地楓皮入血成分抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用研究

摘 要：" 為發(fā)現(xiàn)地楓皮中具有抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（anti-rheumatoid arthritis，anti-RA）功效的化合物，該研究利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）法鑒定地楓皮的入血成分，通過檢測入血成分對膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎小鼠表觀病癥、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、膝關(guān)節(jié)病理變化，以及對血清中MCP-1、IL-6和TNF-α含量的影響，評價入血成分的抗RA活性，同時利用分子對接的方法，探究抗RA活性化合物與TLR4/NF-κB通路的相互作用。結(jié)果表明：（1）地楓皮中的異紅花八角醇和厚樸酚被吸收后能夠進入血漿。（2）異紅花八角醇能夠緩解膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎小鼠的四肢充血、發(fā)紅、腫脹等癥狀，減小四肢關(guān)節(jié)炎指數(shù)打分，阻礙膝關(guān)節(jié)組織病理進程，降低血清中MCP-1、IL-6和TNF-α的含量。（3）異紅花八角醇能夠與TLR4/NF-κB通路中的關(guān)鍵蛋白質(zhì)TLR4、IκBα和NF-κB p65結(jié)合。綜上認為，異紅花八角醇被吸收后，通過血液循環(huán)到達關(guān)節(jié)組織，可能通過影響TLR4/NF-κB通路而緩解RA病癥，是地楓皮抗RA的活性成分之一。

關(guān)鍵詞： 地楓皮， 異紅花八角醇， 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎， 入血， 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法， TLR4/NF-κB通路

中圖分類號：" Q946

文獻標(biāo)識碼：" A

文章編號：" 1000-3142（2025）03-0517-10

Anti-rheumatoid arthritis effect of entering bloodstream components from Illicium difengpi

LI Lianchun， FU Yuxia， TAN Lanfang， NING Desheng， PAN Zhenghong*

（ Guangxi Key Laboratory of Plant Functional Phytochemicals and Sustainable Utilization， Guangxi Institute of Botany，Guangxi Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences， Guilin 541006， Guangxi， China ）

Abstract：" To search the compounds with anti-rheumatoid arthritis （anti-RA） efficacy from Illicium difengpi， the components that can enter bloodstream were identified by liquid chromatography-tandem mass spectrometry （LC-MS/MS）， and then their anti-RA activities were evaluated by testing their effects on symptoms， arthritis indexes， pathological changes of knee joints， and contents of MCP-1， IL-6 and TNF-α in serum of" collagen-induced arthritis mice. The interactions between the anti-RA active compounds and TLR4/NF-κB pathway were studied by molecular docking. The results were as follows： （1） After absorbance， isodunnianol and magnolol of I. difengpi could enter bloodstream. （2） Isodunnianol could alleviate symptoms including limbs congestion， redness and swelling， reduce arthritis index score of" limbs， hinder pathological process of knee joints tissue， and decrease contents of MCP-1， IL-6 and TNF-α in serum of" collagen-induced arthritis mice. （3） Isodunnianol could bind to key proteins of TLR4/NF-κB pathway， including TLR4， IκBα and NF-κB p65. In conclusion， isodunnianol can reach the joint tissue through the bloodstream after being absorbed and can possibly alleviate the pathology of RA through regulating TLR4/NF-κB pathway. Isodunnianol is one of anti-RA active components of I. difengpi.

Key words：" Illicium difengpi， isodunnianol， rheumatoid arthritis （RA）， enter bloodstream， LC-MS/MS， TLR4/NF-κB pathway

地楓皮（Illicium difengpi）為木蘭科八角屬植物，灌木，主要分布于廣西壯族自治區(qū)西南部的喀斯特地區(qū)，常生長于石灰?guī)r山頂、石縫或石山的疏林下，其皮可以入藥，具有祛風(fēng)除濕、行氣止痛的功效， 主要用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛、腰肌勞損等癥（中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會，1996；國家藥典委員會，2020）。

地楓皮藥材中的化學(xué)成分豐富，含有木脂素、苯丙素、三萜、糖苷、倍半木脂素等類型的化合物。其中，一些三萜和倍半木脂素化合物在細胞實驗中顯示出良好的抗炎活性（Fang et al.， 2010；Li et al.， 2013， 2015；Pan et al.， 2019）。前期，本課題組對地楓皮的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇等不同極性部位進行了抗炎活性評價，發(fā)現(xiàn)二氯甲烷提取物抗炎活性最強，可能是地楓皮主要的藥效部位（寧德生等，2016）。但是，藥物的體內(nèi)活性與吸收、分布、代謝、排泄和藥物-受體相互作用等多種因素緊密相關(guān)。因此，要闡明地楓皮抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis， RA）的物質(zhì)基礎(chǔ)，還需開展體內(nèi)的藥效學(xué)研究。中藥具有化學(xué)成分復(fù)雜的特點，其發(fā)揮藥效的物質(zhì)通常是經(jīng)過吸收、代謝等生理過程，能夠進入血液的原型成分或代謝產(chǎn)物（閆廣利等，2015）。為發(fā)現(xiàn)地楓皮中具有抗RA作用的化合物，本研究擬探討以下問題：（1）在大鼠模型中，鑒定地楓皮二氯甲烷提取物中的入血成分；（2）在膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎模型中，評價入血成分的抗RA活性；（3）利用分子對接的方法，探究抗RA活性化合物與TLR4/NF-κB炎癥調(diào)控通路中關(guān)鍵蛋白質(zhì)的相互作用。最終，為闡明地楓皮的抗RA物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制提供參考，為地楓皮的合理開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 SPF級雄性SD大鼠，體質(zhì)量230～270 g，購買自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（湘）2019-0004。SPF級雄性DBA/1小鼠，體質(zhì)量18～22 g，購買自常州卡文斯實驗動物有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（蘇）2021-0013。動物實驗經(jīng)廣西壯族自治區(qū)中國科學(xué)院廣西植物研究所實驗動物管理與倫理委員會批準（批準號為GXZW-20210928-1），實驗動物使用許可證號為SYXK（桂）2020-0002。

1.1.2 藥物與試劑 不完全弗氏佐劑、完全弗氏佐劑和牛Ⅱ型膠原均購自美國Chondrex公司；小鼠單核細胞趨化蛋白1（MCP-1）、白細胞介素6（IL-6）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒均購自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司；各種有機試劑均購自西隴化工股份有限公司。

1.1.3 主要儀器 Spark多功能酶標(biāo)儀（瑞士Tecan公司）；高速冷凍離心機（珠海海馬公司）；200～300目硅膠（青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20葡聚糖凝膠（美國GE公司）；MCI凝膠（日本三菱公司）；ODS C18柱 （100 mm × 2.1 mm，3.5 μm，日本島津公司）；LC/MS-IT-TOF 液相質(zhì)譜聯(lián)用儀（日本島津公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 二氯甲烷提取物、化合物的分離制備 植物材料采集于廣西都安瑤族自治縣，經(jīng)廣西壯族自治區(qū)中國科學(xué)院廣西植物研究所唐輝研究員鑒定為地楓皮的干燥樹皮。將15 kg地楓皮藥材粗粉，用20 L的95%乙醇于室溫中浸泡24 h。過濾，收集濾液，藥材重復(fù)浸提3次。濾液于50 ℃減壓濃縮成浸膏，浸膏用蒸餾水超聲分散后，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓去除溶劑后得到石油醚提取物、二氯甲烷提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物。根據(jù)本課題組前期建立的方法（寧德生等，2017；Pan et al.， 2019），從二氯甲烷提取物中制備2個主要成分厚樸酚和異紅花八角醇，經(jīng)液相鑒定純度均大于95%，它們的NMR數(shù)據(jù)與寧德生等（2017）報道的基本一致。

1.2.2 大鼠給藥及取血 雄性SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機分為空白對照組和給藥組，每組5只。將二氯甲烷提取物混懸于助懸劑（45%聚氧乙烯蓖麻油，45%無水乙醇，10%水）中，60 ℃加熱助溶成0.25 g·mL-1的混懸液。給藥組大鼠灌胃上述混懸液，劑量為2.5 g·kg-1，空白對照組大鼠灌胃等劑量的助懸劑。灌胃處理30、60、90、120、180 min后，從腹主動脈取血，置于含肝素鈉的采血管。4 000 r·min-1，離心10 min，收集血漿。每個時間點取1 mL血漿進行混合，放-80 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 血漿處理 取800 μL混合時間點的血漿，加入1 600 μL丙酮，渦旋混勻5 min。于4 ℃，13 000 r·min-1下離心20 min。收集上清液，用氮氣吹干，再用100 μL 70%的甲醇水溶液復(fù)溶。于4 ℃，13 000 r·min-1下離心20 min。收集上清液，置于內(nèi)存管中，待測。

1.2.4 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測入血成分 液相色譜參數(shù)設(shè)置如下：ODS C18色譜柱 （100 mm × 2.1 mm，3.5 μm）；柱溫設(shè)為30 ℃；流動相為0.1%甲酸（A）-乙腈（B）；流速設(shè)為0.3 mL·min-1；進樣體積為20 μL。梯度洗脫條件如下：0～10 min，40%→70% B；10～40 min，70%→95% B；40～45 min，95% B；45～50 min，95%→40% B。質(zhì)譜參數(shù)參照趙振東等（2013）的方法設(shè)定：ESI 設(shè)為負離子模式；電壓設(shè)為-3.5 kV；氮氣作為霧化氣，流量為1.5 L·min-1；碰撞氣為氬氣；干燥氣壓設(shè)為100 kPa；檢測器電壓設(shè)為1.7 kV；加熱模塊溫度和CDL溫度均設(shè)為200 ℃；一級質(zhì)譜的掃描范圍為質(zhì)荷比（m/z） 300～700；母離子的掃描范圍為質(zhì)荷比（m/z） 315～650；離子累積時間為10 ms；CID 碰撞能量設(shè)為100%；碰撞氣能量設(shè)為100%。

1.2.5 膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（collagen-induced arthritis， CIA） 小鼠模型建立及給藥 雄性DBA/1小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機分為空白對照組、CIA模型組、異紅花八角醇低劑量組（40 mg·kg-1·d-1）、異紅花八角醇高劑量組（80 mg·kg-1·d-1）和甲氨蝶呤組（1 mg·kg-1·d-1，作為陽性對照），每組6只。CIA小鼠模型根據(jù)Miyoshi 和Liu（2018）報道的方法建立：每只小鼠于尾巴根部，注射100 μL由完全弗氏佐劑和牛Ⅱ型膠原配制的乳劑（含100 μg牛Ⅱ型膠原），進行初次免疫；21 d后，每只小鼠于尾巴根部，注射100 μL由不完全弗氏佐劑和牛Ⅱ型膠原配制的乳劑（含100 μg牛Ⅱ型膠原），進行增強免疫。于加強免疫后，異紅花八角醇組和甲氨蝶呤組小鼠灌胃給予指定劑量的化合物，空白對照組和CIA模型組小鼠給予等劑量的生理鹽水。每天一次，連續(xù)處理3周。

1.2.6 異紅花八角醇抗RA活性檢測 加強免疫后，每3 d對小鼠進行1次關(guān)節(jié)炎指數(shù)打分。關(guān)節(jié)炎指數(shù)為表征關(guān)節(jié)炎嚴重程度的指標(biāo)，為四肢打分相加之和。每條肢體的打分規(guī)則如下：0分，正常；1分，單個關(guān)節(jié)腫脹；2分，1個以上關(guān)節(jié)腫脹；3分，所有關(guān)節(jié)腫脹；4分，皮膚爆裂或關(guān)節(jié)扭曲（Li et al.， 2022）。最后1次給藥4 h后，利用CO2窒息法處死小鼠，立即通過眼眶取血，制備血清，根據(jù)廠家說明書測定各組小鼠血清中的MCP-1、IL-6和TNF-α含量。取左后肢膝關(guān)節(jié)材料，修剪整齊，經(jīng)固定、脫水、透明、包埋、切片、攤片、拷片后，進行常規(guī)的蘇木精-伊紅染色（H amp; E），于顯微鏡下觀察小鼠的關(guān)節(jié)病理情況。

1.2.7 分子對接 首先，在Pubchem 數(shù)據(jù)庫里查找異紅花八角醇的2D 結(jié)構(gòu)，利用Chem3D 軟件對異紅花八角醇的2D 結(jié)構(gòu)進行優(yōu)化并轉(zhuǎn)換成3D 結(jié)構(gòu)。其次，在Uniport 網(wǎng)站搜索TLR4、IκBα和NF-κB p65等蛋白質(zhì)，下載蛋白質(zhì)3D結(jié)構(gòu)文件。然后，利用AutodockTools 軟件對蛋白質(zhì)加氫，得到相應(yīng)的pdbqt 文件和grid 文件，將Spacing 值設(shè)置為1，以Vina 命令執(zhí)行分子對接，獲得異紅花八角醇-蛋白質(zhì)結(jié)合能。最后，通過Pymol 軟件去除水分子和小分子配體，然后得到成分-靶點分子對接虛擬圖。

1.2.8 統(tǒng)計分析 在GraphPad Prism 5.0軟件中分析數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準差（x[TX-1mm]±s）表示，兩組間差異用非配對t檢驗進行分析，Plt;0.05認為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 入血成分鑒定

給藥組大鼠血漿、空白對照大鼠血漿、厚樸酚和異紅花八角醇對照溶液在相同條件下進行液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析，得到的總離子流色譜圖如圖1所示。結(jié)合對照品的液相色譜保留時間，以及空白對照血漿和給藥血漿樣品的譜圖差異（圖2）和樣品中的質(zhì)譜碎片信息（圖3），鑒定出地楓皮二氯甲烷提取物進入血漿中的2個成分，即異紅花八角醇和厚樸酚。鑒于異紅花八角醇等倍半木脂素類化合物為八角屬植物的特征性成分（Kouno et al.， 1994），并且本課題組前期發(fā)現(xiàn)異紅花八角醇具有良好的抗炎活性（Pan et al.， 2019），因此本研究著重對異紅花八角醇進行了體內(nèi)抗RA活性及分子對接評價。

2.2 異紅花八角醇緩解CIA小鼠病癥

CIA動物模型在臨床癥狀、免疫病理反應(yīng)、病理損傷等方面都與人類RA 極為相似，是體內(nèi)研究RA公認的動物模型。因此，本研究建立了DBA/1小鼠CIA模型，其典型癥狀包括四肢充血、發(fā)紅、腫脹、關(guān)節(jié)變形等（圖4）。相比CIA模型小鼠，用40 mg·kg-1·d-1的異紅花八角醇（低劑量組）處理21 d，四肢充血發(fā)紅、腫脹和關(guān)節(jié)變形程度減輕；80 mg·kg-1·d-1的異紅花八角醇（高劑量組）效果更加明顯，表明異紅花八角醇能夠緩解CIA小鼠的關(guān)節(jié)炎癥狀。

2.3 異紅花八角醇減小CIA小鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)

為定量評價異紅花八角醇的抗RA活性，本研究測定了其對CIA小鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)的影響。如圖5所示，從給藥3 d開始，異紅花八角醇低劑量組和高劑量組小鼠的關(guān)節(jié)炎指數(shù)打分都低于CIA模型組小鼠且降低程度與異紅花八角醇的給藥劑量成正相關(guān)性。此外，隨著給藥天數(shù)的增加，CIA模型組小鼠與異紅花八角醇低劑量組、高劑量組小鼠間的關(guān)節(jié)炎指數(shù)差距越來越大，表明異紅花八角醇能夠劑量依賴性地延緩RA病理進程。

2.4 異紅花八角醇保護CIA小鼠關(guān)節(jié)組織

為研究異紅花八角醇對關(guān)節(jié)組織的保護作用，本研究對各組小鼠的膝關(guān)節(jié)組織進行了蘇木精-伊紅染色。如圖6所示，空白對照組小鼠膝關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)完整，關(guān)節(jié)腔清晰可見，關(guān)節(jié)面平滑、規(guī)則，無骨的侵蝕、損傷，軟骨和滑膜包圍正常；CIA模型小鼠膝關(guān)節(jié)病變明顯，關(guān)節(jié)面不平滑、不規(guī)則，滑膜組織異常增生導(dǎo)致關(guān)節(jié)腔被填充，軟骨出現(xiàn)不同程度的纖維化而被破壞；異紅花八角醇低劑量組和高劑量組小鼠的滑膜增生、關(guān)節(jié)腔填充程度都有所減輕，關(guān)節(jié)面相對更平滑、規(guī)則，表明異紅花八角醇能夠減輕膝關(guān)節(jié)的病變，對關(guān)節(jié)組織有保護作用。

2.5 異紅花八角醇降低血清炎癥因子含量

為檢測異紅花八角醇的體內(nèi)抗炎活性，本研究測定了其對CIA小鼠血清中TNF-α、MCP-1和IL-6 含量的影響。如圖7所示，CIA模型組小鼠血清中TNF-α、MCP-1和IL-6 的含量顯著高于空白對照組小鼠，表明其體內(nèi)炎癥反應(yīng)異?；罨?。相比CIA模型組小鼠，異紅花八角醇低劑量組、高劑量組小鼠血清中TNF-α、MCP-1和IL-6 的含量顯著降低且有明顯的劑量依賴關(guān)系，表明異紅花八角醇有效地抑制了CIA小鼠中的炎癥反應(yīng)。

2.6 異紅花八角醇與TLR4/NF-κB通路相互作用

通過分子對接發(fā)現(xiàn)，異紅花八角醇與TLR4、IκBα、NF-κB p65的結(jié)合能分別是-7.4、-7.9、-6.9 kcal·mol-1，表明異紅花八角醇能與TLR4、IκBα和NF-κB p65穩(wěn)定結(jié)合。其中，異紅花八角醇與TLR4的Tyr30、Lys31、Tyr33和Phe34殘基通過疏水相互作用形成穩(wěn)定的構(gòu)象；異紅花八角醇與IκBα的Glu20、Ala23、Ala24、Phe25、Lys27、Val51和Val95殘基通過疏水相互作用，并與Tyr48通過疏水相互作用和氫鍵形成穩(wěn)定的構(gòu)象；異紅花八角醇與NF-κB p65的Ile212、Leu214、Trp230、Val233、Thr243和Val245殘基通過疏水相互作用形成穩(wěn)定的構(gòu)象（圖8）。這表明異紅花八角醇可能通過與TLR4、IκBα和NF-κB p65相互作用，調(diào)控TLR4/NF-κB通路。

3 討論與結(jié)論

RA是一種漸進性的慢性自身免疫性疾病，其病理特征包括產(chǎn)生自身免疫抗體和持續(xù)的關(guān)節(jié)滑膜炎，伴隨有關(guān)節(jié)腫脹、僵硬和疼痛，會引起軟骨和骨的損傷，導(dǎo)致關(guān)節(jié)功能減弱甚至喪失。目前，RA還難以治愈，通常以減輕疼痛、阻止病理進程和防止關(guān)節(jié)損傷為治療目標(biāo)（Scott et al.， 2010）。研究發(fā)現(xiàn)，TLR4/NF-κB通路與RA的發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān)，其調(diào)控的MCP-1、IL-6和TNF-α等多種炎癥因子在RA患者中表達升高（Andreakos et al.， 2005）。MCP-1能招募巨噬細胞至關(guān)節(jié)部位，分泌促炎癥因子，引發(fā)炎癥反應(yīng)（Singh et al.， 2021）。IL-6和TNF-α是重要的促炎癥細胞因子，它們能促發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)滑膜細胞增殖，促進基質(zhì)金屬蛋白酶的表達，誘導(dǎo)破骨細胞分化，引起軟骨和骨的損傷（Mateen et al.， 2016）。因此，通過調(diào)控TLR4/NF-κB通路，降低MCP-1、IL-6和TNF-α等炎癥因子的含量，抑制炎癥反應(yīng)是治療RA的有效策略。

地楓皮為壯族同胞用于治療RA的傳統(tǒng)藥物，也是追風(fēng)舒經(jīng)活血片、風(fēng)寒雙離拐片等治療RA中成藥組方藥材，但其藥效基礎(chǔ)尚未闡明，不利于質(zhì)量標(biāo)準的控制，限制了進一步開發(fā)利用。因此，闡明地楓皮的藥效物質(zhì)具有重要的科學(xué)意義和應(yīng)用價值。

基于地楓皮化學(xué)組成復(fù)雜的生物特征，以及藥物需要經(jīng)過吸收、代謝等過程進入血液，隨血液循環(huán)到達靶組織才能產(chǎn)生藥效作用的特點，本研究利用LC-MS/MS方法初步鑒定出地楓皮中的異紅花八角醇和厚樸酚能夠進入血液，篩選出潛在的生物活性成分。本研究首次在體內(nèi)評價了異紅花八角醇的抗RA作用，藥效實驗表明，異紅花八角醇能夠緩解CIA小鼠的四肢充血、發(fā)紅、腫脹等癥狀，減小關(guān)節(jié)炎指數(shù)打分，延緩RA病理進程，并改善膝關(guān)節(jié)的組織病理。此外，異紅花八角醇顯著降低了血清中炎癥因子MCP-1、IL-6和TNF-α的含量且與TLR4、IκBα和NF-κB p65相互作用，表明其可能通過調(diào)控TLR4/NF-κB通路，進而抑制炎癥反應(yīng)來發(fā)揮抗RA功效，是地楓皮抗RA的活性成分之一。鑒于紅花八角醇、地楓皮醇A、地楓皮醇B與異紅花八角醇結(jié)構(gòu)相似、體外抗炎活性相當(dāng)（Pan et al.， 2019），這些倍半木脂素可能也是地楓皮抗RA的活性組分。

Hu等（2019）發(fā)現(xiàn)厚樸酚顯示出良好的體外抗炎活性和體內(nèi)抗骨關(guān)節(jié)炎作用；Kim等（2010）證實了厚樸酚的類似物和厚樸酚具有抗RA作用。由此可以推測，厚樸酚具有的抗RA潛力很可能是地楓皮抗RA的活性組分。

綜上所述，本研究鑒定出了地楓皮藥材中的入血成分異紅花八角醇和厚樸酚，推測它們是地楓皮抗RA的活性組分，并在CIA小鼠模型中證實異紅花八角醇具有抗RA活性，其抗RA作用可能通過影響TLR4/NF-κB通路來實現(xiàn)，從而為地楓皮的質(zhì)量控制和開發(fā)利用提供了線索，為八角屬植物抗RA活性成分的發(fā)現(xiàn)和作用機制的研究提供了借鑒。

參考文獻：

ANDREAKOS E， SACRE S， FOXWELL BM， et al.， 2005. The toll-like receptor-nuclear factor κB pathway in rheumatoid arthritis ［J］. Frontiers in Bioscience， 10（3）： 2478-2488.

Chinese Pharmacopoeia Commission， 2020. Pharmacopoeia of the Peoples Republic of China： Part 1 ［M］. Beijing： China Medical Science Press： 127-128. ［國家藥典委員會， 2020. 中華人民共和國藥典： 一部 ［M］. 北京： 中國醫(yī)藥科技出版社： 127-128. ］

Editorial Commission of China Flora of Chinese Academy of Sciences， 1996. Flora Reipublicae Popularis Sinicae： Vol. 30（1） ［M］. Beijing： Science Press： 131. ［中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會， 1996. 中國植物志： 第30（1）卷 ［M］. 北京： 科學(xué)出版社： 131. ］

FANG L， DU D， DING GZ， et al.， 2010. Neolignans and glycosides from the stem bark of Illicium difengpi ［J］. Journal of Natural Products， 73（5）： 818-824.

HU ZC， LUO ZC， JIANG BJ， et al.， 2019. The protective effect of magnolol in osteoarthritis： In vitro and in vivo studies ［J］. Frontiers in" Pharmacology， 10： 393.

KIM KR， PARK KK， CHUN KS， et al.， 2010. Honokiol inhibits the progression of collagen-induced arthritis by reducing levels of pro-inflammatory cytokines and matrix metalloproteinases and blocking oxidative tissue damage ［J］. Journal of Pharmacological Sciences， 114（1）： 69-78.

KOUNO I， IWAMOTO C， KAMEDA Y， et al.， 1994. A new triphenyl-type neolignan and a biphenylneolignan from the bark of Illicium simonsii ［J］. Chemical and" Pharmaceutical Bulletin， 42： 112-114.

LI CT， WU ZJ， CHEN WS， 2015. A new aromatic glucoside from stem bark of Illicium difengpi K.I.B. et K.I.M ［J］. Natural Product Research， 29（19）： 1793-1797.

LI CT， XI FM， MI JL， et al.， 2013. Two new 3，4;9，10-seco-cycloartane type triterpenoids from Illicium difengpi and their anti-inflammatory activities ［J］. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine， 2013： 942541.

LI LC， PAN ZH， NING DS， et al.， 2022. Rosmanal and carnosol synergistically alleviate rheumatoid arthritis through inhibiting TLR4/NF-κB/MAPK pathway ［J］. Molecules， 27（1）： 78.

MATEEN S， ZAFARA， MOIN S， et al.， 2016. Understanding the role of cytokines in the pathogenesis of rheumatoid arthritis ［J］. Clinica Chimica Acta， 455： 161-171.

MIYOSHI M， LIU S， 2018. Collagen-induced arthritis models ［J］. Methodsin Molecular Biology， 1868： 3-7.

NING DS， FU YX， CHENG L， et al.， 2016. Study on the anti-inflammatory active constituents of Illicium difengpi， a Zhuang-medicine" ［C］// The Symposium Documents of the 8th National Symposium on Ethnobotany and the 7th Asia-Pacific Forum on Ethnobotany. Hohhot： Botanical Society of China： 133-134. ［寧德生， 符毓夏， 程玲， 等， 2016. 壯藥地楓皮抗炎活性成分研究 ［C］//第八屆中國民族植物學(xué)學(xué)術(shù)研討會暨第七屆亞太民族植物學(xué)論壇會議文集. 呼和浩特： 中國植物學(xué)會： 133-134.］

NING DS， FU YX， CHENG L， et al.， 2017. Research on chemical constituents of chloroform extract from Illicii Cortex ［J］. Journal of" Chinese Medicinal Materials， 40（9）： 2093-2097. ［寧德生， 符毓夏， 程玲， 等， 2017. 地楓皮氯仿部位的化學(xué)成分研究 ［J］. 中藥材， 40（9）： 2093-2097. ］

PAN ZH， CHENG L， NING DS， et al.， 2019. Difengpienols A and B， two new sesqui-neolignans with anti-inflammatory activity from the bark of Illicium difengpi ［J］. Phytochemistry Letters， 30： 210-214.

SCOTT DL， WOLFE F， HUIZINGA TW， 2010. Rheumatoid arthritis ［J］. Lancet， 376（9746）： 1094-1108.

SINGH S， ANSHITA D， RAVICHANDIRAN V， 2021. MCP-1： Function， regulation， and involvement in disease ［J］. International Immunopharmacology， 101（Pt B）： 107598.

YAN GJ， SUN H， ZHANG AH， et al.， 2015. Progress of serum pharmacochemistry of traditional Chinese medicine and further development of its theory and method ［J］. China Journal of" Chinese Materia Medica， 40（17）： 3406-3412. ［閆廣利， 孫暉， 張愛華， 等， 2015. 中藥血清藥物化學(xué)研究概況及其理論和方法拓展 ［J］. 中國中藥雜志，" 40（17）： 3406-3412. ］

ZHAO ZD， LI JC， FENG YH， et al.， 2013. Separation and identification of glucosinolates in the Cruciferae crops by UPLC-MS/MS ［J］. Chemical Analysis Meterage， 22（2）： 12-15. ［趙振東， 李嘉誠， 馮玉紅， 等， 2013. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法鑒別十字花科植物中硫代葡萄糖苷 ［J］. 化學(xué)分析計量， 22（2）： 12-15. ］

（責(zé)任編輯 周翠鳴）

基金項目：" 國家自然科學(xué)基金（31960091）； 廣西自然科學(xué)基金（2019GXNSFAA245060）； 桂林市創(chuàng)新平臺和人才計劃（20210102-3）。

第一作者： 李連春（1986—），博士，副研究員，研究方向為天然藥物化學(xué)，（E-mail）llc@gxib.cn。

*通信作者：" 潘爭紅，博士，研究員，研究方向為藥物化學(xué)，（E-mail）pan7260@126.com。