劉保廷

山東省夏津縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（253200）

血常規(guī)檢驗(yàn)是臨床檢驗(yàn)工作的重要內(nèi)容，是臨床常用的三大檢驗(yàn)常規(guī)之一，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和發(fā)展，臨床檢驗(yàn)結(jié)果日益成為臨床診斷、治療和搶救中不可缺少的重要依據(jù)?；?yàn)結(jié)果受很多因素的影響，規(guī)范血液標(biāo)本的采集程序，保證高質(zhì)量的血樣標(biāo)本，以提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。更好地為臨床診斷和治療服務(wù)。

1 人為因素

1.1 標(biāo)本的采集

采血部位可分為末梢毛細(xì)血管法和靜脈采血法，手指血是末梢毛細(xì)血管血樣中與靜脈血差異最小且較為穩(wěn)定的血樣。但有研究表明[1]，手指血白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯升高而血小板計(jì)數(shù)明顯減低，與靜脈血相比準(zhǔn)確性和可重復(fù)性仍然較差，因此，絕大多數(shù)專家建議:血常規(guī)檢驗(yàn)特別是應(yīng)用血液分析儀時(shí)，應(yīng)使用靜脈血。各類文獻(xiàn)均表明，靜脈血血樣是最可靠的標(biāo)本，因其可防止血樣中小凝塊的形成，保證儀器進(jìn)樣時(shí)標(biāo)本能充分混勻。采血時(shí)所選擇采血部位的皮膚應(yīng)完整、無潰爛、無燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥等。還應(yīng)特別觀察標(biāo)本稀釋、樣本抗凝不佳和溶血等現(xiàn)象。如遇有患者輸液時(shí)，應(yīng)在對側(cè)采血，這樣可以減少血樣被稀釋的可能，避免交叉感染。如果從患者輸液留置針處或患者輸液的同側(cè)手背抽血，易造成血液稀釋，離心后上層血漿沒有黏性，還常見樣本抗凝不完全的現(xiàn)象，凝塊較小，有時(shí)肉眼難以辨認(rèn)，做完之后發(fā)現(xiàn)血小板很低和臨床不符，這種情況下要與臨床聯(lián)系后重新抽血。采血時(shí)一般選擇暴露明顯的、清晰的、較粗、平直無彎曲易固定的血管，如上肢、肘部的表淺靜脈。不宜在關(guān)節(jié)處等影響活動(dòng)的部位采血，防止因關(guān)節(jié)活動(dòng)不宜按壓穿刺點(diǎn)，以防造成皮下血腫。止血帶不宜扎太緊，勿讓患者反復(fù)做攥拳運(yùn)動(dòng)，當(dāng)需要重復(fù)使用止血帶時(shí)，應(yīng)使用另一上臂。止血帶結(jié)扎時(shí)間最好不超過2min，以免瘀血和血液濃縮，大靜脈回流受阻而使毛細(xì)血管內(nèi)壓增高，血管內(nèi)液與組織液交流，使分子質(zhì)量＜5000的物質(zhì)逸入組織液，或缺氧引起血液成分的變化，使檢查結(jié)果增高或減低[2]。采血前檢查注射器和針頭，避免因連接不緊而使空氣進(jìn)入產(chǎn)生泡沫致溶血；采血時(shí)應(yīng)定位準(zhǔn)確，嚴(yán)禁針尖在靜脈中反復(fù)穿刺，否則可造成血腫和血標(biāo)本溶血；采血完成將血從注射器中推入試管時(shí)應(yīng)把針頭拔掉；采血時(shí)體位不同對血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果也有影響靜脈滲透壓增加，一部分水從心血管系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到間質(zhì)中去，直立位與臥位相比易導(dǎo)致血紅蛋白、白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血細(xì)胞比容等項(xiàng)目測定值偏高[3]，因此，采血時(shí)應(yīng)盡量統(tǒng)一采血姿勢。采集末梢血標(biāo)本時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行，第1滴血擦去不用，采用第2滴血；血液檢查的標(biāo)本量與抗凝劑比例要合適。血液比例過高時(shí)，容易出現(xiàn)微凝塊，可能阻塞血細(xì)胞儀，同時(shí)影響一些檢驗(yàn)結(jié)果；血液比例過低，抗凝劑相對過剩，會(huì)引起血細(xì)胞形態(tài)和體積的一些改變，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。采集標(biāo)本最好采用封閉式真空采血管，既有利于標(biāo)本的收集、運(yùn)送和保存，又便于防止血液交叉感染。

1.2 標(biāo)本的保存、運(yùn)送及測定時(shí)間

住院患者標(biāo)本應(yīng)有明確標(biāo)記，與醫(yī)師申請單內(nèi)容相符，標(biāo)本運(yùn)送要做到專人專送。采血完成后，應(yīng)盡快送檢，采血后要及時(shí)與抗凝劑溫和地充分混勻，避免晃動(dòng)血樣產(chǎn)生溶血，盡快檢測，盡量減少運(yùn)送和保存的時(shí)間，因?yàn)闃?biāo)本保存時(shí)，血細(xì)胞的代謝活動(dòng)、蒸發(fā)和升華作用以及化學(xué)反應(yīng)、微生物降解等因素均會(huì)直接影響標(biāo)本的質(zhì)量，因而采血后到檢驗(yàn)間隔的時(shí)間越短，檢驗(yàn)結(jié)果越可靠。如果不能及時(shí)檢測應(yīng)放置室溫保存，用EDTA抗凝靜脈血標(biāo)本在標(biāo)本采集后的5min內(nèi)或30min后8h內(nèi)（室溫）檢測，可以得到最佳的檢測結(jié)果。出血性疾病的標(biāo)本應(yīng)盡快檢測，全部操作在室溫下2h內(nèi)完成，置4℃冰箱保存不超過4h，如因故不能及時(shí)檢測，樣品必須置冰箱內(nèi)，但最長不能超過1h。如果不需要血小板和白細(xì)胞分類的準(zhǔn)確資料，則標(biāo)本可以在2℃～8℃的條件下保存到24h。低溫（4℃）保存血液可使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果減低，因此標(biāo)本保存不當(dāng)直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。血細(xì)胞內(nèi)外各種成分有梯度差，故在采集、運(yùn)輸和保管、分離血細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免溶血，使紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血細(xì)胞比積等多項(xiàng)指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果增高或減低，不能確切反映原始標(biāo)本的實(shí)際含量。

為了取得高質(zhì)量的標(biāo)本，采集標(biāo)本方式到血樣運(yùn)輸、貯存等多種非疾病因素對檢驗(yàn)結(jié)果的影響。只有對這些因素系統(tǒng)全面的認(rèn)識(shí)，操作規(guī)范化、完善制度、加強(qiáng)責(zé)任心，才能保證高質(zhì)量的標(biāo)本。

2 生理因素

患者的活動(dòng)情況、精神狀態(tài)、年齡、性別、種族、樣本采集時(shí)間、吸煙、服用藥物、季節(jié)等因素都會(huì)影響檢測結(jié)果。如正常人一日之內(nèi)，白細(xì)胞數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)、血小板數(shù)等均有一定的波動(dòng)。因此采血時(shí)應(yīng)詢問是否服用過明顯干擾檢驗(yàn)的藥物，血液采集前應(yīng)避免跑步、騎自行車等劇烈運(yùn)動(dòng)，冬季應(yīng)將患者暖和后再采血。不同生理狀態(tài)下血細(xì)胞各參數(shù)也會(huì)有所不同，比如妊娠5個(gè)月以上或新生兒WBC總數(shù)會(huì)明顯增高；暴熱或嚴(yán)寒常出現(xiàn)一過性WBC總數(shù)增高。進(jìn)食喝水后，血液會(huì)有生理性稀釋作用，RBC和Hb檢測結(jié)果會(huì)有所下降，劇烈運(yùn)動(dòng)后血液濃縮，此時(shí)迅速采集血液標(biāo)本可使RBC和Hb檢測結(jié)果增高，非急診患者最好固定某一時(shí)間檢查，以盡量減少不同生理狀態(tài)對檢測結(jié)果的影響。

3 儀器因素

血細(xì)胞分析儀只能用儀器配套的校準(zhǔn)物對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，一些血細(xì)胞分析儀無配套的校準(zhǔn)物，這種情況下，實(shí)驗(yàn)室只能使用經(jīng)二級標(biāo)準(zhǔn)血液分析儀或規(guī)范操作的監(jiān)測系統(tǒng)定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。有數(shù)臺(tái)的分析儀的需先對其中一臺(tái)進(jìn)行校準(zhǔn)后，在用新鮮的全血對其他臺(tái)進(jìn)行校準(zhǔn)。至少半年校準(zhǔn)一次。實(shí)驗(yàn)室有數(shù)臺(tái)血細(xì)胞分析儀的，為了保證不同儀器間檢測結(jié)果的可比性和準(zhǔn)確性，需對每臺(tái)儀器進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控、儀器校準(zhǔn)等，以保證檢測質(zhì)量的措施，此外，還需定期用新鮮血標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同型號(hào)的儀器上進(jìn)行結(jié)果比對。自動(dòng)化儀器的應(yīng)用大大提高了檢驗(yàn)工作的效率，減少了標(biāo)本的人為誤差，血液分析儀分類法有三分群和五分類兩種，速度快、準(zhǔn)確性高、易于標(biāo)準(zhǔn)化，能提示異常結(jié)果。是白細(xì)胞分類和篩檢首選方法，但不能完全代替顯微鏡檢查法對異常白細(xì)胞進(jìn)行鑒別和分類。

4 試劑因素

用于血常規(guī)檢驗(yàn)的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理，在目前的眾多抗凝劑中，EDTA鹽是對白細(xì)胞形態(tài)和血小板影響相對較小的抗凝劑，最適合用于血常規(guī)檢驗(yàn)。血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過高時(shí)，由于抗凝劑相對不足，血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加 ，微凝血塊阻塞儀器，影響檢驗(yàn)指標(biāo)。血液比例過低，抗凝劑相對過剩，對檢驗(yàn)指標(biāo)會(huì)造成嚴(yán)重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后，白細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生改變，這種改變和時(shí)間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的最佳濃度（與血液比）為1.5mg/mL，如果血樣少，EDTA的濃度達(dá)到2.5mg/mL，中性粒細(xì)胞腫脹、分葉消失，血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片，這些改變都會(huì)使血常規(guī)檢驗(yàn)和血細(xì)胞計(jì)數(shù)得出錯(cuò)誤結(jié)果。另外，要嚴(yán)格按照儀器的操作規(guī)程進(jìn)行，如儀器的每日清洗和定期保養(yǎng)等。

總之，影響血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多，要想取得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，就要在實(shí)驗(yàn)的每一步驟中認(rèn)真操作，把人為因素引起的誤差降到最低，消滅過失誤差，盡量減少偶然誤差和系統(tǒng)誤差，手動(dòng)檢測要認(rèn)真觀察儀器的操作狀態(tài)，自動(dòng)進(jìn)樣器檢測也要隨時(shí)觀察，不能放上架就不管了，包括儀器運(yùn)行是否正常，是否卡管，是否有結(jié)果異常，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)解決，妥善處理，及時(shí)糾正潛在引起檢驗(yàn)結(jié)果因素的影響，提高檢驗(yàn)質(zhì)量。

[1] 陳芳建.血液標(biāo)本保存時(shí)間對各生化檢測指標(biāo)的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2006,21(1):87.

[2] 馬雙雙,王紅艷,楊俊.提高血常規(guī)檢驗(yàn)質(zhì)量的方法和策略[J].臨床誤診誤治,2006,19(11):79-80.

[3] 張?jiān)葡?血液細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)中的點(diǎn)滴體會(huì)[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2007,14(1):46.