TGF-α、CEA、CA199、CA125 聯(lián)合檢測(cè)消化道惡性腫瘤臨床應(yīng)用

孫慧

腫瘤標(biāo)志物是指腫瘤細(xì)胞在癌變過(guò)程中產(chǎn)生的抗原和一些生物活性物質(zhì)，在正常組織和良性疾病時(shí)幾乎不產(chǎn)生或含量甚微，因而有助于腫瘤的臨床診斷、療效觀察、復(fù)發(fā)監(jiān)控和預(yù)后判斷。近年來(lái)，由于現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)的飛速發(fā)展，腫瘤標(biāo)志物已廣泛應(yīng)用于臨床，為腫瘤的早期診斷和早期治療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。蛋白芯片是一種高通量、高靈敏度、高特異性且微型化的蛋白質(zhì)分析技術(shù)［1］腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在診斷消化道惡性腫瘤具有重要的參考價(jià)值，但單一指標(biāo)檢測(cè)始終存在著特異性不強(qiáng)，靈敏度低等不足［2］。聯(lián)合檢測(cè)有助于提高診斷的準(zhǔn)確性，蛋白質(zhì)芯片是一種高通量，高靈敏度，高特異性且微型化的蛋白質(zhì)分析技術(shù)［1］實(shí)驗(yàn)表明蛋白芯片技術(shù)對(duì)多種疾病的早期診斷均有一定的作用［3，4］為探討其在消化系惡性腫瘤患者血清水平的變化及臨床價(jià)值，我們分別對(duì)本院2005年1月到2009年1月收集到的294例消化道惡性腫瘤住院患者，同期住院的消化道良性病患者107例以及來(lái)我院作健康體檢的正常人335名血清中TGF-α、CEA(癌胚抗原)、CA199(糖鏈抗原l99)、CA125(糖類(lèi)抗原l25)水平進(jìn)行聯(lián)合測(cè)定，探討其在消化道惡性腫瘤診斷中的作用，現(xiàn)報(bào)告分析如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 資料為本院2005年1月至2009年1月的，均經(jīng)病理檢查明確診斷，其中食管癌56例，胃癌61例，結(jié)腸癌149例，胰腺癌28例;男198例，女96例，平均年齡54.1歲。其中食管炎21例，胃炎25例，消化道潰瘍53例，結(jié)腸炎5例，胰腺炎3例;男69例，女38例，平均年齡43.9歲。正常組均系;其中男196例，女139例，平均年齡38.2歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 各組均采集空腹靜脈血2 ml，離心取血清，-20℃保存?zhèn)溆谩５鞍仔酒噭┖袨槊绹?guó)Abbott公司提供，按說(shuō)明書(shū)操作，試劑盒提供的正常參考值范圍為:CA199＜37 U/ml，CA125 ＜35 KU/L，CEA ＜5 μg/ml，TGF-α0.74 ～1.54 ng/ml。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯著性檢驗(yàn)使用χ2檢驗(yàn)(P＜0.05)。

2 結(jié)果

2.1 各組陽(yáng)性率比較 腫瘤組的陽(yáng)性率顯著高于良性組及正常組(χ2=45.725，P=0.000;χ2=234.619，P=0.000)。蛋白芯片對(duì)消化道惡性腫瘤檢測(cè)的陽(yáng)性率為82.93%，特異度為71.49%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為65.95%，陰性預(yù)測(cè)值為86.34%，準(zhǔn)確度為76.09%，見(jiàn)表1。

表1 蛋白芯片對(duì)各組的檢測(cè)比較(例，%)

2.2 4種腫瘤標(biāo)志物在各組中的比較 腫瘤組的陽(yáng)性率均著高于良性組和正常組(P＜0.05);4種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率均顯著高于單一標(biāo)志物檢測(cè)(P＜0.05)見(jiàn)表2。

表2 4種腫瘤標(biāo)志物在各組中的比較

本實(shí)驗(yàn)即運(yùn)用蛋白芯片技術(shù)，通過(guò)同時(shí)定量分析被檢者血清中的4種腫瘤標(biāo)志物的含量，對(duì)消化道惡性腫瘤進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)分析。結(jié)果表明，蛋白芯片可以提高消化道惡性腫瘤診斷的陽(yáng)性率(82.93%)和陰性預(yù)測(cè)值(86.34%)，減少漏診。

3 討論

消化道腫瘤的早期診斷早期治療是提高療效的最有救手段之一目前已有多種相關(guān)標(biāo)志物在臨床得到廣泛應(yīng)用，但單一指標(biāo)始終存在著特異性不強(qiáng)、陽(yáng)性率較低等不足［2］現(xiàn)應(yīng)用多種常用指標(biāo)經(jīng)行聯(lián)合檢測(cè)以提高靈敏度。

TGF-α廣泛分布于癌細(xì)胞、轉(zhuǎn)化細(xì)胞及胚胎等組織中。它在口腔癌、肺癌、食管癌、乳腺癌的組織中均有很高的表達(dá)，體內(nèi) TGF-α的過(guò)表達(dá)可導(dǎo)致腫瘤形成，王虹等［5］發(fā)現(xiàn)TGF-α可能通過(guò):① 由于癌細(xì)胞通過(guò)自分泌及旁分泌作用產(chǎn)生TGF-α及TGF-α調(diào)節(jié)系統(tǒng)平衡失調(diào)，使癌細(xì)胞對(duì)自分泌TGF-α的抑制作用更為敏感。導(dǎo)致TGF-α自分泌增多，以抵消TGFB的抑制作用［6］;②因血清高水平的TGF-α及組織細(xì)胞癌基因與腫瘤啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)化的高表達(dá)，更進(jìn)一步促使正常細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，加速惡性腫瘤自分泌TGF-α增多，加快腫瘤形成和生長(zhǎng)，或是當(dāng)細(xì)胞正常生長(zhǎng)出現(xiàn)障礙。使之致癌因素增加。而導(dǎo)致肺、食管、肝、乳腺和大腸等的腫瘤。

1965年Gold和Freedman首先發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸癌中存在癌胚抗原(CEA)。癌胚抗原(CEA)最初發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的可溶性糖蛋白，胚胎期主要存在于胎兒的胃腸管、胰腺和肝臟.出生后組織含量很低。發(fā)生消化道惡性腫瘤時(shí)可見(jiàn)血清CEA水平升高，CEA是目前研究最廣泛的一種腫瘤標(biāo)志物，胃腸道腫瘤細(xì)胞由于極性消失，分泌的GEA常反流到血液或淋巴系統(tǒng)，導(dǎo)致血清中CEA升高［7］，多種惡性腫瘤如結(jié)直腸癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌和肺癌中均有升高，超過(guò)20 μg/L往往提示有消化道癌腫，但因?yàn)樗詢?nèi)胚層，內(nèi)胚層來(lái)源的腫瘤以及內(nèi)胚層來(lái)源以外的腫瘤也普遍存在CEA。因此，CEA不能作為癌腫定位診斷的指標(biāo)［8］。但根據(jù)其表達(dá)特性，可以用來(lái)早期篩選。

腫瘤相關(guān)糖鏈抗原(CA)是腫瘤表面的抗原，或者是腫瘤細(xì)胞所分泌的抗原，糖鏈抗原是一類(lèi)高分子量的粘蛋白(musin)或血型抗原。CA具有一系列抗原，其在消化道腫瘤標(biāo)志物中較有代表意義的有 CA199、CA125、CA50、CA724等。CA199是1979年Koprowski等制備出的抗消化道腫瘤的單克隆抗體，在由內(nèi)胚層細(xì)胞分化來(lái)的多種上皮類(lèi)惡性腫瘤血清中均可見(jiàn)升高，臨床多用于胰腺癌的診斷，在胰腺癌、結(jié)腸癌和胃癌，CA199大量表達(dá)于癌組織的糖脂和糖蛋白中，并且出現(xiàn)于血清和尿中。CA199是目前對(duì)胰腺癌敏感性最好臨床應(yīng)用最廣泛的腫瘤標(biāo)志物，在腸癌、胃癌、肝癌及膽囊癌的的檢測(cè)中成為重要的腫瘤標(biāo)志物［9］，所有消化道惡性胂瘤患者血清中 CA19-9水平均高于正常人［10］。1981年Bast等學(xué)者利用人卵巢漿液性囊腺癌腹水中的腫瘤細(xì)胞為免疫原制備出，與CA199同屬糖鏈抗原的一種單抗CA125。CA125是一種與卵巢癌相關(guān)的抗原，近年來(lái)報(bào)道在胃癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌有較高的陽(yáng)性檢出率，也有報(bào)道其在肝癌時(shí)升高最顯著。學(xué)者報(bào)道胃癌患者血清CA125檢測(cè)，對(duì)于腹膜轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的陽(yáng)性率達(dá)42.9% ～72.2%，在腹膜種植、腹水和漿膜浸潤(rùn)的診斷方面CA125的診斷陽(yáng)性率高于CEA和CA199［11］胰腺炎、肝硬化、肝壞死及女性排卵期、妊娠前子宮肌瘤等良性疾病也有假陽(yáng)性出現(xiàn)。由此可見(jiàn)，CA125特異性較低［7］綜上所述，測(cè)定各種腫瘤標(biāo)志物診斷早期癌腫陽(yáng)性率仍較低。為提高陽(yáng)性率，應(yīng)提倡測(cè)定腫瘤附近組織或體液(胰液、胃液，腸液等)中的腫瘤標(biāo)志物，其陽(yáng)性率比外周血明顯增高。

本組實(shí)驗(yàn)應(yīng)用 TGF-α、CEA、CA199、CA125 聯(lián)合檢測(cè)食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌的測(cè)量陽(yáng)性率達(dá)到70.37%、76.56%、79.29%、90.14%，有效提高檢測(cè)陽(yáng)性率。陽(yáng)性率均著高于良性組和正常組的49.54%和21.75%。現(xiàn)將多種特異性較高的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)定，應(yīng)用多變量分析，血清TGF-α，CEA，CA199，CA125，可大幅度地提高靈敏度，提高消化道惡性腫瘤診斷的陽(yáng)性率(82.93%)和陰性預(yù)測(cè)值(86.34%)，減少漏診，值得臨床推廣應(yīng)用。

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