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      大鼠胃缺血/再灌注過程中胃電活動變化及電針的影響*

      2010-06-11 03:38:20宋曉晶李順月王淑友馬惠敏
      關(guān)鍵詞:胃電波幅電針

      張 棟,宋曉晶,李順月,王淑友,馬惠敏

      (中國中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所針灸醫(yī)學(xué)工程實驗室,北京 100700)

      胃電(EGG)活動是胃動力的基礎(chǔ),作為反映胃功能的一項客觀電生理指標(biāo),能夠為臨床胃動力紊亂、功能性消化不良等研究和診斷提供檢測方法,并指導(dǎo)臨床治療[1]。胃臟的功能活動與其血流灌注情況密切相關(guān)[2],缺血可以引起功能減弱,甚至組織損傷。研究表明,電針“足三里”可以增加胃缺血/再灌注過程中的胃臟血流量[3];并可使亢進(jìn)的胃電節(jié)律降低[4];針刺可使胃動過緩患者胃電圖檢測主頻趨于規(guī)整[5]。然而,電針對胃缺血/再灌注過程中胃蠕動功能的作用如何尚未有明確結(jié)論?;诹私怆娽樤谖溉毖?再灌注過程中對胃電活動影響的目的,本文在以往工作的基礎(chǔ)上,應(yīng)用我們創(chuàng)建的胃缺血/再灌注模型,觀察了電針干預(yù)下胃電的變化趨勢,現(xiàn)報道于下。

      1 材料與方法

      1.1 動物

      健康成年 Wistar大鼠 32只,雌雄各半,體重350g±50g,由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物所提供,清潔級,批號SCXK(京)2005-0013。

      1.2 環(huán)境

      實驗在恒溫恒濕實驗箱中進(jìn)行,溫度控制在30℃ ~32℃,濕度70% ~90%,每只動物實驗前后溫度變化控制在1℃內(nèi)。

      1.3 大鼠胃缺血/再灌注模型的制作方法

      大鼠于造模前24h斷水?dāng)嗍?。造模時,動物腹腔注射2%戊巴比妥鈉(2.5mg/kg),麻醉后于劍突下沿腹中線切一縱行切口,長度約為2.5cm~3.0cm。將所需觀察臟器游離于體外,剝離附著的脂肪組織和系膜。分離胃右動脈,用動脈夾結(jié)扎,形成胃單一臟器缺血模型。再灌注時于結(jié)扎30min后松解動脈夾。

      1.4 儀器和胃電活動檢測方法

      在模型胃體表面距賁門、幽門各5mm處的漿膜上插入銀絲電極,連接多道生理記錄儀(時間常數(shù)為5s,高頻濾波 10Hz,靈敏度 500μV,1s/div),與計算機(jī)聯(lián)機(jī),用RM6240-2.0p生物信號采集處理軟件處理胃電圖,觀察分析胃電慢波幅度和頻率。胃電記錄用RM6240-C型多道生理記錄儀,電針治療使用MBT-1型微電腦電針治療儀。

      1.5 分組和針刺方法

      1.5.1 不電針組 14例大鼠先被觀察自然狀態(tài)(25min內(nèi))胃電慢波活動,再行觀察胃缺血30min和再灌注30min的胃電慢波活動情況,記錄慢波幅度和頻率。

      1.5.2 電針組 18例大鼠先被觀察自然狀態(tài)(25min內(nèi))胃電慢波活動后,進(jìn)行胃右動脈的結(jié)扎30min和松解30min的連續(xù)過程。從結(jié)扎開始的同時,使用32號針灸針對雙側(cè)“足三里”穴針刺,深度約0.5cm,行針30s后連接電針儀(強(qiáng)度:6V,頻率:1Hz,時間:60min)。觀察胃電慢波活動情況。

      1.6 胃電波幅和頻率的分析統(tǒng)計方法

      分別對不電針組和電針組的前對照、結(jié)扎/松解各時段的胃電波幅變化進(jìn)行分析,實驗數(shù)據(jù)以均值加減標(biāo)準(zhǔn)差(Means±SD)表示。使用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對2組同時段(點(diǎn))的胃電波幅(μV)、頻率(CPM/min)均值進(jìn)行t檢驗,比較2組間的差異。

      2 結(jié)果

      2.1 胃缺血過程中胃電波幅的變化

      表1顯示,與前對照比較,不電針組結(jié)扎胃右動脈后胃電波幅減低。隨缺血時間的延長,減幅增大,至結(jié)扎25min時達(dá)到最大值。而電針組胃電波幅在結(jié)扎并施予電針即時有所增高,隨后波幅下降并低于前對照,至電針15min時波幅又升高。缺血各時點(diǎn)胃電波幅與前對照比較,電針組內(nèi)無顯著性差異;不電針組在結(jié)扎25min、30min時具有統(tǒng)計學(xué)意義;而2組間比較,在結(jié)扎25min和30min時具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

      2.2 再灌注過程中胃電波幅的變化

      表2顯示,不電針組胃電波幅在松解時對胃右動脈的結(jié)扎即刻迅速回升,松解5min、10min時胃電波幅的回升幅度又稍有降低,此后隨松解時間延長,胃電波幅持續(xù)增加。整個再灌注過程中不電針組的胃電幅度除在松解15min與前對照持平外,均低于前對照,組內(nèi)統(tǒng)計均無顯著性差異。而電針組胃電波幅在此過程中也呈回升狀態(tài),胃電幅度均超過前對照,并在松解5min時增加最大。再灌注各時點(diǎn)胃電波幅與前對照的比較,2組內(nèi)均無顯著性差異。

      松解過程中,不電針組和電針組胃電波幅的變化有隨胃血流灌注的恢復(fù)而增高的趨勢。

      表1 胃缺血過程中胃電波幅均值的統(tǒng)計學(xué)分析(Means±SD,μV)

      表2 胃再灌注過程中胃電波幅均值的統(tǒng)計學(xué)分析(Means±SD,μV)

      2.3 缺血過程中胃電頻率的變化

      表3顯示,與前對照比較,缺血過程中電針組和不電針對照組的胃電頻率均值都有小幅降低,各觀察時點(diǎn)變化不大,整個結(jié)扎過程中組內(nèi)、組間均無顯著性差異。

      2.4 灌注過程中胃電頻率的變化

      表4顯示,再灌注過程中,不電針組胃電頻率與前對照比較,沒有明顯變化,只有小幅波動,組內(nèi)統(tǒng)計無顯著性差異。與前對照比較,電針組在再灌注過程中胃電頻率始終增加,并于松解15min時增至最大;且在松解 5、10、15、20、25、30min 時均具有統(tǒng)計學(xué)意義。2組組間各時段胃電頻率變化比較,在松解10min和20min時具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。

      表3 胃缺血過程中胃電頻率均值的統(tǒng)計學(xué)分析(Means±SD,CPM/min)

      表4 胃再灌注過程中胃電頻率均值的統(tǒng)計學(xué)分析(Means±SD,CPM/min)

      3 討論

      研究表明,缺血/再灌注過程會造成機(jī)體組織器官功能改變或器質(zhì)性損傷[6、7]。胃黏膜是人和動物體內(nèi)最易受到損傷的組織。研究普遍認(rèn)為,胃臟在缺血-再灌注情況下,由于胃黏膜內(nèi)氧自由基的過量生成、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、前列腺素合成減少等多種因素造成胃黏膜組織損傷[8],直接影響胃功能。為觀察胃臟的缺血/再灌注過程,人們建立和使用了一些模型,但多在結(jié)扎后涉及其他臟器的損傷,影響實驗結(jié)果[9、10]。針對上述不足,本實驗室用胃右動脈結(jié)扎的方法成功建立了在體胃臟缺血/再灌注模型,并首次運(yùn)用激光多普勒血流灌注成像方法評價了該模型效果,以圖像的形式顯示了結(jié)扎和松解過程中血流的增減規(guī)律[11、12],觀察到電針具有明顯增加胃臟血流的功效[3]。在以往研究基礎(chǔ)上,本文采用相同的動物模型,研究了此過程中胃電活動以及電針的調(diào)節(jié)作用。

      3.1 胃電活動與胃血流的關(guān)系

      正常狀態(tài)下,胃平滑肌的電活動包括靜息電位、慢波以及疊加在慢波上的快波。胃慢波是肌源性的活動,神經(jīng)、激素都不參與慢波電活動的產(chǎn)生,但它們可以影響和改變胃電活動[13]。胃電圖能準(zhǔn)確反映胃肌電慢波的節(jié)律、波幅的相對變化,在臨床和動物實驗中常將胃電慢波作為胃電節(jié)律紊亂的診斷依據(jù)并評價胃功能。本實驗觀察到從結(jié)扎即刻、胃臟缺血開始,胃電波幅出現(xiàn)顯著降低,持續(xù)到結(jié)扎結(jié)束;而結(jié)扎對胃電頻率影響較小,也表現(xiàn)為小幅減少并出現(xiàn)波動。松解的即刻,胃臟血流灌注量驟增(該過程以往工作中曾以直觀圖像給予了明確顯示[12]),胃電波幅和頻率也對應(yīng)升高。隨胃臟血供不斷增多,胃電波幅和頻率持續(xù)在一個較高的水平上。通常血流供應(yīng)為組織細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì),維持細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)和正常功能。而在缺血狀態(tài)下,代謝降低,病理產(chǎn)物堆積,組織的生理功能減弱,導(dǎo)致功能異常。結(jié)扎時胃臟血流灌注量減少,胃蠕動減弱;再灌注時胃臟血流量恢復(fù),胃組織功能隨之恢復(fù),胃蠕動增強(qiáng),胃電波幅和頻率逐漸升高。上述結(jié)果說明,胃臟血液灌注量的增減能對胃電活動的強(qiáng)弱變化造成明顯影響。

      3.2 電針對缺血/再灌注過程胃電活動的調(diào)節(jié)

      針刺可以促進(jìn)全身和多數(shù)臟器血液循環(huán),這是針刺作用中比較公認(rèn)的結(jié)論之一。本文在觀察單純?nèi)毖俟嘧⑦^程胃電活動的同時,設(shè)置了電針對該過程胃電活動影響的觀察,目的也是了解電針改善胃臟因缺血所引起的電活動減弱的作用。實驗中見到,電針組在整個結(jié)扎過程中,胃電波幅除個別時段稍有降低外,均明顯高于結(jié)扎前,而胃電頻率維持在相對穩(wěn)定的水平。結(jié)合我們以往觀察到電針能使結(jié)扎狀態(tài)下血流灌注量增加的結(jié)果[3],可以認(rèn)為這是電針促進(jìn)了缺血狀態(tài)的改善,從而改善并維持胃電活動。再灌注實驗的結(jié)果可見到,松解即時血流灌注量恢復(fù),胃臟功能活躍,胃電波幅和頻率均增高。結(jié)果表明,電針作用促進(jìn)血流量恢復(fù),同時促使胃電活動增強(qiáng)。此外,無論結(jié)扎還是松解過程,電針組胃電波幅的增加始終大于不電針組,更能說明電針具有產(chǎn)生興奮胃電節(jié)律的效應(yīng)。

      許多研究表明,針灸對胃腸電活動有明顯的調(diào)整作用,這種作用在機(jī)體器官功能偏離其穩(wěn)定狀態(tài)的情況下尤為明顯。本實驗觀察到,整個缺血/再灌注過程中的胃電活動及電針良性的調(diào)節(jié)作用,為探討針刺效應(yīng)與胃臟功能的關(guān)系提供了一些胃腸電生理的實驗資料。作為了解電針刺激加強(qiáng)胃臟蠕動作用的本實驗研究,只設(shè)置了針與不針的比較,而對穴位特異性作用的觀察將在下一步工作中予以深入探討。

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