人源

單克隆定型試劑及人源抗-A/B 在吸收放散試驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)行對(duì)比評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下。1 材料與方法1.1 研究對(duì)象及標(biāo)本來(lái)源 2015 年9 月—2023 年3 月期間西安地區(qū)的無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本，29 名獻(xiàn)血者均為漢族，排除了重復(fù)獻(xiàn)血者。 獻(xiàn)血者ABO 血型微孔板法初次篩查均顯示正反定型不符，且同時(shí)使用了單克隆抗-A/B 及人源抗-A/B 進(jìn)行吸收放散試驗(yàn)，最終確定了ABO 血型。 2022 年7 月至8月期間檢測(cè)了西安地區(qū)512 名A 型及504 名B 型無(wú)償

感染的THP-1人源巨噬細(xì)胞中顯著上調(diào)。受試者工作特征曲線(receiver operating curve, ROC)顯示曲線下面積(the area under ROC curve, AUC)為0.7474，靈敏度76.67%，特異度78.13%。通過(guò)RNase R消化和放線菌素D抑制實(shí)驗(yàn)證實(shí)hsa_circ_0007460相較于其線性mRNA更加穩(wěn)定，提示其有作為ATB的診斷生物標(biāo)志物的潛力。通過(guò)蛋白質(zhì)印跡(Western blot)、CCK-8 (

不同,從而使一些人源呼吸道病原無(wú)法直接感染小鼠,或者造成在小鼠與臨床顯著不同的病理與免疫特征。為了能更有效地研究和治療呼吸道病原感染,免疫系統(tǒng)人源化小鼠、肺人源化小鼠、肺/免疫系統(tǒng)雙人源化小鼠等模型在過(guò)去半個(gè)世紀(jì)逐漸發(fā)展和成熟。1 免疫系統(tǒng)人源化小鼠免疫系統(tǒng)人源化小鼠主要指將人的造血干細(xì)胞注射到免疫缺陷小鼠體內(nèi),然后在小鼠體內(nèi)發(fā)育出人免疫細(xì)胞譜系的小鼠模型。早在1980 年,研究人員就發(fā)現(xiàn)了重癥聯(lián)合免疫缺陷(severe combined immunode

系統(tǒng)的小鼠模型，人源化小鼠模型應(yīng)運(yùn)而生。經(jīng)過(guò)30 余年的實(shí)驗(yàn)研究和技術(shù)發(fā)展，人源化小鼠模型逐漸完善，并應(yīng)用于感染和免疫等諸多研究領(lǐng)域，但該模型仍存在一定弊端，有部分人源細(xì)胞不能穩(wěn)定重建，如紅系細(xì)胞。最早提出人源化小鼠模型中人紅細(xì)胞重建的是楊永廣教授，后續(xù)有陳青峰教授等均對(duì)紅細(xì)胞人源化小鼠模型進(jìn)行了相關(guān)的探索和研究。但是迄今為止，人源化小鼠模型中人紅細(xì)胞的重建比例均未達(dá)到理想水平。目前我國(guó)關(guān)于人源化小鼠模型的研究已有綜述類報(bào)道，但尚未見(jiàn)關(guān)于紅細(xì)胞人源化小鼠模

410011）人源化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型是將來(lái)自于人的基因、細(xì)胞或組織針對(duì)性導(dǎo)入到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)，使其獲得與人類更為接近的生理病理特征[1]。人源化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型可用于人感染性疾病的發(fā)病機(jī)制、病理過(guò)程的研究等，可作為非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的替代動(dòng)物模型，在腫瘤精準(zhǔn)治療、藥物研發(fā)、抗體開(kāi)發(fā)等生物醫(yī)藥領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。但目前人源化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型缺乏規(guī)范的制備程序和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)致其臨床表型和對(duì)藥物反應(yīng)不盡相同，極大地限制了其在生物醫(yī)藥工業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用。因此，對(duì)人源化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模

瘤研究模型受限于人源免疫系統(tǒng)的缺失。因此，構(gòu)建同時(shí)具有人源免疫系統(tǒng)和腫瘤的研究模型成為熱點(diǎn)。將患者來(lái)源腫瘤移植入人源免疫系統(tǒng)重建小鼠體內(nèi)腫瘤、免疫雙人源化模型，具有可重現(xiàn)人體內(nèi)免疫細(xì)胞與腫瘤間相互作用的優(yōu)勢(shì)，成為生理和病理?xiàng)l件下模擬人體腫瘤免疫治療療效的新模型。為此，2022年第49卷第11期《中國(guó)腫瘤臨床》刊發(fā)了第四軍醫(yī)大學(xué)西京消化病醫(yī)院聶勇戰(zhàn)教授撰寫的《人源免疫重建PDX模型構(gòu)建及其在腫瘤免疫治療中的應(yīng)用進(jìn)展》一文, 該文主要對(duì)多種類型人源化免疫重建

除，因此，根據(jù)對(duì)人源TNF-α的生物信息學(xué)分析找到新的藥物設(shè)計(jì)靶點(diǎn)至關(guān)重要。1 材料與方法1.1材料 在Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)檢索并下載人源TNF-α的蛋白質(zhì)序列(登錄號(hào)為P01375)獲取人源TNF-α蛋白氨基酸序列。1.2方法1.2.1人源TNF-α蛋白質(zhì)理化性質(zhì)分析 通過(guò)Expasy在線預(yù)測(cè)網(wǎng)站(https：//web.expasy.org/protparam/)預(yù)測(cè)人源TNF-α蛋白理化性質(zhì)。1.2.2預(yù)測(cè)信號(hào)肽、跨膜結(jié)構(gòu)及亞細(xì)胞位置 利用在線數(shù)據(jù)庫(kù)

法的研發(fā)。為解決人源免疫細(xì)胞因異種排異在小鼠體內(nèi)無(wú)法定植的問(wèn)題，近年來(lái)開(kāi)發(fā)出多種重度免疫缺陷模型，促進(jìn)了免疫系統(tǒng)人源化模型的飛速發(fā)展（表1）[2]。通過(guò)將人功能性淋巴細(xì)胞或CD34陽(yáng)性造血干細(xì)胞移植入重度免疫缺陷小鼠，并在人源免疫重建后移植患者來(lái)源的腫瘤組織，可獲得異質(zhì)性和免疫微環(huán)境與患者相似的的免疫、腫瘤雙人源化模型。該類模型不僅能夠模擬腫瘤在患者體內(nèi)的生長(zhǎng)過(guò)程，還可以重現(xiàn)腫瘤與免疫系統(tǒng)間相互作用。因此，免疫、腫瘤雙人源化模型的廣泛應(yīng)用，使得近年來(lái)腫瘤免

異特性，構(gòu)建表達(dá)人源化CAR 的動(dòng)物模型具有重要意義。本研究通過(guò)基因編輯技術(shù)分別構(gòu)建CAR基因敲除小鼠模型和表達(dá)人源CAR全序列轉(zhuǎn)基因小鼠模型，雜交得到不表達(dá)小鼠自身CAR、僅表達(dá)人源CAR的小鼠模型，并對(duì)其表達(dá)水平、剪接變異體、物種特異性化學(xué)物應(yīng)答等特征開(kāi)展鑒定和有效性評(píng)價(jià)。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 野生型C57BL 小鼠，8 周齡，雌性10只用于繁育，雄性20只用于繁育和實(shí)驗(yàn)，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司（生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK［京］202

現(xiàn)年產(chǎn)注射級(jí)高端人源化膠原蛋白原材料300萬(wàn)支，并將賦能下游企業(yè)，拉動(dòng)百億產(chǎn)值，加快人源化膠原蛋白產(chǎn)業(yè)集群化發(fā)展。錦波合成生物產(chǎn)業(yè)園運(yùn)用前沿生物算法、結(jié)構(gòu)生物學(xué)和合成生物學(xué)等技術(shù)，可大規(guī)模生物合成具有高級(jí)結(jié)構(gòu)和功能的人源化膠原蛋白，是全球首個(gè)人源化膠原蛋白綠色智造基地。

具有人免疫系統(tǒng)的人源化小鼠模型得以建立,通過(guò)將患者來(lái)源的腫瘤細(xì)胞系或腫瘤組織移植入免疫系統(tǒng)人源化小鼠體內(nèi)構(gòu)建的腫瘤免疫雙人源化小鼠模型,可以極大程度地模擬患者體內(nèi)腫瘤組織與免疫系統(tǒng)的相互作用,可能成為推動(dòng)腫瘤免疫治療策略臨床前研究的理想工具。本研究通過(guò)將人外周血單個(gè)核細(xì)胞和人胰腺癌細(xì)胞系A(chǔ)spc1 同時(shí)植入重度聯(lián)合免疫缺陷小鼠NCG 體內(nèi)以構(gòu)建胰腺癌免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型并進(jìn)行模型的有效性評(píng)估,以期為后續(xù)開(kāi)展的胰腺癌免疫治療研究提供基礎(chǔ)。1 材料與方法1.

平臺(tái)，進(jìn)一步探究人源肝臟細(xì)胞色素代謝酶CYP3A4基因的生物學(xué)特性，以期為肝癌、肝炎等疾病機(jī)制及其藥物研發(fā)提供參考。1 資料和方法1.1 資料在美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心NCBI 基因序列數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索序列信息，下載人源肝臟細(xì)胞色素代謝酶CYP3A4基因的mRNA 序列(登錄號(hào)：NM_001202855.3)及其編碼的蛋白質(zhì)序列(登錄號(hào)：NP-001189784.1)，備用。1.2 方法1.2.1 基因編碼區(qū)堿基序列組成和蛋白理化特性分析用DNASTAR 系統(tǒng)

不但彌補(bǔ)國(guó)內(nèi)Ⅲ型人源化膠原蛋白規(guī)?；a(chǎn)的空白，還打造了完整的Ⅲ型人源化膠原蛋白研發(fā)、生產(chǎn)、銷售國(guó)際化產(chǎn)業(yè)鏈，將成為全球最大的膠原蛋白產(chǎn)業(yè)基地，可迅速占領(lǐng)國(guó)際市場(chǎng)，帶動(dòng)山西省生物醫(yī)藥研發(fā)實(shí)力快速提升，滿足我國(guó)Ⅲ型人源膠原蛋市場(chǎng)持續(xù)快速發(fā)展的需求。”7月14日，記者在由山西綜改示范區(qū)管委會(huì)和山西錦波生物醫(yī)藥股份有限公司（以下簡(jiǎn)稱“錦波生物”）共建的人源化膠原蛋白產(chǎn)業(yè)園項(xiàng)目辦公室了解到，該項(xiàng)目目前已進(jìn)入設(shè)備安裝階段，正在加快施工中。山西錦波生物醫(yī)藥公司董事長(zhǎng)楊

LA4抗體可以與人源CTLA4結(jié)合,但不會(huì)與鼠源CTLA4交叉反應(yīng)[11]。因此,在利用小鼠進(jìn)行藥物有效性和安全性評(píng)價(jià)時(shí),使用CTLA4人源化的小鼠是更好的選擇。采用CRISPR/Cas9的方法將人源CTLA4基因?qū)氲叫∈蟮氖芫阎?同時(shí)敲除小鼠內(nèi)源CTLA4基因的表達(dá)。CTLA4敲除小鼠在出生后3～5周內(nèi)死亡,而CTLA4人源化小鼠表型正常。通過(guò)建立基因結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)方式與人類相似的模型,改善由于CTLA4在人與小鼠中的種屬差異導(dǎo)致的在臨床測(cè)試與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)

TNFRSF4 人源化小鼠是更好的選擇。采用CRISPR/Cas9 的方法將人源TNFRSF4 基因?qū)氲叫∈蟮氖芫阎?同時(shí)敲除小鼠內(nèi)源TNFRSF4 基因的表達(dá)。TNFRSF4 人源化小鼠(TNFRSF4h/h)及TNFRSF4 敲除小鼠(TNFRSF4-/-)表型正常。通過(guò)建立基因結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)方式與人類相似的模型,改善TNFRSF4 在人與小鼠中種屬差異導(dǎo)致的在臨床測(cè)試與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異,從而使藥物評(píng)價(jià)的結(jié)果更加客觀。1 材料與方法1.1 材料1.1.

具有人免疫系統(tǒng)的人源化腫瘤小鼠模型，期望能夠用于腫瘤免疫藥物的研發(fā)及臨床前評(píng)估。NOD-PrkdcscidIl2rgtm1/Vst(NPG)小鼠是一種先天性T、B與NK細(xì)胞三重免疫缺陷動(dòng)物。與國(guó)外的NSG或 NOG一樣，均為 NOD-Prkdcscid Il2rgnull小鼠，是目前國(guó)際公認(rèn)的免疫缺陷程度最高的小鼠模型，同時(shí)也是最好的人源細(xì)胞移植的受體。將人外周血中分離的PBMC移植入NPG小鼠體內(nèi)，可以重建以成熟T淋巴細(xì)胞為主的人免疫系統(tǒng)，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一

經(jīng)過(guò)層層純化后的人源化膠原蛋白液不斷析出，珍珠般墜入料口下方的5毫升無(wú)菌西林瓶。這是比黃金還要貴重的液體，由原液加工而成的護(hù)膚品價(jià)格可與任何國(guó)際品牌比肩，1克Ⅲ型人源化蛋白凍干纖維醫(yī)用級(jí)原料和產(chǎn)品可以賣到上萬(wàn)元。 由于在全球率先掌握了人源化膠原蛋白材料制備及產(chǎn)業(yè)化的核心技術(shù)，山西綜改示范區(qū)企業(yè)——錦波生物在再生醫(yī)學(xué)、醫(yī)療美容領(lǐng)域聲名鵲起、風(fēng)華正好。距離錦波現(xiàn)有生產(chǎn)園區(qū)7公里的正南方，綜改區(qū)化章街南側(cè)，一個(gè)更宏偉的全球人源化膠原蛋白航母級(jí)生產(chǎn)加工基地正在加

白，其基因序列與人源膠原蛋白有著根本性差異，屬于非同源物質(zhì)。在提取過(guò)程中，動(dòng)物源膠原蛋白的結(jié)構(gòu)和活性可能被破壞，最終提煉出的產(chǎn)品主要以膠原蛋白短肽的形式呈現(xiàn)，不能行使其生物學(xué)功能。同時(shí)，動(dòng)物源膠原蛋白進(jìn)入人體后受到皮膚免疫層阻隔，無(wú)法深入肌底層、真皮層，且在使用過(guò)程中存在活性低甚至無(wú)活性、有動(dòng)物源病毒污染、過(guò)敏風(fēng)險(xiǎn)等諸多弊端。已知人體中的膠原蛋白中有28種亞型，膠原蛋白應(yīng)用時(shí)必須精確到特定亞型才能發(fā)揮其生物學(xué)功能，而市場(chǎng)上充斥的無(wú)結(jié)構(gòu)、無(wú)活性、非人源膠原蛋

鼠模型除了要表達(dá)人源化的OX40分子，應(yīng)該同時(shí)表達(dá)人源化的FcγR。目前，用于研究適用于人類靶點(diǎn)分子的人類激動(dòng)型抗體的小鼠模型主要有靶點(diǎn)分子人源化小鼠、人源化小鼠（接受了人類免疫細(xì)胞移植的免疫缺陷小鼠）、靶點(diǎn)分子和FcγR 人源化的小鼠，這幾種模型具有不同的特點(diǎn)。靶點(diǎn)分子人源化小鼠由于只是將靶點(diǎn)分子進(jìn)行了人源化，獲取相對(duì)簡(jiǎn)單，但是因?yàn)樾∈篌w內(nèi)沒(méi)有人源化的FcγR，所以靶點(diǎn)分子人源化小鼠并不能為人類激動(dòng)型抗體發(fā)揮作用提供完整的環(huán)境。人源化小鼠體內(nèi)存在人類的免

。作為國(guó)內(nèi)領(lǐng)先的人源蛋白產(chǎn)品開(kāi)發(fā)生產(chǎn)企業(yè)，艾迪藥業(yè)近年發(fā)力艾滋病治療領(lǐng)域。此前在網(wǎng)上交流會(huì)上，公司董事長(zhǎng)傅和亮表示，將以抗艾滋病新藥ACC007和ACC008為核心，推進(jìn)藥物合成優(yōu)化、制劑工藝研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定、臨床試驗(yàn)研究等工作，目標(biāo)是逐步把公司打造成為國(guó)內(nèi)抗艾滋病創(chuàng)新藥物研發(fā)的領(lǐng)軍企業(yè);同時(shí)，打造具有特色的抗腫瘤藥物管線，深度開(kāi)發(fā)化藥新藥，形成化學(xué)創(chuàng)新藥物未來(lái)梯隊(duì)上市的良好局面;在人源蛋白領(lǐng)域，則在滿足原料市場(chǎng)供應(yīng)的同時(shí)積極進(jìn)軍成品制劑市場(chǎng)。人源蛋白原

09年，系一家以人源蛋白產(chǎn)品生產(chǎn)、銷售為主的生物制品企業(yè)，同時(shí)開(kāi)展部分仿制藥業(yè)務(wù)及經(jīng)銷雅培公司HIV診斷設(shè)備和試劑業(yè)務(wù)，并正在布局開(kāi)展抗艾滋病、抗炎以及抗腫瘤領(lǐng)域創(chuàng)新藥物研發(fā)。公司起步于人源蛋白業(yè)務(wù)，即以尿液為來(lái)源提取純化多種人源蛋白粗品，銷售給下游制劑企業(yè)用作生化原料。在此領(lǐng)域，公司構(gòu)建了以在線吸附技術(shù)為核心的人源蛋白樹脂吸附工藝生產(chǎn)體系，攻克了環(huán)境污染、規(guī)?；占兓募夹g(shù)難題，成為國(guó)內(nèi)唯一能夠大規(guī)模向下游烏司他丁、尤瑞克林制劑廠商供應(yīng)粗品的生產(chǎn)基地。

ype）［3］。人源溶菌酶（Human lysozyme，HLZ）屬于C型溶菌酶，是一種由130個(gè)氨基酸組成的分子量約為14.7 kD的單體蛋白［4-5］。其氨基酸序列中富含堿性氨基酸、帶正電荷、等電點(diǎn)（pI）約為11.0［6］。人源溶菌酶的空間結(jié)構(gòu)如圖1所示，它是由3個(gè)α螺旋（H1、H2和H3）與3個(gè)β折疊（S1、S2和S3）進(jìn)一步卷曲折疊構(gòu)成的具有特定構(gòu)象的緊湊結(jié)構(gòu)（圖1-A）［7-8］。其結(jié)構(gòu)中所含有的4對(duì)二硫鍵（-S-S-）在穩(wěn)定其空間結(jié)構(gòu)和蛋白復(fù)

)一、問(wèn)題的提出人源性生物樣本是人體組織經(jīng)過(guò)收集、處理、分類后可作為科學(xué)研究使用或作為商品和商業(yè)用途的人體材料，剩余的人源性生物樣本，指的是因診療目的而采集、完成了診療目的后剩余的來(lái)自人體的材料，或原采集用于備用、完成目的后應(yīng)廢棄的人體檢驗(yàn)樣本，包括全血、血清、血漿、體液、細(xì)胞或組織等；健康體檢后剩余的人體檢驗(yàn)樣本，也屬于臨床剩余樣本；現(xiàn)有以某項(xiàng)特定研究為目的而特意招募志愿者并采集的個(gè)體的臨床樣本在研究結(jié)束之后剩余的樣本，也屬于此類剩余人源性生物樣本。醫(yī)藥

菌菌株試驗(yàn)用4株人源無(wú)乳鏈球菌分離于海南大學(xué)校醫(yī)院婦產(chǎn)科中患婦科疾病女性的陰道和肛門分泌物樣品；14株羅非魚源無(wú)乳鏈球菌，其中8株無(wú)乳鏈球菌分離于患病羅非魚腦部，6株菌分離于眼部，發(fā)病羅非魚樣品來(lái)自海南省?？谑谐芜~羅非魚養(yǎng)殖場(chǎng)以及海南大學(xué)東坡湖。1.3 提取基因組利用細(xì)菌基因組提取試劑盒對(duì)18株無(wú)乳鏈球菌基因組進(jìn)行提取，通過(guò)NanoPhotometer儀器檢測(cè)基因組的含量和純度，然后保存于-20 ℃中。1.4 毒力基因的檢測(cè)將得到的18株無(wú)乳鏈球菌分別進(jìn)行

重組人源膠原蛋白是基于人膠原蛋白的特征和主要功能序列重新優(yōu)化設(shè)計(jì)的基因序列， 表達(dá)的蛋白質(zhì)是設(shè)計(jì)序列翻譯的具有人膠原蛋白特征的蛋白質(zhì)。 與傳統(tǒng)提取獲得的膠原蛋白相比，具有可加工性、無(wú)病毒隱患、水溶性好、批次穩(wěn)定和排異反應(yīng)低等優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái)， 由于其特有的三重螺旋結(jié)構(gòu)和功能特性， 國(guó)內(nèi)外科研人員開(kāi)始聚焦重組人源膠原蛋白的研究。 Myllyharju 等（2000）使用甲基酵母Pichia pastoris表達(dá)人膠原蛋白Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。 Rutschmann 等（

類健康作出貢獻(xiàn)。人源化肝臟嵌合小鼠正是其中的實(shí)驗(yàn)之一。培育初衷肝臟是個(gè)神奇的器官，它既是人體最大的內(nèi)臟器官，能分泌膽汁、儲(chǔ)藏糖原，調(diào)節(jié)新陳代謝，也是人體最大的解毒器官。人體代謝過(guò)程所產(chǎn)生的有毒產(chǎn)物、日常攝入的毒素或重金屬、藥物的代謝產(chǎn)物等都需要肝臟來(lái)解毒。但是，這些毒素——特別是有毒的藥物、代謝產(chǎn)物——?jiǎng)┝砍^(guò)肝臟的解毒能力時(shí)，會(huì)對(duì)肝臟造成致命損傷。此外，人類肝臟也容易受到一些特殊病毒，如甲肝病毒、乙肝病毒和丙肝病毒等的侵害，而且這些病毒往往特異性感染人類

等特性。僅以3株人源乳桿菌組合制備發(fā)酵乳，旨在確定3株菌株復(fù)配比例及優(yōu)化發(fā)酵乳制備工藝，為進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)具有降膽固醇的功能特性的人源益生菌發(fā)酵乳提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。1 材料與方法1.1 菌株與材料本實(shí)驗(yàn)所選用的L.rhamnosus LV108、L.casei grx12和L.fermentum grx08均由揚(yáng)州大學(xué)江蘇省乳品生物技術(shù)與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。MRS液體、固體培養(yǎng)基，12%脫脂乳培養(yǎng)基，生理鹽水，氫氧化鈉（分析純）。1.2 主要儀器與設(shè)備HH-

的：探討蝦青素對(duì)人源增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的作用以及機(jī)制研究。方法：體外培養(yǎng)人源增生性瘢痕成纖維細(xì)胞分別加入0、10、50、100μmol/L濃度的蝦青素作用24h，MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率；流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率；ELISA法檢測(cè)細(xì)胞中的TIMP-1、MMP-1、COL-I及COL-III的濃度；Western-blotting檢測(cè)Bcl-2、α-SMA、TGF-β1及Bax等蛋白的表達(dá)。結(jié)果： 不同濃度的蝦青素使人源增生性瘢痕成纖維細(xì)胞活力降低而

琳，趙金禮?重組人源性膠原蛋白的制備及表征侯增淼，李曉穎，李敏，楊金芳，楊小琳，趙金禮陜西慧康生物科技有限責(zé)任公司，陜西 西安 710054為了獲得可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)的重組人源性膠原蛋白，根據(jù)人I型膠原蛋白Gly-X-Y序列，優(yōu)選親水性的Gly-X-Y膠原肽段設(shè)計(jì)人源性膠原蛋白氨基酸序列及對(duì)應(yīng)的核苷酸序列，利用酶切技術(shù)構(gòu)建pPIC9K-COL表達(dá)載體，電轉(zhuǎn)化畢赤酵母獲得人源性膠原蛋白畢赤酵母工程菌，并對(duì)其進(jìn)行發(fā)酵罐發(fā)酵、純化及鑒定。結(jié)果顯示，獲得表達(dá)量達(dá)4.

體內(nèi)構(gòu)建免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型及人源化小鼠疾病模型，在這種人源化的小鼠動(dòng)物模型中進(jìn)行的研究更能模擬人類免疫系統(tǒng)及人類疾病實(shí)際情況。1 免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型的建立及優(yōu)化1.1 人源造血干細(xì)胞來(lái)源的選擇根據(jù)造血干細(xì)胞不同的起源部位，可分為胎肝造血干細(xì)胞、骨髓造血干細(xì)胞、粒細(xì)胞集落刺激因子(Granulocyte colony-stimulating factor，G-CSF)動(dòng)員的外周血造血干細(xì)胞、臍帶血造血干細(xì)胞。其中，胎肝造血干細(xì)胞來(lái)源于胎兒，人類胎兒肝

7]。研究發(fā)現(xiàn)，人源與小鼠源ASIC1a有98%氨基酸序列相同，另2%氨基酸決定人源與小鼠源ASIC1a在功能的差異：對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染人源或小鼠源ASIC1a基因，結(jié)果顯示，與小鼠源ASIC1a相比，人源ASIC1a介導(dǎo)酸引起的膜電流增加，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高，繼而引起細(xì)胞損傷加重，導(dǎo)致這些功能存在差異的機(jī)制是由于人源ASIC1a的細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)效率更高，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)第285位氨基酸是決定人源與小鼠源ASIC1a膜轉(zhuǎn)運(yùn)差異的關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)[8-9]。雖然人源AS

有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的人源化抗體小鼠已進(jìn)入藥物開(kāi)發(fā)應(yīng)用階段，有力地打破了國(guó)外的技術(shù)壟斷。所謂人源化抗體動(dòng)物，是先通過(guò)技術(shù)手段敲除動(dòng)物本身的抗體基因，然后再向動(dòng)物導(dǎo)入人類的抗體基因，從而使動(dòng)物能夠產(chǎn)生全人源化抗體，用于疾病的診斷和治療。人源化抗體小鼠是開(kāi)發(fā)全人源抗體藥物的核心工具動(dòng)物，也是開(kāi)發(fā)全人源抗體藥物的戰(zhàn)略資源型動(dòng)物。人源化抗體小鼠主要用于腫瘤、器官移植、自身免疫疾病等重大疾病的全人源抗體藥物的開(kāi)發(fā)。由于目前人源化抗體小鼠品系較少，屬于稀缺資源，目前已有多家

進(jìn)步，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的人源化技術(shù)取得了巨大的進(jìn)步［11-12］。人源化動(dòng)物模型是指帶有人類功能性基因、細(xì)胞或組織的動(dòng)物模型［13］。人源化動(dòng)物的構(gòu)建主要通過(guò)2種方式：①基因人源化，即將人類的抗體、病原受體、藥物代謝基因等敲入到大鼠或小鼠的基因組中，使動(dòng)物可分泌人類抗體、感染人傳染病病原、與人類有相似的藥物代謝行為和毒理表型；②細(xì)胞人源化，即在免疫缺陷動(dòng)物（如NSG小鼠）中注射一定數(shù)量的人類細(xì)胞或干細(xì)胞，從而獲得人源化動(dòng)物。本文總結(jié)了目前可用于腫瘤免疫治療藥物研究

感染的TNF-α人源化小鼠模型，為評(píng)價(jià)TNF-α單抗類藥物治療引起的單增李斯特菌感染風(fēng)險(xiǎn)提供了一種研究模式，并應(yīng)用該模型對(duì)阿達(dá)木單抗進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。1　材料與方法1.1　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用TNF-α人源化小鼠12只，購(gòu)于百奧賽圖公司[SCXK(京)2015-0008]，是將C57BL/6小鼠17號(hào)染色體上Tnf基因用人TNF基因進(jìn)行原位替換，從而使人TNF基因在該品系小鼠上表達(dá)。野生型C57BL/6，6只，購(gòu)于維通利華公司[SCXK(京)2012-0001]。

抑制因子[1]。人源CBX7蛋白位于人類染色體22q13.1上，由251個(gè)氨基酸組成，全長(zhǎng)約28.3 KDa[2]。其能直接參與PcG復(fù)合物對(duì)其他CBX蛋白家族編碼基因的轉(zhuǎn)錄抑制[3]，且和人類的多種癌癥和腫瘤的發(fā)生都有著一定聯(lián)系[4-5]。到目前為止，對(duì)人源CBX7蛋白結(jié)功能的研究報(bào)道并不多，對(duì)其結(jié)構(gòu)的研究?jī)H有兩篇報(bào)道[6-7]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)人源CBX7蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)，設(shè)計(jì)出相應(yīng)的片段進(jìn)行ppSUMO-CBX7/domain融合蛋白的構(gòu)建[8-10]

具有重要意義，而人源化小鼠就是在這種環(huán)境下應(yīng)運(yùn)而生[2]。具有人造血免疫系統(tǒng)的人源化小鼠即造血免疫系統(tǒng)人源化小鼠，是目前最為成熟且應(yīng)用最為廣泛的一類人源化小鼠模型。1 造血免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型及其人紅細(xì)胞發(fā)育情況1988年McCune等[3]將人的胎肝造血干細(xì)胞、胚胎胸腺及淋巴結(jié)移植入重癥聯(lián)合免疫缺陷(SCID)小鼠中建立了第1個(gè)人源化小鼠模型，即SCID-hu小鼠。同年8月，PBL-SCID小鼠模型誕生，該小鼠是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞輸注入SCID小鼠中

210009)人源神經(jīng)干細(xì)胞來(lái)源外泌體的提取鑒定及內(nèi)吞作用張桂龍1,2，陳陸馗1,2，李炳乾1,2，蔡云朗2,3(1.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院，神經(jīng)外科，江蘇 南京 210009； 2.東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210009； 3.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院，婦產(chǎn)科，江蘇 南京 210009)目的細(xì)胞外囊泡外泌體內(nèi)含有蛋白、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì)，在細(xì)胞間的交流中發(fā)揮著非常重要的作用。本研究首次探討人源神經(jīng)干細(xì)胞來(lái)源外泌體的的生物學(xué)特性和潛在功能。方法經(jīng)東南大學(xué)附屬中大

10034）表達(dá)人源SOD的畢赤酵母重組子的構(gòu)建李新鳴1，2，孫冶1，2，肖純凌2（1. 沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室，沈陽(yáng) 110034； 2. 遼寧省環(huán)境污染與微生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，沈陽(yáng) 110034）目的研究在畢赤酵母重組子中高表達(dá)有活性人源超氧化物歧化酶 （SOD） 方法。方法在畢赤酵母構(gòu)建表達(dá)重組人源SOD，對(duì)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基中銅離子濃度和甲醇誘導(dǎo)條件進(jìn)行優(yōu)化，并初步純化SOD。結(jié)果獲得了5個(gè)穩(wěn)定表達(dá)人源SOD的畢赤酵母重組子。色譜層析方法分

人源性肺癌組織移植瘤模型的研究進(jìn)展人源性肺癌組織移植瘤模型（PDX）是指將肺癌患者的腫瘤組織移植于免疫缺陷鼠進(jìn)行增殖傳代，傳代的肺癌組織高度保存腫瘤生長(zhǎng)所處的微環(huán)境，且保留原發(fā)肺癌組織的生物學(xué)、組織病理學(xué)特征以及腫瘤標(biāo)志物等，是一種理想的模擬人體內(nèi)環(huán)境的動(dòng)物模型。該模型對(duì)腫瘤臨床前期評(píng)估、抗腫瘤藥物療效評(píng)價(jià)、生物標(biāo)志物分析等具有重要意義。《中國(guó)腫瘤臨床》2016年第20期“專家論壇”欄目，特邀中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)肺癌專業(yè)委員會(huì)內(nèi)科學(xué)組委員于雁教授就肺癌PDX模型的

402460）人源化抗體轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究進(jìn)展與趨勢(shì)葛良鵬1鄒賢剛2劉作華3（1 重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 402460；2 農(nóng)業(yè)部養(yǎng)豬科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 402460；3 養(yǎng)豬科學(xué)重慶市市級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 402460）葛良鵬，博士，研究員，主要從事動(dòng)物資源的創(chuàng)新開(kāi)發(fā)研究。E-mail:geliangpeng1982@163.com劉作華，博士，研究員，主要從事動(dòng)物資源保護(hù)與開(kāi)發(fā)利用工作。E-mail:liuzuohua66@163.com人源化抗體轉(zhuǎn)

－串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定人源瘦素的含量孫雪晴1，2，胡高飛1，宋德偉2，田亞平3，顏光濤3，徐 蓓2，李紅梅2（1．北京化工大學(xué)，北京 100029；2．中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，北京 100013；3．解放軍總醫(yī)院生化科，北京 100853）為準(zhǔn)確測(cè)定人源瘦素的含量，建立了蛋白水解－高效液相色譜－同位素稀釋－串聯(lián)質(zhì)譜（HPLCIDMS）測(cè)定人源瘦素純品絕對(duì)含量的方法，并對(duì)人源瘦素蛋白水解時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，人源瘦素中的被測(cè)氨基酸在溫度為110℃，6mol／L HC

中的生長(zhǎng)激素（即人源生長(zhǎng)激素）有可能在接種者身體中留下潛在的阿爾茨海默病的“種子”。僅僅是懷疑布蘭德納對(duì)8名在幼年時(shí)接受過(guò)人源生長(zhǎng)激素注射以治療侏儒癥或身高發(fā)育不良的人的大腦進(jìn)行研究，這些人接受治療的激素取自數(shù)千名尸體的腦垂體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，8人中有7人的大腦中含有阿爾茨海默病相關(guān)的β淀粉樣蛋白（Aβ）沉著物，其中4人大腦中Aβ沉著物的濃度較高。一般情況下，Aβ沉著物只會(huì)在阿爾茨海默病患者和一些老年人的大腦中存在（老人大腦中存在Aβ沉著物并不意味著必然發(fā)病），

島266003)人源化小鼠模型是指帶有人類功能性基因、細(xì)胞或組織的小鼠模型[1-2]。這種模型通常作為研究人類疾病的活體替代模型，在闡明發(fā)病機(jī)制、藥物篩選等方面具有巨大的優(yōu)勢(shì)和廣泛的應(yīng)用前景[3]。由于免疫缺陷小鼠缺乏免疫力，相對(duì)容易接受異種細(xì)胞或組織，作為人源化動(dòng)物模型的應(yīng)用性更強(qiáng)。目前，人源化小鼠模型已廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)及臨床研究，主要涉及腫瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病和代謝性疾病等方面，而越來(lái)越多的新型人源化小鼠模型也在不斷產(chǎn)生。1 人源化小鼠模型研究

出的轉(zhuǎn)人CYP的人源化小鼠模型為藥物的研發(fā)提供了極大的便利，轉(zhuǎn)CYP人源化小鼠(CYP humanized mouse)是將人CYP相關(guān)基因或者人外源性激活的核受體直接導(dǎo)入或者替代小鼠相關(guān)等位基因，制備出可以表達(dá)人CYP的轉(zhuǎn)基因小鼠模型。本文綜述了轉(zhuǎn)CYP人源化小鼠及應(yīng)用的研究進(jìn)展。1 傳統(tǒng)模型及轉(zhuǎn)CYP人源化小鼠模型的優(yōu)勢(shì)CYP酶系，尤其是CYP1-3家族參與了超過(guò)75%的臨床用藥、前致癌物的I相代謝反應(yīng)以及大量日常膳食和外源化合物的生物轉(zhuǎn)化調(diào)控［5－7

顯微注射法構(gòu)建了人源化小鼠造血嵌合體模型，在2月齡人源化小鼠中仍可檢測(cè)到人源化細(xì)胞的存在［2］，但2月齡雄性人源化小鼠中出現(xiàn)顯著的疝氣癥狀。本文對(duì)疝氣的病因、對(duì)動(dòng)物生理、行為表型及對(duì)模型應(yīng)用的潛在影響進(jìn)行了研究。1 材料和方法1.1 人造血干祖細(xì)胞制備正常健康新生兒臍血由北京市臍帶血造血干細(xì)胞庫(kù)提供（孕母排除病毒性肝炎、艾滋病和梅毒感染）。臍血用肝素鈉抗凝，12 h內(nèi)分選。用Ficoll Paque PLUS淋巴細(xì)胞分離液（密度1.077，GE Healt

鼠源單克隆抗體，人源化改造過(guò)的單克隆抗體和完全的人源單克隆抗體3個(gè)階段，三者均能對(duì)腫瘤、自身免疫疾病和器官移植產(chǎn)生的排斥反應(yīng)有效果[1]，其中鼠源單克隆抗體的免疫原性和毒副作用最大[2]，經(jīng)過(guò)人源改造過(guò)的抗體可有效的彌補(bǔ)前者的不足，但由于改造過(guò)程復(fù)雜，工作量大，鼠源性成分去除不徹底等弊端[3]，目前最廣泛使用的是采用抗體庫(kù)篩選技術(shù)和基因工程小鼠來(lái)制備完全的人源單克隆抗體。本文就人源單克隆抗體藥物在腫瘤治療的研究進(jìn)展和臨床應(yīng)用做一綜述。一、人源化改造的單克隆

5]。有研究表明人源及人源化中和性抗禽流感病毒 H5N1單克隆抗體對(duì)小鼠有良好保護(hù)和治療效果[6-7]。因而,從人源大容量天然抗體庫(kù)中利用高通量的篩選策略在短時(shí)間內(nèi)獲得抗禽流感病毒H5N1人源單抗,對(duì)于新發(fā)傳染病的緊急預(yù)防和治療是十分必要和可行的。本研究利用人源大容量天然抗體庫(kù),采用噬菌體表面展示技術(shù),以 H5N1禽流感病毒安徽株 HA為抗原,最終得到了5株針對(duì)HA的噬菌體抗體基因,為高致病性禽流感病毒H5N1的預(yù)防和治療帶來(lái)了希望。1 材料與方法1.1

021)技術(shù)方法人源化小鼠人源細(xì)胞檢測(cè)方法陳 煒，馮 娟，施海霞，梁 虹，張連峰(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心 衛(wèi)生部人類疾病比較醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100021)目的 人源化小鼠在人類疾病與再生醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用，為獲得一種理想的人源化小鼠檢測(cè)方法，研究人特異性線粒體序列擴(kuò)增作為人源化動(dòng)物模型中人類DNA檢測(cè)方法的可行性。方法設(shè)計(jì)人線粒體DNA特異性引物，并用該引物對(duì)人臍血造血干細(xì)胞嵌合體小鼠進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果在人源化動(dòng)物

王利 李寧麗利用人源化小鼠研究組織工程材料的體內(nèi)免疫原性張秋玉 盛慧明 崔磊 王瑛 尹爍 林錦驃 吳娟娟 沈佰華 王利 李寧麗目的建立并利用人源化小鼠模型，研究組織工程材料的體內(nèi)免疫原性。方法利用NOD/SCID小鼠（非肥胖型糖尿病鼠與重癥聯(lián)合免疫缺陷鼠反交鼠模型），通過(guò)腹腔注射人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）（100×106）建立人源化小鼠，在人源化小鼠皮下植入異體人皮膚（陽(yáng)性對(duì)照）、人體脂肪干細(xì)胞與脫鈣骨構(gòu)建的組織工程骨（實(shí)驗(yàn)組）、單純脫鈣骨材料（陰性對(duì)