張小強(qiáng),宣小龍
(寧夏隆德縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所,隆德 756300)
奶牛乳腺炎是影響奶牛業(yè)發(fā)展的一大疾病,也是獸醫(yī)產(chǎn)科學(xué)研究的重點。歷年來由于在治療奶牛乳腺炎的過程中濫用抗生素導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性,并引起奶源中抗生素水平長期超標(biāo),影響人體健康。為保證乳源與乳制品安全,很多研究把重點放到提高奶牛乳腺自身免疫力上,而中藥多糖及其綴合物可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,其作用是多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點的[1-2]。試驗以干奶期奶牛為對象,應(yīng)用黃芪多糖來提高乳腺免疫力,從而達(dá)到預(yù)防乳腺炎的目的。
1.1 主要試劑 十二烷基硫酸鈉30 g,苛性鈉15 g,溴甲酚紫0.1 g,蒸餾水1 000 mL,生理鹽水。
1.2 動物 選擇寧夏某奶牛場的黑白花奶牛,體重約550 kg,2~4胎次,處于干奶前期,無肉眼可見臨床癥狀及乳汁變化,經(jīng)CMT隱性乳房炎檢測呈陽性。
1.3 藥物 黃芪多糖以苯甲醇和吐溫-80為助溶劑,注射用水以1∶1配制成10 mg/mL,過濾除菌后備用。
2.1 奶牛隱性乳腺炎的檢測
2.1.1 乳樣采集 先用溫水清洗乳房,擠去前3把乳汁,每乳區(qū)無菌取乳5 mL,置具塞試管中,標(biāo)明牛號、日期。于0℃冰箱保存待檢。
2.1.2 檢測方法 用DHI測定儀檢測干奶前和產(chǎn)后第3天的乳樣,并詳實記錄每頭牛的體細(xì)胞數(shù)。
2.1.3 DHI檢測判定標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)該牛場乳腺炎的發(fā)生并結(jié)合試驗的實際情況將判定標(biāo)準(zhǔn)定為:體細(xì)胞數(shù)低于5×105個/mL為陰性;體細(xì)胞數(shù)高于5.5×105個/mL為陽性。判斷標(biāo)準(zhǔn)見表1。
表1 DHI檢測判定標(biāo)準(zhǔn)
2.2 隱性乳腺炎的檢測判定 依據(jù)2.1.3判定標(biāo)準(zhǔn),將結(jié)果分為兩類,“+”、“++”、“+++”歸為陽性;“±”者重復(fù) 3次,有1次為“+”者歸為陽性,否則和“-”一起歸為陰性。記錄各類奶牛頭數(shù)。
2.3 隱性乳腺炎奶牛用藥前后對比 將36頭隱性乳腺炎患牛隨機(jī)分為4組,第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為乳池投藥組,第4組為對照組。Ⅰ~Ⅲ組在干奶前1周分別乳池灌注黃芪多糖注射液10、30和50 mg,4組灌注生理鹽水50 mL,用藥時間定為第0天,分別于第 1天、第3天、第5天、第6天采乳樣進(jìn)行DHI檢測,停藥作干奶處理,直到產(chǎn)后第3天再進(jìn)行DHI檢測。將干奶前與產(chǎn)后檢測結(jié)果進(jìn)行對比。
2.4 統(tǒng)計分析 用SPSS統(tǒng)計軟件進(jìn)行分類統(tǒng)計。
3.1 試驗牛場隱性乳腺炎的發(fā)病情況 干奶前7 d,采用DHI檢測黑白花奶牛108頭,其中62頭患有不同程度的隱性乳腺炎,陽性率57.41%。挑選其中體重相似、胎次相近的患牛36頭進(jìn)行臨床治療試驗。其發(fā)病程度及編號見表2。
表2 隱性乳腺炎臨床治療試驗?zāi)膛0l(fā)病情況
3.2 不同藥物濃度對奶牛隱性乳腺炎治療結(jié)果 干奶前不同藥物濃度處理后DHI檢測結(jié)果見表3。
表3 不同劑量藥物處理后乳樣DHI檢測結(jié)果
以各組平均頭陽性乳房數(shù)作為統(tǒng)計對象,進(jìn)行單因素方差分析,結(jié)果見表4。用藥組與對照組比較差異顯著(P<0.05),以30 mg劑量組效果最明顯(P<0.01)。
表4 不同劑量藥物處理后各組均頭陽性乳房數(shù)統(tǒng)計
干奶前與產(chǎn)后第3天DHI檢測結(jié)果對比見表5。
表5 干奶前6天與產(chǎn)后第3天DHI檢測結(jié)果
為比較干奶前6天與產(chǎn)后第3天DHI檢測結(jié)果,將每組平均每頭奶牛陽性乳房數(shù)作為統(tǒng)計對象,分別進(jìn)行組間內(nèi)t檢驗和組間單因素方差分析。結(jié)果見表6。
表6 干奶前6天與產(chǎn)后第3天各組均頭陽性乳房數(shù)
對乳腺炎的治療,歷來采用抗生素,病情嚴(yán)重者可配合進(jìn)行全身治療。泌乳期應(yīng)用抗生素會殘存于乳汁中,此種牛乳必須廢棄,造成奶牛場經(jīng)濟(jì)損失[3]。同時由于抗菌素的廣泛使用,使部分細(xì)菌產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。為避免病原菌產(chǎn)生抗藥性和降低抗生素在乳中的殘留,開展防制奶牛隱性乳腺炎新型藥劑的研究具有重要的意義。
中草藥作為有生物活性效應(yīng)的一類藥物,在防治人及畜禽疾病,特別是慢性難治性疾病和傳染病方面,顯示出合成藥、抗生素、疫苗等無法比擬的優(yōu)勢。其中中草藥免疫調(diào)節(jié)劑的研究和應(yīng)用已引起了國內(nèi)外學(xué)者的濃厚興趣[4]。很多研究發(fā)現(xiàn)中草藥發(fā)揮抗病治病作用同化學(xué)藥物有著很大的區(qū)別,尤其在治療病原微生物感染方面,化學(xué)藥物主要是干擾病原微生物的代謝過程,影響其結(jié)構(gòu)與功能,而中草藥則是通過調(diào)動機(jī)體的防御系統(tǒng),從多方面提高機(jī)體的抗感染免疫功能[5]。近年來,隨著中藥免疫機(jī)理研究的逐漸深入,人們發(fā)現(xiàn)許多中藥或其活性成分對機(jī)體免疫功能具雙向調(diào)理作用,能使機(jī)體紊亂的(亢進(jìn)或低下)免疫狀態(tài)恢復(fù)正常。因此,中藥或其活性成分在防治感染、腫瘤和免疫功能紊亂等疾病方面具有重要意義[6-7]。
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