磷脂轉(zhuǎn)運蛋白在動脈粥樣硬化和代謝紊亂中作用的研究進(jìn)展*

張心怡， 張 科， 于 楊

［1山東第一醫(yī)科大學(xué)（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）附屬省立醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250021；2山東第一醫(yī)科大學(xué)（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）實驗動物學(xué)院（省實驗動物中心），山東 濟(jì)南 250117；3山東第一醫(yī)科大學(xué)（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）臨床與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院， 山東 濟(jì)南 250117］

磷 脂 轉(zhuǎn) 運 蛋 白（phospholipid transfer protein，PLTP）是循環(huán)內(nèi)介導(dǎo)脂蛋白代謝的重要蛋白之一，其血漿活性與多種代謝性疾病或動脈粥樣硬化性心血管疾病相關(guān)。本文就PLTP 的生物學(xué)特性及其與糖脂代謝、動脈粥樣硬化和血栓等病理過程相關(guān)的研究進(jìn)展、研究前景和臨床潛在應(yīng)用進(jìn)行介紹。

1 PLTP的基因信息與表達(dá)

小鼠的成熟PLTP 與人的PLTP 氨基酸數(shù)目相同，全序列有83%同源性，可表達(dá)區(qū)域序列同源性86%。PLTP表達(dá)廣泛，組織間表達(dá)水平差別較大，且種屬間差別明顯［1］：PLTP在人類子宮、膽囊、膀胱、卵巢等表達(dá)水平高，在小鼠則是肺、皮下脂肪、乳腺、性腺周脂肪、膀胱等器官或組織高表達(dá)（圖1）。

Figure 1.The expression profile of phospholipid transfer protein （PLTP） in human and adult mice.A： human PLTP mRNA expression profile obtained after RNA-seq was performed on 27 tissues of 95 subjects； B： the PLTP mRNA expression profile of 22 tissues in adult mice from the Mouse ENCODE project.圖1 人和成年小鼠的PLTP表達(dá)譜

1.1 PLTP 的基因信息與表達(dá)調(diào)控 人PLTP 的cDNA 全長1 750個核苷酸，包括一個1 518個核苷酸的開放閱讀框和184個核苷酸的3'-非翻譯區(qū)（3'-untranslated region， 3'-UTR）［2］（圖2A）。小 鼠 成 熟PLTP 與人PLTP 氨基酸數(shù)目相同，3'-UTR 差別略大［3］（圖2B）。人和小鼠PLTP基因的啟動子區(qū)位于-245 和-69 之間，負(fù)責(zé)啟動子的全部活性，包括多個AP2和Sp1位點參與PLTP 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。生理因素和病理刺激可在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控PLTP 表達(dá)或改變PLTP 活性：缺氧干預(yù)、葡萄糖和膽酸能刺激PLTP 表達(dá)上調(diào)［4］；脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）刺激和胰島素能降低PLTP 表達(dá)［5-6］。PLTP 受過氧化物酶體增殖物激活受體（peroxisome proliferator-activated receptor，PPAR）和法尼酯X 激活受體（farnesoid X-activated receptor， FXR）的調(diào)控，DNA 序列分析表明，-859 至-847 和-309 至-297 的DNA 序列與PPAR 的潛在結(jié)合基序相似，-407 至-395 和-393 至-381 的DNA 序列與FXR的識別基序同源［7］。

Figure 2.The locus information of phospholipid transfer protein （PLTP）.A： human PLTP （gene ID： 5360）； B： mouse PLTP （gene ID： 18830）.Red arrows indicate the direction of transcription.All information was obtained from NCBI Gene.圖2 磷脂轉(zhuǎn)運蛋白基因位點信息

肝X 受體（Liver X receptor， LXR）能上調(diào)PLTP表達(dá)，PLTP啟動子含有LXR 反應(yīng)元件。瞬時轉(zhuǎn)染LXR/類視黃醇X 受體（retinoid X receptor， RXR）實驗證明，LXR 和RXR 能形成異源二聚體并誘導(dǎo)PLTP表達(dá)；LXR激動劑能通過激活固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c（sterol regulatory element-binding protein-1c， SREBP-1c）途徑啟動PLTP轉(zhuǎn)錄［8］。p53可與指定p53反應(yīng)元件中的基因啟動子結(jié)合，從而增加PLTP轉(zhuǎn)錄，增強(qiáng)PLTP的分泌［9］。

生理狀態(tài)下血漿PLTP 來源包括巨噬細(xì)胞、脂肪組織、肝臟和肺臟等。不同組織特異性敲除PLTP對血漿PLTP 活性的影響，通常是雜合F1 個體或腺相關(guān)病毒干預(yù)之后的表現(xiàn)，并非長期穩(wěn)定的可遺傳表型。因此探究PLTP 的生理學(xué)或病理生理學(xué)作用，需結(jié)合合適的模型、種屬間的表達(dá)差異，并輔以適當(dāng)?shù)蔫b定方法來進(jìn)行綜合考量。

1.2 PLTP 的表達(dá)譜與蛋白結(jié)構(gòu) PLTP 含476 個氨基酸殘基，其中有6 個N 末端糖基化修飾位點，不同程度的糖基化修飾后，表現(xiàn)出不同的分子量（約55或81 kD）［2］。人和小鼠PLTP 均有42%左右的氨基酸殘基屬于疏水結(jié)構(gòu)，因此PLTP 能夠非特異性轉(zhuǎn)運多種雙性分子，如磷脂、游離膽固醇、α-生育酚、鞘氨醇-1-磷酸（sphingosine-1-phosphate， S1P）等［10-11］。人血漿中的PLTP 有含載脂蛋白AI（apolipoprotein AI，apoAI）的高活性復(fù)合物（約140 kD）和含載脂蛋白E（apolipoprotein E， apoE）的低活性復(fù)合物（約520 kD）兩種形式存在，但在人腦脊液中及家兔和小鼠體內(nèi)均未檢測到類似復(fù)合物［12-14］。

PLTP 屬于脂質(zhì)轉(zhuǎn)運家族，具有類似香蕉的外形，N末端和C末端桶狀結(jié)構(gòu)連接形成轉(zhuǎn)運脂質(zhì)分子的疏水通道［15-16］。該家族還包括殺菌通透性增強(qiáng)蛋白（bactericidal permeability-increasing protein， BPI）、LPS結(jié)合蛋白（LPS-binding protein， LBP）和膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（cholesterol ester transfer protein， CETP），上述三者的晶體結(jié)構(gòu)均已被闡明，只有PLTP 蛋白結(jié)構(gòu)尚未被完全解析（圖3）。

Figure 3.Structures of lipid transfer protein superfamily.All the information comes from Protein Data Bank （PDB）.BPI： bactericidal permeability-increasing protein （PDB ID： 1EWF）； CETP： cholesterol ester transfer protein （PDB ID： 2OBD）； LBP： lipopolysaccharide-binding protein （PDB ID： 4M4D）； PLTP： phospholipid transfer protein.圖3 脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白超家族的結(jié)構(gòu)

2 PLTP與代謝的研究

PLTP 參與脂代謝和糖代謝，其水平與血漿甘油三酯和apoB 水平成正比，并參與血漿脂蛋白分泌、胰島素抵抗和葡萄糖耐受性的調(diào)節(jié)。

2.1 PLTP與脂代謝的關(guān)系

2.1.1 PLTP 活性影響含apoB、富含甘油三酯的脂蛋白的分泌 PLTP 能促進(jìn)肝臟含apoB 脂蛋白（apoB-containing lipoprotein， BLp）酯化，協(xié)助極低密度脂蛋白（very low-density lipoprotein， VLDL）分泌；PLTP敲除（PLTPknockout，PLTP-KO）小鼠VLDL 分泌缺陷［17-18］；過表達(dá)PLTP 能促進(jìn)肝臟VLDL 過度產(chǎn)生［19-20］。人PLTP 過表達(dá)的兔血漿低密度脂蛋白（low-density lipoprotein， LDL）顯著增加［21］。機(jī)制研究表明，PLTP 活性對BLp 結(jié)合率及小鼠肝臟BLp 組裝始動非常重要；PLTP 抑制劑能顯著減少肝細(xì)胞BLp 分泌［22］?；谌祟惾蚪M關(guān)聯(lián)研究（Genome-Wide Association Studies， GWAS），人PLTP 水平與血漿甘油三酯和apoB 水平正相關(guān)［23］。通過抑制微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白阻止VLDL 分泌和敲除甲硫氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶或超氧化物歧化酶的小鼠會造成肝脂堆積，但在小鼠模型PLTP缺乏能顯著減少BLp 分泌而不會有肝脂堆積的后果［17］。因此抑制PLTP 可能成為中度脂質(zhì)異?；颊邷p少VLDL 分泌的替代治療手段。

PLTP 能在脂蛋白之間以及脂蛋白和細(xì)胞間轉(zhuǎn)運維生素E（vitamin E， VE），PLTP-KO小鼠LDL上富含VE，能抵抗銅離子誘導(dǎo)的氧化，且誘導(dǎo)單核細(xì)胞趨化活性也較低［24-25］，而從PLTP轉(zhuǎn)基因（PLTPtransgenic，PLTP-Tg）小鼠獲得的LDL 有相反效應(yīng)［26］。PLTP缺乏的巨噬細(xì)胞在氧化LDL（oxidized LDL， ox-LDL）存在時堆積大量膽固醇，補(bǔ)充VE 則使巨噬細(xì)胞膽固醇水平恢復(fù)正常［27］。PLTP缺乏的肝細(xì)胞分泌更少的BLp，這與VE 缺乏介導(dǎo)的氧化應(yīng)激引起B(yǎng)Lp 過早降解有關(guān)［28］。因此PLTP 在細(xì)胞內(nèi)的作用可能與細(xì)胞VE水平和氧化應(yīng)激有關(guān)。

2.1.2 PLTP的轉(zhuǎn)脂作用 PLTP轉(zhuǎn)脂活性的定義是將磷脂從富含甘油三酯的BLp（包括乳糜微粒和VLDL）轉(zhuǎn)到高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL），并介導(dǎo)磷脂在脂蛋白之間的轉(zhuǎn)運［16］。PLTP作為加速HDL 代謝的促融合因子，其轉(zhuǎn)運磷脂活性對HDL 顆粒的增大和HDL 甘油三酯內(nèi)核的變大十分重要［29］。PLTP-KO 小鼠膽固醇逆轉(zhuǎn)運（reverse cholesterol transport， RCT）降低，雖然CETP不能補(bǔ)償PLTP缺乏，但肝臟特異性表達(dá)CETP 可改善小鼠的RCT［30］。

PLTP-KO 小鼠多種磷脂轉(zhuǎn)運活性全部喪失，轉(zhuǎn)運游離膽固醇活性部分喪失，因此從PLTP-KO 小鼠獲得的HDL 磷脂很少而蛋白含量豐富，普通飼料條件下，PLTP-KO 小鼠HDL 和apoAI 顯著下降［31］。低水平表達(dá)人PLTP的小鼠pre-β-HDL顯著增加。腺病毒和腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的肝臟過表達(dá)PLTP 能顯著增加血漿PLTP 活性，這些小鼠的α-HDL 顯著減少而pre-β-HDL 水平增加?？傊?，PLTP-KO 和PLTP過表達(dá)小鼠HDL 膽固醇都顯著下降，這種現(xiàn)象對人的血脂調(diào)節(jié)意義有待深入探究。

S1P 由鞘氨醇經(jīng)磷酸化形成，是通過5 種S1P 膜受體發(fā)揮作用的脂質(zhì)信號分子。S1P 具有抗動脈粥樣硬化特性，S1P的梯度有利于淋巴細(xì)胞從淋巴器官出發(fā)，并通過S1P1和S1P3受體促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞生存并抑制凋亡；另一方面，S1P 通過巨噬細(xì)胞S1P2 受體激活核因子κB 促進(jìn)趨化，并刺激巨噬細(xì)胞和（或）單核細(xì)胞中腫瘤壞死因子α 的產(chǎn)生［32-33］。HDL 是血漿S1P 的主要載體，通過載脂蛋白M（apolipoprotein M，apoM）與S1P結(jié)合，apoM-S1P能增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞屏障作用［34］。血漿蛋白中，PLTP、apoM 和清蛋白等均參與調(diào)節(jié)血漿S1P 分布和代謝。apoM敲除小鼠血漿S1P降低約45%，全身敲除清蛋白使血漿S1P 降低約33%［34-35］。PLTP-Tg 小鼠血漿S1P 含量較野生型小鼠下降21.1%，HDL 組分中S1P 含量下降約35.1%，而LDL組分中S1P比例則增加了127.4%［36］。還有研究表明，PLTP缺乏后血漿S1P下降超過50%，初步證明PLTP能從紅細(xì)胞源性S1P轉(zhuǎn)運至HDL，提示PLTP是血漿脂蛋白上S1P 的重要決定因素［11］。這些研究為PLTP在調(diào)控S1P介導(dǎo)血管壁細(xì)胞功能中的作用提供了更多機(jī)制證據(jù)［37］。

2.2 PLTP與糖代謝異常相關(guān)疾病的關(guān)系 PLTP在一些病理狀態(tài)下（如肥胖［38-39］、胰島素抵抗［40］和II 型糖尿?。┍磉_(dá)會增高。PLTP-KO 能顯著降低高脂飼料誘導(dǎo)的肥胖和胰島素抵抗，機(jī)制分析表明PLTP缺乏能顯著增強(qiáng)胰島素刺激后小鼠肝、脂肪和肌肉組織胰島素受體和Akt 磷酸化水平，質(zhì)膜上的GLUT4蛋白也顯著增加［41］。PLTP 在棕色脂肪組織（brown adipose tissue， BAT）表達(dá)水平是白色脂肪組織的6倍左右，將BAT 相關(guān)基因敲除后，血漿PLTP 活性降低超過50%［4］，提示BAT 可能是血漿PLTP 的又一重要來源。全身性或BAT 特異性過表達(dá)PLTP，可顯著改善葡萄糖耐量和胰島素敏感性，增加能量消耗，降低循環(huán)內(nèi)膽固醇、磷脂和鞘脂水平，并減輕飲食誘導(dǎo)的體重增加。這種變化還伴隨著循環(huán)中膽汁酸的增加，反過來又增強(qiáng)了BAT中的葡萄糖攝取和產(chǎn)熱，血漿膽汁酸升高還能激活G 蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體TGR5，激活FXRα并減輕肥胖［42］，這種作用有助于調(diào)節(jié)全身葡萄糖和脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)［4］。PLTP過表達(dá)后小鼠白色脂肪重量顯著減少［4］。BAT-less小鼠（PPARγ被選擇性敲除后，小鼠肩胛間BAT顯著小于同窩對照）循環(huán)內(nèi)PLTP 活性下降58.1%，提示該模型循環(huán)內(nèi)PLTP 的重要來源是BAT。使PLTP 轉(zhuǎn)脂活性大幅下降（血漿PLTP 總量不變，轉(zhuǎn)脂活性下降35%以上）再進(jìn)行BAT 過表達(dá)，此時能量消耗和血漿膽汁酸增加都不再出現(xiàn)［4］。

與低脂飲食的野生型和PLTP-KO 小鼠相比，高脂飲食導(dǎo)致更高的葡萄糖水平，PLTP缺乏引起磷脂轉(zhuǎn)運功能障礙，高脂飲食下PLTP-KO 小鼠表現(xiàn)出胰島素敏感性下降，在基礎(chǔ)條件下表現(xiàn)出略高的胰島素血癥，在葡萄糖強(qiáng)飼后變得顯著［43］。上述研究證明PLTP 不僅參與脂代謝，還能參與糖代謝并影響機(jī)體能量代謝調(diào)控。

2.3 PLTP 影響類固醇激素調(diào)節(jié) 糖皮質(zhì)激素是腎上腺合成的類固醇激素，可促進(jìn)對壓力的生理反應(yīng)。HDL 是小鼠糖皮質(zhì)激素合成的主要膽固醇來源。PLTP-KO 引起HDL 含量下降，與野生型小鼠相比，PLTP-KO 小鼠血漿中的總膽固醇水平顯著降低，但低膽固醇血癥PLTP-KO小鼠對食物剝奪表現(xiàn)出正常的糖皮質(zhì)激素反應(yīng)［44］。這說明HDL缺乏對小鼠腎上腺糖皮質(zhì)激素輸出的影響是模型依賴性的，暗示HDL 以外的其他膽固醇來源也可以產(chǎn)生腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞中用來合成糖皮質(zhì)激素的成分。

3 PLTP與動脈粥樣硬化和血栓形成的關(guān)系

多項人群研究證明心血管疾病發(fā)病率與血漿PLTP 活性正相關(guān)。較多的機(jī)制研究證實PLTP 參與動脈粥樣硬化形成和血栓形成。

3.1 PLTP 與動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的研究 兩種PLTP單核苷酸多態(tài)性結(jié)果評估表明，較低的肝臟PLTP轉(zhuǎn)錄和較低水平的PLTP 活性能降低心血管疾病發(fā)病率［45］。ox-LDL是動脈粥樣硬化進(jìn)展的關(guān)鍵因素，ox-LDL 與受體結(jié)合后，刺激單核-巨噬細(xì)胞攝取大量ox-LDL，產(chǎn)生泡沫細(xì)胞和大量炎癥因子，引起一系列炎癥反應(yīng)，推動動脈粥樣硬化的發(fā)展［46］。刺激狀態(tài)下，肺泡上皮細(xì)胞能促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor β1， TGF-β1）合成，激活Smad3-Ras-ERK 通路，并誘導(dǎo)PLTP 表達(dá)［47］。香煙提取物能誘導(dǎo)PLTP 表達(dá)，并通過激活TGF-β1/cyclin D1/CDK4 途徑改變肺泡上皮細(xì)胞周期［48］。血漿PLTP 活性增高與男子首次心血管事件（定義為致命或不致命的冠心病與中風(fēng)）正相關(guān)［49］，并與人類左心室收縮功能失常正相關(guān)［50-51］。針對射血分?jǐn)?shù)保留型心力衰竭病人采用螺內(nèi)酯治療后的血漿蛋白組學(xué)分析表明，螺內(nèi)酯組PLTP 含量顯著降低［52］，提示一些病理狀態(tài)時，某些藥物能參與PLTP的調(diào)控。

針對170 位心血管疾病高風(fēng)險的糖尿病男性患者研究表明，血漿PLTP 活性與5 年死亡率獨立正相關(guān)［53］。相反的報道顯示，PLTP 水平在一小群心血管疾病患者中比對照組降低［54］。目前已知的是血漿PLTP 活性與心血管疾病相關(guān)性更明確［55-56］。煙酸可增加血漿HDL膽固醇并降低LDL膽固醇和甘油三酯水平，而在他汀類藥物治療中加入煙酸，頸動脈斑塊組成（carotid plaque composition）和低HDL/高甘油三酯代謝綜合征動脈粥樣硬化血栓形成干預(yù)組中PLTP 顯著升高，導(dǎo)致與動脈粥樣硬化風(fēng)險增加相關(guān)的多種HDL 蛋白水平升高，增加與動脈粥樣硬化發(fā)生相關(guān)的蛋白質(zhì)的豐度［57］，這為煙酸治療無法降低動脈粥樣硬化的風(fēng)險提出了可能的解釋。

小鼠系統(tǒng)性PLTP缺乏減輕動脈粥樣硬化［17］，而小鼠和家兔模型PLTP過表達(dá)均表現(xiàn)出促動脈粥樣硬化的作用［21，26，58-59］。血漿PLTP 介導(dǎo)脂質(zhì)從VLDL轉(zhuǎn)移到HDL，誘導(dǎo)性PLTP缺乏顯著降低了VLDL5（最小的VLDL 顆粒）的甘油三酯水平，對所有HDL顆粒的減少產(chǎn)生了更深遠(yuǎn)的影響，血漿總膽固醇和甘油三酯也顯著降低，可防止動脈粥樣硬化進(jìn)展，并促進(jìn)動脈粥樣硬化消退［60］。弗林蛋白酶（furin）可與細(xì)胞內(nèi)PLTP 相互作用，促進(jìn)其泛素化和蛋白酶體降解，導(dǎo)致肝細(xì)胞PLTP 分泌減少，顯著減輕動脈粥樣硬化，降低血漿非HDL 膽固醇水平［61］。上述研究證明，通過抑制肝臟PLTP 調(diào)控血脂可能是一類很有前景的動脈粥樣硬化疾病防治手段。

3.2PLTP缺乏可減輕血栓形成 系統(tǒng)性PLTP缺乏與血栓形成反應(yīng)下降也有關(guān)聯(lián)［62］。PLTP缺乏能減少腹主動脈瘤的發(fā)生幾率［63］。PLTP-KO 小鼠凝血時間延長，這與紅細(xì)胞內(nèi)VE 減少引起的磷酯酰絲氨酸（phosphatidylserine， PS）外翻減少有關(guān)［64］。PLTP缺乏能減弱氧化應(yīng)激引起的血栓形成反應(yīng)［62］。也有研究表明，PLTP 表現(xiàn)出抗血小板作用［65-66］。血小板在膠原激活時和剪切力誘導(dǎo)激活時能大量釋放PLTP［67］，釋放的PLTP 有助于血小板內(nèi)膜的PS 外翻，進(jìn)一步加速血小板聚集。在氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的小鼠血栓腦梗模型中，PLTP-KO 小鼠的梗死面積明顯小于野生型小鼠，而PLTP-Tg 小鼠的梗死面積則明顯大于野生型小鼠，進(jìn)一步證明PLTP 促進(jìn)血小板聚集。但是PLTP 以何種方式存在于血小板中，其調(diào)控方式是怎樣的，有待深入研究。

4 結(jié)語與展望

PLTP 在動脈粥樣硬化性心血管疾病發(fā)生發(fā)展中起到明確的促進(jìn)作用，可能涉及的機(jī)制包括血脂代謝異常、糖代謝異常、炎癥、血栓形成等。PLTP 在多種細(xì)胞表達(dá)并留存細(xì)胞內(nèi)，但其細(xì)胞內(nèi)功能仍不明確。目前已有多種體內(nèi)外研究表明，抑制PLTP 是治療血脂異常和心血管疾病的有效靶點。PLTP 在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)［68］和原發(fā)性肺腺癌患者的呼出顆粒［69］中均存在，提示體液中的PLTP 可能是一種與炎癥高度相關(guān)的蛋白成分，與疾病演變和預(yù)后有密切聯(lián)系。能否通過限制PLTP 來獲得抗炎和調(diào)脂作用，進(jìn)而產(chǎn)生有效的心血管保護(hù)作用，或?qū)LTP作為生物標(biāo)志物對前述疾病的診療提供幫助，需要更多的研究來證實。同時不能忽視系統(tǒng)PLTP缺乏降低LPS 的中和及清除能力、中樞神經(jīng)系統(tǒng)PLTP缺乏對空間學(xué)習(xí)記憶能力的損害等負(fù)面影響（圖4）。

Figure 4.The "Yin" and "Yang" of phospholipid transfer protein （PLTP）.LPS： lipopolysaccharide； BLp： apolipoprotein B-containing lipoprotein.PLTP is widely expressed in the body and has different pathophysiological effects in various systems， organs and tissues.This figure briefly summarizes the research progress of PLTP-KO or reduced activity and its overexpression or increased activity in different disease states or models.圖4 磷脂轉(zhuǎn)運蛋白的“陰陽”兩面

綜上所述，監(jiān)測血漿PLTP 活性可作為一些疾病的預(yù)后指標(biāo)；抑制PLTP 在代謝和動脈粥樣硬化等慢病過程中的不良作用，并注意在膿毒癥和學(xué)習(xí)記憶方面保留PLTP 的積極作用，是基于PLTP 為調(diào)控靶點開展機(jī)制研究和藥物研發(fā)的關(guān)鍵。