徐寧 吳亮 朱建俊

摘要：以鹽堿地區(qū)優(yōu)勢植物多枝檉柳（Tamarix ramosissima Ledeb.）幼苗為研究對(duì)象，采用盆栽方式，探究根際施用獨(dú)腳金內(nèi)酯并接種叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，簡稱AMF）對(duì)鹽脅迫下多枝檉柳生長情況、氣體交換參數(shù)、葉綠素?zé)晒鈪?shù)及內(nèi)源激素變化的影響。結(jié)果表明，與非鹽處理相比，鹽脅迫下多枝檉柳株高減少，葉綠素含量以及光合作用不斷降低，PSⅡ光系統(tǒng)中葉綠素?zé)晒鈪?shù)呈下降趨勢，內(nèi)源激素平衡遭到破壞。而根際施用獨(dú)腳金內(nèi)酯能夠促進(jìn)AMF侵染發(fā)育，增加泡囊數(shù)、叢枝數(shù)和侵入點(diǎn)位數(shù)，菌根侵染率最高達(dá)58.5%。接種AMF和/或獨(dú)腳金內(nèi)酯處理均能夠增加鹽脅迫下多枝檉柳株高和根冠比，提高光合作用，維持PSⅡ光系統(tǒng)中葉綠素?zé)晒鈪?shù)，鹽害指數(shù)從65.1%下降到41.5%，多枝檉柳枝條相對(duì)含水量也明顯增加。鹽脅迫下，接種AMF和/或獨(dú)腳金內(nèi)酯處理的多枝檉柳葉片凈光合速率（P_n）、蒸騰速率（T_r）、水分利用效率（WUE）、胞間二氧化碳濃度（C_i）、氣孔導(dǎo)度（G_s）以及氣孔限制值（L_s）分別提高20.7%～40.7%、42.6%～176.6%、27.6%～96.6%、38.5%～99.1%、21.2%～75.9%、60.9%～160.9%，葉綠素?zé)晒鈪?shù)中PSⅡ最大光化學(xué)效率（F_v/F_m）、PSⅡ潛在活性（F_v/F_o）、表觀電子傳遞速率（ETR）分別提高0.2%～4.0%、24.8%～51.0%、37.3%～189.8%，熱耗散速率（HDR）下降9.7%～32.3%；內(nèi)源激素中獨(dú)腳金內(nèi)酯（SLs）、生長素（IAA）以及赤霉素（GA）含量分別增加5.1%～5.8%、7.3%～98.8%、31.8%～121.1%，脫落酸（ABA）含量下降20.7%～45.2%。結(jié)論認(rèn)為，接種AMF和/或根施獨(dú)腳金內(nèi)酯處理均能提高多枝檉柳葉綠素含量以及枝條相對(duì)含水量，增強(qiáng)植物光合作用能力，維持PSⅡ光系統(tǒng)中葉綠素?zé)晒鈪?shù)以及內(nèi)源激素含量來增加植物株高和根冠比，顯著降低鹽害指數(shù)，本試驗(yàn)認(rèn)為根施獨(dú)腳金內(nèi)酯并接種AMF是提高多枝檉柳幼苗耐鹽性的有效手段。

關(guān)鍵詞：叢枝菌根真菌；鹽脅迫；獨(dú)腳金內(nèi)酯；激素；光合作用；葉綠素?zé)晒鈪?shù)

中圖分類號(hào)：S182；S184? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2024）06-0150-09

收稿日期：2023-10-22

基金項(xiàng)目：河南省高校人文社會(huì)科學(xué)研究一般項(xiàng)目（編號(hào)：2024-ZDJH-662）；國家自然科學(xué)基金（編號(hào)：32001100）。

作者簡介：徐寧（1987—）女，河南杞縣人，碩士，講師，主要從事園林植物應(yīng)用及景觀設(shè)計(jì)研究。E-mail：bzfl93771@163.com。

鹽脅迫嚴(yán)重影響植物生長發(fā)育和繁殖等生命活動(dòng)，也是人們研究最多的逆境因子之一。鹽害限制了我國濱海地區(qū)綠化樹種的選擇范圍，影響園林綠化景觀效果^[1]。獨(dú)腳金內(nèi)酯（strigolactones，簡稱SLs）是一類植物倍半萜類化合物，也是一種新型植物激素，作為植物生長發(fā)育所必需的基本調(diào)節(jié)物質(zhì)，普遍存在于植物體中，調(diào)控著各種植物的生長發(fā)育過程^[2-3]。此外，獨(dú)腳金內(nèi)酯還有助于提高植物對(duì)生物和非生物脅迫的抗逆性^[4]。研究發(fā)現(xiàn)，獨(dú)腳金內(nèi)酯在參與調(diào)控鹽脅迫的過程中，主要通過影響生長素、赤霉素、脫落酸等植物激素的穩(wěn)態(tài)平衡和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，從而共同調(diào)控植物的生長進(jìn)程并抵御外界環(huán)境脅迫帶來的影響，進(jìn)而適應(yīng)環(huán)境條件^[5-6]。有研究發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫條件下噴施獨(dú)腳金內(nèi)酯人工合成類似物（GR24）可減輕月季葉片的受害程度，減緩葉綠素的損耗速率，降低相對(duì)電導(dǎo)率^[7]。王喬健也發(fā)現(xiàn)，外施GR24能夠提高烏桕幼苗抗鹽脅迫的能力，增加烏桕幼苗的生物量，還能夠調(diào)控氧化還原系統(tǒng)來增加清除自由基和過氧化物的能力^[8]。此外，獨(dú)腳金內(nèi)酯作為根部來源的信號(hào)物質(zhì)，能夠增強(qiáng)植物與叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，簡稱AMF）之間的共生關(guān)系，促進(jìn)菌絲分枝^[9-10]。

叢枝菌根真菌在系統(tǒng)發(fā)育上屬于球囊霉亞門（Glomeromycotina），能與超過80%的陸生植物根系形成共生關(guān)系^[11-12]。通過AMF龐大的菌絲網(wǎng)絡(luò)，寄主植物能夠從土壤中獲取水分和養(yǎng)分，尤其是土壤磷元素^[13]。大量的研究已經(jīng)證明，AMF能不同程度地提高寄主植物對(duì)鹽脅迫的耐受力，這種潛在機(jī)制包括增強(qiáng)寄主植物水分利用效率、增強(qiáng)光合作用以及活性氧（reactive oxygen species，簡稱ROS）的清除能力等^[14-16]。有研究發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫能顯著降低櫸樹的苗高以及地徑凈增長量，而接種摩西球囊霉1號(hào)（GM1）、2號(hào)（GM2）處理顯著提高了鹽脅迫下櫸樹的地徑凈增長量，同時(shí)也能夠提升櫸樹葉片凈光合速率、氣孔限制值、水分利用效率，并降低胞間CO₂濃度^[17]。崔令軍等發(fā)現(xiàn)，隨鹽濃度逐漸增加，接種AMF處理的楨楠根系與對(duì)照處理的赤霉素（GA）、生長素（IAA）、玉米素（ZR）含量均呈下降趨勢，脫落酸（ABA）含量則呈上升趨勢，AMF通過打破激素間的平衡，增加GA、IAA、ZR含量而降低ABA含量來增強(qiáng)楨楠的耐鹽性，促進(jìn)根系生長^[18]。

多枝檉柳（Tamarix ramosissima Ledeb.）是檉柳科檉柳屬的灌木或小喬木，廣泛分布在我國內(nèi)陸鹽堿地區(qū)。多枝檉柳具有防風(fēng)固沙、涵養(yǎng)水源的作用，且能夠有效改善鹽堿地生態(tài)環(huán)境。在內(nèi)陸濱海地區(qū)，多枝檉柳是重要的抵抗海岸帶侵蝕的優(yōu)勢植物，也是改造鹽堿地綠化環(huán)境的優(yōu)良樹種，對(duì)維持濱海地區(qū)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定具有重要作用。近年來，對(duì)多枝檉柳的研究成果主要集中生長特性、種群分布等方面^[19-20]，而關(guān)于鹽脅迫下接種AMF并添加外源獨(dú)腳金內(nèi)酯對(duì)多枝檉柳幼苗光合以及內(nèi)源激素的研究更是鮮有報(bào)道。鑒于AMF極為廣泛的寄主范圍和多樣化的生理生態(tài)功能，在眾多有益土壤微生物中地位突出。本研究擬通過溫室盆栽試驗(yàn)，探究鹽脅迫處理下AMF與根施獨(dú)腳金內(nèi)酯二者聯(lián)合促進(jìn)多枝檉柳生長特性、光合作用、葉綠素?zé)晒鈪?shù)以及激素變化的生理機(jī)制，對(duì)研究鹽脅迫下植物生長發(fā)育具有重要意義。

1? 材料與方法

1.1? 試驗(yàn)材料

供試植物材料為多枝檉柳種子，由河南豫藝種業(yè)科技發(fā)展有限公司提供。獨(dú)腳金內(nèi)酯（rac-GR24，純度≥98%）類似物購買自北京索萊寶科技有限公司，在室溫下避光保存。選用的AMF菌種為地表球囊霉（Glomus versiforme）和摩西斗管囊霉（Funneliformis mosseae）混合1∶1組成，購自北京市農(nóng)林科學(xué)院植物營養(yǎng)與資源研究所，接種物主要是栽培基質(zhì)中的AMF孢子、菌絲和菌根根段，經(jīng)檢測AMF孢子密度260～305個(gè)/50 g，菌根侵染率70%。栽培基質(zhì)選用表層園土（取自河南農(nóng)業(yè)大學(xué)校園綠地）和河沙按照體積比1∶1均勻混合后曬干，過2 mm篩，并進(jìn)行高溫高壓蒸汽滅菌（121 ℃，0.15 MPa）2 h后備用，經(jīng)檢測栽培基質(zhì)的pH值為6.78，有機(jī)質(zhì)含量為1.26%，全氮含量為1.35 g/kg，全鉀含量為36.5 g/kg，全磷含量為0.89 g/kg，速效磷含量為5.66 mg/kg，速效鉀含量為 106.33 mg/kg。

1.2? 試驗(yàn)方法

選取均勻度高，大小一致的多枝檉柳種子，用5% NaClO₂溶液浸泡消毒5 min，再用蒸餾水沖洗5～6次。隨后將消毒后的種子在光照培養(yǎng)箱（PGX-1000B，溫度28 ℃恒溫）中催芽，后播種在50孔穴盤中，待幼苗長至5～7 cm高度時(shí)上盆，每盆栽植1株（盆高為30 cm，上口直徑為30 cm，下口直徑為25 cm），盆內(nèi)裝基質(zhì)3.5 kg。

試驗(yàn)于2022年4—10月在河南農(nóng)業(yè)大學(xué)空地進(jìn)行，采用盆栽試驗(yàn)。試驗(yàn)共設(shè)置8個(gè)處理：（1）CK，不添加鹽處理，（2）AMF（接種地表球囊霉和摩西斗管囊霉混合1∶1菌種），（3）SLs（根施 50 nmol/L 獨(dú)腳金內(nèi)酯），（4）AMF+SLs（接種混合AMF并噴施50 nmol/L獨(dú)腳金內(nèi)酯），（5）SS（進(jìn)行0.6%鹽濃度處理），（6）SS+AMF（0.6%鹽濃度處理下混合接種AMF），（7）SS+SLs（0.6%鹽濃度處理下根施 50 nmol/L 獨(dú)腳金內(nèi)酯），（8）SS+AMF+SLs（0.6%鹽濃度處理下混合接種AMF并根施 50 nmol/L 獨(dú)腳金內(nèi)酯），每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)。研究發(fā)現(xiàn)，多枝檉柳幼苗在土壤鹽分為0.5%～0.8%間出現(xiàn)葉片變黃的現(xiàn)象^[21]，故本次試驗(yàn)鹽濃度設(shè)置為0.6%。接種AMF處理的接種物數(shù)量為100 g/盆，對(duì)照（CK）則接種等量滅菌接種物（121 ℃，20 min下高溫高壓滅菌），以保持相同的其他根圍微生物區(qū)系環(huán)境。施用獨(dú)腳金內(nèi)酯的處理用蒸餾水配成 50 nmol/L 的溶液進(jìn)行灌根（濃度參照范吳蔚等的研究^[22]設(shè)定），每間隔7 d灌根1次，其余組施用等量去離子水灌根。待多枝檉柳移苗生長25 d后進(jìn)行鹽處理，每隔3 d 加入1次鹽溶液，使鹽含量達(dá)到栽培基質(zhì)質(zhì)量的0.6%。管理期間保證溫度、水分、養(yǎng)分、通風(fēng)等條件的控制，每周定期隨機(jī)調(diào)換盆栽位置，確保條件的一致性，觀察記錄各處理組多枝檉柳生長情況，鹽脅迫70 d后收獲并測量各項(xiàng)指標(biāo)。

1.3? 指標(biāo)測定

1.3.1? AMF侵染指標(biāo)的測定

隨機(jī)選取10株多枝檉柳，將根系用水沖洗干凈，洗凈后加入10%氫氧化鉀溶液，在90 ℃水浴鍋（DZKW-S-6型）中放置30 min，冷卻后清洗干凈，后加1%HCl酸化，加0.1%酸性品紅-乳酸甘油染色液放置12 h，在顯微鏡下制片鏡檢，根據(jù)劉潤進(jìn)等的描述方法計(jì)算菌根侵染率、泡囊數(shù)、叢枝數(shù)以及侵入點(diǎn)位數(shù)^[23]。

1.3.2? 生長指標(biāo)的測定

用直尺測量多枝檉柳株高，將植株的根、莖、葉分別進(jìn)行收獲。注意收獲根部分時(shí)，小心去除根部雜質(zhì)，盡量不要損傷根部，用水將雜質(zhì)沖洗干凈。分別將根、莖、葉放入85 ℃烘箱中烘干至恒重，稱取各部分重量并記錄。根冠比＝根生物量/地上部生物量。

1.3.3? 鹽害指數(shù)的測定

鹽害分級(jí)的方法參照付晴晴等的分類，在測定各項(xiàng)指標(biāo)前2 d測定^[24]。

1.3.4? 葉綠素含量以及枝相對(duì)含水量的測定

采用乙醇提取法提取葉綠素，用紫外可見分光光度計(jì)分別在波長663、645 nm下測定吸光度，計(jì)算葉綠素含量；采用飽和稱重法測定枝相對(duì)含水量，枝相對(duì)含水量=（枝鮮重-枝干重）/（枝飽和重-枝干重）×100%。

1.3.5? 氣體交換參數(shù)的測定

選擇晴朗少云的天氣，采用美國CIRAS-3便攜式光合儀，在08：30—11：30進(jìn)行測定。每個(gè)處理選取6～8株植株，每株植株選取1張中上部健康的、完全展開的成熟葉進(jìn)行測量。測量過程中記錄凈光合速率（P_n）、蒸騰速率（T_r）、氣孔導(dǎo)度（G_s）、胞間二氧化碳濃度（C_i）、水分利用效率（WUE）以及氣孔限制值（L_s）。

1.3.6? 葉綠素?zé)晒鉁y定

選取晴朗少云的天氣，測定時(shí)間為08：30—11：30，采用Pocket PEA植物效率儀進(jìn)行葉片的葉綠素?zé)晒鈪?shù)測定。測量的葉片與氣體交換測量選擇的葉片相同。葉片暗適應(yīng) 30 min 后，測定PSⅡ最大光化學(xué)效率（ F_v/F_m）、PSⅡ潛在活性（F_v/F_o）、表觀電子傳遞速率（ETR）、熱耗散速率（HDR）等參數(shù)，所有測定重復(fù)3次，取平均值。

1.3.7? 內(nèi)源激素含量測定

內(nèi)源激素含量的測定采用酶聯(lián)免疫吸附測定法（enzyme-linked immunosorbent assay，簡稱ELISA），獨(dú)角金內(nèi)酯、生長素、赤霉素以及脫落酸試劑盒均購買于武漢吉立德生物科技有限公司，各項(xiàng)激素均重復(fù)3次測量。

1.4? 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2010軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和繪圖，所有試驗(yàn)均采用SPSS 16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，通過單因素方差分析（one-way ANOVA）雙因素方差分析（two-way ANOVA）以及差異顯著性檢驗(yàn)（LSD法，α=0.05）處理數(shù)據(jù)。表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 鹽脅迫下多枝檉柳菌根發(fā)育情況

本試驗(yàn)條件下，AMF能夠侵染多枝檉柳根系，并形成穩(wěn)定的菌根共生關(guān)系。而鹽脅迫下AMF的菌根侵染率、根內(nèi)泡囊數(shù)、叢枝數(shù)和根上菌絲侵入點(diǎn)數(shù)均有所降低，說明鹽脅迫能抑制AMF對(duì)多枝檉柳根系的侵染。非鹽脅迫或者鹽脅迫下，根施獨(dú)腳金內(nèi)酯有助于促進(jìn)AMF的侵染（表1）。與AMF處理相比，AMF+SLs處理下的菌根侵染率、根內(nèi)泡囊數(shù)、叢枝數(shù)和根上菌絲侵入點(diǎn)數(shù)分別提高18.2%、17.2%、23.0%和18.2%；鹽脅迫下，與SS+AMF處理相比，SS+AFM+SLs處理下的菌根侵染率、根內(nèi)泡囊數(shù)、叢枝數(shù)和根上菌絲侵入點(diǎn)數(shù)分別提高10.0%、31.7%、56.1%和15.6%?？芍?，非鹽脅迫或者鹽脅迫下，根施SLs處理均能促進(jìn)AMF發(fā)育。

2.2? 鹽脅迫下外源獨(dú)腳金內(nèi)酯和AMF對(duì)多枝檉柳生長的影響

由圖1可知，鹽脅迫下，多枝檉柳的株高和根冠比均呈下降趨勢，非鹽脅迫或者鹽脅迫下接種AMF或者根施SLs均有助于促進(jìn)多枝檉柳的生長。非鹽脅迫下，與CK處理相比，AMF處理下的多枝檉柳的株高和根冠比增加43.9%和19.2%，SLs處理下分別增加37.1%和23.0%，AMF+SLs處理分別增加70.6%和35.7%，AMF與SLs處理下的多枝檉柳株高和根冠比差異均不顯著。鹽脅迫下，與SS處理相比，SS+AMF處理下的多枝檉柳株高和根冠比分別提高61.5%、16.4%，SS+SLs處理下的株高和根冠比分別提高70.6%、31.9%，SS+AMF+SLs處理下分別提高121.1%、64.1%?？梢?，非鹽脅迫或者鹽脅迫下，接種AMF并根施SLs促進(jìn)多枝檉柳生長的效果優(yōu)于單一AMF處理或者SLs處理，且增幅效果在鹽脅迫下更大。

2.3? 鹽脅迫下外源獨(dú)腳金內(nèi)酯和AMF對(duì)多枝檉柳鹽害指數(shù)的影響

鹽脅迫處理的多枝檉柳幼苗葉片表現(xiàn)出葉緣黃化并萎蔫的現(xiàn)象，植株生長較為緩慢，而非鹽脅迫處理下的多枝檉柳幼苗生長較為健壯，并未出現(xiàn)鹽害癥狀。鹽脅迫下，SS處理的多枝檉柳幼苗鹽害指數(shù)為65.1%，SS+AMF處理的鹽害指數(shù)為51.7%，SS+SLs處理的鹽害指數(shù)為50.1%，而SS+AMF+SLs處理下的鹽害指數(shù)為41.5%（圖2）。可見，鹽脅迫下接種AMF或者根施SLs均可以緩解鹽害，但SS+AMF與SS+SLs處理差異不顯著。

2.4? 鹽脅迫下外源獨(dú)腳金內(nèi)酯和AMF對(duì)多枝檉柳葉綠素和枝條含水量的影響

由圖3可知，鹽脅迫下，多枝檉柳葉片葉綠素含量和枝相對(duì)含水量表現(xiàn)為下降的趨勢，而非鹽脅迫或者鹽脅迫下接種AMF或者根施SLs均有助于多枝檉柳葉片積累葉綠素含量以及枝條含水量。非鹽處理下，與CK處理相比，AMF處理多枝檉柳的葉綠素含量44.7%，枝相對(duì)含水量無顯著差異，SLs處理下的葉綠素含量增加34.9%，SLs處理下的枝相對(duì)含水量與CK處理無顯著差異，AMF+SLs處理的葉綠素含量和枝相對(duì)含水量分別提高82.5%和6.1%。鹽脅迫下，與SS處理相比，SS+AMF處理下的多枝檉柳葉綠素含量和枝相對(duì)含水量分別提高33.9%和2.3%，SS+AMF+BRs處理下葉綠素含量和枝相對(duì)含水量分別提高86.4%和5.0%，但SS+SLs處理下的葉綠素含量和枝相對(duì)含水量與SS處理無顯著差異，其他處理下差異均顯著?？梢?，非鹽脅迫或者鹽脅迫下，接種AMF并根施SLs提高多枝檉柳葉綠素含量以及枝相對(duì)含水量的效果優(yōu)于單一AMF處理或者SLs處理，對(duì)葉綠素含量的增幅效果在鹽脅迫下更大一些。

2.5? 鹽脅迫下外源獨(dú)腳金內(nèi)酯和AMF對(duì)多枝檉柳氣體交換參數(shù)的影響

由圖4可知，鹽脅迫下，多枝檉柳凈光合速率、蒸騰速率、水分利用效率、胞間二氧化碳濃度、氣孔導(dǎo)度以及氣孔限制值的變化趨勢基本一致，均呈現(xiàn)下降的趨勢；AMF或者SLs處理多枝檉柳幼苗葉片的P_n、T_r、WUE、C_i、G_s及L_s顯著高于CK處理。非鹽脅迫下，與CK處理相比，AMF處理下多枝檉柳的P_n、T_r、WUE、C_i、G_s及L_s分別提高12.6%、103.9%、48.6%、48.7%、40.5%和110.0%，SLs處理下各指標(biāo)分別增加4.2%、55.3%、22.9%、27.2%、24.3%和66.7%，AMF+SLs處理下各指標(biāo)分別增加16.8%、181.6%、94.3%、81.3%、53.3%和176.7%，但AMF處理與AMF+SLs處理下的P_n差異不顯著。鹽脅迫下，與SS處理相比，SS+AMF處理下多枝檉柳的P_n、T_r、WUE、C_i、G_s及L_s分別提高21.3%、97.9%、62.1%、60.8%、40.2%和117.4%，SS+SLs處理下各指標(biāo)分別增加20.7%、42.6%、27.6%、38.5%、21.2%和60.9%，SS+AMF+SLs處理下各指標(biāo)分別增加40.7%、176.6%、96.6%、99.1%、75.9%和160.9%，但 SS+AMF處理與SS+SLs處理下的P_n無顯著差異?？梢?，非鹽脅迫或者鹽脅迫下，接種AMF并根施SLs處理對(duì)多枝檉柳光合作用的提升效果優(yōu)于單一處理。

2.6? 鹽脅迫下外源獨(dú)腳金內(nèi)酯和AMF對(duì)多枝檉柳葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

由圖5可知，鹽脅迫下，多枝檉柳葉片中PSⅡ最大光化學(xué)效率、PSⅡ潛在活性、表觀電子傳遞速率下降，而熱耗散速率則表現(xiàn)為增加的趨勢，接種AMF處理或者SLs處理下能夠提高多枝檉柳 F_v/F_m、F_v/F_o以及ETR等參數(shù)，而降低HDR參數(shù)。非鹽脅迫下，與CK處理相比，AMF處理下多枝檉柳的F_v/F_m和F_v/F_o分別增加2.6%和31.8%，ETR下降，HDR下降47.6%，SLs處理下的F_v/F_m值與CK處理差異不顯著，SLs處理下的HDR與CK處理相比下降14.3%，AMF+SLs處理下的F_v/F_m、F_v/F_o以及ETR分別增加6.5%、44.5%、33.9%，HDR下降61.9%。鹽脅迫下，與SS處理相比，SS+AMF處理下多枝檉柳的F_v/F_m、F_v/F_o、ETR分別增加1.3%、33.1%和116.8%，HDR下降25.8%，SS+SLs處理下F_v/F_m、F_v/F_o、ETR分別增加0.2%、24.8%和37.3%，HDR下降9.7%，SS+AMF+SLs處理下的F_v/F_m、F_v/F_o以及ETR分別增加4.0%、51.0%、189.8%，HDR下降32.3%?？梢?，非鹽脅迫或者鹽脅迫下，接種AMF并根施SLs處理對(duì)多枝檉柳F_v/F_m、F_v/F_o以及ETR等參數(shù)的提升效果優(yōu)于單一處理，降低HDR的效果也高于單一處理。

2.7? 鹽脅迫下外源獨(dú)腳金內(nèi)酯和AMF對(duì)多枝檉柳內(nèi)源激素含量的影響

鹽脅迫下，多枝檉柳葉片中獨(dú)腳金內(nèi)酯、生長素以及赤霉素含量下降，而脫落酸含量上升，接種AMF處理和/或SLs處理均能夠提高多枝檉柳葉片中內(nèi)源SLs、IAA以及GA含量，而降低ABA含量。非鹽脅迫下，與CK處理相比，AMF處理下多枝檉柳葉片中的內(nèi)源SLs稍下降，IAA以及GA含量分別增加95.2%和116.1%，ABA含量下降33.6%；SLs處理下內(nèi)源SLs、IAA以及GA含量分別增加3.6%、48.5%和33.5%，ABA含量下降28.2%；AMF+SLs處理下內(nèi)源SLs、IAA以及GA含量分別增加7.7%、189.6%和125.9%，ABA含量下降46.4%。鹽脅迫下，與SS處理相比，SS+AMF處理下多枝檉柳葉片中的內(nèi)源SLs下降，IAA以及GA含量分別增加45.4%和65.8%，ABA含量下降26.1%；SS+SLs

處理下內(nèi)源SLs、IAA以及GA含量分別增加5.1%、7.3%和31.8%，ABA含量下降20.7%；SS+AMF+SLs處理下內(nèi)源SLs、IAA以及GA含量分別增加5.8%、98.8%和121.1%，ABA含量下降45.2%。可見，非鹽脅迫或者鹽脅迫下，接種AMF并根施SLs處理對(duì)內(nèi)源激素的調(diào)控作用優(yōu)于單一處理。

3? 討論

土壤鹽含量直接影響植物干物質(zhì)的積累和生長發(fā)育，隨著土壤鹽含量增加，植物生長發(fā)育狀況也會(huì)隨之降低。有研究發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫下，AMF可以主動(dòng)向植物運(yùn)輸水分和養(yǎng)分，并且形成菌根后根系的輸水效率更高，水分運(yùn)輸阻力更小，同時(shí)能夠保護(hù)寄主植物的光合作用，調(diào)節(jié)氣孔導(dǎo)度以提高水分利用率等方式來提高植物的抗鹽能力^[25-26]。目前已有研究表明，獨(dú)腳金內(nèi)酯在植物中不僅可作為一種信號(hào)分子調(diào)控植物生長發(fā)育以及株型的形成，還能抵御各種生物和非生物脅迫，增強(qiáng)植物抗逆性^[27]。獨(dú)腳金內(nèi)酯不僅可以調(diào)控植物的分枝能力，還參與植物根系的建成，通過對(duì)黃芪、蘋果等植物的研究發(fā)現(xiàn)，獨(dú)腳金內(nèi)酯能夠抑制側(cè)根的生長，而促進(jìn)主根的生長發(fā)育，調(diào)控根系構(gòu)型來改善植物營養(yǎng)^[28-29]。此外，獨(dú)腳金內(nèi)酯對(duì)菌根共生也有積極的影響，作為植物與根際微生物之間的交流信號(hào)，能夠增加叢枝菌根真菌菌絲的分枝數(shù)量，特別是營養(yǎng)元素缺乏的土壤中，可加速刺激植物合成活性更強(qiáng)

的獨(dú)腳金內(nèi)酯并快速釋放到土壤當(dāng)中，改善土壤中氮磷鉀的平衡狀態(tài)，促進(jìn)寄主植物生長^[30-31]。本試驗(yàn)也證明，鹽脅迫下，AMF的侵染情況下降，獨(dú)腳金內(nèi)酯能促進(jìn)AMF的生長發(fā)育，增加叢枝數(shù)和根上菌絲侵入點(diǎn)數(shù)，幫助其侵染多枝檉柳并形成穩(wěn)定的共生關(guān)系，顯著增加多枝檉柳的株高，并形成更高的根冠比來增加根系的生物量。鹽脅迫不僅影響AMF的繁殖，還會(huì)使寄主植物出現(xiàn)鹽害等現(xiàn)象，接種AMF或者獨(dú)腳金內(nèi)酯根施后可以使多枝檉柳的幼苗鹽害情況減弱，說明二者可以提高多枝檉柳幼苗的耐鹽性。

植物通過光合作用將大氣中的CO₂固定轉(zhuǎn)化為有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，在物質(zhì)循環(huán)以及能量流動(dòng)過程中被利用。有研究表明，鹽脅迫處理會(huì)影響植物的光合作用，主要表現(xiàn)在碳同化效率的降低以及有機(jī)物合成能力的下降^[32]。鹽濃度50 mmol/L下對(duì)植株幼苗的凈光合速率影響不大，超過50 mmol/L后P_n開始下降，氣孔限制值也減小^[33]。接種AMF可以維持植物正常的生長發(fā)育狀態(tài)，改善植物光合能力^[34]。本試驗(yàn)中，鹽脅迫下多枝檉柳葉片葉綠素含量和枝相對(duì)含水量表現(xiàn)為下降的趨勢，而接種AMF或根施獨(dú)腳金內(nèi)酯后，葉綠素含量均有增加的趨勢，說明AMF或根施獨(dú)腳金內(nèi)酯能夠增加葉綠素在細(xì)胞內(nèi)合成的能力，顯著提高植物的光和效率。葉綠素?zé)晒鈪?shù)在植物進(jìn)行光合作用過程中也發(fā)揮著重要作用，其中F_v/F_m、F_v/F_o、ETR和HDR是 PSⅡ 反應(yīng)系統(tǒng)的重要參數(shù)，可反映環(huán)境脅迫對(duì)植物光合作用的影響^[35]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)_v/F_m、F_v/F_o、ETR在鹽處理下表現(xiàn)為下降的趨勢，HDR增加，接種AMF或根施獨(dú)腳金內(nèi)酯后，表現(xiàn)則相反。說明AMF或獨(dú)腳金內(nèi)酯可以有效減緩鹽濃度處理帶來的光抑制現(xiàn)象，提高PSⅡ反應(yīng)系統(tǒng)對(duì)原初光能的捕獲效率，從而使光合器官的破壞程度變小，光合效率進(jìn)一步增加。凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、水分利用率、胞間CO₂濃度以及氣孔限制值等是反映植物光合作用的主要參數(shù)，包括植物碳同化以及有機(jī)物的合成能力。本試驗(yàn)條件下，鹽脅迫顯著降低了植物光合作用，各參數(shù)值整體顯著下降；接種AMF或者根施獨(dú)腳金內(nèi)酯后，光合作用顯著改善，凈光合速率增加，這與梁倩倩等的研究結(jié)果一致，其發(fā)現(xiàn)鹽處理下接種摩西球囊霉的牡丹植株葉片凈光合速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO₂利用能力、蒸騰速率、水分利用效率和植株生長量均顯著高于不接種對(duì)照，AMF能顯著提高牡丹的光合作用并提高耐鹽性^[36]。而獨(dú)腳金內(nèi)酯可能通過促進(jìn)多枝檉柳根系的生長來發(fā)揮作用，使得根冠比增加，具體還需進(jìn)一步試驗(yàn)驗(yàn)證。

植物激素是對(duì)植物的生長發(fā)育有顯著調(diào)節(jié)作用的微量有機(jī)物，在植物耐鹽性方面發(fā)揮著重要作用，這些激素相互作用，調(diào)節(jié)生物化學(xué)和生理過程，轉(zhuǎn)化為生長、發(fā)育、營養(yǎng)分配作用^[37-38]。本研究發(fā)現(xiàn)鹽處理下，叢枝菌根真菌可以促進(jìn)寄主植物對(duì)IAA、GA的積累，而降低ABA的產(chǎn)生量。菌根植物能夠合成獨(dú)腳金內(nèi)酯，促進(jìn)根部真菌的生長，而菌根植物依靠圍繞在根部的叢枝真菌從土壤中吸收氮磷鉀等營養(yǎng)物質(zhì)，叢枝真菌也從植物根部得到所需的糖類等^[39]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫顯著降低了IAA、GA以及SLs的含量，但接種AMF后GA、IAA含量顯著增加。另有研究證明，獨(dú)腳金內(nèi)酯能夠調(diào)節(jié)其他植物激素的含量，特別是IAA和ABA，并與之相互作用^[40]。本試驗(yàn)條件下，鹽脅迫后ABA含量顯著高于對(duì)應(yīng)非鹽脅迫處理，而接種AMF后ABA含量表現(xiàn)為降低的趨勢，這表明在鹽處理下接種AMF可以減少ABA的合成水平，促進(jìn)寄主植物生長發(fā)育。因此，多枝檉柳接種AMF或者SLs處理后可通過積累IAA、GA含量，降低ABA的產(chǎn)生量來減緩鹽脅迫造成的傷害。

4? 結(jié)論

綜上所述，鹽脅迫下多枝檉柳生長受抑制，株高和根冠比下降，葉綠素含量以及枝條相對(duì)含水量降低，光合作用下降。而根施獨(dú)腳金內(nèi)酯能夠促進(jìn)AMF對(duì)多枝檉柳的侵染，增加泡囊數(shù)、叢枝數(shù)和侵入點(diǎn)位數(shù)。獨(dú)腳金內(nèi)酯配合AMF接種能增加葉綠素含量，通過提高葉片水分利用效率、凈光合速率、蒸騰速率和氣孔導(dǎo)度來增強(qiáng)植物光合作用能力，維持PSⅡ光系統(tǒng)中最大光化學(xué)效率、PSⅡ潛在活性以及表觀電子傳遞速率，而減低熱耗散速率，顯著增加植株的株高和根冠比，維持體內(nèi)激素平衡，來降低多枝檉柳的鹽害指數(shù)，結(jié)論認(rèn)為根施獨(dú)腳金內(nèi)酯配合AMF接種是提高濱海地區(qū)多枝檉柳幼苗抗鹽性的有效手段。

參考文獻(xiàn)：

[1]王文卿，劉俊偉，王良睦. 重視南方濱海地區(qū)城鎮(zhèn)園林綠化樹種鹽害的研究[J]. 中國園林，2000，16（5）：73-75.

[2]Xu E J，Chai L，Zhang S Q，et al. Catabolism of strigolactones by a carboxylesterase[J]. Nature Plants，2021，7：1495-1504.

[3]吳轉(zhuǎn)娣，胡鑫，昝逢剛，等. 獨(dú)腳金內(nèi)酯的生物合成及其調(diào)控[J]. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，25（12）：97-110.

[4]Wang L，Wang B，Yu H，et al. Transcriptional regulation of strigolactone signalling in Arabidopsis[J]. Nature，2020，583：277-281.

[5]Sun H W，Li W Q，Burritt D J，et al. Strigolactones interact with other phytohormones to modulate plant root growth and development[J]. The Crop Journal，2022，10（6）：1517-1527.

[6]沈月，陶寶杰，華夏，等. 獨(dú)腳金內(nèi)酯與激素互作調(diào)控根系生長的研究進(jìn)展[J]. 生物技術(shù)通報(bào)，2022，38（8）：24-31.

[7]朱思雅，段建維，許彬，等. 獨(dú)角金內(nèi)酯對(duì)鹽脅迫下月季植株生長的影響[J]. 現(xiàn)代園藝，2022，45（1）：13-15，20.

[8]王喬健.? 獨(dú)腳金內(nèi)酯調(diào)控烏桕抗旱耐鹽的分子機(jī)理研究[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2019.

[9]Akiyama K，Matsuzaki K I，Hayashi H. Plant sesquiterpenes induce hyphal branching in arbuscular mycorrhizal fungi[J]. Nature，2005，435（7043）：824-827.

[10]Müller L M，F(xiàn)lokova K，Schnabel E，et al. A CLE–SUNN module regulates strigolactone content and fungal colonization in arbuscular mycorrhiza[J]. Nature Plants，2019，5：933-939.

[11]謝偉，郝志鵬，張莘，等. 叢枝菌根網(wǎng)絡(luò)介導(dǎo)的植物間信號(hào)交流研究進(jìn)展及展望[J]. 植物生態(tài)學(xué)報(bào)，2022，46（5）：493-515.

[12]Chaturvedi A，Cruz Corella J，Robbins C，et al. The methylome of the model arbuscular mycorrhizal fungus，Rhizophagus irregularis，shares characteristics with early diverging fungi and Dikarya[J]. Communications Biology，2021，4：901.

[13]雷梅，甘子瑩，譚世廣，等. 叢枝菌根真菌和不同形態(tài)氮對(duì)杉木幼苗根際土壤氮磷養(yǎng)分含量及其相關(guān)酶化學(xué)計(jì)量比的影響[J]. 林業(yè)科學(xué)研究，2023，36（1）：59-67.

[14]周昕南，楊亮，許靜，等. 接種AM真菌對(duì)不同鹽度土壤中向日葵生長的影響[J]. 農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境學(xué)報(bào)，2020，37（5）：744-752.

[15]賈婷婷，常偉，范曉旭，等. 鹽脅迫下AM真菌對(duì)沙棗苗木光合與葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊慬J]. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2018，38（4）：1337-1347.

[16]吳強(qiáng)盛，柳威，翟華芬，等. 鹽脅迫下AM真菌對(duì)枳實(shí)生苗生長和根系抗氧化酶的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32（4）：759-762，782.

[17]馬仕林，曹鵬翔，張金池，等. 鹽脅迫下AMF對(duì)櫸樹幼苗生長和光合特性的影響[J]. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2022，46（1）：122-130.

[18]崔令軍，劉瑜霞，林健，等. 鹽脅迫下叢枝菌根真菌對(duì)楨楠根系生長和激素的影響[J]. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2020，44（4）：119-124.

[19]肖生春，肖洪浪，司建華，等. 干旱區(qū)多枝檉柳的生長特性[J]. 西北植物學(xué)報(bào)，2005，25（5）：1012-1016.

[20]趙峰俠，尹林克. 荒漠內(nèi)陸河岸胡楊和多枝檉柳幼苗種群空間分布格局及種間關(guān)聯(lián)性[J]. 生態(tài)學(xué)雜志，2007，26（7）：972-977.

[21]張瑞群，馬曉東，呂豪豪. 多枝檉柳幼苗生長及其根系解剖結(jié)構(gòu)對(duì)水鹽脅迫的響應(yīng)[J]. 草業(yè)科學(xué)，2016，33（6）：1164-1173.

[22]范吳蔚，潘志演，王原秀，等. 獨(dú)腳金內(nèi)酯對(duì)煙草腋芽生長以及抗氧化酶活性和糖含量的影響[J]. 植物生理學(xué)報(bào)，2021，57（4）：910-918.

[23]劉潤進(jìn)，陳應(yīng)龍. 菌根學(xué)[M]. 北京：科學(xué)出版社，2007.

[24]付晴晴，孫魯龍，翟衡，等. 葡萄種間雜交砧木育種F₁代植株耐鹽性分析[J]. 植物學(xué)報(bào)，2017，52（6）：733-743.

[25]郭娜，張玥，劉賢雍，等. 叢枝菌根真菌提高植物耐鹽性生理機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2023，51（4）：16-23.

[26]陳曉楠，伊力努爾·艾力，高文禮，等. 鹽脅迫下叢枝菌根真菌對(duì)疏葉駱駝刺幼苗生長和生理的影響[J]. 草業(yè)科學(xué)，2022，39（9）：1763-1772.

[27]王玫，陳洪偉，王紅利，等. 獨(dú)腳金內(nèi)酯調(diào)控植物分枝的研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2014，41（9）：1924-1934.

[28]趙玉歡，黃曉宇，關(guān)環(huán)，等. 獨(dú)腳金內(nèi)酯對(duì)黃芪幼苗根系發(fā)育的影響[J]. 植物生理學(xué)報(bào)，2023，59（3）：505-514.

[29]賈竣淇. 外源獨(dú)腳金內(nèi)酯及其抑制劑對(duì)蘋果根系生長發(fā)育和養(yǎng)分吸收的影響[D]. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2022.

[30]Ha C V，Leyva-González M A，Osakabe Y，et al. Positive regulatory role of strigolactone in plant responses to drought and salt stress[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2014，111（2）：851-856.

[31]Mostofa M G，Li W Q，Nguyen K H，et al. Strigolactones in plant adaptation to abiotic stresses：an emerging avenue of plant research[J]. Plant，Cell & Environment，2018，41（10）：2227-2243.

[32]王宇超，王得祥. 鹽脅迫對(duì)木本濱藜葉綠素合成及凈光合速率的影響[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2012，28（10）：151-158.

[33]王耘，金瀟瀟，趙輝，等. 鹽脅迫對(duì)鮮食蠶豆幼苗光合特性及抗氧化酶活性的影響[J]. 北方園藝，2017（20）：25-30.

[34]王志剛，畢銀麗，李強(qiáng)，等. 接種AM真菌對(duì)采煤沉陷地復(fù)墾植物光合作用和抗逆性的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017，48（5）：800-805.

[35]李瑞，周瑋，陸巍. 低葉綠素b水稻葉片自然衰老過程中光合作用與葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，32（2）：10-14.

[36]梁倩倩，王維華，郭紹霞，等. 鹽脅迫下叢枝菌根對(duì)牡丹光合作用的影響[J]. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2013，30（2）：79-83.

[37]楊瑞瑞，李小雙，梁玉青，等. 植物激素在苔蘚生長發(fā)育與逆境響應(yīng)過程中的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 西北植物學(xué)報(bào)，2022，42（3）：527-540.

[38]白鳳麟，樊雨荷，李琳. 硒、硅對(duì)鹽脅迫下小麥光合生理及養(yǎng)分累積的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2023，51（3）：68-75.

[39]孫金華，畢銀麗，裘浪，等. 土壤中叢枝菌根真菌對(duì)宿主植物磷吸收作用機(jī)制綜述[J]. 土壤通報(bào)，2016，47（2）：499-504.

[40]高雨，李穎，謝寅峰，等. 獨(dú)腳金內(nèi)酯調(diào)控植物側(cè)枝發(fā)育的分子機(jī)制及其與生長素交互作用的研究進(jìn)展[J]. 植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào)，2013，22（4）：98-104.