徐昕宇 虞嘯炫 宋云霄

(1.上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 上海 200031；2.上海市臨床檢驗(yàn)中心 上海 200031)

年齡相關(guān)性黃斑變性 (age-related macular degeneration,AMD)是與年齡密切相關(guān)的黃斑視網(wǎng)膜變性疾病，是全球范圍內(nèi)不可逆致盲的主要病因之一[1]。到2040 年，全球AMD 患病人數(shù)預(yù)計(jì)將增加至3 億人左右[2]，將給社會(huì)和醫(yī)療行業(yè)帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)。根據(jù)臨床表現(xiàn)和病理改變不同，可將AMD分為干性和濕性。干性AMD 多發(fā)生于50 歲以上的老年人，起病緩慢，患者視力減退隱匿，臨床發(fā)現(xiàn)時(shí)多已發(fā)展到晚期。因此，如何識(shí)別干性AMD發(fā)生、發(fā)展的危險(xiǎn)因素是目前臨床醫(yī)師面臨的巨大挑戰(zhàn)。

干性AMD 的發(fā)病機(jī)制仍不明確。近年來(lái)，眾多研究[3-6]發(fā)現(xiàn)，AMD 患者臨床常規(guī)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)存在異常。Pinna等[4]研究發(fā)現(xiàn)，AMD 組患者白細(xì)胞(WBC)、單核細(xì)胞(M)、中性粒細(xì)胞(NE)、血小板(PLT)、平均血小板體積(MPV)水平均低于對(duì)照組(P＜0.05)。羅中伶等[5]研究發(fā)現(xiàn)，平均紅細(xì)胞體積(MCV)和紅細(xì)胞比容(HCT)水平升高是AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素。以上研究[3-6]均提示，AMD 患者體內(nèi)存在臨床常規(guī)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的異常。同時(shí)基于干性AMD起病緩慢、發(fā)病隱匿等臨床特點(diǎn)，本研究開(kāi)展病例對(duì)照研究，擬探索臨床檢驗(yàn)常規(guī)數(shù)據(jù)與干性AMD的相關(guān)性，尋找干性AMD 發(fā)生、發(fā)展的危險(xiǎn)因素，以期為AMD 早發(fā)現(xiàn)、早治療提供一定的臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料

本研究招募2017 年1 月—2022 年12 月于上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院就診并診斷為干性AMD 的患者作為病例組，收集同時(shí)間段在本院體檢的人群作為對(duì)照組。收集2 組性別、年齡、病史及臨床常規(guī)數(shù)據(jù)。共收集干性AMD 患者223 例，正常對(duì)照組420 例。干性AMD 病例組年齡為(67.85±14.76)歲，其中男性111 例、女性112 例；對(duì)照組年齡為(67.10±7.68)歲，其中男性188 例、女性232 例。本研究所有研究對(duì)象均簽署《知情同意書(shū)》，經(jīng)上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

干性AMD 組納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＞45 歲；②均自愿參加本試驗(yàn)研究；③符合干性AMD 診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有嚴(yán)重眼病史，包括角膜疾病、眼外傷和嚴(yán)重白內(nèi)障；②相關(guān)臨床信息缺失；③患有各種良惡性腫瘤、急性感染等系統(tǒng)性疾??；④濕性AMD 患者。

對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＞45 歲；②均自愿參加本試驗(yàn)研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有嚴(yán)重眼病史，包括AMD、角膜疾病、眼外傷和嚴(yán)重白內(nèi)障；②相關(guān)體檢信息缺失；③患有各種良惡性腫瘤、急性感染等系統(tǒng)性疾病。

1.3 數(shù)據(jù)收集

采集所有研究對(duì)象空腹靜脈采血2 mL，運(yùn)用全自動(dòng)血球分析儀(邁瑞B(yǎng)C-6800，全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀)檢測(cè)NE、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血小板比容(PCT)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、血小板分布寬度(PDW)、血紅蛋白(HB)、嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)、嗜堿性粒細(xì)胞(BASO)、MPV、淋巴細(xì)胞(LYM)、HCT、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞平均分布寬度(RDW)、MCV、MPV、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

運(yùn)用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用Kolmogorov-Smirnov 檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性分析。根據(jù)數(shù)據(jù)分布類(lèi)型，2 組間數(shù)據(jù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)(正態(tài)分布)或秩和檢驗(yàn)(非正態(tài)分布)。采用Logistic 回歸分析臨床常規(guī)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)與干性AMD發(fā)病的危險(xiǎn)因素。采用LASSO 回歸對(duì)納入的變量進(jìn)行篩選。繪制受試者工作特征曲線(ROC)，通過(guò)計(jì)算曲線下面積(AUC)來(lái)評(píng)估臨床常規(guī)數(shù)據(jù)對(duì)干性AMD 的診斷效能。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本資料

本研究共納入干性AMD 患者223 例、對(duì)照組420 例，2 組間年齡和性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。NE、RBC、PLT、HB、EOS、BASO、LYM、HCT、MPV、WBC、RDW、MCV、MCHC水平在干性AMD 組和對(duì)照組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 2組間臨床常規(guī)參數(shù)比較

2.2 Logistic 回歸分析及LASSO 回歸分析

Logistics 回歸分析顯示，NE、RBC、PDW、EOS、MCV、HCT、MCHC 是干性AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素。校正年齡后，NE、RBC、PDW、EOS、MCV、HCT、MCHC 是干性AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素。校正年齡、性別后，NE、RBC、PDW、EOS、MCV、HCT、MCHC 是干性AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素，詳見(jiàn)表2。

表2 干性AMD發(fā)病危險(xiǎn)因素的Logistic回歸分析

將所有臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)納入LASSO 回歸分析，顯示NE、RBC、RDW、EOS 四項(xiàng)臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)是干性AMD 的特征性指標(biāo)，公式為Y=0.081 94×NE-0.264 16×RBC-0.481 45×EOS+0.013 68×RDW_CV。詳見(jiàn)圖1。

圖1 LASSO回歸分析篩選干性AMD特征性指標(biāo)

2.3 臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)診斷干性AMD 的ROC 曲線分析

在Logistic 回歸和LASSO 回歸分析基礎(chǔ)上，ROC曲線分析NE、RBC、PDW、EOS、MCV、HCT、MCHC 在干性AMD 中的診斷價(jià)值。ROC 曲線分析顯示，NE、RBC、PDW、EOS、MCV、HCT、MCHC對(duì)干性AMD 均有一定診斷價(jià)值，詳見(jiàn)表3。以LASSO 回歸模型納入特征性指標(biāo)(NE、RBC、RDW、EOS)繪制ROC 曲線，曲線下面積為0.701，敏感度為0.874 5，特異度為0.776 9，詳見(jiàn)圖2。

圖2 LASSO回歸模型納入特征性指標(biāo)的ROC曲線

表3 ROC曲線分析

3 討論

本研究通過(guò)開(kāi)展大樣本橫斷面病例對(duì)照研究探討臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)與干性AMD 的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)NE、RBC、PDW、EOS、MCV、HCT、MCHC 是干性AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素。其中NE、RBC、EOS和RDW 是干性AMD 發(fā)病的特征性指標(biāo)，其診斷干性AMD 的曲線下面積為0.701。本研究結(jié)果提示，臨床檢驗(yàn)常規(guī)數(shù)據(jù)與干性AMD 具有顯著的相關(guān)性，臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)異常可能是干性AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素。

近年來(lái)，眾多研究探討AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素[7-9]。例如劉歡等[7]通過(guò)開(kāi)展Meta 分析顯示：吸煙、飲酒、低文化水平、高血壓是我國(guó)人群發(fā)生AMD 的危險(xiǎn)因素，攝入抗氧化劑、戶外避光、食用水果多是我國(guó)人群發(fā)生AMD 的保護(hù)因素。陳國(guó)富[10]的研究未發(fā)現(xiàn)維生素B12、葉酸、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、空腹血糖、糖化血紅蛋白與AMD 之間具有相關(guān)性。相關(guān)學(xué)者也嘗試探索小樣本或單個(gè)常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)與AMD的相關(guān)性。例如柳辰[11]開(kāi)展小樣本病例對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)，濕性AMD 患者較正常人外周血中淋巴細(xì)胞百分比低，NE 與LYM 比值高。謝洪濤等[12]研究發(fā)現(xiàn)，AMD 患者全血黏度、PLT、PDW 等指標(biāo)均較治療前明顯降低(P＜0.05)。以上研究均提示臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)可能與AMD 的發(fā)生、發(fā)展具有相關(guān)性。而仍缺乏系統(tǒng)性探索臨床常規(guī)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)與干性AMD 的相關(guān)性。本研究系統(tǒng)性檢測(cè)干性AMD 患者臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)，進(jìn)一步明確了臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)與干性AMD 的發(fā)生發(fā)展具有相關(guān)性。

雖然AMD 的發(fā)病機(jī)制暫不明確，但諸多基礎(chǔ)研究及臨床研究提示AMD 與炎癥、免疫等因素相關(guān)[13-14]。因此，干性AMD 患者存在常規(guī)臨床檢驗(yàn)指標(biāo)變化的可能機(jī)制如下。①慢性炎癥是AMD 病變的關(guān)鍵機(jī)制[15]，患者體內(nèi)存在補(bǔ)體系統(tǒng)的異常激活[16]，會(huì)引起機(jī)體系列免疫、炎癥反應(yīng)。臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)主要反映機(jī)體內(nèi)的炎癥狀態(tài)，因此AMD 患者體內(nèi)存在臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)的變化并與AMD 具有顯著的相關(guān)性。②AMD 患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激系統(tǒng)功能的紊亂[17]，而臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)可反應(yīng)機(jī)體內(nèi)的氧化應(yīng)激狀態(tài)。綜上，臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)異?？赡苁歉尚訟MD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素。

本研究也存在一些不足之處。①數(shù)據(jù)均來(lái)源于上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院，樣本量不充足，且可能存在地域偏差，需要外部驗(yàn)證來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證本研究結(jié)果。②干性AMD 患者存在不同的病情階段和病因，由于樣本量不夠充足，因此收集的樣本并未區(qū)分疾病嚴(yán)重程度。③本研究只納入了干性AMD 患者，是否臨床常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)與濕性AMD 患者具有相關(guān)性值得進(jìn)一步研究。因此，仍需要多中心、大樣本、前瞻性研究來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證本研究結(jié)論。

綜上所述，干性AMD 患者體內(nèi)存在常規(guī)檢驗(yàn)指標(biāo)的異常，外周血檢驗(yàn)指標(biāo)NE、RBC、RDW、EOS 水平異常可能是干性AMD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素。