王濟興 夏瑞雪

綠膿桿菌又稱銅綠假單胞菌，在自然界中廣泛存在。正常人的皮膚、呼吸道、腸道中均存在。而在醫(yī)院環(huán)境中廣泛分布，為重要的條件致病菌。人們發(fā)現(xiàn)該菌耐藥廣泛并容易變異，致死率很高，在臨床中危害日益增大［1］。本實驗中，選取臨床中常用針對綠膿桿菌的一些抗生素，觀察其耐藥性，以期為臨床用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 選擇2006年4月至2009年9月我院臨床各種感染標本中分離出144株綠膿桿菌，其分離率分泌物占54.9%，痰液占 34.7%，尿液占 4.8%，其他標本占 5.6%。

1.2 分離與鑒定 標本接種至血瓊脂培養(yǎng)基行細菌分離培養(yǎng)，培養(yǎng)后細菌涂片觀察革蘭氏陰性菌桿菌，選用VITER-GN鑒定卡進行鑒定，通過法國梅里埃公司的Vitek 2全自動微生物分析儀鑒定。

1.3 藥敏試驗

1.3.1 藥品:VITEK2 AST-GN09藥敏卡。

1.3.2 方法:對鑒定出的綠膿桿菌上法國梅里埃VITEK 2全自動微生物分析儀上利用VITEK 2 AST-GN09藥敏卡進行藥物敏感試驗。質(zhì)控菌為ATCC27853。

2 結(jié)果

綠膿桿菌對所測各種抗生素均有不同程度的耐藥，耐藥率9.72%～90.98%，許多菌株表現(xiàn)出多重耐藥。比較敏感的有亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、頭孢他啶、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、環(huán)丙沙星，耐藥率分別為 9.72%、17.36%、18.06%、20.13%、20.84%、21.53%、22.22%;其他各種抗生素的耐藥率在25%～95.2%。見表1。

3 討論

綠膿桿菌感染在院內(nèi)感染中所占比例較高，是院內(nèi)感染主要致病菌之一［2］。多發(fā)生在年老、合并基礎(chǔ)疾病以及混合細菌感染者［3］。患者病情多危重，病死率極高。本組菌株多分離自分泌物，此結(jié)果與其他報告有些出入［4，5］?？梢蚋鱾€科室送檢習慣不一導致。其耐藥原理:其有多重耐藥系統(tǒng)。而且同一耐藥突變株可能同時存在多個耐藥系統(tǒng)。其多重耐藥是外膜第通透性與酶協(xié)同作用的結(jié)果。同時，還有主動泵出系統(tǒng)參與耐藥作用［6，7］。綠膿桿菌外膜的外葉層由特殊的脂多糖組成。其外膜僅有低效率的微孔蛋白，外膜通透性差，小分子藥物通過其微孔的速率僅為一般革蘭氏陰性細菌的百分之一［6］。具有非常有效的通透屏障作用，特別是針對親脂性抗生素。且容易發(fā)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBL)耐藥細菌變異。主要產(chǎn)生PSE-1，能分解氨芐西林、羧芐西林、頭孢噻吩、頭孢孟多、哌拉西林等，易產(chǎn)生耐藥［8］。目前，人們針對β-內(nèi)酰胺酶耐藥菌所研制的抗生素主要有以下幾種:β-內(nèi)酰胺類與β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑如克拉維酸;對β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定的新一類廣譜抗生素如頭孢類以及青霉烯及碳青霉烯類抗生素［8］。

表1 綠膿桿菌常用抗生素的藥敏結(jié)果

對16種抗生素的藥物敏感試驗發(fā)現(xiàn)，其中較敏感抗生素為亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、頭孢他啶、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、環(huán)丙沙星，其耐藥率低于25%。亞胺培南屬于最新型β-內(nèi)酰胺類抗生素-亞胺硫霉素，有對抗細菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶的降解能力。此藥在本組實驗中耐藥率最低。阿米卡星因有腎毒、耳毒等不良反應(yīng)，臨床應(yīng)用少，因此敏感度較高。本組資料中，綠膿桿菌對哌拉西林有相當高的敏感性，可能與近年來臨床廣泛使用新一代的頭孢菌素、喹諾酮類抗生素，而某些抗生素使用相對減少而使敏感性有所恢復(fù)有關(guān);而作為第三代喹諾酮類藥物的環(huán)丙沙星，在此實驗中仍表現(xiàn)出很高的敏感度。綠膿桿菌對第2代頭孢幾乎全部表現(xiàn)出較高的耐藥率;對氨芐西林和氨芐西林/舒巴坦耐藥情況最嚴重。

實驗室藥敏結(jié)果與臨床用藥習慣有關(guān)—新的用藥習慣會產(chǎn)生新的細菌耐藥譜。我們要重視細菌培養(yǎng)以及藥敏實驗，將經(jīng)驗與細菌培養(yǎng)結(jié)果相結(jié)合，指導臨床用藥。

1 李紅霞，李從榮，施金玲，等.醫(yī)院銅綠假單胞菌感染體外耐藥動態(tài)觀察.中華醫(yī)院感染學雜志，2002，12:621-622.

2 張慧芳，李慶興，朱碧紅，等.醫(yī)院內(nèi)感染綠膿桿菌對頭孢菌素的耐藥性分析.中國熱帶醫(yī)學，2005，5:828-831.

3 王豫平，王慕云，廖致紅.多重耐藥銅綠假單胞菌感染相關(guān)因素分析.中華醫(yī)院感染雜志，2006，16:1059-1060.

4 肖揚，李鎖文，劉刃，等.院內(nèi)獲得性肺炎綠膿桿菌對13種抗生素敏感性研究.第一軍醫(yī)大學學報，1999，19:444-446.

5 王志芳，張旭剛.ICU肺部銅綠假單胞菌感染的藥物敏感試驗分析.中國全科醫(yī)學，2009，11:1267.

6 張偉，金美玲，蔡映云.綠膿桿菌對抗生素的多重耐藥的機制研究.國外醫(yī)學內(nèi)科學分冊，1999，26:482-484.

7 吳安華，羅曉燕.銅綠假單胞菌多重耐藥主動外排泵與抗生素耐藥.中華醫(yī)院感染雜志，2003，13:93-95.

8 段小貝，楊志援.細菌耐藥性變異與抗菌藥物臨床應(yīng)用研究進展.深圳醫(yī)學，1998，11:37-41.