王晶娟,張貴君,楊 舒
(北京中醫(yī)藥大學中藥學院中藥鑒定教研室,北京 100102)
變應性鼻炎(AR)屬中醫(yī)學“鼻鼽”范疇,鼻康噴霧劑是由山豆根等中藥組方而成,具有清熱化濕,宣肺解表,芳香開竅等功效,主要用于治療AR。從現(xiàn)代藥理來看,鼻康噴霧劑具有抗炎、抗過敏和免疫調(diào)節(jié)作用。本實驗從小鼠耳廓二甲苯致炎的影響、對大鼠蛋清足跖腫脹的影響和對大鼠棉球肉芽腫的影響3個經(jīng)典模型探討鼻康噴霧劑的抗炎作用。
1.1 實驗動物 ICR品系小鼠,體質量18~22 g,動物許可證編號:陜醫(yī)動證字08-004號,SD品系大鼠,體質量120~180 g,動物許可證編號:陜醫(yī)動證字08-005號。
以上動物購買后在實驗室適應性飼養(yǎng)2 d后用于正式實驗。條件:清潔級,室溫:22~25℃,相對濕度:65%,12 h明暗交替照明,自由進食、飲水。
1.2 藥物與試劑 鼻康噴霧劑,規(guī)格:10 mL/瓶,(北京宏泰康達醫(yī)藥科技有限公司);醋酸潑尼松片,規(guī)格:5 mg/片,(浙江仙琚制藥有限公司,批號:051186);0.9%氯化鈉注射液,規(guī)格:500 mL/瓶,(陜西華山制藥有限公司,批號:05101201);二甲苯(化學純),規(guī)格:500mL/瓶,(西安化學試劑廠,批號:840613)。
2.1 鼻康噴霧劑對小鼠耳廓二甲苯致炎的影響
2.1.1 分組與給藥 ICR品系小鼠50只,雌雄各半,體質量18~22g,隨機分為5組,每組10只。第1組為空白對照組,給等容量生理鹽水;第2組為陽性對照組,予醋酸潑尼松片0.005 g/kg;第3組為小劑量組,鼻康噴霧劑0.35 g/kg;第4組為中劑量組,予鼻康噴霧劑0.70 g/kg;第 5組為大劑量組,予鼻康噴霧劑1.4 g/kg。灌胃給藥,1次/d,連續(xù)3 d。
2.1.2 指標測定 末次給藥后1 h,各組小鼠右耳涂抹二甲苯0.05 mL/只,左耳作對照,15 min后處死動物,用直徑8 mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下,分別稱重,以左、右耳片質量之差為腫脹度,比較各組腫脹度的差異。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示,用組間t檢驗對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析[1]。
2.2 鼻康噴霧劑對大鼠蛋清足跖腫脹的影響
2.2.1 分組與給藥 SD大鼠50只,雌雄各半,體質量120~180 g,隨機分為5組,每組10只。第1組為空白對照組,給等容量生理鹽水;第2組為陽性對照組,醋酸潑尼松片0.005 g/kg;第3組為小劑量組,鼻康噴霧劑0.25 g/kg;第4組為中劑量組,鼻康噴霧劑0.5 g/kg;第5組為大劑量組,鼻康噴霧劑1.0 g/kg。灌胃給藥,1次/d,連續(xù)3 d。
2.2.2 指標測定 末次給藥后1 h,各組動物右后足跖皮下注射100%蛋清0.05 mL/只,分別測定致炎前和致炎后1、2、4、6 h右后足跖容積。以致炎前后容積之差值作為腫脹度,比較各組腫脹度的差異。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示,用組間t檢驗對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析[2]。
2.3 鼻康噴霧劑對大鼠棉球肉芽腫的影響
2.3.1 分組與給藥 分組方法和給藥劑量同2.2.1。灌胃給藥,1次/d,連續(xù)7 d。
2.3.2 指標測定 給藥前各組大鼠乙醚麻醉,無菌條件下分別于左右大腿根部皮下植入50 mg滅菌棉球,術后當日開始灌胃給藥,1次/d,連續(xù)7 d。第8天處死大鼠,將棉球連同周圍結締組織一起取出,剔除脂肪組織,放入烘箱70℃烘干,稱質量。將稱得的質量減去棉球原質量既得肉芽腫質量,比較各組肉芽腫質量,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示,正態(tài)分布資料組間比較采用單因素方差分析,偏態(tài)資料組間比較采用秩和檢驗。
3.1 鼻康噴霧劑對小鼠耳廓二甲苯致炎的影響 實驗結果見表1。鼻康噴霧劑大、中、小劑量組小鼠耳廓腫脹度與空白對照組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。實驗結果表明,鼻康噴霧劑可明顯減輕小鼠耳廓腫脹度。
表1 鼻康噴霧劑對小鼠耳廓二甲苯致炎的影響 (±s)Tab.1 The effect of NHSA on the auricular swelling in mice(±s)
表1 鼻康噴霧劑對小鼠耳廓二甲苯致炎的影響 (±s)Tab.1 The effect of NHSA on the auricular swelling in mice(±s)
注:與空白對照組比較:*P<0.05,**P<0.01。
組別空白對照組陽性對照組大劑量組中劑量組小劑量組劑量20 mL/kg 0.005 g/kg 1.40 g/kg 0.70 g/kg 0.35 g/kg n 1010101010腫脹度(mg)12.05±1.524.06±1.08**3.42±3.32**5.95±2.04**10.30±1.75*
3.2 鼻康噴霧劑對大鼠蛋清足跖腫脹的影響 實驗結果見表2。鼻康噴霧劑大、中、小劑量組在致炎后2 h大鼠右后足跖腫脹度明顯減小,4~6 h時作用最為明顯,與空白對照組比較有統(tǒng)計學意義 (P<0.05 或 P<0.01)。實驗結果表明,鼻康噴霧劑可減輕蛋清所致的大鼠右后足跖腫脹度。
3.3 鼻康噴霧劑對大鼠棉球肉芽腫的影響 實驗結果見表3。鼻康噴霧劑大、中、小劑量組大鼠肉芽腫質量與空白對照組比較明顯減?。≒<0.05)。實驗結果表明,鼻康噴霧劑對大鼠棉球肉芽組織增生有抑制作用。
表2 鼻康噴霧劑對大鼠蛋清足跖腫脹的影響(±s)Tab.2 The effect of NHSA on rat paw edema(±s)mL
表2 鼻康噴霧劑對大鼠蛋清足跖腫脹的影響(±s)Tab.2 The effect of NHSA on rat paw edema(±s)mL
注:與空白對照組相比較:*P<0.05,**P<0.010。
組別 n劑量 致炎后右后足跖腫脹度差值空白對照組陽性對照組大劑量組中劑量組小劑量組10 mL/kg 0.005 g/kg 1.0 g/kg 0.5 g/kg 0.25 g/kg 1010101010致炎前(mL)1.32±0.121.36±0.091.43±0.131.41±0.101.38±0.161 h 0.99±0.220.91±0.340.89±0.241.01±0.191.12±0.232 h 1.10±0.290.94±0.350.75±0.19*0.77±0.18*0.91±0.204 h 1.04±0.260.71±0.31**0.66±0.22**0.72±0.17**0.78±0.20**6 h 0.80±0.200.40±0.16**0.45±0.13**0.50±0.21**0.65±0.23
表3 鼻康噴霧劑對大鼠棉球肉芽腫的影響(±s)Tab.3 The effect of NHSA on Cotton Ball Granuloma in rats(±s)
表3 鼻康噴霧劑對大鼠棉球肉芽腫的影響(±s)Tab.3 The effect of NHSA on Cotton Ball Granuloma in rats(±s)
注:與空白對照組相比較:*P<0.05。
組別空白對照組陽性對照組大劑量組中劑量組小劑量組劑量10mL/kg 0.005 g/kg 1.0 g/kg 0.5 g/kg 0.25 g/kg n 1010101010肉芽腫質量(mg/100g體質量)224.99±83.09136.74±46.61*144.61±25.82*163.78±21.49*210.42±69.60
小鼠耳廓二甲苯致炎、大鼠蛋清足跖腫脹、大鼠棉球肉芽腫的動物模型為經(jīng)典的炎癥模型,也是藥物抗炎作用最基本的評價方法。本實驗結果得出鼻康噴霧劑能夠減輕二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度、減輕蛋清所致的大鼠右后足跖腫脹度、對大鼠棉球肉芽組織增生有抑制作用,充分說明其具有抗炎的作用。
[1] 徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:911-914.
[2] 陳 奇.中藥藥理實驗方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1994:71-310.