(huì)導(dǎo)致食物通過(guò)腸壁直接進(jìn)入宿主,產(chǎn)生特異性IgG抗體,引起機(jī)體的自身免疫性疾病的發(fā)生,因此本研究觀察HT患者食物特異性IgG抗體存在的情況,并分析二者之間的相關(guān)性,期望為HT的診治提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2022年6月—2022年9月在同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院確診為HT患者96例為HT組,診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]: 基于臨床特點(diǎn),血清甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(thyroid peroxidase antibody, TPOAb)和甲狀腺球蛋白抗體(thyroglobulin antibody, TGAb)陽(yáng)性,其中男19例,女77例,年齡17-88歲,平均年齡(56.60±17.21)歲,依據(jù)TPOAb結(jié)果分為輕(≤100 IU/mL)、中(101-300 IU/mL)、高(>300 IU/mL)3組,每組各32例,并選取同時(shí)期甲狀腺功能及TPOAb、TGAb正常的健康體檢者30名為對(duì)照組,男9例,女21例,年齡11-84歲,平均年齡(60.73±17.36)歲。所有人員均無(wú)胃腸道疾病及相關(guān)癥狀,均簽署知情同意書(shū),本研究方案通過(guò)同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院倫理委員會(huì)審批(倫理編號(hào): LL-2023-LW-005)。

1.2 食物特異性IgG抗體檢測(cè)

所有受試者于清晨空腹采集靜脈血5 mL,離心(離心半徑20 cm,3 500 r/min,10 min)后取血清進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法進(jìn)行測(cè)定,使用儀器為北京普朗新技術(shù)有限公司生產(chǎn)的DNM-9602酶標(biāo)分析儀,試劑盒為江蘇浩歐博生物醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)的食物特異性IgG抗體檢測(cè)試劑盒。檢測(cè)項(xiàng)目為牛肉、雞肉、鱈魚(yú)、玉米、螃蟹、雞蛋(蛋白/蛋黃)、蘑菇、牛奶、豬肉、大米、蝦、大豆、西紅柿、小麥共14種,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。

1.3 結(jié)果判定

根據(jù)吸光度及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本IgG抗體濃度,檢測(cè)值<50 U/mL為0級(jí)陰性,檢測(cè)值50-100 U/mL為1級(jí)輕度敏感,檢測(cè)值101-200 U/mL為2級(jí)中度敏感,檢測(cè)值≥200 U/mL為3級(jí)高度敏感。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用EXCEL2016和SPSS 22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理,計(jì)數(shù)資料以n(%)表示,組間采用χ2檢驗(yàn)比較,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。使用Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)是否符合正態(tài)分布,利用Levene檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的方差齊性,將非正態(tài)分布數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成正態(tài)分布,然后采用中位數(shù)及四分位距M(P25,P75)來(lái)描述數(shù)據(jù)的集中趨勢(shì),使用方差分析單因素檢驗(yàn)比較組間差異性比較,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用Spearman檢驗(yàn)對(duì)HT患者TPOAb值與雞蛋抗體滴度進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 食物特異性IgG抗體在HT患者及對(duì)照組中的表達(dá)情況

分別對(duì)HT組中和對(duì)照組進(jìn)行14種食物特異性IgG抗體滴度的測(cè)定并進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)在HT組中14種食物特異性IgG抗體滴度均接近或高于對(duì)照組,其中雞蛋特異性IgG抗體滴度HT組為64.8 U/mL,明顯高于對(duì)照組的16.8 U/mL,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.012),其余食物特異性IgG抗體滴度與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見(jiàn)表1。

表1 HT組與對(duì)照組特異性IgG抗體滴度比較

在96例HT患者中,TPOAb輕、中、高度增高組及對(duì)照組食物特異性IgG抗體的表達(dá)情況(陽(yáng)性人數(shù)/檢測(cè)人數(shù))分別為19/32、25/32、24/32、11/30,14種食物特異性IgG抗體檢測(cè)陽(yáng)性率HT各組及全部病例與對(duì)照組比較,其中TPOAb輕度增高組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.074),TPOAb中、高度增高組及整體HT組與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P分別為0.001、0.002),見(jiàn)表2。TPOAb輕、中、高度增高組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2 各組食物特異性IgG抗體表達(dá)情況

HT組中共發(fā)現(xiàn)有12種食物特異性IgG抗體陽(yáng)性的現(xiàn)象,其中雞蛋的發(fā)生率最高為58.3%(56/96),其次為蘑菇8.3%(8/96)、小麥6.3%(7/96)、大豆6.3%(6/96)、玉米6.3%(6/96)、牛奶5.2%(5/96),牛肉、雞肉未發(fā)現(xiàn)食物特異性IgG抗體陽(yáng)性的情況。雞蛋特異性IgG抗體陽(yáng)性率在對(duì)照組中雖達(dá)到33.3%,但與HT組相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.017);其他食物特異性IgG抗體陽(yáng)性率在兩組中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見(jiàn)表3。

表3 HT組食物特異性IgG抗體陽(yáng)性分布情況

2.2 HT組食物特異性IgG抗體與年齡、性別分析

HT組中男性人數(shù)為19例,女性人數(shù)為77例,食物IgG抗體陽(yáng)性組中男性13例,女性55例,平均年齡(55.68±17.99)歲;食物IgG抗體陰性組中男性6例,女性22例,平均年齡(58.86±15.21)歲。兩組間性別、年齡差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.796、0.413)。

2.3 雞蛋IgG抗體滴度與HT患者血清TPOAb相關(guān)性比較

因雞蛋IgG抗體滴度在HT組中明顯高于對(duì)照組,進(jìn)一步分析了不同HT組中雞蛋IgG抗體滴度,并對(duì)雞蛋IgG抗體滴度與血清TPOAb進(jìn)行了相關(guān)性比較。結(jié)果顯示雞蛋IgG抗體滴度在中度增高組與輕度增高組之間沒(méi)有差異,但是在高度增高組與中度增高組(P=0.038)、高度增高組與輕度增高組之間(P=0.019)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見(jiàn)表4。

表4 HT患者各組間雞蛋IgG抗體滴度比較

HT患者血清TPOAb與雞蛋IgG抗體滴度做相關(guān)性分析得出相關(guān)系數(shù)r=0.235、P=0.021,結(jié)果顯示兩者呈弱正相關(guān),見(jiàn)圖1。

圖1 雞蛋IgG抗體滴度與HT患者血清TPOAb相關(guān)性比較

3 討 論

隨著對(duì)食物不耐受研究的深入,發(fā)現(xiàn)多種自身免疫性疾病都與之相關(guān),因此本研究選擇了一種常見(jiàn)的自身免疫性疾病HT,探討食物特異性IgG抗體與HT的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn),HT患者中普遍存在多種食物特異性IgG抗體增高的情況,陽(yáng)性率達(dá)到了70.8%,明顯高于甲狀腺功能正常的健康人群的36.7%,并且出現(xiàn)陽(yáng)性的食物種類繁多,在已檢測(cè)的14種食物中出現(xiàn)了12種,僅牛肉與雞肉未出現(xiàn)特異性IgG抗體增高,雞蛋是特異性IgG抗體增高最多的食物,本研究結(jié)果也證實(shí)了雞蛋特異性IgG抗體與TPOAb存在著弱正相關(guān)的關(guān)系,與相關(guān)報(bào)道的結(jié)果相近[2]。一項(xiàng)針對(duì)74名歐洲人的125種食物的研究[6]中發(fā)現(xiàn)HT患者中李子、杏仁特異性IgG抗體明顯增高,這些證據(jù)說(shuō)明了食物特異性IgG抗體確與HT存在相關(guān)性。雞蛋作為日常生活中食用概率較高的食物,其特異性IgG抗體異常增高同樣出現(xiàn)在健康體檢人群及兒童中,其原因可能為雞蛋所含的動(dòng)物源性蛋白質(zhì)具有較強(qiáng)的免疫原性[1],更易被腸道的免疫系統(tǒng)所攻擊[7],因此雞蛋成為了引起自身免疫性疾病的重要食物來(lái)源。

HT是自身免疫系統(tǒng)異常時(shí)將甲狀腺作為靶器官進(jìn)行攻擊導(dǎo)致的結(jié)果,除遺傳因素外其危險(xiǎn)因素還包括環(huán)境因素,如碘、硒、維生素D水平以及腸道菌群等,越來(lái)越多的研究表明HT與其他因腸道菌群異常引起食物不耐受所導(dǎo)致的疾病相關(guān),Virili[8]等研究證實(shí)了HT患者腸道菌群發(fā)生了改變。一項(xiàng)巴西學(xué)者的研究[9]中不僅發(fā)現(xiàn)了HT患者腸道菌群的改變,同時(shí)還證實(shí)了漏腸的存在。漏腸是腸道的黏膜屏障因某種原因被破壞導(dǎo)致腸道的通透性增加,使得外部抗原進(jìn)入宿主,從而引起多種疾病,如乳糜瀉、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、哮喘等自身免疫性疾病[10]。部分食物進(jìn)入人體后,因腸道菌群的改變導(dǎo)致體內(nèi)缺乏相應(yīng)的酶而無(wú)法完全消化吸收,以多肽或其他分子的形式存在于腸道或通過(guò)漏腸部位進(jìn)入宿主,由此誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的發(fā)生,產(chǎn)生食物特異性IgG抗體,IgG抗體與食物分子結(jié)合形成免疫復(fù)合物進(jìn)而發(fā)生炎癥反應(yīng),導(dǎo)致全身多系統(tǒng)疾病的產(chǎn)生,這也解釋了食物特異性IgG抗體易出現(xiàn)于腸道菌群不健全的兒童[11]及其他自身免疫性疾病患者[12-13]中的原因。另有研究表明食物特異性IgG抗體的滴度與腸道通透性生物標(biāo)志物抗脂多糖呈正相關(guān)[14],說(shuō)明通過(guò)測(cè)定食物特異性IgG抗體的滴度可以反映漏腸的嚴(yán)重程度,間接反映了機(jī)體可能發(fā)生自身免疫性疾病的概率或嚴(yán)重程度。本研究中,TPOAb的滴度高度增高組中雞蛋特異性IgG抗體滴度明顯高于TPOAb的滴度輕、中度增高組,TPOAb的滴度與雞蛋特異性IgG抗體滴度呈弱正相關(guān),說(shuō)明了食物特異性IgG抗體的滴度可以在一定程度上反映HT患者甲狀腺受損的程度。由此,可以給臨床醫(yī)生在診治HT疾病中提供新的思路和依據(jù),如發(fā)現(xiàn)HT的致病誘因,調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)、減少特異性IgG抗體的滴度增高的食物的攝入,注意腸道的黏膜屏障的保護(hù)等等,從而減輕HT患者的癥狀及減緩疾病的發(fā)展。

食物特異性IgG抗體與多種自身免疫性疾病相關(guān),能否通過(guò)控制飲食減少自身免疫性疾病的癥狀或發(fā)生率呢?Gargano等[15]對(duì)食物過(guò)敏和不耐受的患者進(jìn)行了營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題的敘述性回顧中指出對(duì)免疫和非免疫介導(dǎo)的食物誘導(dǎo)疾病進(jìn)行正確的診斷方法和飲食控制可能會(huì)最大限度地減少這些患者的營(yíng)養(yǎng)差距,從而有助于改善他們的生活質(zhì)量并降低其管理的經(jīng)濟(jì)成本;Laing[16]等認(rèn)為個(gè)性化飲食方法的管理對(duì)由食物不耐受導(dǎo)致的炎癥性腸病起到了很好的保護(hù)作用;Coucke[12]也認(rèn)為應(yīng)該對(duì)每個(gè)患者進(jìn)行定制的個(gè)人飲食計(jì)劃,如果正確地遵循,可以緩解癥狀,并可能停止或減緩自身免疫疾病的進(jìn)展。同樣HT作為一種常見(jiàn)的自身免疫性甲狀腺疾病,本研究發(fā)現(xiàn)HT患者中普遍存在食物特異性IgG抗體增高的現(xiàn)象,那么通過(guò)飲食結(jié)構(gòu)調(diào)整、去除或減少高特異性IgG抗體食物的攝入,以及調(diào)整腸道菌群、修繕漏腸是否會(huì)起到減低TPOAb,減輕HT臨床癥狀甚至達(dá)到治愈疾病的作用呢,我們將在后續(xù)的工作中進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

綜上,本研究發(fā)現(xiàn)在HT患者中存在多種食物特異性IgG抗體增高的現(xiàn)象;食物特異性IgG抗體滴度增高的發(fā)生率在TPOAb中、高度增高組中明顯高于對(duì)照組,其中雞蛋特異性IgG抗體與橋本甲狀腺炎具有相關(guān)性;食物特異性IgG抗體反映了HT患者甲狀腺受損的程度,可能是HT發(fā)病的因素之一。