瓜類作物霜霉病研究進展

摘要：瓜類作物是我國重要的農(nóng)作物。自改革開放以來，瓜菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，栽培面積不斷擴大。霜霉病是威脅瓜菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要病害之一，該病傳播速度快防治難度大，大面積暴發(fā)時植物莖、葉及花序均受到損害，植株產(chǎn)量及品質(zhì)降低。近年來，隨著江蘇省瓜類作物霜霉病發(fā)生面積和受害面積逐年提升，瓜類作物霜霉病的深入研究已十分迫切。本文以前人研究為基礎(chǔ)，以黃瓜和甜瓜為代表對瓜類作物霜霉病進行系統(tǒng)全面的綜述。主要包括以下4個方面：（1）瓜類作物霜霉病生物學特性及發(fā)病規(guī)律；（2）病原菌防治；（3）瓜類作物霜霉病抗病機制；（4）瓜類作物霜霉病抗病基因挖掘與利用。此外，作者從生理層面和分子層面2個方面入手，討論了當前開展瓜類作物霜霉病研究面臨的挑戰(zhàn)并對進一步研究瓜類作物霜霉病進行展望，以期為未來科學有效防治瓜類作物霜霉病及深入研究霜霉病抗病分子機制等提供理論借鑒。

關(guān)鍵詞：瓜類作物；霜霉??；病原菌檢測；抗性機制

中圖分類號：S436.42""文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2024）22-0001-06

瓜類作物一直是江蘇省的主要經(jīng)濟作物。近年來，隨著江蘇省瓜類作物生產(chǎn)規(guī)模逐年擴大，霜霉病發(fā)生頻率及傳播速度愈發(fā)難控制^［1］。瓜類霜霉病是典型的氣傳病害，通過古巴假霜霉菌引起，在田間溫度低、濕度大、光照弱的條件下極易感染^［2-3］。此外，該病流行迅速、為害嚴重、防治困難，對果實產(chǎn)量、含糖量及商品率都造成直接影響^［4-5］。

瓜類作物霜霉病在生產(chǎn)上極具破壞性，在植物的各個時期均可發(fā)病，主要危害植株葉片和果實，嚴重時也能危害莖和花序^［6］。此外，瓜類作物霜霉病在植株不同時期的發(fā)病程度存在差異^［7］。例如植株苗期染病后，子葉出現(xiàn)水漬狀斑點，逐漸發(fā)展為淺褐色病斑，當濕度增加并達到一定閾值時，病葉背面就會長出灰色霉層，進而危害植株生長；而成株期植株染病后，最初植株近根部葉片會產(chǎn)生水漬狀斑，隨后病斑擴展到葉片正面，受葉脈限制，病斑呈現(xiàn)淺黃褐色多角形斑，葉片枯卷，嚴重時下方葉片全枯，致使植株產(chǎn)量和品質(zhì)下降^［8-9］。

因此，以前人研究為基礎(chǔ)，以黃瓜和甜瓜為代表從以下4個方面對瓜類作物霜霉病研究進行了深入探討：（1）瓜類作物霜霉病生物學特性及發(fā)病規(guī)律；（2）病原菌防治；（3）瓜類作物霜霉病抗病機制；（4）瓜類作物霜霉病抗病基因挖掘與利用。希望為未來科學有效檢測、防治和調(diào)控瓜類作物霜霉病以及選育優(yōu)質(zhì)抗病新品種提供參考。

1"霜霉病病原菌生物學特性及發(fā)病規(guī)律

1.1"病原菌的生物學特性

霜霉病是危害瓜類的主要葉部病害，其致病菌是由鞭毛菌亞門的古巴霜霉菌引起的真菌性病害^［10］。瓜類作物霜霉病菌菌絲體無色、無隔膜，在寄主細胞內(nèi)主要通過指狀分枝及卵形汲取養(yǎng)分^［11］。由于霜霉菌屬于專性寄生菌，主要通過孢囊梗和孢子囊等無性繁殖方式大量傳播（圖1），其中孢子囊可附著在空氣、動物體表面以及農(nóng)具中大量傳播；但因其孢子囊抗逆能力差，壽命不長，離體干燥8 d后無任何致病力，因此只能通過活體保存^［12-13］。目前實驗室主要通過寄主活體、離體葉、低溫保存液和低溫冷凍等4種方式保存^［14-17］。

1.2"發(fā)病規(guī)律

瓜類作物霜霉病是典型的氣傳性流行病害，主要是大氣、風雨、昆蟲傳播，周年循環(huán)。在連續(xù)降雨條件下，霜霉病病菌菌絲大量富集，病斑很快擴散成大斑塊，致使葉片卷枯，影響葉片進行光合作用^［18］。霜霉病在植株成熟后期發(fā)病率較高，且存在品種特異性。例如，在晚熟甜瓜中霜霉病發(fā)病率較高、速度快^［8］。此外，霜霉病的發(fā)病規(guī)律還存在地區(qū)差異。因南方地區(qū)溫暖潮濕，霜霉病菌的傳播主要通過氣流和雨水；而在北方干燥寒冷的地區(qū)，瓜類作物霜霉病菌主要在黃瓜霜霉病流行系統(tǒng)內(nèi)完成病菌傳播，通過菌絲體和孢子囊附著到溫室黃瓜上越冬，在春季栽培時，依附于溫室黃瓜植株的霜霉病菌就會通過氣流等方式傳播到春季大棚植株表面，在瓜類作物定植到田間后病菌再通過氣流、雨水等方式傳播到大田甜瓜中，在條件適宜的情況下，霜霉病菌可頻繁地重復(fù)侵染^［19-20］。

除上述發(fā)病規(guī)律外，霜霉病菌的發(fā)生與瓜類作物植株葉片的生理年齡、營養(yǎng)條件、寄主花粉也有關(guān)。Mahrishi等研究發(fā)現(xiàn)，霜霉病菌在高磷條件下病菌活性降低，田間植株霜霉病的發(fā)病率也隨之下降，而在低氮和鉀同時施用后，霜霉病孢子活性增強，田間霜霉病害加重^［21］。Shetty等將混合花粉與霜霉病菌的孢子囊懸液噴施于甜瓜植株葉片背面后，植株葉片病斑的數(shù)量和面積均比單獨施用孢子囊懸液接種后多^［22］。

2"病原菌防治

霜霉病的防治始終堅持“預(yù)防為主、防控相結(jié)合”的原則，主要采用病原菌預(yù)防與早期檢測、化學防治、生物防治以及優(yōu)質(zhì)抗病品種選育等防治方法^［23］。

霜霉病病原菌的早期檢測能夠?qū)⒕鷦┯盟帟r期、用量多少提供指導。甜瓜霜霉病菌是專性病原菌，只能在活體中擴繁和生長^［12］。因此，在病原菌早期檢測過程中需要提取病原菌DNA樣品進行檢測，然而在采集過程中難免會提取到其他寄主或附屬植物的DNA，因此需要高度特異性識別病原菌的引物才能真正做到精準檢測^［24-25］。根據(jù)當前國內(nèi)外的報道瓜類作物病原菌的檢測主要采用2對不同的特異性引物PcK和PxK，通過重疊PCR對霜霉和白粉2種病菌進行特異性擴增，隨后通過高分辨熔解曲線HRM同時檢測2種病原菌進而實現(xiàn)特異性診斷^［26］。此外，利用DNA測序裝置即交叉引物擴增和環(huán)介導等溫擴增2種方式也對空氣中病原菌的負荷含量以及病原菌的遺傳多樣性進行檢測^［27-28］。在生產(chǎn)中若能合理利用這些方法就能夠準確預(yù)測病害暴發(fā)的趨勢，同時也能提醒農(nóng)戶及時使用高效真菌劑防控病害。

除前期霜霉病病原菌的監(jiān)測和預(yù)防外，在生產(chǎn)上主要通過化學防治的手段進行瓜類作物霜霉病病害防治。目前瓜類作物霜霉病防治主要利用氨基甲酸酯類、乙磷鋁以及苯基酰胺類、苯甲酰胺類、嗜球果傘素類、甲氧基丙烯酰胺類及烷基磷酸鹽類等6類中化學藥劑^［29］。這些化學藥劑在使用過程中主要秉持“早” “準” “換” “均” “全”5個原則?！霸纭笔且诎l(fā)病早期及時用藥，把病害控制在萌芽狀態(tài)；“準”是要看準病害對癥下藥；“換”是指用藥要勤換，常用一種藥易使病菌產(chǎn)生抗藥性，需選用多種藥物搭配使用；“均”是在藥品使用時在葉片正反面均要噴施均勻；“全”是指在藥品噴施時要全面，地面棚膜均需噴施完全。此外，瓜類作物霜霉病在發(fā)病各個階段的噴施藥劑種類和用量均存在差異，生產(chǎn)上也會通過施用一些新型、低毒殺菌劑和農(nóng)藥或采用多種化學試劑混合使用來顯著提高甜瓜霜霉病的防控效果^［30-32］。例如，新型殺菌劑 D-塔格糖新型農(nóng)藥、新衍生物8q殺菌劑、嘧啶胺化合物1c殺菌劑以及氟噻唑吡乙酮殺菌劑；低毒殺菌劑有過氧乙酸500倍液、百霜脲500倍液、甲霜靈錳鋅600倍液等，這些化學試劑多次混合噴施后，能夠顯著提高霜霉病的防治效果，例如66.8%霉多克可濕性粉劑、10%科佳懸浮劑混合噴施3次能夠增強霜霉病的防效。

此外，生物防治也是當前瓜類作物霜霉病防治的重要手段之一。植物產(chǎn)生的次生代謝物具有殺蟲和抑菌效果。目前已有研究報道側(cè)柏葉、馬尾松針及澤漆莖葉混合丙酮提取液、番茄莖葉混樣提取液以及蒼耳葉提取液對瓜類作物霜霉病有重要作用^［33］。除植物自身提取物質(zhì)外，芽孢桿菌和大豆 β-聚賴氨酸、鲇魚皮黏液p22糖蛋白等細菌拮抗劑也可用來防治瓜類作物霜霉病。例如芽孢桿菌 Z-X-3、Z-X-10對甜瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)、霜霉病溫室和大田防效菌有較好的生防效果；噴施多黏類芽孢桿菌P1到感染霜霉病菌的瓜類葉片后，霜霉病菌孢子囊活力顯著降低，能減少農(nóng)藥使用；此外，鲇魚皮黏液和大豆β-聚賴氨酸也能夠顯著抑制黃瓜霜霉病，主要原理是p22糖蛋白能夠降解霜霉病菌孢子囊的細胞壁^［34-36］。

盡管現(xiàn)階段化學藥劑是生產(chǎn)上對瓜類霜霉病的主要防治手段，但長期施用后一方面會增加種植戶的種植成本，另一方面也會危害環(huán)境，而且會使霜霉病菌產(chǎn)生抗藥性。此外隨著食品安全意識的增強，一些高毒危害農(nóng)藥也被限制使用，霜霉病的防治問題也變得愈加困難。因此，只有培育品質(zhì)優(yōu)良的抗病品種才能夠有效地減少霜霉病菌的侵染^{［8，37］}。但因目前篩選到的抗霜霉病的甜瓜材料大部分是野生資源，轉(zhuǎn)育時間長，很難直接應(yīng)用，且不同地區(qū)黃瓜、甜瓜等霜霉病優(yōu)勢生理小種并未確定，植株對不同霜霉病生理小種存在抗性差異，因此國內(nèi)外對瓜類作物霜霉病抗病品種的選育仍有較大困難。

3"瓜類作物霜霉病抗病機制

在植物病理、抗病育種研究中，瓜類霜霉病的抗病機制始終是焦點。目前瓜類霜霉病抗病機制研究主要集中在以下4個部分：

病原菌侵染對抗、感品種不同組織結(jié)構(gòu)的差異。霜霉病病原菌侵入不同甜瓜抗、感品種后，感染部位附近氣孔胼胝質(zhì)、木質(zhì)素等含量不足，細胞內(nèi)菌絲迅速蔓延，核膜溶解，細胞質(zhì)中出現(xiàn)病理性泡狀結(jié)構(gòu)，孢子大量繁殖，細胞解體為碎片，進而葉表面形成大量病斑。而霜霉病菌侵染抗病品種后，侵染部位葉肉細胞周圍木質(zhì)素和胼胝質(zhì)等大量聚集，養(yǎng)分進出速度減慢，同時受侵染細胞也迅速分解消亡，葉表面就會呈現(xiàn)小而少的病斑^［38］。

病原菌侵染后，寄主植株細胞內(nèi)含物含量變化。瓜類作物植株在接種霜霉病菌后，寄主植株細胞內(nèi)含物發(fā)生變化，用以應(yīng)對病菌侵染^［39-40］。例如霜霉病侵染甜瓜抗病、感病品種后，抗病、感病品種的過氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）活性均會升高，且2個品種之間CAT及POD活性相差較大^［41］。丁九敏等對黃瓜抗、感病品種葉片接種霜霉病菌后內(nèi)含物含量的研究發(fā)現(xiàn)，抗病自交系中葉綠素、可溶性糖含量均比感病自交系高，接種霜霉病菌后感病品種過氧化物酶和多酚氧化酶（PPO）活性均低于抗病品種^［42］。

病原菌侵染后，一系列控制植物特異性的基因被挖掘與鑒定。通過轉(zhuǎn)座子標簽法分離出首個抗病基因R，能夠特異識別病原物效應(yīng)因子^［43］。當病原菌侵入植物體后，R基因編碼蛋白就會識別病原，進而激發(fā)一系列抗病響應(yīng)。在模式植物擬南芥中，已報道的含有R基因編碼蛋白NBS-LRR 結(jié)構(gòu)域的相關(guān)基因共有149個，其中霜霉病抗性基因RPP與R蛋白同源的共有28個，其中RPP1、RPP2、RPP5、RPP7、RPP8和RPP13等6個基因已被成功克隆且在侵染霜霉菌后誘導植株產(chǎn)生過敏反應(yīng)進而實現(xiàn)抗病^［44］?；谇捌跀M南芥的研究，Wan等分離鑒定出4種NBS型基因，將其命名為CsRGAs，對IL5211S不同組織中的28個NBS型基因表達量測定后發(fā)現(xiàn)：霜霉病侵染葉片后，CsRGA23被激活，脫落酸、水楊酸、茉莉酸等信號轉(zhuǎn)導途徑同樣被顯著誘導^［45］。此外，王賢磊在甜瓜中利用抗病基因同源序列（RGA）技術(shù)也已成功克隆了4類NBS抗病基因，分別為MRGH4、MRGH21、MRGH63、MRGH18，霜霉病菌侵染后，MRGH21表達量顯著升高^［46］。

當病原菌侵染植株后，受體蛋白識別并啟動相應(yīng)抗病機制進而實現(xiàn)抗病^［47］。WRKY轉(zhuǎn)錄因子作為一類受體蛋白，在病原體侵染后能夠調(diào)控下游靶基因表達。例如，模式植物擬南芥中AtWRKY70能夠通過調(diào)控擬南芥霜霉病抗性基因AtRPP4的表達，參與水楊酸和茉莉酸調(diào)控途徑實現(xiàn)植物抗??；過表達CsWRKY50可強化霜霉病抗性，能夠提高葉綠素含量和氧化酶活性^［48］；葡萄VvWRKY1能參與多個抗性防衛(wèi)機制，過表達VvWRKY1后，葡萄霜霉病抗性增加^［49-50］。

植物特異性識別病原物效應(yīng)基因的挖掘與鑒定也是研究瓜類作物霜霉病抗病機理的重要方式之一。有研究表明，無機化合物、天然有機化合物及人工合成化合物等誘導因子也能激發(fā)植株對霜霉病的抗性^［51］。Mur等研究發(fā)現(xiàn)，硝酸鹽中的PO^3-4能夠螯合植物細胞壁中的Ca²⁺，破壞細胞壁結(jié)構(gòu)，激發(fā)一系列水解酶活性，進而誘導植株產(chǎn)生抗病能力^［52］；K2HPO4溶液噴灑黃瓜的第1葉后，能顯著提高植株第2、3葉抗霜霉病的能力^［29］。此外，水楊酸、β-氨基丁酸、草酸以及人工合成誘導劑苯并噻二唑均能誘導瓜類作物對霜霉病產(chǎn)生抗性^［53］。例如黃瓜幼苗經(jīng)水楊酶處理后，葉片過氧化物酶活性增強，多酚氧化酶、L-苯丙氨酸解氨酶活性減弱，抗性增加；β-氨基丁酸處理感染霜霉病菌的葡萄葉片后，葉片細胞壁形成乳突、產(chǎn)生胼胝質(zhì)或使感病細胞發(fā)生木質(zhì)化阻止抵御病原菌吸收養(yǎng)分；草酸能誘導黃瓜幼苗產(chǎn)生局部和系統(tǒng)抗性，抵御霜霉菌侵入；0.1～0.7 mmol/L BTH［新型植物抗病誘導劑苯基（1，2，3）噻二唑-7-硫代羧酸硫甲酯］處理黃瓜子葉后能誘導黃瓜對霜霉病菌產(chǎn)生抗性，且抗病效果可持續(xù)9 d以上^［54-56］。

4"瓜類作物霜霉病抗病基因挖掘與利用

因瓜類作物抗病基因的遺傳背景較為復(fù)雜、多態(tài)性標記較難開發(fā)，目前國內(nèi)外對黃瓜、甜瓜霜霉病抗性遺傳研究不多，且仍存在較大分歧。在黃瓜霜霉病抗性遺傳研究中，Horejsi等利用抗病品種WI4783和感病品種Wisconsin SMR 18雜交，隨后通過后代統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)黃瓜抗霜霉病的基因是由3對隱性基因dm-1、dm-2和dm-3決定^［57］。Szczechura等將感病品種PI175695和抗病品種PI197085雜交后，構(gòu)建了F2代的連鎖圖譜并對其進行了QTL定位，分析結(jié)果表明霜霉病侵染抗病品種后，其霜霉病抗性具有多基因特征^［58］。此外，Wang等將霜霉病抗性材料PI330628和霜霉病感病材料9930雜交，對F1代進行了QTL位點分析，研究表明，霜霉病抗病基因能夠由位點dm2.1、dm4.1、dm5.1、dm6.1決定^［59］。同樣，在甜瓜霜霉病抗性遺傳研究方面，目前已鑒定的霜霉病抗性基因僅有5個，即Pc-1、Pc-2、Pc-3、Pc-4、Pc-5^［60］。其中pc-1和pc-2是Thomas等將抗病自交系材料MR-1雜交后得到的后代群體，并對霜霉病菌侵染該群體后的狀況進行分析發(fā)現(xiàn)，在MR-1中是由pc-1和 pc-2 控制霜霉病抗性^［60］；pc-3是Epinat等通過感病品種Vedrantais和抗霜霉病品系PI414723雜交后發(fā)現(xiàn)抗病植株抗性由單顯性基因控制，于是將該單顯性基因命名為pc-3；pc-4是統(tǒng)計抗病自交系PI124112和PI124111F與感病品種AY雜交后的后代霜霉菌抗性后，發(fā)現(xiàn)PI124112是由2個不完全顯性基因控制，其中1個是pc-4^［61］；pc-5是5-4-2-1不同感病自交系雜交后抗病基因遺傳類型存在差異，例如與感病自交系VK1-5雜交后其抗病基因表現(xiàn)為隱形遺傳，而與感病自交系K15-6雜交后其抗病基因表現(xiàn)為顯性遺傳，進一步研究發(fā)現(xiàn)K15-6中有能夠支配5-4-2-1表達的基因，于是命名為 pc-5^［62-63］。然而，也有研究者表示霜霉病抗性由多基因控制，例如感病品系EC564749與抗病品系IIHR121雜交后，其雜交后代F2和BC群體病情呈現(xiàn)高抗到高感的連續(xù)分布狀態(tài)^［64］。此外，楊柳燕等通過田間調(diào)查以及SRAP標記對高抗和高感品種構(gòu)建F2代群體和回交后代BC1群體，發(fā)現(xiàn)分離后代感病株明顯多于抗病株，推測是隱性基因使甜瓜產(chǎn)生霜霉病抗性^［65］。由于瓜類作物霜霉病遺傳規(guī)律易受多種環(huán)境影響，且研究難度大，因此未來還需進一步驗證。

目前，相關(guān)測序技術(shù)已應(yīng)用于瓜類作物抗性基因的篩選中^［66］，也有不少霜霉病抗性基因遺傳標記。例如2005年甜瓜霜霉病遺傳圖譜首次構(gòu)建，該圖譜長度為1 150 cM，包含了許多重要標記，其中有11個與抗霜霉病基因相關(guān)的QTL^［67］。2012年，甜瓜基因組的測序完成，大量的SNP位點被標記。2014年，賀玉花等篩選到抗霜霉病基因Pc-3連鎖的SSR標記3個^［68］。2019年，張學軍等完成了甜瓜高密度遺傳連鎖圖譜構(gòu)建，結(jié)合甜瓜苗期生長中期和生長后期的抗病表型數(shù)據(jù)共定位到與甜瓜霜霉病性狀相關(guān)的QTL共26個^［69］。楊柳燕利用273對SRAP引物分別對甜瓜抗感池進行篩選，最終標記到甜瓜霜霉病抗性基因連鎖距離為 9.8 cM 等^［65］。

5"展望

當前，瓜類作物霜霉病已嚴重影響蔬菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，品種優(yōu)良的抗病品種選育困難。盡管育種工作者已經(jīng)鑒定并保存了部分甜瓜、黃瓜等霜霉病生理小種并在抗霜霉病優(yōu)異種質(zhì)的篩選、抗病候選基因發(fā)掘以及一些分析生物學研究方面取得了一定的進展，但育種周期長，而病害發(fā)展較快，至今也較少選育出高抗甜瓜、黃瓜霜霉病的優(yōu)良種質(zhì)。因此，利用生物技術(shù)手段篩選優(yōu)質(zhì)種質(zhì)成為新途徑。但由于瓜類作物霜霉病菌致病機制的研究不夠深入，抗病植株與病原菌的相互作用過程以及外源物質(zhì)通過哪些信號通路激活和參與植物自身防御反應(yīng)等還未有定論，未來仍需進行大量研究。此外，隨著瓜類作物霜霉病生理小種持續(xù)分化，統(tǒng)一的病害鑒定方法尚未建立，優(yōu)勢生理小種仍存在分歧，不同毒性的病原菌致病力也尚未分類，也需要通過不同接種方法、接種濃度和接種時期進行綜合分類研究，建立苗期、成株期2個不同時期瓜類作物霜霉病的人工接種鑒定體系，統(tǒng)一病情分析標準，對當前國內(nèi)外報道的優(yōu)質(zhì)抗病種質(zhì)資源進行苗期抗霜霉病鑒定。從生理層面和分子層面2個方面入手，深入研究瓜類作物抗霜霉病機理，以期為優(yōu)質(zhì)、多抗、專用甜瓜、黃瓜新品種選育夯實基礎(chǔ)。

當然，隨著生物信息學的快速發(fā)展，一些新興的研究手段例如寄主誘導基因沉默、基因編輯技術(shù)的出現(xiàn)，也能夠為抗病基因功能挖掘及瓜類作物霜霉病寄主與病原菌之間關(guān)系復(fù)雜的作用機制研究提供一定的技術(shù)支撐，同時也為育種工作者選育優(yōu)質(zhì)抗病甜瓜新種質(zhì)提供理論依據(jù)。

參考文獻：

［1］Cohen Y，van den Langenberg K M，Wehner T C，et al. Resurgence of Pseudoperonospora cubensis：the causal agent of cucurbit downy mildew［J］. Phytopathology，2015，105（7）：998-1012.

［2］石延霞，李寶聚，劉學敏. 黃瓜霜霉病菌致病作用與兩種細胞壁降解酶關(guān)系初探［J］. 園藝學報，2003，30（4）：465-466.

［3］GOker M，Voglmayr H，Riethmüller A，et al. How do obligate parasites evolve？ a multi-gene phylogenetic analysis of downy mildews［J］. Fungal Genetics and Biology，2007，44（2）：105-122.

［4］賀玉花，徐永陽，徐志紅，等. 甜瓜霜霉病抗性研究進展［J］. 果樹學報，2014，31（2）：324-334.

［5］田"黎，陳向東，孫京城. 新疆黃瓜、甜瓜霜霉病侵染途徑及防治［J］. 新疆農(nóng)業(yè)科學，1995，32（3）：133-134.

［6］Wallace E C，D^，Arcangelo K N，Quesada-Ocampo L M.Population analyses reveal two host-adapted clades of Pseudoperonospora cubensis，the causal agent of cucurbit downy mildew，on commercial and wild cucurbits［J］. Phytopathology，2020，110（9）：1578-1587.

［7］VandenLangenberg K M，Wehner T C. Downy mildew disease progress in resistant and susceptible cucumbers tested in the field at different growth stages［J］. HortScience，2016，51（8）：984-988.

［8］Lebeda A，Cohen Y. Cucurbit downy mildew （Pseudoperonospora cubensis）-biology，ecology，epidemiology，host-pathogen interaction and control［J］. European Journal of Plant Pathology，2011，129（2）：157-192.

［9］Jenkins J M Jr. Studies on the inheritance of downy mildew resistance and of other characters in cucumbers［J］. The Journal of Heredity，1946，37（9）：267-271.

［10］Lebeda A.Screening of wildcucumis species against downy mildew （Pseudoperonospora cubensis） isolates from cucumbers［J］. Phytoparasitica，1992，20（3）：203-210.

［11］Burkhardt A，Day B. Transcriptome and small RNAome dynamics during a resistant and susceptible interaction between cucumber and downy mildew［J］. The Plant Genome，2016，9（1）：1-19.

［12］Palti J，Cohen Y. Downy mildew of Cucurbits （Pseudoperonospora Cubensis）：the fungus and its hosts，distribution，epidemiology and control［J］. Phytoparasitica，1980，8（2）：109-147.

［13］馮東昕，李寶棟. 主要瓜類作物抗霜霉病育種研究進展［J］. 中國蔬菜，1997（2）：45-48.

［14］方智遠. 中國蔬菜育種科學技術(shù)的發(fā)展與展望［J］. 農(nóng)學學報，2018，8（1）：12-18.

［15］Parkash V，Sokhi S S. Detached leaf method for main-tenance of cultures of pseudo Peronospora cubensis［J］. Indian Phytopathology，1989，42（4）：575-576.

［16］Satou M. Studies of physiological specialization of downy mildew of crucifers caused by Peronospora parasitica［J］. Journal of General Plant Pathology，2000，66（3）：283.

［17］張艷菊，秦智偉，周秀艷，等. 黃瓜霜霉病菌保存方法［J］. 植物病理學報，2007，37（4）：438-441.

［18］賀玉花. 甜瓜霜霉病抗性基因的SSR標記［D］. 北京：中國農(nóng)業(yè)科學院，2014：19-22.

［19］黃玉貞. 甜瓜霜霉病的發(fā)生及綜合防治［J］. 新疆農(nóng)業(yè)科技，2003（增刊1）：50.

［20］van Vliet G J A，Meysing W D. Inheritance of resistance to Pseudoperonospora cubensis Rost. in cucumber （Cucumis sativus L.）［J］. Euphytica，1974，23（2）：251-255.

［21］Mahrishi R P，Siradhana B S. Epidemiology of downy mildew on muskmelon （Cucumis melo L.） caused by Pseudoperonospora cubensis （Berk.and Curt.）［J］. Journal of Turkish Phytopathology，1988，17（ 2）：67-73.

［22］Shetty A，Shetty H S，Safeeulla K M. Effect of ridge gourd pollen on zoospore germination of Pseudoperonospora cubensis and its significance in epidemiology［J］. Proceedings of the Indian Academy of Sciences（Plant Sciences），1982，91（5）：427-431.

［23］Yin Z M，Hennig J，Szwacka M，et al. Tobacco PR-2d promoter is induced in transgenic cucumber in response to biotic and abiotic stimuli［J］. Journal of Plant Physiology，2004，161（5）：621-629.

［24］Thines M，Telle S，Ploch S，et al. Identity of the downy mildew pathogens of basil，coleus，and sage with implications for quarantine measures［J］. Mycological Research，2009，113（5）：532-540.

［25］Sharma R，Xia X J，Cano L M，et al. Genome analyses of the sunflower pathogen Plasmopara halstedii provide insights into effector evolution in downy mildews and Phytophthora［J］. BMC Genomics，2015，16：741.

［26］Bandamaravuri K B，Nayak A K，Bandamaravuri A S，et al. Simultaneous detection of downy mildew and powdery mildew pathogens on Cucumis sativus and other cucurbits using duplex-qPCR and HRM analysis［J］. AMB Express，2020，10（1）：135.

［27］Nezhad A S. Future of portable devices for plant pathogen diagnosis［J］. Lab on a Chip，2014，14（16）：2887-2904.

［28］Mahaffee W F. Use of airborne inoculum detection for disease management decisions［M］//Detection and diagnostics of plant pathogens. Dordrecht：Springer Netherlands，2014：39-54.

［29］徐世成，王鶴冰，馮俊杰，等. 黃瓜霜霉病及寄主抗性機制研究進展［J］. 生物工程學報，2022，38（5）：1724-1737.

［30］Mochizuki S，F(xiàn)ukumoto T，Ohara T，et al. The rare sugar D-tagatose protects plants from downy mildews and is a safe fungicidal agrochemical［J］. Communications Biology，2020，3（1）：423.

［31］Li Y T，Lin J，Yao W Q，et al. Discovery of a new fungicide by screening triazole sulfonylhydrazone derivatives and its downy mildew inhibition in cucumber［J］. Journal of Heterocyclic Chemistry，2020，57（5）：2128-2138.

［32］Salas S E，Shepherd C P，Ngugi H K，et al. Disease control attributes of oxathiapiprolin fungicides for management of cucurbit downy mildew［J］. Plant Disease，2019，103（11）：2812-2820.

［33］趙"杰，趙愛華，胡育海，等. 室內(nèi)測定30種植物提取液對甜瓜霜霉病的防效［J］. 上海交通大學學報（農(nóng)業(yè)科學版），2007，25（2）：161-164.

［34］Zheng L，Gu C，Cao J，et al. Selecting bacterial antagonists for cucurbit downy mildew and developing an effective application method［J］. Plant Disease，2018，102（3）：628-639.

［35］葉乃瑋，王承芳，干華磊，等. 多黏類芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa菌株P(guān)1防治黃瓜霜霉病的研究［J］. 植物保護，2021，47（2）：271-275.

［36］Atallah O O，Osman A，Ali M A，et al. Soybean β-conglycinin and catfish cutaneous mucous p22 glycoproteins deteriorate sporangial cell walls of Pseudoperonospora cubensis and suppress cucumber downy mildew［J］. Pest Management Science，2021，77（7）：3313-3324.

［37］Sedláková B，Lebeda A. Fungicide resistance in Czech populations of cucurbit powdery mildews［J］. Phytoparasitica，2008，36（3）：272-289.

［38］Li S N，Lin D X，Zhang Y W，et al. Genome-edited powdery mildew resistance in wheat without growth penalties［J］. Nature，2022，602（7897）：455-460.

［39］駱桂芬，高郁芳. 黃瓜葉片中糖和木質(zhì)素含量與霜霉病誘導抗性的關(guān)系［J］. 植物病理學報，1997，27（1）：65-69.

［40］齊慧霞，王同坤，齊永順，等. 不同酒葡萄品種感染霜霉病后葉片生理特性的變化［J］. 果樹學報，2006，23（1）：73-76.

［41］孟慶玖，周曉榕，龐保平，等. 黃瓜霜霉病菌侵染對黃瓜葉片生理生化指標的影響［J］. 西北農(nóng)業(yè)學報，2014，23（6）：141-146.

［42］丁九敏，高洪斌，劉玉石，等. 黃瓜霜霉病抗性與葉片中生理生化物質(zhì)含量關(guān)系的研究［J］. 遼寧農(nóng)業(yè)科學，2005（1）：11-13.

［43］何"鋒，王長春，王鋒青，等. 植物抗病基因（R）與病原物無毒基因（Avr）相互作用機制的研究進展［J］. 中國細胞生物學學報，2011，33（9）：1037-1044.

［44］李"峰. 植物NBS-LRR類抗病基因的研究進展［J］. 分子植物育種，2011（9）：1784-1790.

［45］Wan H J，Zhao Z G，Malik A A，et al. Identification and characterization of potential NBS-encoding resistance genes and induction kinetics of a putative candidate gene associated with downy mildew resistance in Cucumis［J］. BMC Plant Biology，2010，10：186.

［46］王賢磊.甜瓜遺傳圖譜的構(gòu)建與抗病基因遺傳分析［D］. 烏魯木齊：新疆大學，2011.

［47］Monaghan J，Zipfel C. Plant pattern recognition receptor complexes at the plasma membrane［J］. Current Opinion in Plant Biology，2012，15（4）：349-357.

［48］Ulker B，Shahid Mukhtar M，Somssich I E. The WRKY70 transcription factor of Arabidopsis influences both the plant senescence and defense signaling pathways［J］. Planta，2007，226（1）：125-137.

［49］欒倩倩. 黃瓜CsWRKY50基因的克隆與功能研究［D］. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學，2023.

［50］Marchive C，Léon C，Kappel C，et al. Over-expression of VvWRKY1 in grapevines induces expression of jasmonic acid pathway-related genes and confers higher tolerance to the downy mildew［J］. PLoS One，2013，8（1）：e54185.

［51］Reglinski T，Poole P R，Whitaker G，et al. Induced resistance against Sclerotinia sclerotiorum in kiwifruit leaves［J］. Plant Pathology，1997，46（5）：716-721.

［52］Mur L A J，Simpson C，Kumari A，et al. Moving nitrogen to the centre of plant defence against pathogens［J］. Annals of Botany，2017，119（5）：703-709.

［53］汪"尚，徐鷺芹，張亞仙，等. 水楊酸介導植物抗病的研究進展［J］. 植物生理學報，2016，52（5）：581-590.

［54］Achuo E A，Audenaert K，Meziane H，et al. The salicylic acid-dependent defence pathway is effective against different pathogens in tomato and tobacco［J］. Plant Pathology，2004，53（1）：65-72.

［55］Hamiduzzaman M M，Jakab G，Barnavon L，et al. Beta-aminobutyric acid-induced resistance against downy mildew in grapevine acts through the potentiation of callose formation and jasmonic acid signaling［J］. Molecular Plant-Microbe Interactions，2005，18（8）：819-829.

［56］蔡鴻生，王晨芳，馬"青，等. BTH和K2HPO4誘導黃瓜抗霜霉病研究［J］. 西北農(nóng)業(yè)學報，2007，16（1）：95-97.

［57］Horejsi T，Staub J E，Thomas C. Linkage of random amplified polymorphic DNA markers to downy mildew resistance in cucumber （Cucumis sativus L.）［J］. Euphytica，2000，115（2）：105-113.

［58］Szczechura W，Staniaszek M，Klosinska U，et al. Molecular analysis of new sources of resistance to Pseudoperonospora cubensis （Berk.et Curt.） Rostovzev in cucumber［J］. Russian Journal of Genetics，2015，51（10）：974-979.

［59］Wang Y H，VandenLangenberg K，Wehner T C，et al. QTL mapping for downy mildew resistance in cucumber inbred line WI7120 （PI 330628）［J］. Theoretical and Applied Genetics，2016，129（8）：1493-1505.

［60］Thomas C E，Cohen Y，Mccreighti J D，et al. Inheritance of resistance to downy mildew in Cucumis melo［J］. Plant Disease Journal，1988，72（1）：33-35.

［61］Epinat C，Pitrat M. Inheritance of resistance to downy mildew （Pseudoperonospora cubensis） in muskmelon （Cucumis melo）. Ⅱ. Generation means analysis of 5 genitors［J］. Agronomie，1994，14（4）：249-257.

［62］Kenigsbuch D. Inheritance of resistance to downy mildew in Cucumis melo PI 124112 and commonality of resistance genes with PI 124111F［J］. Plant Disease，1992，76（6）：615.

［63］Angelov D，Krasteva L. Dominant inheritance of downy mildew resistance in melons［J］. Acta Horticulturae，2000（510）：273-276.

［64］Shashikumar K T，Pitchaimuthu M，Rawal R D. Generation mean analysis of resistance to downy mildew in adult muskmelon plants［J］. Euphytica，2010，173（1）：121-127.

［65］楊柳燕. 甜瓜霜霉病（Pseudoperonospora cubensis）抗性遺傳研究及SRAP分子標記［D］. 北京：中國農(nóng)業(yè)科學院，2012：1-2.

［66］鄒明學，許"勇，張海英，等. 葫蘆科瓜類作物分子標記輔助育種研究進展［J］. 生物技術(shù)通報，2007，23（4）：72-78.

［67］Perchepied L，Bardin M，Dogimont C，et al. Relationship between loci conferring downy mildew and powdery mildew resistance in melon assessed by quantitative trait loci mapping［J］. Phytopathology，2005，95（5）：556-565.

［68］Garcia-Mas J，Benjak A，Sanseverino W，et al. The genome of melon （Cucumis melo L.）［J］. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2012，109（29）：11872-11877.

［69］張學軍，楊文莉，張永兵，等. 采用GBS-seq技術(shù)構(gòu)建甜瓜高密度遺傳圖譜［J］. 新疆農(nóng)業(yè)科學，2019，56（10）：1828-1838.