許友卿 李太元 丁兆坤 吳衛(wèi)君

二噁英(Dioxin)是廣泛分布的持久性有機(jī)污染物，能使生物體突變、致畸、致癌等。環(huán)境中二噁英的來(lái)源主要有:①含氯垃圾焚燒及處理;②含氯化工產(chǎn)品如煤、汽油及芳烴類(lèi)化合物的生產(chǎn)和燃燒;③除草劑和殺蟲(chóng)劑等農(nóng)藥的降解過(guò)程（林海鵬，2009）。目前發(fā)現(xiàn)二噁英有209種同分異構(gòu)體，它們的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相似，分為兩大類(lèi)：多氯二苯并二噁英（Polychlorinated Dibenzo-p-dioxin,簡(jiǎn)稱(chēng) PCDD，復(fù)數(shù)表示為 PCDDs）和多氯二苯并呋喃（Polychlorinated Dibenzo-p-furan,簡(jiǎn)稱(chēng) PCDF,復(fù)數(shù)為 PCDFs）（楊永濱，2006）。由于氯原子取代數(shù)目和位置不同，導(dǎo)致各二噁英毒性差異很大。其中 2，3，7，8-四氯二苯并-對(duì)-二噁英 (2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,2，3，7，8-TCDD，TCDD)的毒性最強(qiáng)，被稱(chēng)為“地球上毒性最強(qiáng)的毒物”，其毒性相當(dāng)于氰化鉀(KCN)的1 000倍、氰化鈉的130倍、砒霜的900倍、馬錢(qián)子堿的500倍以上，比黃曲霉素高10倍，比3，4-苯并芘、多氯聯(lián)苯和亞硝銨還要高數(shù)倍(王愛(ài)香，2006)。TCDD具有極強(qiáng)的急性毒性，機(jī)體接觸少量就會(huì)有明顯的中毒反應(yīng)。因此，國(guó)際癌癥研究署 (IARC)將TCDD列為一級(jí)致癌物 (Abad E，2000)。

TCDD是脂溶性物質(zhì)，可通過(guò)食物鏈富集并進(jìn)入魚(yú)、人和其他動(dòng)物體，在脂肪中累積，半衰期達(dá)7.1年，對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重的威脅。食物鏈中TCDD的生物富集對(duì)自然環(huán)境（例如對(duì)海水污染）也潛在嚴(yán)重的威脅（Michael S,2009）。因此引起了全人類(lèi)的極大關(guān)注，成為目前世界環(huán)境研究的重點(diǎn)之一。

本文主要綜述TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)發(fā)育的影響及其機(jī)理，同時(shí)提出預(yù)防TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)影響的一些措施。目的是為了更好的研究TCDD對(duì)水環(huán)境、魚(yú)類(lèi)和其他水生生物的影響、機(jī)制和預(yù)防，為控制TCDD對(duì)水環(huán)境污染、保護(hù)魚(yú)類(lèi)和其他水生生物提供參考。

1 TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)的影響

生活在水環(huán)境的魚(yú)類(lèi)一方面要攝食，另一方面要不斷通過(guò)鰓進(jìn)行氣體交換，可能攝入污染了TCDD的食物或接觸污染TCDD的水環(huán)境,毒物很容易通過(guò)消化道和鰓絲進(jìn)入血液。陳進(jìn)東等（2009）研究發(fā)現(xiàn)，斑馬魚(yú)（Danio rerio）在TCDD水浴染毒48 h后,其鰓中的7-甲氧基-3-異吩唑酮-脫甲基酶(methoxyresorufin-O-demethylase,MROD)的活力隨著水環(huán)境中毒物含量的遞增呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系,各染毒劑量組與對(duì)照組比較,差異顯著(P＜0.01）。

宋士波等（2005）利用同位素示蹤把標(biāo)記的TCDD溶解于丙酮/植物油中，對(duì)鯉魚(yú)(Cyprinus carpio)進(jìn)行腹腔注射，1、2、4、8、12 d 后取樣檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)魚(yú)肝和膽汁內(nèi)的放射性活度同步變化，都是于第8 d達(dá)到峰值后下降，暴露4 d后，TCDD在魚(yú)體各組織器官分布量的順序?yàn)椋褐荆靖闻K ＞消化管 ＞性腺 ＞腎臟 ＞脾臟 ＞皮膚＞鰓＞肌肉＞腦＞血液，分布總量最多的是魚(yú)體脂肪、肝臟、消化管、性腺和肌肉。

通常，TCDD是在肝中進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，所以肝是TCDD的主要儲(chǔ)存部位和靶器官。在TCDD誘導(dǎo)下，魚(yú)類(lèi)及其他動(dòng)物肝均會(huì)出現(xiàn)不同程度的組織病理學(xué)改變。用肉眼可以觀察到TCDD導(dǎo)致肝臟表面出現(xiàn)一個(gè)或多個(gè)蒼白區(qū)域，肝腫大且表面結(jié)節(jié)、脂肪肝、肝萎縮等。在光鏡下觀察，正常肝臟是由肝索及肝血竇組成的清晰網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，但是經(jīng)過(guò)TCDD染毒的肝臟網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)被破壞。在電鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)TCDD染毒的肝細(xì)胞的大部分細(xì)胞器都受到不同程度的影響，如細(xì)胞核變?yōu)椴灰?guī)則狀，核結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)核濃縮，甚至出現(xiàn)多核細(xì)胞現(xiàn)象，然而它不是真正的多倍體細(xì)胞，而是幾個(gè)細(xì)胞融合的結(jié)果。線(xiàn)粒體的形狀改變，數(shù)目減少，嵴變形等。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)排列混亂，其表面核糖體脫落，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少，而滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)則增多。其他細(xì)胞器也會(huì)發(fā)生相應(yīng)改變（董麗，2005）。

魚(yú)類(lèi)心血管系統(tǒng)尤其是胚胎心臟對(duì)TCDD高度敏感，受TCDD影響嚴(yán)重。董武等（2002）采用形態(tài)學(xué)、組織學(xué)觀察法及細(xì)胞色素P4501A(CYP1A)抗體染色法，研究TCDD對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的影響，發(fā)現(xiàn)0.1 μg/l濃度的TCDD對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的影響不明顯，但是當(dāng)用0.3～10 μg/l濃度的TCDD染毒斑馬魚(yú)胚胎時(shí)，首先觀察到后主靜脈的血流減緩與停滯，同時(shí)還有心囊、卵黃囊、頭部、軀體等不同程度水腫以及頭部畸形。于染毒 180 h 后 ， 對(duì) 照 組 、0.1、0.3、0.1 μg/l 和 10 μg/l TCDD染毒組的死亡率分別是0、5%、60.2%、61.8%、100%。用CYP1A抗體染色試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組無(wú)陽(yáng)性反應(yīng)，而染毒組在血管上皮看到極強(qiáng)的陽(yáng)性反應(yīng)。試驗(yàn)表明，TCDD對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的循環(huán)系統(tǒng)有極強(qiáng)的損壞作用（靳洪濤，2008）。

對(duì)中腦染色觀察發(fā)現(xiàn)，TCDD染毒可以顯著升高背側(cè)中腦視頂蓋核固縮細(xì)胞的死亡率，這些核固縮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn)出凋亡特征，如核固縮和核分裂（靳洪濤，2008）。TCDD誘導(dǎo)的中腦細(xì)胞凋亡繼發(fā)于中腦循環(huán)障礙。局部循環(huán)障礙與AHR的激活誘導(dǎo)CYP1A和氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)。同時(shí)也證明了血管內(nèi)皮細(xì)胞是TCDD引起中腦循環(huán)障礙和凋亡的靶部位，且不同部位和不同濃度TCDD的作用機(jī)制不同。

TCDD染毒可引起斑馬魚(yú)仔魚(yú)腦部神經(jīng)元顯著缺失。在此過(guò)程中TCDD首先對(duì)頭部細(xì)胞凋亡產(chǎn)生強(qiáng)烈抑制，至受精58 h后細(xì)胞凋亡才開(kāi)始有所增加，受精80～100 h后，TCDD染毒組細(xì)胞凋亡更為嚴(yán)重（靳洪濤，2008）。最初TCDD對(duì)細(xì)胞凋亡的強(qiáng)烈抑制，可能阻礙正常神經(jīng)組織通過(guò)凋亡進(jìn)行重建(remastering)，使大腦失去功能，導(dǎo)致后期凋亡增加。

TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)生殖系統(tǒng)的發(fā)育和正常生殖功能影響明顯，不但直接對(duì)接觸者產(chǎn)生作用，而且對(duì)其后代產(chǎn)生影響（趙力軍，2007）。TCDD是生殖毒物和內(nèi)分泌干擾物，它對(duì)斑馬魚(yú)血清雌二醇濃度和卵泡發(fā)育影響很大。

魚(yú)類(lèi)受精卵對(duì)TCDD非常敏感，因而受TCDD影響嚴(yán)重。稀有鮈鯽（Gobiocypris rarus）的受精卵暴露在TCDD50 pg/ml濃度時(shí)，卵黃囊前端出現(xiàn)水腫，部分肝細(xì)胞的細(xì)胞核偏離中心，胞內(nèi)大部分線(xiàn)粒體的嵴脫落崩解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)斷裂片段化，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量小脂滴；當(dāng)受精卵暴露在TCDD90 pg/ml的濃度時(shí)，卵黃囊前端的水腫破裂，部分肝細(xì)胞的細(xì)胞核偏離中心，核膜破裂，核固縮變形，細(xì)胞內(nèi)的線(xiàn)粒體等大多數(shù)細(xì)胞器丟失，整個(gè)細(xì)胞幾乎被一個(gè)大的脂滴所占據(jù)，推測(cè)脂滴可能是TCDD影響細(xì)胞脂代謝的結(jié)果，而細(xì)胞核變化可能與TCDD的致癌作用相關(guān)（袁秀平，1999）。

TCDD可導(dǎo)致成魚(yú)的脂質(zhì)過(guò)氧化。劉連平（2008）等曾經(jīng)將150尾斑馬魚(yú)分成5組（包括四個(gè)梯度TCDD染毒組和一個(gè)對(duì)照組）進(jìn)行染毒試驗(yàn)。水質(zhì)接觸染毒5 d后，引起受試斑馬魚(yú)肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物——丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量增加，使超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶（g1utathion transferase，GST）活力下降，各指標(biāo)都表明，TCDD導(dǎo)致斑馬魚(yú)脂質(zhì)過(guò)氧化作用，產(chǎn)生過(guò)多氧自由基攻擊機(jī)體而造成相應(yīng)的細(xì)胞毒性效應(yīng)和損傷(劉連平,2008)。

2 TCDD影響?hù)~(yú)類(lèi)生長(zhǎng)的機(jī)理

TCDD發(fā)揮毒作用并非由于TCDD直接與機(jī)體蛋白質(zhì)、核酸等形成加合物或直接引起脂質(zhì)過(guò)氧化，而是TCDD與芳香烴受體 (aryl hydrocarbon receptor，AHR)結(jié)合后誘導(dǎo)相應(yīng)基因的表達(dá)，改變酶活性和蛋白質(zhì)，在參與體內(nèi)生物氧化反應(yīng)中，產(chǎn)生活性氧的機(jī)會(huì)增加，導(dǎo)致氧化應(yīng)激等一系列反應(yīng)。其中TCDD及其同系物與AHR受體的結(jié)合是特異性的。和其他在細(xì)胞中作為第二信使的激素一樣，TCDD的作用也包括三個(gè)步驟：①信號(hào)識(shí)別；②信號(hào)轉(zhuǎn)換；③應(yīng)答反應(yīng)。信號(hào)識(shí)別包括TCDD或相關(guān)化合物與AHR受體結(jié)合。這個(gè)反應(yīng)具有高度特異性，除了需要側(cè)鏈鹵代和極性外，還需要平面性和堆積作用。AHR與TCDD結(jié)合的配體亞基不是一段單獨(dú)的肽，而是一個(gè)復(fù)雜多聚體(張志仁，2000）。

AHR是一分子質(zhì)量相對(duì)高的蛋白質(zhì)聚合物，分子量為270 kD左右，細(xì)胞質(zhì)中的AHR為四聚體，含兩個(gè)分子量為90 kD的熱休克蛋白（HSP90）、一個(gè)配體結(jié)合亞基和一分子p50（楊永濱，2006）。AHR對(duì)激活靶基因的轉(zhuǎn)錄具有重要意義，因此又稱(chēng)為轉(zhuǎn)錄因子。AHR的配體結(jié)合亞基上有一個(gè)復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄活化區(qū)域，該區(qū)域由3個(gè)功能不同的亞區(qū)域組成：一是富含P/S/T的亞區(qū)域，該部位可提高轉(zhuǎn)錄活性；二是富含Q的亞區(qū)域，是激活轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵部位；三是Acidic亞區(qū)域，它本身不能激活轉(zhuǎn)錄。研究表明，AHR的第666～688個(gè)氨基酸序列是活化轉(zhuǎn)錄的功能部位，進(jìn)一步的研究顯示，第678位的白氨酸（leu 678）是AHR的活化部位，可能是配體的結(jié)合部位（楊永濱，2006）。當(dāng)二噁英類(lèi)外來(lái)物或內(nèi)源性配基與AHR結(jié)合后，AHR的兩個(gè)HSP90蛋白和一分子p50即脫離，受體被激活，隨后配體-受體復(fù)合物由細(xì)胞漿轉(zhuǎn)入細(xì)胞核。Sadek C M.等（1994）研究發(fā)現(xiàn)，將配體結(jié)合亞基轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核內(nèi)還需要一種叫芳香烴受體核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（aryl hydrocarbon receptor nuclear translocating protein,ARNT）參與。細(xì)胞核中的ARNT與AHR結(jié)合成二聚異構(gòu)體AHR/ARNT復(fù)合物。ARNT與AHR結(jié)合部位是AHR的螺旋-環(huán)-螺旋基序區(qū)域（分子量為87 kD），該區(qū)域和ARNT的一個(gè)螺旋-環(huán)-螺旋以二聚異構(gòu)體形式結(jié)合（Henry E C,2006）。ARNT使配體-受體復(fù)合物二聚體化，變成與DNA結(jié)合形式。該復(fù)合物再與二噁英反應(yīng)基因上游部位的AHR反應(yīng)元件（aromatic hydrocarbon response elements,AHREs）結(jié)合。激活轉(zhuǎn)錄過(guò)程不僅需要配體結(jié)合、多聚體分離、轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核和二聚體化，還需要激活異二聚體。用RNA酶處理配體-受體復(fù)合物將抑制其DNA結(jié)合能力，表明RNA參與其中。DNA結(jié)合形成時(shí)還需要磷酸化過(guò)程。磷酸化酶處理可抑制DNA結(jié)合，而蛋白激酶C可促進(jìn)DNA結(jié)合，表明絲氨酸/蘇氨酸磷酸化作用在受體激活變?yōu)镈NA結(jié)合形式過(guò)程中非常重要。激活的二聚異構(gòu)體結(jié)合到作為轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子的DNA特異位點(diǎn)并誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)，引起相關(guān)基因如細(xì)胞色素P450（如 CYP1A1,CYP1A2） 的轉(zhuǎn)錄 (楊小芳，2000）。DNA上的二噁英應(yīng)答增強(qiáng)子（二噁英應(yīng)答元件，dioxin responsive enhancer,DRE）位于特定轉(zhuǎn)錄基因5'末端前（Harper）。DRE的核苷酸序列具有高度保守性，在不同動(dòng)物種屬DNA序列相似，核心序列為5'-T/GNGCGTGA/CG/CA-3'（Denison;Santostefano）。核心序列的幾個(gè)核苷酸對(duì)于結(jié)合作用是必須的。突變分析表明，如果將這些堿基去除，則不能完成結(jié)合。構(gòu)建報(bào)告基因研究表明，DRE調(diào)控CYP1A1表達(dá)。DRE重復(fù)序列比單個(gè)DRE更能促進(jìn)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行。調(diào)控區(qū)域內(nèi)也有抑制區(qū)，可能抑制受體活性（張志仁，2000）。

在不同生物體，雖然AHR的含量各異，但是大多數(shù)組織均存在AHR。而且AHR與二噁英類(lèi)物質(zhì)結(jié)合的親和力在魚(yú)類(lèi)、人和其他許多動(dòng)物是相似的（楊永濱，2006）。在一個(gè)機(jī)體內(nèi)，AHR可以是一或數(shù)種，大西洋鮭（Salmo salar）有四種AHRⅡ。鮭科（Salmo salar）魚(yú)類(lèi)對(duì)TCDD的高度敏感性可能是由于其具有多種功能性AHR基因（Hansson M C,2008）。二噁英誘導(dǎo)的基因多達(dá)6個(gè)或更多，即2個(gè)P450基因-CYP1A1、CYP1A2及4個(gè)非P450基因（NQO1、Aldh3a1、Vgtab、Gstal）。目前研究最為廣泛的是CYP1A1、CYP1A2基因，發(fā)現(xiàn)在CYP1A1轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游有3個(gè)二噁英反應(yīng)元件。斑馬魚(yú)常被用于混和化學(xué)物污染的檢測(cè),其CYP1A并未分化。目前對(duì)魚(yú)CYP1A的研究主要局限于通過(guò)檢測(cè)肝7-乙氧基-3-異吩唑酮-脫乙基酶（ethoxyresorufin-O-deethylase，EROD）而間接判斷 CYP1A的變化,其理論依據(jù)是哺乳動(dòng)物CYP1A1可特異性地調(diào)控EROD酶活力,而哺乳動(dòng)物CYP1A2可特異性地調(diào)控7-甲氧基-3-異吩唑酮-脫甲基酶（methoxyresorufin-O-demethylase,MROD）活力（謝英明，2009）。陳進(jìn)東等（2008）首次利用TCDD對(duì)斑馬魚(yú)進(jìn)行染毒,分析它們對(duì)斑馬魚(yú)肝臟和鰓MROD酶活力及CYP1A的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TCDD對(duì)斑馬魚(yú)肝臟MROD活力的誘導(dǎo)非常強(qiáng)烈,其中最高劑量組比對(duì)照組增加了60.8倍,首次證實(shí)了斑馬魚(yú)肝臟內(nèi)MROD酶可經(jīng)TCDD誘導(dǎo)后特異性表達(dá),并呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。

TCDD引起下頜發(fā)育短小是AHR2介導(dǎo)的sonic hedgehog(shh)基因表達(dá)的降低及欠缺所致。Dong等（2005）證實(shí)，斑馬魚(yú)下頜發(fā)育短小與sonic hedgehog(shh)基因表達(dá)相關(guān)。Teraoka等（2002）發(fā)現(xiàn)，TCDD 染毒加強(qiáng)了斑馬魚(yú)AHR2 mRNA的表達(dá),而且TCDD染毒引起的shh下調(diào)依賴(lài)于AHR2受體。失去shh信號(hào)的突變體，表現(xiàn)出類(lèi)似于TCDD誘導(dǎo)的下頜發(fā)育遲緩。進(jìn)一步的機(jī)制研究表明，TCDD可引起細(xì)胞增殖的顯著降低，卻不引起下頜部細(xì)胞凋亡的顯著增加。但是TCDD并未引起shh的受體patched1(ptc1)表達(dá)明顯下調(diào)，而shh抑制劑環(huán)王巴明(eyelopamine)處理組，ptc 1在神經(jīng)元組織和下頜的表達(dá)明顯減少。同時(shí)，與TCDD不同，shh抑制劑可同時(shí)降低細(xì)胞增殖和增加凋亡（董武，2005）。由此推論，TCDD引起斑馬魚(yú)下頜發(fā)育短小不僅因?yàn)橛绊憇hh表達(dá)，還可能影響其他基因。Gooseeoid(GSC)基因在鼠、斑馬魚(yú)和人類(lèi)中高度保守，該基因的缺失或突變可以導(dǎo)致顱面部的多種畸形，研究發(fā)現(xiàn)，染毒斑馬魚(yú)胚胎60 hpf(受精后60 h)GSC 基因表達(dá)量顯著減少（虞佩,2007）。Tisha（2008）研究表明，TCDD對(duì)斑馬魚(yú)卵巢毒性影響以及其誘導(dǎo)內(nèi)分泌的紊亂可作為T(mén)CDD在魚(yú)類(lèi)生殖方面一種機(jī)制的說(shuō)明。

DNA轉(zhuǎn)錄后的mRNA即進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)結(jié)合于核糖體開(kāi)始蛋白質(zhì)的翻譯。翻譯產(chǎn)物CYP1A1和CYP1A2活性的提高可以增加電子傳遞到氧分子導(dǎo)致形成活性氧的機(jī)會(huì)，引起氧化應(yīng)激反應(yīng)。氧化應(yīng)激是指破壞了強(qiáng)氧化劑和抗氧化劑之間的平衡導(dǎo)致的潛在傷害，這種傷害是指當(dāng)氧自由基的產(chǎn)生超過(guò)機(jī)體抗氧化防御清除能力或機(jī)體防御體系受損而不能發(fā)揮正常功能時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞毒性效應(yīng)。細(xì)胞損傷的主要原因是氧化劑與抗氧化劑之間的平衡遭受破壞，先是直接引起生物膜脂質(zhì)過(guò)氧化、細(xì)胞內(nèi)蛋白及酶變性、DNA損害，最后導(dǎo)致細(xì)胞死亡或凋亡、組織損傷、疾病發(fā)生（劉連平,2008）。經(jīng)不同途徑進(jìn)入機(jī)體內(nèi)的TCDD一方面可以被細(xì)胞色素P450代謝成易氧化還原的酚類(lèi)或者醌類(lèi)物質(zhì)，在有氧的條件下，代謝物質(zhì)在氧化還原的過(guò)程中不斷產(chǎn)生氧自由基；另一方面是細(xì)胞色素P450在代謝TCDD時(shí)直接生成氧自由基。有實(shí)驗(yàn)表明，TCDD染毒后SD大鼠血、尿、肝、腦、睪丸及附睪等組織中脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA含量明顯增加，抗氧化酶SOD、GSH-Px等活力下降(劉連平,2008)。

AHR介導(dǎo)特異基因表達(dá)是TCDD毒性作用最主要也是最基本的作用機(jī)理。其作用過(guò)程可包括為以下幾個(gè)過(guò)程：①TCDD進(jìn)入細(xì)胞；②TCDD與AHR結(jié)合；③配體-受體復(fù)合物轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核；④配體-受體復(fù)合物與DNA識(shí)別位點(diǎn)結(jié)合；⑤特異基因的轉(zhuǎn)錄及翻譯；⑥表達(dá)蛋白與發(fā)揮作用。

TCDD可以通過(guò)其他途徑產(chǎn)生毒性作用。TCDD可通過(guò)降低促性腺激素的反應(yīng)和減少雌激素的合成抑制卵泡成熟，干擾雌激素調(diào)節(jié)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)也可能是TCDD影響卵泡發(fā)育的一個(gè)原因。TCDD可通過(guò)干擾各種信號(hào)通路來(lái)改變卵巢功能，如糖代謝、脂代謝，并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄。然而，TCDD擾亂魚(yú)卵泡發(fā)育和繁殖的機(jī)制尚待進(jìn)一步研究(Tisha,2008)。對(duì)受精24 h后的斑馬魚(yú)胚胎進(jìn)行染毒試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，下頜短小程度和TCDD的濃度相關(guān)，與對(duì)照組差異顯著（P＜0.05）。形態(tài)發(fā)育基因Sonic hedgehog(shh）在下頜原基表達(dá)的程度與TCDD的染毒濃度相關(guān)，染毒濃度越高，shh表達(dá)的程度越小。可見(jiàn)，shh對(duì)下頜的生長(zhǎng)發(fā)育起重要作用，TCDD引起下頜短小與shh表達(dá)量減少相關(guān)（董武，2005）。

3 給魚(yú)投喂無(wú)污染、添加微量營(yíng)養(yǎng)素或其他物質(zhì)的飼料

給魚(yú)投喂含植物油和添加VA、VE等微量營(yíng)養(yǎng)素的飼料，可減少TCDD的污染，增強(qiáng)抗病力，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育。Tisha等（2008）發(fā)現(xiàn)，用菜油代替魚(yú)油大大減少了TCDD在魚(yú)體的積累及危害。機(jī)體VA、VE具有維持正常視覺(jué)、上皮細(xì)胞分化、胚胎發(fā)育、抗氧化、抗腫瘤及免疫等功能。但是，TCDD能阻礙VA在肝臟內(nèi)的儲(chǔ)存,促進(jìn)其排泄,導(dǎo)致血清中的VA明顯降低。TCDD也可降低機(jī)體血清VE的水平（趙力軍等，2007）。因此，適當(dāng)補(bǔ)充被TCDD損耗的微量營(yíng)養(yǎng)素是有益的。此外，Huang等（2007）報(bào)道，環(huán)加氧酶COX2對(duì)發(fā)育斑馬魚(yú)的心臟畸形有抑制作用。Chao（2009）的實(shí)驗(yàn)證明，氯化鎘抑制人類(lèi)肝癌細(xì)胞的TCDD AHR激活，而且效果明顯。劉燕群等（2008）發(fā)現(xiàn)，茶多酚在一定程度上緩解TCDD所致的肝損傷，其機(jī)制可能與抗氧化功能有關(guān)。氯化鎘和茶多酚等也可用于保護(hù)魚(yú)類(lèi)試驗(yàn)。

通過(guò)投喂無(wú)TCDD或添加微量營(yíng)養(yǎng)素或其他物質(zhì)的飼料，可以在一定程度上保護(hù)魚(yú)類(lèi)，但是不能根本消除TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)的影響。修復(fù)被TCDD污染的水體，凈化魚(yú)類(lèi)生活環(huán)境，也是預(yù)防TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)影響的措施之一。從根本上說(shuō)，要預(yù)防TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)和其他水生生物的影響，必須大力進(jìn)行環(huán)保宣傳，加強(qiáng)全民的環(huán)保意識(shí)，自覺(jué)地保護(hù)環(huán)境，采取積極的措施控制污染源，減少、防止TCDD等二噁英的排放。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，TCDD對(duì)魚(yú)類(lèi)、人和其他動(dòng)物體的危害嚴(yán)重，TCDD產(chǎn)生毒性的機(jī)理種種，但是，AHR介導(dǎo)特異基因表達(dá)是TCDD毒性作用最主要也是最基本的作用機(jī)理。為了預(yù)防TCDD的危害，必須繼續(xù)深入研究TCDD的毒性作用及其機(jī)制，同時(shí)積極減少、防止TCDD的產(chǎn)生和對(duì)養(yǎng)殖的污染。

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