姜曉文，張春燕，于文會*，馮國峰，徐 利

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150030；2.哈爾濱和平獸藥有限公司，哈爾濱 150039）

復(fù)方伊維菌素乳液是一種口服的廣譜驅(qū)蟲藥，其主要成分為伊維菌素和阿苯達(dá)唑。伊維菌素為新型大環(huán)內(nèi)酯類抗生素類驅(qū)蟲藥，具有廣譜、高效、低毒等優(yōu)點(diǎn)，對馬、牛、羊、豬的消化道和呼吸道線蟲，馬盤尾絲蟲的微絲蚴以及豬腎蟲等均有良好的驅(qū)蟲效果。對馬胃蠅和羊鼻蠅的各期幼蟲以及牛羊的疥螨、癢螨、毛虱、血虱、腭虱以及豬疥螨、豬血虱等外寄生蟲具有良好的殺滅作用[1-2]，是畜牧生產(chǎn)中應(yīng)用最廣泛和使用量最大的一種廣譜、高效、安全、理想的抗體內(nèi)外寄生蟲藥物[3]。阿苯達(dá)唑，廣泛用于治療及預(yù)防人和動物所患的鉤蟲、蛔蟲、鞭蟲、蟯蟲、旋毛線蟲、絳蟲及囊蟲等寄生蟲病[4]。為了獲得更安全高效的驅(qū)蟲效果，將動物體內(nèi)寄生蟲感染率降至更低水平，制成復(fù)方伊維菌素乳液。本文通過對復(fù)方伊維菌素乳液的毒性試驗(yàn)研究，為臨床用藥安全提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

Wistar大白鼠80只，大白鼠180～220 g，雌雄各半，購自哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。試驗(yàn)前，在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下飼養(yǎng)7 d。

1.2 主要藥品和試劑

復(fù)方伊維菌素乳液（哈爾濱和平獸藥廠提供）；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT/GPT）試劑盒（購自四川省邁克科技有限責(zé)任公司）；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST/GOT）試劑盒（購自上海申索佑富醫(yī)學(xué)診斷用品有限公司）；尿素氮（BUN）試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）；肌酐（CR）液體試劑盒（購自西化儀北京科技有限公司）。

1.3 急性毒性試驗(yàn)

大白鼠40只，隨機(jī)分4組，每組10只，稱重，每組分別按 1.5、3、6 和 12 mL·kg－1劑量（LD100=50 mL·kg－1，哈爾濱和平獸藥廠提供數(shù)據(jù)）一次口服復(fù)方伊維菌素乳液，給藥前禁食12 h，給藥后禁食3 h，但要保證正常給水。

觀察試驗(yàn)大白鼠的臨床癥狀及死亡情況，并計(jì)算大白鼠的死亡率（P），按改良寇氏法公式進(jìn)行計(jì)算[5]：LD50=lg－1[Xm－i（∑P－0.5）]，LD50的平均可信限=LD50±（LD50的 95%可信限的高限－低限）/2，LD50的 95%平均可信限=LD50±4.5LD50·SX50，其中 SX50為LD50的標(biāo)準(zhǔn)誤，其中n=各組動物數(shù)，ΣP2=各組死亡率平方的總和。

1.4 亞急性毒性試驗(yàn)

大白鼠40只，隨機(jī)分4組，稱重，一組為對照組，其余三組為試驗(yàn)組，試驗(yàn)每組分別按0.2、0.4和0.6 mL·kg－1劑量口服復(fù)方伊維菌素乳液，對照組以0.6 mL·kg－1劑量灌服生理鹽水，給藥前禁食12 h。連續(xù)14 d，停藥后觀察14 d。試驗(yàn)過程中，觀察試驗(yàn)大白鼠的臨床癥狀及生命體征。通過眼球采血，檢測血液常規(guī)和肝腎功能。剖檢尸體，觀察心、肝、腦、肺、腎、脾、睪丸/卵巢等臟器；取不同臟器組織做病理切片。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±S）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

LD50的平均可信限=4.241±1.518 mL·kg－1（見表1）。由表1可知，乳房伊維菌素乳液用藥劑量和大白鼠死亡率呈線性正相關(guān)增長。當(dāng)藥物濃度達(dá)到4.241 mL·kg－1時(shí)，大白鼠的死亡率到達(dá)50%。

表1 LD50試驗(yàn)數(shù)據(jù)Table 1 Results of determination of LD50

2.2 亞急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 大白鼠的一般狀況及體重變化

中、低劑量組動物采食量無明顯影響，給藥7 d，高劑量組（0.6 mL·kg－1）大白鼠有呆滯表現(xiàn)，且有部分大白鼠出現(xiàn)糞便變軟。在體重變化方面，高劑量組體重下降明顯，與對照組相比差異明顯（P＜0.05），而中、低劑量組與對照組相比，體重變化無顯著差異（P＞0.05）（見表 2）。

表2 對各組大白鼠體重影響的檢測結(jié)果Table 2 Effects of ivermectin emulsion compound on rats'body weight

2.2.2 大白鼠血細(xì)胞的變化

高劑量組白細(xì)胞顯著低于對照組（P＜0.05），中、低劑量組白細(xì)胞與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）。各劑量組紅細(xì)胞（RBC）和血小板（PLT）與對照組比較差異不顯著（P＞0.05）（見表 3）。

2.2.3 大白鼠血液生化指標(biāo)的檢測結(jié)果

高劑量組、中劑量組、低劑量組谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、肌酐（CR）、 尿素氮（BUN）與對照組比較無明顯差異（P＞0.05）（見表4）。

表3 血液學(xué)檢查結(jié)果Table 3 Results of blood examination

表4 血液生化檢測結(jié)果Table 4 Results of blood biochemistry examination

2.2.4 大白鼠部分臟器病理組織學(xué)觀察結(jié)果

將試驗(yàn)組和對照組的大鼠處死后，取心、肝、腎、脾等器官，肉眼觀察未發(fā)現(xiàn)明顯出血、壞死等病變。同時(shí)對上述組織做組織切片，400倍光學(xué)顯微鏡觀察，也未發(fā)現(xiàn)組織變性、壞死及間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤等病理損害性改變，與對照組比較，均未見明顯差異。結(jié)果見圖1～4。

圖1 肝臟的組織切片（HE，10×10）Fig.1 Liver biopsy

圖2 腎臟的組織切片（HE，10×10）Fig.2 Kidney biopsy

圖3 脾臟的組織切片（HE，10×10）Fig.3 Spleen biopsy

圖4 心臟的組織切片（HE，10×10）Fig.4 Myocardial biopsy

3 討論

邵新璽等報(bào)道，伊維菌素大鼠急性經(jīng)口試驗(yàn)LD50為140 mg·kg-1，在較高劑量時(shí)對受試大鼠動物體重及肝、腎、脾功能有一定影響;該送檢藥物亞慢性經(jīng)口對大鼠最大無作用劑量為0.4 mg·kg-1[6]。徐霞等研究表明，伊維菌素注射劑的LD50為24.2493 mg·kg-1[7]。因?yàn)橐辆S菌素具有廣譜高效性，較高的安全性等優(yōu)點(diǎn)，在畜牧生產(chǎn)中得到了廣泛的應(yīng)用。

但是近年來，偶有因用量過大引起動物中毒的報(bào)道；少數(shù)犬種敏感，正常用量即可出現(xiàn)中毒癥狀；也有個(gè)別犬種偶見過敏，引起死亡的報(bào)道[8]。為更好地利用伊維菌素的優(yōu)點(diǎn)，增加藥物療效，進(jìn)一步降低藥物毒性，人們正致力于改變其劑型或藥物配伍的研究。如伊維菌素脂質(zhì)體，與其他藥物配伍使用，制成長效注射劑等[7,9]。

阿苯達(dá)唑主要對線蟲、絳蟲和吸蟲具較強(qiáng)驅(qū)殺作用，是廣譜、高效、低毒的驅(qū)蟲藥。為更好地利用伊維菌素的優(yōu)點(diǎn)，將伊維菌素和阿苯達(dá)唑復(fù)合用藥，以達(dá)到更好的預(yù)防家畜體內(nèi)外寄生蟲病的目的。方悅怡等報(bào)道應(yīng)用國產(chǎn)伊維菌素伍用阿苯達(dá)唑治療鉤蟲、鞭蟲、蟯蟲感染效果顯著，對鞭蟲療效明顯優(yōu)于阿苯達(dá)唑，對鉤蟲、蟯蟲療效明顯優(yōu)于伊維菌素，并且有排蟲快、不良反應(yīng)少而輕等優(yōu)點(diǎn)[10]。

復(fù)方伊維菌素乳液是以伊維菌素和阿苯達(dá)唑?yàn)橹饕煞值氖且环N新型藥物，為了給臨床用藥提供理論依據(jù)，本試驗(yàn)通過對復(fù)方伊維菌素乳液的急性和亞急性毒理試驗(yàn)對其毒性進(jìn)行了研究。急性試驗(yàn)表明該藥毒性弱、毒性反應(yīng)小，LD50的平均可信限為4.241±1.518 mL·kg-1。亞急性毒性試驗(yàn)中，中、低劑量組體重、血常規(guī)、血液生化指標(biāo)及組織切片均正常，高劑量組體重及白細(xì)胞數(shù)低于對照組，但均未見明顯的毒性反應(yīng)。說明將伊維菌素和阿苯達(dá)唑復(fù)合用藥，未見其毒性增強(qiáng)的試驗(yàn)結(jié)果。但本次試驗(yàn)對復(fù)方伊維菌素乳液在生殖毒性、致畸、繁殖等方面未進(jìn)行研究，關(guān)于這方面的毒性，今后有待于進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

通過復(fù)方伊維菌素乳液的急性和亞急性毒理試驗(yàn)，表明復(fù)方伊維菌乳液毒性弱、反應(yīng)小，是一種安全的口服驅(qū)蟲藥。

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