基于中西醫(yī)臨床特點的感染后腸易激綜合征動物模型分析

謝璐安，張揚雨，陳小霞，潘震東，楊貽鈴，黃適，2（.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 53000；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西 南寧 53000）

腸易激綜合征（Irritable bowel syndrome，IBS）是多因素共同作用引起的腦-腸互動異常，癥狀以腹痛、腹脹或腹部不適，伴排便習(xí)慣改變或糞便性狀改變，實驗室檢查及影像學(xué)檢查常未發(fā)現(xiàn)器質(zhì)性疾病用以解釋上述癥狀的發(fā)生[1]。感染后腸易激綜合征（Postinfectious irritable bowel syndrome，PI-IBS）是其中的一個特殊亞型：先前未診斷腸易激綜合征或者無腸易激綜合征癥狀的個體，在急性腸道感染恢復(fù)后出現(xiàn)了腸易激綜合征癥狀[2]。腸易激綜合征在全球普通人中的流行率為4.1%[3]，據(jù)一項薈萃分析[4]報道急性腸道感染后的個體罹患腸易激綜合征的風(fēng)險較無感染史的個體高4倍，其中超過10%的腸道感染患者后來發(fā)展為腸易激綜合征，急性腸道感染后腸易激綜合征的總患病率為11.5%。盡管其并非致命性疾病，但腸易激綜合征的疾病負(fù)擔(dān)可與重大疾病負(fù)擔(dān)相當(dāng)[5]，患者生活質(zhì)量下降、心理疾病患病率升高、經(jīng)濟負(fù)擔(dān)加重均嚴(yán)重影響著罹患腸易激綜合征的人群。

感染后腸易激綜合征的病因目前尚未明確，其機制可能與腸屏障受損及腸道低度炎癥有關(guān)，目前治療上以止瀉、抗痙攣、抗焦慮、調(diào)節(jié)腸道菌群等對癥治療為主。建立有效的感染后腸易激綜合征動物模型對其發(fā)病機制、病因病機的研究及防治有著重要的作用，故本研究基于感染后腸易激綜合征的中西醫(yī)臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)及癥狀特點，將現(xiàn)有感染后腸易激綜合征動物模型的品系、造模方法、造模機制進行歸納總結(jié)，并進行吻合度評價、分析模型制備的優(yōu)缺點，以期為建立符合中西醫(yī)臨床特點的感染后腸易激綜合征動物模型提供參考。

1 感染后腸易激綜合征的發(fā)病機制

1.1 西醫(yī)發(fā)病機制目前感染后腸易激綜合征的發(fā)病機制尚未完全闡明。據(jù)多項薈萃分析認(rèn)為導(dǎo)致感染后腸易激綜合征發(fā)病的主要危險因素一方面是早期腸道感染致發(fā)熱的持續(xù)時間：發(fā)熱時間越長，感染后出現(xiàn)感染后腸易激綜合征的概率越高，這可能與感染源的毒力有關(guān)[6]；另一方面是病原體的類型及感染的嚴(yán)重程度：寄生蟲感染后出現(xiàn)感染后腸易激綜合征的概率較其他感染源更高，感染源的毒力因子越強，宿主免疫力越差，感染后恢復(fù)時間則越長，罹患感染后腸易激綜合征的概率越高。Sethi 等[7]研究發(fā)現(xiàn)艱難梭菌感染患者在感染后6個月出現(xiàn)腸易激綜合征或FGID 癥狀的比率是22%；而Young 等[8]對感染志賀菌人群的一項10 年隨訪研究發(fā)現(xiàn)，感染后1 年感染后腸易激綜合征的發(fā)病率在13.1%，在感染后3 年人群罹患腸易激綜合征的風(fēng)險顯著增加；對感染賈第鞭毛蟲人群進行的隨訪研究[9]發(fā)現(xiàn)，感染發(fā)生后3年腸易激綜合征的患病率為47%，感染后10年腸易激綜合征的患病率僅稍降為43%；既往的比較研究普遍認(rèn)為與細(xì)菌和寄生蟲感染相比，病毒感染導(dǎo)致腸易激綜合征的發(fā)病率相對低，但據(jù)Marshall 等[10]對食源性諾如病毒感染后人群進行的統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，3 個月后出現(xiàn)腸易激綜合征癥狀的人群比率為23.6%，其發(fā)病率較其他感染源相比并無明顯降低。在新冠后疫情時代我們還需要關(guān)注的是新冠后感染后腸易激綜合征的發(fā)病情況，對新冠病毒感染人群的調(diào)查[11]發(fā)現(xiàn)感染過程中出現(xiàn)胃腸道癥狀的比率為3.8%，感染后腸易激綜合征的發(fā)病率為3%，病毒感染致感染后腸易激綜合征仍應(yīng)引起我們的注意。其他危險因素還包括年齡、性別、心理因素、遺傳易感傾向等。綜合復(fù)雜的致病因素，其發(fā)病機制可能與腸道感染導(dǎo)致的腸屏障功能受損、腸上皮通透性增加以及腸道菌群紊亂有關(guān)，病理生理學(xué)上以持續(xù)的腸道低度炎癥狀態(tài)為特征，表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞及肥大細(xì)胞浸潤、免疫細(xì)胞漂移、炎癥因子釋放及腸嗜鉻細(xì)胞增殖等，在整個病理生理過程中腦腸軸互動異常、腸道痛覺超敏及腸道運動功能紊亂等因素均可能共同作用于感染后腸易激綜合征的發(fā)生發(fā)展。

1.2 中醫(yī)病因病機中醫(yī)并無腸易激綜合征的診斷，通常根據(jù)其癥狀特點將其歸類為“泄瀉”“便秘”“腹痛”等范疇[12]。腹瀉型腸易激綜合征（irritable bowel syndrome with predominant diarrhea，IBS-D）為腸易激綜合征常見分型中的一類，表現(xiàn)為以糊狀便或水樣便為主的糞便性質(zhì)異常，并伴與排便異常相關(guān)的腹脹、腹痛或腹部不適。古籍中對IBS-D也有類似的記載，如《難經(jīng)》[13]：“大腸泄者，食已窘迫，大便色白，腸鳴切痛”，又如《靈樞》[14]所述：“大腸病者，腸中切痛而鳴濯濯。冬日重感于寒即泄，當(dāng)臍而痛不能久立”。感染后腸易激綜合征多表現(xiàn)為腹痛、腹瀉等癥狀，與IBS-D癥狀相接近，結(jié)合其前期存在感染史，中醫(yī)病名上更契合于“痛瀉”“大腸瀉”“腸郁”等。據(jù)《醫(yī)方考》：“瀉責(zé)之脾，痛責(zé)之肝，肝責(zé)之實，脾責(zé)之虛，脾虛肝實故令痛瀉”。腸易激綜合征的病位主要在于肝脾，病因主要是脾胃虛弱、情志不暢，復(fù)感外邪，最終形成了肝脾不和、正虛邪戀的病機特點。感染后腸易激綜合征是急性胃腸道感染后出現(xiàn)反復(fù)腹痛、腹瀉等癥狀的疾病，其致病關(guān)鍵在于脾氣虛弱、濕邪留戀，復(fù)加情志因素影響，故諸癥遷延難愈。常因感受外邪后經(jīng)治療或自愈后外邪未盡，正氣已損而未復(fù)，致病邪氣主要為濕邪，濕性重濁、粘滯、易襲陰位，故見反復(fù)發(fā)作、綿延不斷的泄瀉癥狀；濕傷陽氣，脾陽受濕邪礙膩，致本已受損的脾陽更為不振，無力運化水谷，發(fā)為泄瀉、納食不馨等癥。脾胃為氣機升降之樞紐，本已受濕邪影響氣機運轉(zhuǎn)受阻，外加情志因素，肝氣橫逆犯脾，樞機窒塞，氣機郁滯，脾胃更為虛弱，則生諸疾。正如《黃帝內(nèi)經(jīng)》所云：“正氣存內(nèi)，邪不可干”“邪之所湊，氣其必虛”。因此，可根據(jù)疾病各發(fā)展階段的病機特點將感染后腸易激綜合征的證型歸納為：肝郁脾虛證、肝氣郁滯證、脾胃虛弱證和寒熱錯雜證[15]。

2 感染后腸易激綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)及中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)

2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及臨床表現(xiàn)目前國內(nèi)外指南內(nèi)尚無明確感染后腸易激綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)，故西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)、臨床表現(xiàn)參照《Bowel disorders》[18]中提及的羅馬Ⅳ標(biāo)準(zhǔn)、羅馬基金會工作組對感染后腸易激綜合征的工作報告[16]及Spiller 等[2]、Ghoshal[17]對感染后腸易激綜合征的定義及癥狀描述，詳見表1。

表1 感染后腸易激綜合征（PI-IBS）的西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Diagnostic criteria of western medicine for post-infection irritable bowel syndrome（PI-IBS）

根據(jù)感染后腸易激綜合征的西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)并引入田碩[19]的動物模型判定方法：感染后腸易激綜合征與腸易激綜合征的鑒別點在于是否發(fā)生于急性腸道感染后，故具備腸道感染的病史是感染后腸易激綜合征的特點，因此通過外部感染源感染誘導(dǎo)腸道炎癥狀態(tài)，對于感染后腸易激綜合征動物模型的建立而言至關(guān)重要，屬于I 類指標(biāo)（核心指標(biāo)），符合這一條件的模型賦值30%。如造模后病原學(xué)檢測陽性率達九成或病理學(xué)提示處于炎癥后階段則提示下一階段的感染后模型建立明確，屬于I 類指標(biāo)（核心指標(biāo)），符合這一條件賦值30%。實驗動物與人類存在生理及行為上的差異，在動物上完美復(fù)制出人類疾病形態(tài)是近乎不可能的，因此在對動物模型進行臨床吻合度評估時，更多的是依據(jù)癥狀間接表現(xiàn)指標(biāo)及動物行為學(xué)變化進行評價。常用的評估內(nèi)臟敏感性的動物間接指標(biāo)有腹壁回撤反射（abdominal withdrawal reflex，AWR）評分、結(jié)腸肌電活動變化等；評估腸道活動速度的間接指標(biāo)有腸道標(biāo)志物運轉(zhuǎn)力、大便頻率統(tǒng)計等；評估糞便性狀的間接指標(biāo)有Bristol 分級、糞便含水量測定、腹瀉指數(shù)等；內(nèi)臟高敏感性、腸道活動加快、糞便性狀稀爛為感染后腸易激綜合征主要臨床癥狀（腹痛腹脹或腹部不適、大便次數(shù)增多、腹瀉）的間接表現(xiàn)指標(biāo)，為Ⅱ類指標(biāo)（直接相關(guān)指標(biāo)），每滿足1 項賦值10%。其他表現(xiàn)指標(biāo)劃分為Ⅲ類指標(biāo)（間接相關(guān)指標(biāo)），每滿足1 項賦值3.3%?？傊禐?00%，各癥狀對應(yīng)表現(xiàn)及賦值標(biāo)準(zhǔn)詳見表2。

表2 感染后腸易激綜合征（PI-IBS）西醫(yī)臨床特點與動物模型表現(xiàn)對應(yīng)表及賦值標(biāo)準(zhǔn)Table 2 Assignment criteria and the correspondence table between clinical features of PI-IBS in western medicine and situation of animal models

2.2 中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)感染后腸易激綜合征的中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥用于腸易激綜合征臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》（2017）、《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[20]及《腸易激綜合征中醫(yī)診療專家共識意見》（2017）[21]中的辨證分型標(biāo)準(zhǔn)，將其分為肝郁脾虛證、脾虛濕盛證、脾腎陽虛證、寒熱錯雜證4種證型，詳見表3。

表3 感染后腸易激綜合征（PI-IBS）的中醫(yī)辨證分型Table 3 Traditional Chinese medicine syndrome differentiation of PI-IBS

基于感染后腸易激綜合征中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及《中醫(yī)臨床診療指南釋義（脾胃分冊）》[22]將各證型癥狀劃分為主癥和次癥，并引入田碩[19]的動物模型判定方法：腹痛、泄瀉、排便次數(shù)增加、神志變化為各證型共有癥狀，屬于主癥，每符合一個條件賦值20%。納食變化、外觀變化及體質(zhì)量變化為各證型不同癥狀，屬次癥，如肝郁脾虛證動物模型會出現(xiàn)外界刺激或造模應(yīng)激時易激惹抵抗、出現(xiàn)攻擊性表現(xiàn)，無刺激條件下則自主活動減少、扎堆聚集于角落，進食量減少，耳廓顏色淡紅，皮毛干枯毛躁；脾虛濕盛證動物模型會出現(xiàn)對外界刺激反應(yīng)不敏感，對造模應(yīng)激抵抗程度輕，蜷縮聚集于角落，進食量減少，耳廓顏色淡白，皮毛晦暗；脾腎陽虛證動物模型會出現(xiàn)對外界刺激反應(yīng)少，對造模應(yīng)激抵抗程度輕，蜷縮甚至堆疊于角落，進食量少，耳廓顏色晦暗，皮毛晦暗干枯；寒熱錯雜證動物模型會出現(xiàn)對外界刺激易激惹，對造模應(yīng)激抵抗程度強，蜷縮甚至堆疊于角落，進食水少，耳廓顏色晦暗，皮毛晦暗干枯。符合次癥中每一分項，賦值6.6%?？傊?00%，各癥狀對應(yīng)表現(xiàn)及賦值標(biāo)準(zhǔn)詳見表4。

表4 感染后腸易激綜合征（PI-IBS）中醫(yī)臨床特點與動物模型表現(xiàn)對應(yīng)表及賦值標(biāo)準(zhǔn)Table 4 Assignment criteria and the correspondence table between clinical features of PI-IBS in Chinese medicine and situation of in animal models

3 感染后腸易激綜合征常見動物模型

3.1 模型動物的選擇感染后腸易激綜合征動物模型常以實驗大鼠、小鼠居多。大鼠有SD、Wistar 大鼠；小鼠有C57BL/6、NIH 小鼠、CD-1 小鼠。其中以成年SD 大鼠及C57BL/6 小鼠最為多見，考慮與嚙齒類實驗動物品系穩(wěn)定、性情溫順，外源感染普遍易感更易于造模、腫瘤自發(fā)生率低有關(guān)。

3.2 動物模型與臨床吻合度感染后腸易激綜合征的造模方法主要分為外源感染誘導(dǎo)和化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)兩大類。外源感染誘導(dǎo)可細(xì)分為：細(xì)菌感染誘導(dǎo)，方法分別有空腸彎曲桿菌感染、鼠傷寒沙門氏菌感染、鼠類檸檬酸桿菌感染、福氏志賀痢疾桿菌感染；寄生蟲感染誘導(dǎo)，方法分別有旋毛蟲感染、賈第鞭毛蟲感染、隱孢子蟲感染、巴西日圓線蟲感染；病毒感染誘導(dǎo)，方法有單純皰疹病毒感染?；瘜W(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)腸道損傷炎癥后造模的方法分別有三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)、葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)、脫氧膽酸（DCA）誘導(dǎo)、乙酸誘導(dǎo)、異硫氰酸烯丙酯（OM）誘導(dǎo)、酵母聚糖誘導(dǎo)等方法?，F(xiàn)對以上動物模型進行造模方法及機制總結(jié)，并分析評價其臨床特點吻合度及制備優(yōu)缺點，詳見表5。各模型中西醫(yī)臨床吻合度可視化展示詳見圖1。

圖1 感染后腸易激綜合征（PI-IBS）動物模型中西醫(yī)臨床吻合度Figure 1 Consistency between animal model of PI-IBS and clinical symptoms of Chinese and western medicine

表5 感染性腸易激綜合征（PI-IBS）動物模型與中西醫(yī)臨床病證吻合情況Table 5 Consistency between animal model of PI-IBS and clinical symptoms of Chinese and western medicine

4 討論

構(gòu)建感染后腸易激綜合征（PI-IBS）動物模型是研究感染后腸易激綜合征發(fā)病機制以及篩選有效防治藥物的重要手段。理想的感染后腸易激綜合征動物模型應(yīng)同時具備早期急性腸道感染狀態(tài)及后期感染恢復(fù)后腸道存在慢性炎癥狀態(tài)。目前常用的模型動物多為嚙齒類動物，大鼠、小鼠因其繁殖快且品系穩(wěn)定、飼養(yǎng)難度低而廣泛應(yīng)用于各類造模方法中，倉鼠則多用于病毒感染類的模型[59]，除嚙齒類動物外亦有應(yīng)用斑馬魚建立炎癥后腸易激綜合征模型[60]的造模形式。感染后腸易激綜合征動物模型類型較多，模型特點和造模原理各有不同，模型的應(yīng)用范圍及吻合的臨床癥狀也因此有所不同。

4.1 目前感染后腸易激綜合征動物模型的分類及優(yōu)缺點當(dāng)前感染后腸易激綜合征動物模型的制備方法主要集中為外源感染誘導(dǎo)及化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)兩大類，常通過結(jié)合不同的病因模擬手段及不同角度的觀察手段來展現(xiàn)模型的中西醫(yī)臨床吻合情況。

外源感染誘導(dǎo)的感染后腸易激綜合征模型通過使模型動物獲得腸道感染來模擬人類腸道急性感染過程，這與感染后腸易激綜合征病例發(fā)生于細(xì)菌、寄生蟲或病毒感染后的發(fā)病過程相符合，且對疾病直接相關(guān)指標(biāo)表現(xiàn)力較好。但在模型制備過程中，感染源的獲取及制備過程相對繁雜，且可能因需針對不同品系的動物調(diào)整感染攻擊劑量，導(dǎo)致造模周期延長。對于外源感染誘導(dǎo)的感染后腸易激綜合征模型而言，造模的成模率多取決于外源感染源的株型及感染量、模型動物的品系、造模途徑：①感染源的株型及感染量：不同株型對同一宿主的定植率存在差異，有研究[61]比較發(fā)現(xiàn)宿主適應(yīng)后的空腸彎曲桿菌分離株定植率更高。不同感染劑量下的模型動物表現(xiàn)各不相同，劑量過低導(dǎo)致感染恢復(fù)過快、癥狀表現(xiàn)欠佳，劑量過高則易導(dǎo)致模型動物死亡，如在模型制備過程中如首次感染接種超1 000 個巴西日圓線蟲幼蟲會導(dǎo)致模型小鼠免疫抑制甚至死亡[62]。一個理想的感染后腸易激綜合征模型需要找到一個合適的感染劑量，如傳統(tǒng)的空腸彎曲桿菌感染模型存在內(nèi)臟高敏表現(xiàn)欠佳、成模率低的缺點，曹亞男等[23]通過改良傳統(tǒng)方法將感染劑量由108CFU·mL-1提高到1010CFU·mL-1后，感染成功率明顯提高。②造模動物的品系：不同品系的動物對不同種類的感染源反應(yīng)各有不同，造模需根據(jù)不同品系動物的易感特點進行模型動物選擇。如旋毛蟲感染后的變化在NIH/Swiss 小鼠是特有的，在Balb/c 小鼠中則無法體現(xiàn)。除影響成模率外，尚有可能造成模型動物死亡，如Crepin 等[63]發(fā)現(xiàn)不同品系小鼠對鼠類檸檬酸桿菌感染反應(yīng)不同，C57BL/6 小鼠感染后表現(xiàn)為解軟便及內(nèi)臟高敏，而C3H/Hej小鼠則易患致命的感染后腹瀉，導(dǎo)致死亡率升高。③造模途徑：外源感染的造模途徑常見的有灌胃、腹腔注射、皮下注射等，針對不同種類的感染源各造模方法各有利弊。如呂軍蘋[64]通過比較腹腔注射及灌胃感染鼠傷寒沙門氏菌兩種途徑發(fā)現(xiàn)，腹腔注射的造模方式過于靈敏，急性發(fā)病率高，雖然可出現(xiàn)典型的腹瀉癥狀及體質(zhì)量、毛發(fā)、精神狀態(tài)變化，但對注射濃度要求精確，且造模死亡率高，并不利于后續(xù)實驗及組織樣本采集。Camberis 等[62]則提出對于制備巴西日圓線蟲感染模型，皮下注射途徑比灌胃及腹腔注射途徑更能保證蟲體活性及有效感染率。結(jié)合感染后腸易激綜合征的發(fā)病過程，外源感染多通過糞口途徑進行傳播，利用灌胃途徑建立細(xì)菌、寄生蟲或病毒感染誘導(dǎo)的感染后腸易激綜合征模型，更符合疾病形成過程。與此同時，近期有研究[65]發(fā)現(xiàn)新冠病毒感染后部分人群出現(xiàn)腸易激綜合征癥狀，在新冠疫情后時代基于人群需求，此處需要討論的是通過非腸道途徑使動物獲得外源感染后表現(xiàn)出感染后腸易激綜合征典型癥狀的模型是否符合感染后腸易激綜合征的建模要求，如Sencio[59]等通過滴鼻途徑使小鼠感染流感病毒后出現(xiàn)了明顯的腸屏障受損表現(xiàn)，是感染后全身免疫應(yīng)激并在實驗過程中把關(guān)注重點放在了腸屏障上，還是感染源通過非腸道途徑感染后僅攻擊消化道，仍需更多的實驗設(shè)計驗證及探索。

化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)模型則通過模擬感染源對腸道黏膜造成的損傷及由此引起的持續(xù)腸道炎癥狀態(tài)來模擬感染后腸易激綜合征的發(fā)病過程。應(yīng)用TNBS、DCA、乙酸等對模型動物進行灌腸都是常用的腸易激綜合征、炎癥性腸病的造模方法，模型可復(fù)制性高、造模成功率有保障。但化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)造模存在兩個弊端，其一是缺乏感染后腸易激綜合征發(fā)病過程中的急性感染過程：眾所周知，腸道感染是一個復(fù)雜的病理生理過程，單一化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)的模型通常無法同時體現(xiàn)感染后腸易激綜合征的多個疾病特征，這可能與單一物質(zhì)無法完全模擬外源感染造成的復(fù)雜損傷有關(guān)，更適合用于研究感染后腸易激綜合征發(fā)病機制中的某一方面，這也提示了復(fù)合造模方法的重要性。其二是造模的用藥劑量、溶劑、灌腸深度及評估造模效果的時間點尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)：TNBS、DCA 等化學(xué)物質(zhì)廣泛用于腸易激綜合征、潰瘍性結(jié)腸炎及克羅恩病等模型的誘導(dǎo)物質(zhì)，各病的發(fā)病機制及病理表現(xiàn)均不同，則在造模過程中需通過干預(yù)化學(xué)物質(zhì)給藥劑量來控制動物的病理表現(xiàn)以達到造模目的。Qin等[43]比較了低、中、高劑量TNBS、不同濃度乙醇溶劑及不同灌腸深度對SD 大鼠造模的影響，發(fā)現(xiàn)每只大鼠予低劑量TNBS（5 mg·0.8 mL-1），溶劑采用50%乙醇，距肛門8 cm 處結(jié)腸給藥可成功造模符合感染后腸易激綜合征黏膜損傷、腸道低度炎癥及內(nèi)臟痛覺過敏癥狀的模型。可見，完善不同濃度化學(xué)物質(zhì)及其溶劑的造模劑量，比較不同給藥深度的造模方法是建立感染后腸易激綜合征動物模型的關(guān)鍵。

4.2 優(yōu)勢感染后腸易激綜合征動物模型的優(yōu)缺點綜合中西醫(yī)臨床吻合度及造模優(yōu)缺點，較為貼切的感染后腸易激綜合征模型是空腸彎曲桿菌感染模型、旋毛蟲感染模型以及病癥結(jié)合模型中的肝郁脾虛證模型。

空腸彎曲桿菌是全球范圍內(nèi)食源性細(xì)菌性胃腸炎的常見病因，可利用其致人畜共患病的特點對大鼠進行造模，該模型具有操作相對簡易，內(nèi)臟高敏及腸道運動障礙表現(xiàn)明顯的特點，缺點是對感染劑量要求較高且需篩選出敏感感染株；旋毛蟲感染模型是經(jīng)典的感染后腸易激綜合征建模方法，可感染包括人類在內(nèi)的哺乳動物引起旋毛蟲病，感染累及十二指腸、回腸，可引起持續(xù)時間較長的內(nèi)臟高敏感、腸道低度炎癥及腸道運動障礙，缺點是旋毛蟲有一定概率穿破腸道進入腹腔引起全身炎癥反應(yīng)從而覆蓋腸道炎癥表現(xiàn)，且旋毛蟲制備過程復(fù)雜，總實驗周期長；病證結(jié)合中的肝郁脾虛證模型是通過慢性束縛應(yīng)激+過度疲勞+飲食失節(jié)+旋毛蟲感染的復(fù)合方法造模，從病因角度采用應(yīng)激、疲勞等方法構(gòu)建證型模型，以方測證，優(yōu)點是建模后可觀察到較為完整的直接及間接臨床指標(biāo)表現(xiàn)，缺點是造模方法相對復(fù)雜、實驗周期長。

4.3 總結(jié)與展望總結(jié)優(yōu)勢模型發(fā)現(xiàn)，具備合適且攻擊劑量有效的外界感染源是制備臨床指標(biāo)表現(xiàn)力好的感染后腸易激綜合征動物模型的關(guān)鍵，在此基礎(chǔ)上增加對疾病模型不同癥狀角度的觀察、測量及結(jié)合其他致病因素協(xié)同造模，基于此制備的感染后腸易激綜合征動物模型中西醫(yī)臨床吻合度將大大提高。但是結(jié)合總結(jié)結(jié)果看，當(dāng)前符合現(xiàn)代中醫(yī)藥科研需求的病證結(jié)合的感染后腸易激綜合征模型相對較少，究其原由是因為缺乏規(guī)范客觀的動物中醫(yī)癥狀評價標(biāo)準(zhǔn)、缺乏規(guī)范的動物模型辨證方法，導(dǎo)致針對中醫(yī)臨床癥狀多維度的觀察開展受限。病證結(jié)合模型的優(yōu)勢是可將動物特質(zhì)、疾病特點與中醫(yī)證候特點相融合，在實驗過程中能充分體現(xiàn)辨證論治的中醫(yī)思想[66]。為更好地建立病癥結(jié)合感染后腸易激綜合征動物模型，為中醫(yī)藥防治感染后腸易激綜合征提供動物實驗支持，本研究綜合現(xiàn)有病證結(jié)合動物模型的建立方法，可從以下對感染后腸易激綜合征建模方法進行改進：①病證結(jié)合模型需找到各證型的客觀評價指標(biāo)：可采用代謝組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等組學(xué)技術(shù)系統(tǒng)性地對不同證型患者的代謝物等進行分析建立數(shù)據(jù)模型，在大量樣本中找到同一證型的共同標(biāo)志物，以此形成微觀、可量化的客觀評價指標(biāo)對模型進行評價。②豐富動物四診的信息采集：可通過量化動物行為積分，形成證型積分公式，尚可納入進食水量、基礎(chǔ)生命征等作為輔助小權(quán)重指標(biāo)；可采用紅外熱成像儀、動物內(nèi)鏡、核磁共振等儀器對實驗動物進行檢查，收集具象的圖像信息，對圖像進行分類分級積分，納入證型積分公式。目前針對動物模型的證候體系尚未確立，病證結(jié)合動物模型建模成功的標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)以動物標(biāo)準(zhǔn)客觀參數(shù)與人類疾病原型、臨床證候診斷標(biāo)準(zhǔn)基本相貼合甚至相同[67]。但建模過程中仍需認(rèn)識到人類與實驗動物存在諸多區(qū)別，模型仍有其自身的局限性，不可能完全復(fù)制目標(biāo)疾病，對于模型的評價與使用仍需具體實驗具體調(diào)整。

綜上所述，目前較為理想的感染后腸易激綜合征動物模型是空腸彎曲桿菌感染模型、旋毛蟲感染模型。此外，吻合度略次的病癥結(jié)合模型也具有較大的應(yīng)用價值，采用復(fù)合方式造模可建立中西醫(yī)病證體系更完善的感染后腸易激綜合征模型，既符合感染后腸易激綜合征的發(fā)病過程及病理特點，又貼切中醫(yī)證候特點，依從中醫(yī)基本的辨證論治原則，加強病與證的關(guān)系，可為研究感染后腸易激綜合征發(fā)病機制及探討其證候間分子差異提供理論支持，也可為研究中藥單藥或復(fù)方防治感染后腸易激綜合征提供動物實驗支持。因此，在現(xiàn)有的造模方式的基礎(chǔ)上繼續(xù)完善，建立更加完善的貼切于中西醫(yī)臨床病證特點的感染后腸易激綜合征動物模型將是防治各類感染后腸易激綜合征及炎癥性腸病的研究熱點，具有廣闊的研究前景。