易建華， 王 欽#， 王 輝， 宋慶洋，敖慧玲， 曹詩(shī)宜， 別漢晴， 張 彥， 戴晉軍

（1.農(nóng)業(yè)微生物資源發(fā)掘與利用全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北宜昌 443003；2.湖北省酵母功能湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北宜昌 443003）

近年來(lái)，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖密度的增加，魚(yú)類病害不斷增多，限制了漁獲產(chǎn)量的提升，嚴(yán)重威脅了魚(yú)類健康，制約了水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)的發(fā)展。酵母培養(yǎng)物（Yeast Culture）是由發(fā)酵底物、酵母細(xì)胞及其代謝物組成的復(fù)合發(fā)酵產(chǎn)物，含有核苷酸、肽、β-葡聚糖、 甘露糖低聚糖和其他免疫調(diào)節(jié)成分（Jensen等，2008），因此，其常被用作免疫增強(qiáng)劑。 酵母細(xì)胞壁中甘露聚糖（MOS）和β-葡聚糖的結(jié)構(gòu)成分有助于促進(jìn)免疫力。酵母培養(yǎng)物中的β-葡聚糖可以有效降低膽固醇（CHO）并激活巨噬細(xì)胞釋放各種免疫球蛋白，例如細(xì)胞因子和白細(xì)胞介素（Jayachandran 等，2018）。酵母培養(yǎng)物在提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)動(dòng)物消化酶活性、機(jī)體免疫力和腸道健康方面具有積極作用（冷向軍，2023）。 研究表明，酵母培養(yǎng)物可以顯著提高草魚(yú)、南美白對(duì)蝦、和大鱗副泥鰍等的生長(zhǎng)性能、消化酶活性、抗氧化能力和免疫力（李佑杰等，2021；李軍濤等，2018；劉明等，2017）。本試驗(yàn)以鯽魚(yú)為試驗(yàn)對(duì)象，在鯽魚(yú)基礎(chǔ)飼料中添加不同濃度的酵母培養(yǎng)物， 探討酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)生長(zhǎng)性能、血清生化、消化酶、抗氧化和免疫指標(biāo)的影響， 為其在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用及水產(chǎn)行業(yè)健康發(fā)展提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料 酵母培養(yǎng)物為安琪酵母股份有限公司提供（湖北，宜昌）。按照配方設(shè)計(jì)將飼料分為4 個(gè)組， 在基礎(chǔ)飼料中添加不同含量的酵母培養(yǎng)物，分別為對(duì)照組（CK）、0.1%酵母培養(yǎng)物添加組（S1）、0.3%酵母培養(yǎng)物添加組（S3）和0.5%酵母培養(yǎng)物添加組（S5）。 將原料粉碎過(guò)60 目篩，經(jīng)混合制粒膨化成3.0 mm 粒徑的顆粒飼料，冷藏儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）%

1.2 養(yǎng)殖試驗(yàn)和樣品采集 試驗(yàn)魚(yú)購(gòu)自湖北省當(dāng)陽(yáng)市某養(yǎng)殖場(chǎng)。 在分組前，進(jìn)行投喂2 周的商品料來(lái)馴化鯽魚(yú)。 挑選出300 尾健康活潑、規(guī)格均一且初始均質(zhì)量為（13.00±0.50）g 的試驗(yàn)鯽魚(yú)，設(shè)置4個(gè)處理，每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25 尾鯽魚(yú)。

試驗(yàn)地點(diǎn)為安琪生物農(nóng)業(yè)科技有限公司水產(chǎn)養(yǎng)殖基地。 在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)進(jìn)行養(yǎng)殖試驗(yàn)，試驗(yàn)鯽魚(yú)養(yǎng)殖容器的規(guī)格為200 cm×200 cm×100 cm。 養(yǎng)殖用水為經(jīng)過(guò)曝氣處理的自來(lái)水，水體24 h不間斷增氧，配有加熱裝置以維持鯽魚(yú)生長(zhǎng)較適宜的水溫。 養(yǎng)殖周期為8 周，每天投喂2 次（08：00~09：00 和17：00 ~ 18：00），并且定期對(duì)養(yǎng)殖用水進(jìn)行更換。 投餌量為鯽魚(yú)體重的1%~3%，之后依據(jù)每個(gè)試驗(yàn)組前一天的實(shí)際攝食量進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。每天察看鯽魚(yú)攝食狀況和死亡狀況并記錄，同時(shí)記錄每天的水溫。 飼養(yǎng)期間水溫 （26.00±2.00）℃，pH（7.05±0.52），溶解氧（7.78±0.13）mg/L。

攝食生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)束后， 所有試驗(yàn)魚(yú)空腹24 h，經(jīng)120 mg/L MS-222 麻醉后進(jìn)行稱重及計(jì)數(shù)。 每桶選5 尾魚(yú)，用ACD 抗凝劑浸潤(rùn)過(guò)的一次性注射器從尾靜脈中抽血，在4 ℃，用離心機(jī)以3500 r/min離心10 min 獲得血清，-70 ℃保存， 用于血清生化指標(biāo)檢測(cè)；取血后的5 尾魚(yú)被解剖獲取腸道，用于消化酶活性檢測(cè)； 取血后的5 尾魚(yú)被解剖獲取肝臟，稱重并計(jì)算肝體比，肝臟用于抗氧化酶活性及免疫應(yīng)答指標(biāo)檢測(cè)。

1.3 生化分析 血清生化指標(biāo)由宜昌市第一人民醫(yī)院測(cè)定：包括血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）、尿素（UREA）、葡萄糖（GLU）、總膽固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C） 、堿性磷酸酶（ALP）。腸道脂肪酶、胰蛋白酶和α-淀粉酶測(cè)定采用商業(yè)試劑盒（南京建成生物工程研究所，南京）。肝臟組織勻漿液蛋白含量（TP）、總超氧化物歧化酶（TSOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）及溶菌酶（LZM）等抗氧化及免疫指標(biāo)，相關(guān)試劑盒均來(lái)源于南京建成生物工程研究所。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 采用Minitab21.3.1.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行Tukey 檢驗(yàn)， 結(jié)果以 “平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”（mean±SE）表示，P < 0.05 代表顯著差異。 生長(zhǎng)性能相關(guān)計(jì)算公式如下：

式中：Nt為試驗(yàn)?zāi)~(yú)數(shù)量，尾；N0為魚(yú)初始數(shù)量， 尾；Wt為試驗(yàn)終末均體質(zhì)量，g；Wd為試驗(yàn)期間死亡魚(yú)均體質(zhì)量，g；W0為試驗(yàn)初始均體質(zhì)量，g；t 為試驗(yàn)天數(shù)，d；F 為總攝食量，g；L 為終末平均體長(zhǎng)，cm；Wz 為試驗(yàn)終末平均肝胰臟質(zhì)量，g；Wv 為試驗(yàn)終末平均內(nèi)臟團(tuán)質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，在基礎(chǔ)飼料中添加酵母培養(yǎng)物組鯽魚(yú)幼魚(yú)的終末體質(zhì)量、 增重率和特定生長(zhǎng)率顯著提高（P ＜0.05），其中S3 組終末體質(zhì)量、增重率和特定生長(zhǎng)率最高，分別提高了16.77%、34.67%和23.93%；三個(gè)處理組均能降低鯽魚(yú)幼魚(yú)的飼料系數(shù)（P ＜0.05），其中S3 組飼料系數(shù)最低，降低了34.72%；與CK 組相比，S5 組鯽魚(yú)幼魚(yú)的肝體比和肥滿度顯著增加（P ＜0.05），分別增加31.58%和24.10%，S3 組鯽魚(yú)幼魚(yú)的肥滿度顯著增加20.51%（P ＜0.05）。 但各組間存活率和臟體比等差異不顯著（表2）。

表2 酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)血清生化的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后， 血清中尿素、總蛋白、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、血糖含量無(wú)顯著性差異。 與對(duì)照組相比，S1 組鯽魚(yú)的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶顯著升高38.45%（P ＜0.05） 和堿性磷酸酶顯著升高47.87%（P ＜0.05），S3 組鯽魚(yú)的血清甘油三酯顯著降低24.40%（P ＜0.05） 和堿性磷酸酶顯著升高90.06%（P ＜0.05），S5 組鯽魚(yú)的血清白蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶顯著升高（P ＜0.05），分別升高19.17%、56.23%、267.42%和58.48%，S5 組鯽魚(yú)的血清低密度脂蛋白膽固醇顯著降低35.25%（P ＜0.05）；S3 組鯽魚(yú)的血清甘油三酯也顯著低于S1 組（P ＜0.05）（表3）。

表3 酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)血清生化的影響

2.3 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)腸道消化酶活性的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，與對(duì)照組相比，S3 組鯽魚(yú)幼魚(yú)的腸道脂肪酶和胰蛋白酶顯 著 升 高 （P ＜0.05）， 分 別 提 高398.46%和307.40%， 并具有提高鯽魚(yú)幼魚(yú)腸道α-淀粉酶的趨勢(shì)，但差異不顯著（P ＞0.05），S5 組鯽魚(yú)腸道脂肪酶顯著升高267.70%（P ＜0.05）；S3 組鯽魚(yú)幼魚(yú)的腸道脂肪酶和胰蛋白酶顯著高于S1 組和S2組（P ＜0.05）；S5 組鯽魚(yú)的腸道脂肪酶顯著高于S1 組（P ＜0.05）（表4）。

表4 酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)腸道消化酶活性的影響

2.4 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)肝臟抗氧化能力及免疫力的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，丙二醛含量無(wú)顯著性差異。 與對(duì)照組相比，S3組鯽魚(yú)幼魚(yú)的肝臟總抗氧化能力、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽過(guò)氧化酶顯著升高（P ＜0.05）， 分別提高12.5%、35.77%和11.92%，并具有提高鯽魚(yú)幼魚(yú)肝臟溶菌酶含量的趨勢(shì) （P ＞0.05），S1 組鯽魚(yú)的肝臟過(guò)氧化氫酶顯著升高17.06%（P ＜0.05）； S3 組鯽魚(yú)的肝臟過(guò)氧化氫酶顯著高于S1 組 （P ＜0.05），S5 組肝臟谷胱甘肽過(guò)氧化物酶顯著低于S1 組（P ＜0.05）（表5）。

表5 酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)肝臟抗氧化能力及免疫力的影響

3 討論

3.1 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響 在飼料中添加酵母培養(yǎng)物可促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)，在建鯉、虹鱒、團(tuán)頭魴和南美白對(duì)蝦等魚(yú)類上均證明谷胱甘肽的促生長(zhǎng)作用（周婷婷等，2013；Barnes 等，2007； 劉 哲 等，2003）。 劉 哲 等（2003）報(bào)道，在飼料中添加0.5%的酵母培養(yǎng)物能使建鯉的增重率提高32.8%， 餌料系數(shù)降低19.34%。 Barnes 等（2007） 研究發(fā)現(xiàn)，添加0.025%的酵母培養(yǎng)物能顯著提高虹鱒的生長(zhǎng)性能， 增重率提高45.76%。 李高鋒等（2009）發(fā)現(xiàn)，在團(tuán)頭魴飼料中添加0.2%的酵母培養(yǎng)物團(tuán)頭魴特定生長(zhǎng)率提高12.95%， 餌料系數(shù)降低9.87%。 劉明等（2017）研究表明，在南美白對(duì)蝦飼料中添加0.5%酵母培養(yǎng)物能顯著提高南美白對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能，增重率提高了16.74%， 飼料系數(shù)降低了9.79%。李佑杰等（2021）報(bào)道，添加1%的酵母培養(yǎng)物能對(duì)大鱗副泥鰍的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用， 飼料系數(shù)降低了19.29%。 在本研究中，飼料中添加0.1%、0.3%和0.5%酵母培養(yǎng)物均能促進(jìn)鯽魚(yú)生長(zhǎng)，增重率分別提高了16.56%、34.67%和19.98%， 餌料系數(shù)分別降低了15.09%、34.72%和19.25%，最佳添加量為0.3%。酵母培養(yǎng)物能提高水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和飼料利用率， 可能與其含有豐富的B 族維生素、小肽、核苷酸等活性成分有關(guān)。

3.2 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)血清生化的影響 血清生化指標(biāo)一般可以反饋出水產(chǎn)動(dòng)物的健康狀況，血清中的白蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇可以反映機(jī)體對(duì)蛋白的利用率及脂類代謝； 谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性可以反映肝功能狀態(tài)；堿性磷酸酶可以反映機(jī)體免疫力。本試驗(yàn)中，在鯽魚(yú)飼料中添加0.5%酵母培養(yǎng)物可以顯著提高血清中白蛋白含量， 表明酵母培養(yǎng)物提高了機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的利用率。 與陳坤海（2023）在加州鱸上的研究結(jié)果相似。 本試驗(yàn)中， 添加0.5%酵母培養(yǎng)物鯽魚(yú)血清LDL-C 含量降低35.25%，添加0.3%酵母培養(yǎng)物鯽魚(yú)血清TG 含量降低24.40%，表明酵母培養(yǎng)物對(duì)機(jī)體脂質(zhì)代謝起到重要作用。 與桂良超等（2019）在凡納濱對(duì)蝦的研究結(jié)果類似。 可能是酵母培養(yǎng)物使脂肪酶活性的提高，加速了脂質(zhì)代謝（Castillo 等，2014）。 本試驗(yàn)中， 添加0.1%、0.5%酵母培養(yǎng)物增加了血清AST 含量， 添加0.5%酵母培養(yǎng)物增加了ALT 含量， 但0.3%酵母培養(yǎng)物對(duì)AST 和ALT 卻沒(méi)有影響，表明在飼料中0.3%酵母培養(yǎng)物對(duì)肝臟健康無(wú)影響。 Liu 等（2018）在草魚(yú)上也有類似的研究結(jié)果。 本試驗(yàn)中，添加0.1%、0.3%、0.5%酵母培養(yǎng)物可以顯著提高血清中堿性磷酸酶含量， 分別提高47.87%、90.56%和58.48%， 表明酵母培養(yǎng)物可以提高機(jī)體免疫力。 與劉泓宇等（2021）在珍珠龍膽石斑魚(yú)的結(jié)果類似。

3.3 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)腸道消化酶活性的影響 水產(chǎn)動(dòng)物中腸道脂肪酶、蛋白酶活性能夠影響機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，從而影響水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)（唐黎等，2007）。 本研究中，添加0.3%酵母培養(yǎng)物能顯著提高鯽魚(yú)脂肪酶活性（398.46%）和胰蛋白酶活性（307.40%），添加0.5%酵母培養(yǎng)物能顯著提高鯽魚(yú)脂肪酶活性（267.69%），這與Wang 等（2022）在南美白對(duì)蝦上的研究結(jié)果相似。酵母培養(yǎng)物提高了鯽魚(yú)腸道消化酶活性，可能是與其含有豐富的小肽和氨基酸等強(qiáng)化了消化酶，同時(shí)含有的乳酸等酸性物質(zhì)也降低了消化道的pH 有關(guān)，相關(guān)機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

3.4 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)肝臟抗氧化能力和免疫力的影響 研究表明，酵母培養(yǎng)物可調(diào)節(jié)人類（Possemiers 等，2013）、豬（Shen 等，2009）和魚(yú)類（Berto 等，2016）的免疫反應(yīng)，通過(guò)減少病原菌和改善腸道健康來(lái)維持健康和改善生長(zhǎng)性能。TAOC、CAT、GSH-PX 和LZM 等指標(biāo)常用來(lái)表征水產(chǎn)動(dòng)物的抗氧化能力和免疫力。 本試驗(yàn)中， 添加0.1%酵母培養(yǎng)物可提高鯽魚(yú)肝臟CAT 活力（17.06%）； 添加0.3%酵母培養(yǎng)物可顯著提高鯽魚(yú)肝臟T-AOC、CAT 和GSH-PX 活力， 分別提高了12.5%、35.77%和11.92%， 具有提高鯽魚(yú)幼魚(yú)肝臟溶菌酶含量的趨勢(shì)； 添加0.5%酵母培養(yǎng)物可提高鯽魚(yú)肝臟GSH-PX 活力（12.59%），這與雷宇杰等（2020）在斑點(diǎn)叉尾鮰和陳潯等（2024）在加州鱸上的研究結(jié)果相似。本研究表明酵母培養(yǎng)物可以增強(qiáng)鯽魚(yú)抗氧化和免疫力， 可能與其含有的甘露寡糖、β-葡聚糖、小肽、核苷酸等多種活性成分有關(guān)。

4 小結(jié)

綜上所述， 在飼料中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)鯽魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能有促進(jìn)作用， 并且提高了鯽魚(yú)消化酶活性、抗氧化能力及免疫力，其中0.3%酵母培養(yǎng)物添加組效果最佳。